骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及p38和ERKl/2蛋白激酶表达的影响

目的 研究骨碎补总黄酮(TFDF)对晚期糖基化终末产物(AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号蛋白的影响,探讨骨碎补总黄酮防治骨质疏松的作用机理.方法 二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞以及活性观察;pNPP、ELISA、茜素红染色法分别检测不同质量浓度晚期糖基化终末产物对成骨细胞碱性磷酸酶活性(ALP)、Ⅰ型胶原(Col I)、骨钙素(BGP)以及矿化能力的影响,并观察骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化的干预;Westem-hlot检测骨碎补总黄酮对晚期糖基化终末产物作用下,成骨细胞p38和ERK1/2蛋白磷酸化的影响.结果 晚期糖基化终末产物(200、400、800 mg/L)可以降低成骨细胞表达ALP、Col I、BGP,降低其矿化能力.骨碎补总黄酮可以剂量依赖性的提高晚期糖基化终末产物(400 mg/L)作用下成骨细胞表达ALP、Col I、BGP和矿化能力.骨碎补总黄酮(50 mg/L)可以提高晚期糖基化终末产物(400 mg/L)作用下p38和ERK1/2的蛋白磷酸化.结论 骨碎补总黄酮可以提高晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化和矿化能力,其机制可能和提高p38和ERK1/2信号蛋白的磷酸化有关.     

中医药干预AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病的机制研究概述

糖尿病肾病发病机制复杂,晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)-糖基化终末产物受体(receptor of AGEs,RAGE)信号通路是糖尿病肾病的重要发病通路之一,也是近年来的研究热点.中医药治疗糖尿病肾病有一定的优势,研究表明中医药可通过干预AGEs...     

基于伏邪理论探讨调控晚期糖基化终末产物改善糖尿病大血管病变

高血糖的长期存在导致代谢记忆效应的出现是糖尿病大血管病变形成的重要原因,尽早控制代谢记忆为防治糖尿病及其并发症的关键所在。晚期糖基化终末产物的过度形成不仅是引起代谢记忆的重要因素,也是引发糖尿病大血管病变的核心机制。中医认为,伏邪是糖尿病大血管病变形成的关键病机,而尽早采用祛邪通络之法则是防治该病的必要手段。伏邪理论在春秋战国时已现萌芽,后经不断发展,于明清处得以成熟。所谓伏邪,即伏而不即发之邪。伏邪之说首见于《黄帝内经》,原指伏气温病,随后其含义不断扩展,现指一切伏而不即发的邪气。作为诸多疾病的病因病机,伏邪理论被广泛用于临床,并指导疾病的治疗。在机体内部,随着晚期糖基化终末产物的不断蓄积,可诱发体内的后续级联效应,最终促进糖尿病大血管病变的生成发展。这与中医内因痰瘀伏邪藏匿体内,而诱导机体出现代谢紊乱并产生疾病的过程极为类似。因此,在伏邪理论的指导下,解析晚期糖基化终产物阻断代谢记忆、防治糖尿病大血管病变的作用机制,一方面将为探索伏邪理论通过调控晚期糖基化终末产物的生成而影响糖尿病大血管病变的疾病进程提供科学依据;另一方面也能为伏邪理论在糖尿病大血管病变中的发生发展提供物质变化基础。     

绞股蓝皂苷对晚期糖基化终末产物诱导人肾小球系膜细胞晚期糖基化终末产物受体表达及氧化应激水平的影响

目的观察绞股蓝皂苷(GP)对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导下人肾小球系膜细胞(HMCs)中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)表达及氧化应激水平的影响。方法用含13%FBS的DMEM低糖培养液体外培养HMCs细胞,将细胞分为6组:对照组(DMEM培养液),AGEs组(200 mg/L),GP低、中、高剂量(25、75、150 mg/L)组和阳性对照组(氨基胍0.1 mmol/L)。培养72 h后,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中RAGE m RNA的表达水平,Western blotting法检测RAGE蛋白表达水平。应用试剂盒检测各组细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及细胞内微量还原型谷胱甘肽(GSH)活性。结果 AGEs显著促进HMCs中RAGE m RNA及蛋白表达(P0.01),增强细胞氧化应激水平。GP能有效抑制RAGE m RNA及蛋白表达,增加上清液中SOD和细胞内GSH水平,降低细胞上清液中MDA水平,且呈浓度依赖效应,与AGEs组比较差异显著(P0.01)。结论 GP下调AGEs刺激后HMCs细胞RAGE的异常高表达,同时改善细胞内氧化应激水平,其可能的机制是GP阻断了RAGE介导的AGEs-RAGE-氧化应激信号通路,表现为细胞上清液中MDA水平降低和SOD水平增加及细胞内GSH水平增加。     

黄芪对晚期糖基化终末产物作用下人脐静脉内皮细胞的影响

目的:研究黄芪对晚期糖基化终末产物(AGEs)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和损伤的影响。方法:采用MTT比色法,观察黄芪对体外AGEs培养的人脐静脉内皮细胞增殖的影响;以内皮细胞膜与Alcain Blue(AB,阿利新蓝)结合量为指标,观察黄芪对AGEs导致的人脐静脉内皮细胞损伤的影响;利用AO/EB染料诱导AGEs作用下的人脐静脉内皮细胞,并利用荧光显微镜观察黄芪的抑制作用。结果:黄芪对人脐静脉内皮细胞增殖有抑制作用,可对抗AGEs导致的内皮细胞膜负电荷减少,并且对抗AGEs诱导凋亡的作用,对内皮细胞有保护作用。结论:黄芪是晚期糖基化终末产物的拮抗剂,可有效抑制人脐静脉内皮细胞增殖并有细胞保护作用。     

基于轴探讨糖尿病肾病中医发病机制及治疗靶点

糖尿病肾病（Diabetes Nephropathy,DN）是糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）患者常见的微血管并发症,也是引起终末期肾脏病的主要原因之一。高糖环境下,非酶糖化反应生成的晚期糖基化终末产物（Advanced Glycationend Products,AGEs）和晚期糖基化终末产物受体（Receptors for Advanced Glycation End Products,RAGE）的相互结合和作用是DN发生和进展的重要原因之一。研究发现,作用于AGEs-RAGE轴的不同位点可以改善DN的症状,中医药通过抑制非酶糖化,减少AGEs形成和抑制RAGE方面改善DN,AGEs-RAGE轴在DN发病中具有伏邪特征。基于近几年实验研究热点,结合AGEs-RAGE轴进行总结论述,阐释“邪伏膜原”发病机制假说及中医治疗DN的作用机制。     

中药单体对抑制糖基化终末产物改善糖尿病视网膜病变作用机制研究进展

在简述糖基化终末产物(AGEs)的和糖尿病视网膜病变关系的基础上,综述近年中药单体对糖基化终末产物发挥抗糖网病作用的进展。中药单体可直接抑制AGEs合成、减少视网膜血管周细胞凋亡、保护内皮细胞功能。     

四妙勇安汤合四藤一仙汤内服外敷辅助治疗糖尿病足疗效及对炎性细胞因子、晚期糖基化终末产物的影响

目的观察四妙勇安汤合四藤一仙汤内服外敷辅助治疗糖尿病足疗效及对炎性细胞因子、晚期糖基化终末产物的影响。方法将110例糖尿病足患者随机分为2组,对照组55例给予前列地尔、硫辛酸治疗,观察组55例在此基础上加用四妙勇安汤合四藤一仙汤内服外敷辅助治疗,观察2组治疗前后中医证候积分、足背动脉血流速度、踝臂血压指数、腓总神经传导速度、TNF-α、IL-6及晚期糖基化终末产物水平变化情况,统计2组近期疗效和不良反应发生情况。结果 2组治疗后皮肤瘙痒、干而无汗、动脉搏动减弱或消失、口渴、大便干及小便黄积分显著降低(P均<0.05),且观察组治疗后各项积分均显著低于对照组(P均<0.05);2组治疗后足背动脉血流速度、踝臂血压指数及腓总神经传导速度均显著提高(P均<0.05),TNF-α、IL-6及晚期糖基化终末产物水平均显著降低(P均<0.05),且观察组治疗后各项指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);观察组近期治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论四妙勇安汤合四藤一仙汤内服外敷辅助治疗糖尿病足可有效缓解临床症状,改善足部循环状态和神经传导速度,下调TNF-α、IL-6及晚期糖基化终末产物水平,且安全。     

葛根素对体内外晚期糖基化终末产物形成的抑制作用

目的研究葛根素对体内外晚期糖基化终末产物(AGEs)形成的影响。方法 C57BL/6小鼠采用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(40 mg/kg)构建糖尿病模型。造模成功后随机分为模型组,氨基胍组(100 mg/kg),葛根素低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组,另设对照组。连续给药8周后,检测空腹血糖(FBG)、口服糖耐量(OGTT)、糖化血清蛋白(GSP)及血清AGEs水平。此外将不同浓度的葛根素(0.5、1.0、2.0 mmol/L)与丙酮醛和牛血清白蛋白共孵育144 h,建立体外非酶糖基化反应模型,用荧光光度法测定AGEs的荧光值,考察葛根素体外抑制AGEs生成的规律。结果葛根素能够显著降低糖尿病小鼠的FBG,改善OGTT,抑制GSP及血清AGEs的生成。葛根素在体外非酶糖基化反应体系中抑制AGEs的生成,并有一定的剂量依赖性。结论葛根素可以显著降低糖尿病小鼠的FBG,对体内外AGEs的形成具有明显的抑制作用。     

黄芪对初诊2型糖尿病患者血清晚期糖基化终末产物、可溶性糖基化终末产物受体水平的影响

目的观察黄芪对初诊2型糖尿病患者血清晚期糖基化终末产物（AGEs）、可溶性糖基化终末产物受体（sRAGE）水平的影响。方法选择2010年9月至2011年12月江苏省常熟市中医院（新区医院）内分泌科初诊2型糖尿病患者56例,按随机数字表法分为两组各28例,对照组给予控制血糖、血压、血脂等治疗,治疗组在对照组基础上加用黄芪颗粒剂冲服,两组均治疗12周为1个疗程,治疗前后均检测生化指标,采用酶联免疫吸附法检测血清AGEs、sRAGE水平。结果①对照组糖化血红蛋白（HbAlc）、甘油三脂（TG）治疗后[（7．28±0．83）％、（1．45±0．39）mmol／L]较同组治疗前[（9．57±1．14）％、（1．92±1.01）mmol／L]明显下降（t值分别为5．75、2．79,P〈0．05）;②治疗组HbAlc、TG治疗后[（7．16±0．88）％、（1．53±0．41）mmol／L]较同组治疗前[（9．29±1．62）％、（2．11±0．79）mmol／L]下降（t值分别为6．08、2．40,P〈0．05）;③治疗组治疗后血清sILAGE水平（20．38±8．01）ng／ml较同组治疗前（15．10±9．22）ng／ml升高（t=-2．29,P〈0．05）,与对照组治疗后（15．13±9．27）ng／ml比较,差异有统计学意义（t=-1．17,P〈0．05）。结论黄芪可上调初诊2型糖尿病患者血清sILAGE表达。     

黄芪对晚期糖基化终末产物作用下肾小球系膜细胞的影响

目的：研究黄芪对晚期糖基化终末产物（AGEs）作用下牛肾小球系膜细胞（GMC）增殖和损伤的影响。方法：采用MTT比色法,观察黄芪对体外AGEs培养的GMC增殖的影响。以GMC细胞膜与阿利新蓝（AB）结合量为指标,观察黄芪对AGEs导致的系膜细胞膜损伤的影响。利用AO/EB染料观察AGEs作用下GMC的凋亡,并用荧光显微镜观察黄芪对凋亡的抑制作用。结果：黄芪对GMC增殖有抑制作用,可对抗AGEs导致的细胞膜负电荷减少,并且对抗AGEs诱导凋亡的作用,对系膜细胞有保护作用。结论：黄芪可有效抑制AGEs作用下GMC增殖并有细胞保护作用,是治疗糖尿病肾病的有效药物。     

莫诺苷对晚期糖基化终末产物加重链脲佐菌素诱导糖尿病肾病保护作用及其机制

目的探讨山茱萸Cornus officinalis中效应成分莫诺苷对晚期糖基化终末产物(AGEs)加重链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)小鼠的保护机制。方法将STZ诱导成功的DN小鼠饲喂高AGEs饲料,并分别ig给予氨基胍(0.1 g/kg)、二甲双胍(0.2 g/kg)、卡托普利(0.02 g/kg)、莫诺苷低剂量(0.02 g/kg)和莫诺苷高剂量(0.10 g/kg)12周。检测空腹血糖、胰岛素、血清肌酐和尿素氮、血清和肾脏AGEs、24 h尿蛋白等指标,RT-PCR法检测肾组织中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)m RNA表达,Westorn blotting法检测肾组织中RAGE蛋白表达,观察各组小鼠胰腺和肾脏的病理改变。结果莫诺苷可显著降低DN小鼠血糖,改善"三多一少"症状,增加胰岛素分泌,降低24 h尿蛋白、血清尿素氮和肌酐、血清和肾脏AGEs水平,缓解胰腺及肾脏病变,下调肾皮质RAGE m RNA和蛋白的表达。结论莫诺苷具有保护DN小鼠的作用,且高剂量作用较优,其相关机制可能与降低血清、肾脏AGEs水平,下调肾皮质RAGE m RNA和蛋白的表达有关。     

基于网络药理学探讨甘草附子汤治疗痛风性关节炎的作用机制

目的：探讨甘草附子汤治疗痛风性关节炎的作用机制。方法：利用中药系统药理学数据库与分析平台筛选甘草附子汤的有效成分及作用靶标。通过GeneCards数据库获得痛风性关节炎相关基因,取交集并构造有效成分-基因-疾病网络,利用STRING数据库构建基因的蛋白质-蛋白质相互作用网络图,并进行富集分析。结果：甘草附子汤治疗痛风性关节炎的核心成分是槲皮素、山柰酚、异鼠李素等,核心靶点为肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor, TNF）、白细胞介素（Interleukin,IL）-1B、IL-6等,基因本体论条目681条,京都基因与基因组百科全书信号通路105条,主要为IL-17信号通路、晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体信号通路、TNF信号通路等。结论：甘草附子汤主要通过TNF、IL-1B、IL-6等基因由多通路发挥抗炎、止痛及免疫调节等作用治疗痛风性关节炎。     

针灸促进创面修复的机制研究进展

创面是一种以皮肤缺损或功能受限为特征的常见外科疾病，针灸在创面修复过程中起到重要的作用。本文通过梳理针灸促进创面修复的相关机制研究文献，发现针灸可以改善创面血流灌注量、促进血管生成、增加成纤维细胞数量及调节胶原合成；同时针灸可通过抑制肿瘤坏死因子-α、白细胞介素等炎性因子的释放，上调转化生长因子-β、血管内皮生长因子的表达水平，影响磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B、丝裂原活化蛋白激酶及晚期糖基化终末产物/糖基化终末产物受体等诸多信号通路促进创面修复。未来应深入研究多机制协同调控中心靶点，重点关注针灸在组织修复中的治疗手段、量效关系。     

非酶糖基化终末产物所致疾病的中药干预

非酶糖基化终末产物(AGEs)是蛋白质、脂质和核酸等大分子的游离氨基与还原性单糖的醛基反应所生成的稳定的共价化合物,在体内的积累是导致糖尿病等多种疾病及其并发症的关键因素。AGEs可直接或间接地对机体产生致病作用。目前AGEs抑制剂特别是某些中药在治疗AGEs引起的疾病方面研究进展迅速,主要通过降低体内AGEs水平、减少AGEs交联、抗氧化、阻断与相关受体的结合等途径来干预AGEs的合成、代谢和受体后效应。简述AGEs的致病机制,并探讨中药对AGEs所致疾病的干预及其可能机制。     

莫诺苷对晚期糖基化终末产物诱导人脐静脉内皮细胞损伤的代谢组学研究

目的研究晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)模型导致的细胞内源性代谢物的变化及山茱萸环烯醚萜苷类特征成分莫诺苷对异常代谢的调节作用,寻找莫诺苷保护损伤HUVECs潜在的代谢生物标志物,探索莫诺苷保护AGEs诱导损伤HUVECs的作用机制。方法体外培养HUVECs,AGEs诱导制备HUVECs损伤模型。将细胞分为对照组、模型组和给药组,通过高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)技术,对3组细胞样本进行分离测定。采用主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等模式识别方法对变量数据进行分析,t检验进行显著性统计分析,筛选出潜在生物标志物。通过独特通路分析(IPA),构建代谢组学特征网络图。结果模式识别能够较好地区分对照组、模型组和给药组细胞;进一步根据VIP数值大小筛选出30个对分类有显著贡献的离子,定性鉴定出10种潜在代谢生物标志物,这些内源性物质在给药组细胞内的水平均得到了不同程度的恢复。找到5条代谢通路,构建了莫诺苷保护AGEs诱导HUVECs损伤的代谢组学特征网络图。结论莫诺苷可使AGEs诱导损伤的HUVECs中代谢物水平有不同程度的恢复,其保护作用可能与5条相关代谢通路的调节有关。     

中药复方对糖基化终末产物培养下的肾小球系膜细胞增殖以及系膜基质增生的影响

目的观察中药复方对糖基化终末产物(AGEs)培养下的肾小球系膜细胞增殖以及细胞外基质分泌的影响。方法MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖,碱解法检测细胞上清液中羟脯氨酸的含量。结果1×10-3、1×10-2、1×10-1mg/mL的中药复方提取液均能抑制AGEs培养下的鼠肾小球系膜细胞的增殖;能减少AGEs作用下的细胞上清液中羟脯氨酸含量,抑制系膜基质增生。结论中药复方能抑制AGEs引起的大鼠肾小球系膜细胞增殖以及系膜基质增生,提示此方可能通过阻止AGEs受体信号通路抑制糖尿病肾病的发生发展。     

基于网络药理学探讨虎地肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的作用机制

目的：通过网络药理学探析虎地肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法：基于TCMSP和台湾中医药数据库筛查药物的潜在活性成分及靶点；采用GeneCards数据库获取UC的已知靶点，运用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图；应用DAVID数据库对共同靶点基因进行基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析；通过Cytoscape 3.7.2软件和R语言软件对数据进行可视化。结果：虎地肠溶胶囊治疗UC的活性成分143种，关键成分包括山柰酚、β-谷甾醇、槲皮素等；潜在作用靶点69个，主要有肿瘤蛋白P53(TP53)、原癌基因蛋白(MYC)、胱天蛋白酶3(CASP3)、人雌激素受体α(ESR1)等靶基因。晚期糖基化产物-晚期糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路。GO功能富集分析结果显示主要涉及DNA转录调控、RNA聚合酶Ⅱ特异性、核受体调控、单加氧酶活性、氧化还原反应等。KEGG通路富集分析结果显示主要涉及疾病相关信号通路、炎症相关信号通路和细胞凋亡信号通路。结论：虎地肠溶胶囊的多种活性成分具有...     

山茱萸、生地有效部位及配伍组合抑制糖基化终末产物致肾小球系膜细胞增殖的研究

目的:通过体外培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC),建立糖基化终末产物(AGEs)致肾小球系膜细胞增殖的细胞模型,观察山茱萸有效部位、生地有效部位及其配伍组合对糖基化终末产物致肾小球系膜细胞增殖的抑制作用,以确定最佳配伍组合物。方法:体外培养肾系膜细胞,当细胞贴壁生长至80%~90%时,(1),用浓度为50、100、200、400mg/L的山茱萸各部位(环烯醚萜苷、三萜酸、多糖)、生地各部位(环烯醚萜苷、多糖、寡糖)进行干预,然后加入200mg/L的糖基化终末产物刺激,24 h后检测细胞增殖情况,筛选出活性较强的部位。(2),将活性较强的部位山茱萸环烯醚萜苷和三萜酸(A)、生地环烯醚萜苷(B)按1:0、0:1、1:1、1:2、2:1进行配伍组合(分别为A1、B1、A1B1、A1B2、A2B1),以浓度为25、50、100mg/L生药及含药血清进行干预,加入200mg/L的AGEs刺激,24 h后检测细胞增殖情况以及细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Coll-Ⅳ)水平。结果:(1)山茱萸环烯醚萜苷部位、山茱萸三萜酸部位与生地环烯醚萜苷部位活性较强,具有显著抑制糖基化终末产物致肾小球系膜细胞增殖的作用。(2)配伍组合物(A1、B1、A1B1、A1B2、A2B1)生药及含药血清均能够抑制肾小球系膜细胞增殖及其分泌纤维连接蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的水平,并呈一定量效关系。结论:山茱萸环烯醚萜苷部位、山茱萸三萜酸部位、生地环烯醚萜苷部位及其配伍组合能够明显抑制糖基化终末产物致肾系膜细胞增殖及其分泌的纤维连接蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原水平,减少细胞外基质沉积,其中配伍组合A2B1抑制效应最强,为最佳配伍组合。     

从“毒损肾络”理论研究糖尿病肾病的发病机制

糖尿病肾病是由于糖尿病迁延不愈,燥热化毒,毒损肾络而成。其发生和发展是由于持续高血糖引起体内多种蛋白质非酶糖基化及由此形成的晚期糖基化终末产物,而晚期糖基化终末产物间接或直接损伤肾脏微血管,最终导致糖尿病肾病,晚期糖基化终末产物与糖尿病肾病密切相关。依据毒损肾络理论,治疗以益肾通络解毒为法,解毒通络,扶正固本。