LYVE1+巨噬细胞在RA患者关节滑膜组织中表达变化及对RA-FLS细胞迁移、侵袭、FMT的抑制作用

目的 观察淋巴管内皮受体-1(LYVE1)⁺巨噬细胞在类风湿性关节炎(RA)患者关节滑膜组织中的表达变化及对RA成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)迁移、侵袭、向肌成纤维细胞转化(FMT)的抑制作用。方法 采用免疫荧光染色法对45例RA患者及45例骨关节炎(OA)患者滑膜组织LYVE1、CD68进行定性、定量检测。取对数生长期人单核白血病细胞THP-1,在培养液中加入LYVE1过表达慢病毒,培养48 h获得表达LYVE1的THP-1细胞,在表达LYVE1的THP-1细胞中加入100 ng/mL的佛波酯(PMA)诱导培养48 h,获得LYVE1⁺巨噬细胞;另取部分THP-1细胞,仅加入100 ng/mL的PMA诱导培养48 h获得LYVE1^-巨噬细胞。取对数生长期人类风湿性关节炎成纤维细胞MH7A分为LYVE1⁺巨噬细胞组、LYVE1^-巨噬细胞组,分别加入LYVE1⁺巨噬细胞、LYVE1^-巨噬细胞,另将仅含培养基的小室设为空白对照组,采用划...     

毛兰素对人肝癌细胞系HEPG2增殖、迁移、凋亡和上皮间质转化的影响及其机制

目的 观察毛兰素对人肝癌细胞系HEPG2增殖、迁移、凋亡和上皮间质转化的影响，并探讨其机制。方法取对数生长期HEPG2细胞分为对照组、毛兰素组、毛兰素+pc-DNA组、毛兰素+pc-Snail组：对照组仅为HEPG2细胞，毛兰素组加入40 nmol/L的毛兰素，毛兰素+pc-DNA组转染空白对照质粒pc-DNA并加入40 nmol/L的毛兰素，毛兰素+pc-Snail组转染Snail过表达质粒pc-Snail并加入40 nmol/L的毛兰素。各组细胞继续培养24 h后，采用平板克隆法观察各组细胞增殖能力，以细胞克隆个数表示；采用Transwell小室法观察各组细胞迁移能力，以细胞迁移个数表示；采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率；采用Western blotting法检测各组细胞Snail蛋白、凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2）、间质转化相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）。结果 对照组、毛兰素组、毛兰素+pc-DNA组、毛兰素+pc-Snail组细胞克隆个数分别为（109.17±6.98）、（47.50±5.04）、（41.67±4.92）、（82.3...     

血脉通颗粒对动脉粥样硬化小鼠外周血单核细胞TLR4、IL-6、TNF-α的影响

目的 观察血脉通颗粒对动脉粥样硬化（AS）小鼠外周血单核细胞Toll样受体4（TLR4）表达及血浆白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平的影响.方法 选择apo E基因敲除（apo E-/-）小鼠,采用高脂饮食法建立AS模型;造模成功后随机分为血脉通组和对照组,每组11只.血脉通组给予血脉通颗粒3.808 mg/（g·d）灌胃,对照组给予相同剂量生理盐水灌胃.6周后处死,眼眶静脉丛采血.采用RT-PCR法检测小鼠外周血单核细胞TLR4 mRNA,流式细胞术测算单核细胞表面TLR4平均荧光强度,ELISA法检测小鼠血浆IL-6和TNF-α.结果 血脉通组外周血单核细胞中TLR4 mRNA的相对表达量为0.22 ±0.07,TLR4荧光强度为25.45±8.30,血浆IL-6、TNF-α水平分别为（10.86 ±4.41）、（36.94±9.46） pg/mL;对照组分别为34.04 ±7.31、0.31±0.09及（18.24±8.21）、（52.82±13.78） pg/mL;两组比较,P均＜0.05.小鼠血浆IL-6、TNF-α水平与单核细胞表面TLR4的表达均呈正相关（r =4.86、0.509,P均＜0.05）.结论 血脉通颗粒可降低AS小鼠单核细胞TLR4表达和血浆IL-6、TNF-α水平,这可能是其抑制血管炎症、治疗AS的机制之一.     

石斛多糖对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的观察石斛多糖对人Burkitt淋巴瘤Raji细胞增殖和凋亡的影响,探讨其作用机制。方法用水提醇沉淀法从铁皮石斛中提取石斛多糖。取体外培养对数生长期Raji细胞,加入终浓度为0、100、200、400、800mg/L的石斛多糖溶液,用MTT法检测石斛多糖对Raji细胞增殖的抑制率、流式细胞术检测Raji细胞凋亡率、RT-PCR检测Raji细胞中Caspase-3 mRNA。结果随着石斛多糖浓度的提高和作用时间延长,各组Raji细胞增殖抑制率、凋亡率、Caspase-3 mRNA表达量升高,P均〈0.05。结论石斛多糖可以抑制Raji细胞增殖并诱导其凋亡,效果随着作用剂量和时间的增加而增强,其抑瘤机制可能与促进Raji细胞Caspase-3蛋白的表达上调有关。     

黄芩苷对脂多糖诱导心肌细胞炎症反应和焦亡的抑制作用及其机制

目的 观察黄芩苷对脂多糖（LPS）诱导心肌细胞焦亡、炎症反应的抑制作用并分析其机制。方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2,取对数生长期细胞分为对照组、LPS组、黄芩苷组,对照组不做干预,LPS组以LPS刺激H9C2细胞构建体外细胞损伤模型,黄芩苷组在LPS诱导后分别加入10、20、40、80μmol/L黄芩苷,CCK-8法检测各组细胞活力,取细胞活力最高的黄芩苷浓度作为最佳作用浓度进行后续实验。而后取对数期H9C2细胞分为对照组、LPS组、黄芩苷组、抑制剂组、黄芩苷+抑制剂组及黄芩苷+激活剂组,除不做干预的对照组外均给予LPS刺激构建细胞损伤模型;黄芩苷组在此基础上给予黄芩苷处理,抑制剂组给予磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）通路抑制剂LY294002处理,黄芩苷+抑制剂组给予黄芩苷及LY294002处理,黄芩苷+激活剂组给予黄芩苷及PI3K/AKT通路激活剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理。采用ELISA法检测细胞上清液炎症因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6,Western blotting法检测细胞焦亡相关蛋白焦孔素D(GSDMD)、核苷酸寡聚化结构域样...     

3-甲基腺嘌呤对转化生长因子-β诱导大鼠肝脏星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响观察

目的 观察3-甲基腺嘌呤（3-MA）对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响。方法 取对数生长期的HSC-T6细胞分为空白组、TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组。TGF-β+3-MA组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入3-MA(0.5 mg/mL)处理24 h,TGF-β+PBS组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入等量PBS处理24 h,空白组加入等量PBS处理,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β mRNA和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β蛋白和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5蛋白。结果 TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β mRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组（P均<0.05）。TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞自噬标志物LC3、B...     

醒脑解郁方含药血清对IL-4+LPS诱导的小胶质细胞极化、细胞活力的影响

目的 观察醒脑解郁方含药血清对白细胞介素（IL）-4+脂多糖（LPS）诱导的小胶质细胞M1/M2型极化、细胞活力及炎症因子水平的影响，以探讨醒脑解郁方治疗卒中后抑郁的机制。方法 将SD大鼠随机分为醒脑解郁方低、中、高剂量组和对照组，分别予0.525、1.05、2.1 g/mL的醒脑解郁方和蒸馏水灌胃，3 d后腹主动脉取血，获得血清。培养BV2细胞，分为空白组、模型组、实验1组、实验2组、实验3组；实验1、2、3组及模型组细胞先后接种于含20 ng/mL IL-4、100μg/mL LPS的胎牛血清培养基各培养12 h，实验1、2、3组分别更换为含低、中、高剂量醒脑解郁方含药血清的胎牛血清培养基，模型组更换为胎牛血清培养基；空白组胎牛血清培养基不添加药物。倒置显微镜下观察各组细胞形态变化，检测细胞上清液中的M1极化相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-1β、一氧化氮（NO）]和M2极化相关因子[IL-10、脑源性神经营养因子（BDNF）]，采用MTT比色法检测细胞活力。结果 空白组细胞为圆形或椭圆形，基本无突触；IL-4处理后的模型组细胞出现两头分支，胞体未见明显增大，...     

替米沙坦通过激活PPARγ而下调NF-κB通路抑制脂多糖诱导的单核细胞THP-1炎症反应

目的探讨替米沙坦（Telm）对脂多糖（LPS）诱导的人THP-1巨噬细胞炎症因子释放的影响及机制。方法体外培养人THP-1单核细胞随机分为对照组、脂多糖组和替米沙坦组（LPS+Telm）。替米沙坦组细胞予替米沙坦（10μmol/L）预孵育2h后与脂多糖组均加入脂多糖刺激24h。应用Westernblot检测各组细胞过氧化体增殖物激活型受体γ（PPARγ）、磷酸化过氧化体增殖物激活型受体γ（p-PPARγ）、IκBα、磷酸化IκBα（p-IκBα）、核因子κB（NF-κB）、磷酸化核因子κB（p-NF-κB）的蛋白表达,ELISA法检测各组细胞培养上清中单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的表达水平,应用实时定量PCR（RT-PCR）检测各组细胞MCP-1、TNF-α和IL-6的mRNA表达水平。结果Westernblot检测发现,与对照组相比,脂多糖组p-PPARγ、p-NF-κB和p-IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,IκBα表达明显下降（P<0.05）,PPARγ和NF-κB表达水平无显著差异（P>0.05）;RT-PCR和ELISA检测发现,与对照组相比,脂多糖组MCP-1、TNF-α和IL-6蛋白水平和mRNA表达水平均明显增高（P<0.05）。与脂多糖组相比,替米沙坦组p-NF-κB和p-IκBα蛋白水平表达明显下降,MCP-1、TNF-α及IL-6分泌水平和mRNA水平也均明显降低,p-PPARγ和IκBα蛋白表达水平明显增加（P<0.05）,但是NF-κB和PPARγ表达水平依然无显著差异（P>0.05）。结论替米沙坦预处理可通过激活PPARγ而下调NF-κB活化从而抑制脂多糖诱导单核细胞THP-1产生炎症反应。     

EGCG对人食管癌CaEs-17细胞增殖、凋亡及其线粒体膜电位的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对人食管癌CaEs-17细胞增殖凋亡及线粒体腹电位（MMP）的影响。方法取对数生长期人食管癌CaEs-17细胞,随机分为观察组和对照组。观察组分别予30、60、240 mg/L EGCG处理48 h及120 mg/L EGCG分别处理12、24、48、72 h;对照组常规培养。采用MTT法检测细胞增殖率、流式细胞仪检测细胞凋亡率,JC-1染色检测MMP。结果观察组细胞增殖率均显著低于对照组,细胞凋亡率均显著高于对照组,MMP均显著低于对照组（P均〈0.05）,且呈浓度时间依赖性。结论 EGCG可在体外抑制人食管癌CaEs-17细胞增殖,促进凋亡,并降低其MMP。     

罗哌卡因对大鼠脂肪干细胞增殖、凋亡及成骨分化的影响观察

目的 观察罗哌卡因对大鼠脂肪干细胞（ADSCs）增殖、凋亡及成骨分化的影响。方法 分离并提取大鼠ADSCs,传代培养后,取对数生长期ADSCs分别加入含0 mg/mL、200 mg/mL、500 mg/mL罗哌卡因的培养基100μL,分别记为对照组、200 mg/mL组、500 mg/mL组。取各组细胞,继续培养24、48、72 h时,采用CCK-8实验观察细胞增殖能力。取各组细胞,继续培养24 h,使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。取各组细胞,加入成骨诱导培养基,观察各组细胞成骨分化能力,包括成骨潜能（以ALP活性表示）、矿化能力（以OD值表示）和成骨相关蛋白骨钙素（OCN）表达水平。结果 与对照组相比,200 mg/mL组、500 mg/mL组细胞培养24、48、72 h时的增殖能力均显著下降,且500 mg/mL组低于200 mg/mL组。对照组、200 mg/mL组、500 mg/mL组细胞凋亡率分别为2.78%±0.23%、4.15%±0.62%、5.88%±0.78%,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,200 mg/mL组、500 mg/mL组细胞ALP活性、矿化...     

浙贝母碱对肺癌A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用观察及机制探讨

目的观察浙贝母碱对肺癌A549/DDP细胞多药耐药的逆转作用,并探讨其可能的机制。方法将对数生长期的细胞随机分成2组,对照组分别加入不同浓度的DDP,实验组在对照组基础上再加入400μg/mL的浙贝母碱;采用MTT法测算细胞增殖抑制率,计算两组细胞DDP的半数抑制浓度(IC50)及浙贝母碱的逆转倍数。将对数生长期的细胞分为3组,空白对照组不加任何药物,对照组加入DDP,实验组在对照组基础上再加入400μg/mL的浙贝母碱;药物作用48 h后,采用流式细胞术测算细胞凋亡率,用细胞免疫荧光法检测细胞中的人肺耐药蛋白(LRP)。结果实验组DDP的IC50为4.15μg/mL,对照组为15.46μg/mL,浙贝母碱的逆转耐药倍数为3.73。培养48 h后,空白对照组细胞凋亡率为2.56%±0.44%、LRP蛋白阳性细胞为(9.8±1.92)个/HP,对照组分别为为13.5%±1.42%、(9.2±1.9)个/HP,实验组为38.16%±2.25%、(5.8±1.3)个/HP;实验组与对照组、空白对照组比较,P均<0.05。结论浙贝母碱可逆转肺癌A549/DDP细胞株的多药耐药,其作用机制可能与其促进耐药细胞凋亡、下调LRP蛋白表达有关。     

血管紧张素（1-7）和血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞胆固醇外流的影响

目的 观察血管紧张素（1-7）［Ang（1-7）］及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对THP-1源性泡沫细胞B族Ⅰ型清道夫受体（SR-BⅠ）、ATP结合盒转运体A1（ABCA1）表达及胆固醇外流的影响。方法 将THP-1单核细胞加入100 nmol/L佛波酯（PMA） 48 h诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,加入氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）建立泡沫细胞模型。随机分为五组：空白对照组、AngⅡ组、Ang（1-7）组、Ang（1-7）+AngⅡ组及AngⅡ+Ang（1-7）+A-779组［A-779为Ang（1-7）受体特异性阻滞剂］。分别运用RT-PCR及Western blot方法检测SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达,用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出率的变化。结果 与空白对照组相比,加用AngⅡ组SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达均明显减弱且胆固醇外流减少（P<0.05）;与AngⅡ组比较,加用Ang（1-7）促进SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达,胆固醇外流增加（P<0.05）;与AngⅡ+Ang（1-7）组比较,AngⅡ+Ang（1-7）+A-779组SR-BⅠmRNA、ABCA1mRNA及其蛋白的表达减弱、胆固醇外流减少（P<0.05）,但与AngⅡ组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 AngⅡ抑制THP-1源性泡沫细胞SR-BⅠ、ABCA1的表达并减少胆固醇外流,而Ang（1-7） 通过其特异性受体MAS受体可减弱AngⅡ的作用,促进胆固醇外流,从而对动脉粥样硬化的进展起到抑制作用。     

弓形虫ROP16蛋白在人白血病细胞THP-1表达及对其细胞增殖与凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨弓形虫Ⅱ型(Me49)ROP16蛋白在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中的表达及其对THP-1细胞增殖与凋亡的影响。方法构建过表达ROP16(overExp-ROP16)和空载体(overExp-NC)慢病毒,通过转染THP-1细胞,72 h后观察荧光表达情况,采用PCR与Western blot验证ROP16在THP-1细胞中的表达。免疫荧光技术检测ROP16蛋白在THP-1细胞中的定位。CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖及凋亡。采用qRT-PCR检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA相对表达水平。Western blot检测Bax、Bcl-2、Pro-Caspase-3和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达变化。结果构建的过表达ROP16重组慢病毒转染到THP-1细胞后,可观察强荧光信号,ROP16蛋白在THP-1细胞中成功表达。免疫荧光结果表明ROP16蛋白定位于THP-1细胞核。CCK-8与流式细胞术证实ROP16蛋白抑制THP-1细胞的增殖并促进其凋亡(均P<0.05)。与对照组相比,过表达组促凋亡因子Bax、Caspase-3 mRNA高表达(P<0.05),抗凋亡因子Bcl-2 mRNA低表达(P<0.01),Bax与Cleaved-Caspase-3蛋白水平上调(P<0.01),Bcl-2与Pro-Caspase-3蛋白水平下调(P<0.01)。结论构建的慢病毒表达质粒overExp-ROP16可在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中表达且通过入核调节凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3而抑制THP-1细胞增殖,促进其凋亡。     

VEGF单克隆抗体对人舌癌细胞Tca-8113增殖抑制作用观察

目的观察VEGF单克隆抗体对体外舌癌细胞Tca-8113增殖的抑制作用,并探讨其机制。方法对数生长期的Tca-8113细胞制成2.5×107/ml的单细胞悬液,接种于96孔板。设A、B两组。培养6 h待细胞贴壁后,A组加入VEGF单克隆抗体,B组不添加任何药物。分别于培养后24、48、72、96 h检测细胞生长存活率,于培养后48 h采用流式细胞仪检测细胞周期,Real-time PCR法检测两组细胞中的VEGF mRNA。结果培养24、48、72、96 h后,A组细胞生长存活率分别为65.9%、46.1%、69.7%、30.3%（P均〈0.05）。A组G2/M期细胞数量较对照组明显增多（分别为7.393%±0.323%和2.733%±0.055%,P〈0.01）,A组VEGF mRNA表达水平显著低于B组（分别为0.180±0.061和1.000±0.000,P〈0.01）。结论 VEGF单克隆抗体可抑制Tca-8113细胞增殖,可能是通过诱导Tca-8113细胞凋亡和细胞周期重分布及下调细胞中VEGF mRNA的表达而发挥作用。     

ROCK信号通路对高糖诱导血管平滑肌细胞炎症反应的调控作用及其与Nur77表达的关系

目的 观察阻断ROCK信号通路对高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）炎症反应的调控作用,并探讨其与孤儿核受体Nur77表达的关系。方法 分离提取大鼠主动脉VSMC,将细胞随机分为对照组、法舒地尔组、高糖组、高糖+法舒地尔组,分别加入葡萄糖5.5 mmol/L、葡萄糖5.5 mmol/L+ROCK信号通路抑制剂法舒地尔50μmol/L、葡萄糖30 mmol/L、葡萄糖30 mmol/L+法舒地尔50μmol/L,作用12 h;采用Western blotting法检测细胞ROCK1、ROCK2、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、Nur77蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测Nur77 mRNA表达。将VSMC随机分为Nur77高表达组和空白组,两组均加入葡萄糖5.5 mmol/L,Nur77高表达组同时加入Nur77激动剂Cytosporone B(CsnB)10μg/mL,作用12 h后比较其Nur77 mRNA及蛋白表达;更换培养基,加入葡萄糖30 mmol/L,作用12 h后比较其Nur77及IL-1β、IL-6蛋白表达。结果 高糖组细胞ROCK1、IL-1β、...     

IL-6/STAT3通路对THP-1单核细胞环氧化酶2表达的影响

目的探讨人THP-1单核细胞中白细胞介素6(IL-6)/信号转导与转录激活子3(STAT3)通路与环氧化酶2(COX-2)表达之间的关系。方法以人THP-1单核细胞株作为研究对象,分别设置0至48 h不同时间点,检测IL-6对STAT3磷酸化和COX-2表达的时效性影响。用100μmol/L S3I-201(STAT3通路选择性抑制剂)对THP-1单核细胞预处理24 h,再经10μg/L IL-6作用相应时间,将THP-1单核细胞分为4组:对照组、S3I-201组、IL-6组及IL-6+S3I-201组,检测STAT3磷酸化及COX-2表达水平变化。采用实时荧光定量PCR方法检测THP-1单核细胞COX-2的mRNA表达量,Western blot方法检测THP-1单核细胞STAT3磷酸化水平与COX-2的蛋白表达量。结果THP-1单核细胞经IL-6作用后STAT3的磷酸化及COX-2的表达均出现时效性激活,IL-6刺激5 min后STAT3磷酸化水平即显著增加(P0.001),同时COX-2 mRNA和蛋白水平均明显上调,分别于1 h和2 h达到峰值(P0.001)。与对照组相比,S3I-201组COX-2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P0.01);与IL-6组相比,IL-6+S3I-201组STAT3磷酸化水平下降(P0.001),COX-2 mRNA表达水平降低(P0.001),同时COX-2蛋白表达受到明显抑制(P0.05)。结论 IL-6能够激活THP-1单核细胞STAT3通路,其可能通过催化下游COX-2的表达影响动脉粥样硬化性疾病进程。     

支气管哮喘患者外周血单个核细胞Th2特异性转录因子GATA-3表达及其临床意义

目的探讨支气管哮喘患者Th2特异性转录因子GATA-3的表达及其临床意义。方法采用ELISA法、RT-PCR等，分别检测15例哮喘患者（哮喘组）外周血嗜酸细胞（EOS）计数、血清总IgE，地塞米松干预前后单个核细胞（PBMC）培养上清液IL-4，IL-5水平及GATA-3 mRNA表达量，并与10例健康正常者（对照组）进行比较。结果哮喘组GATA-3 mRNA表达水平、IL-4及IL-5明显高于健康对照组，经地塞米松干预后，上述各指标水平均降低。哮喘组GATA-3表达与IL-4、IL-5，IgE，嗜欺细胞计数星正相关。结论Th2特异性转录因子GATA-3可直接调控IL-4，IL-5表达，并参与哮喘气道炎症的发生。     

青蒿琥酯对人胚肺成纤维细胞系HFL—I细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的进一步探讨青蒿琥酯的抗纤维化作用及机制。方法取对数生长期人胚肺成纤维细胞（HELF）系HFL-I细胞株,随机分为观察1—4组及对照组,观察1-4组分别加入质量浓度为4、8、16、32mg／L的青蒿琥酯,对照组加入等体积培养液后继续培养。用CCK-8法检测细胞增殖情况（A值）,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR法测定Survivin mRNA表达。结果观察1-4组G0＋G1期细胞所占比例及细胞凋亡率均显著高于对照组,细胞A值及Survivin mRNA表达均显著低于对照组,且各观察组间亦有显著差异（P〈0．05）。结论青蒿琥酯具有抗肺纤维化作用,可能机制为通过下调Survivin mRNA表达抑制HFL-I细胞增殖、促进HFL-I细胞凋亡。     

缺氧环境中犬内皮集落形成细胞成血管能力及自噬水平观察

目的 观察缺氧环境中犬内皮集落形成细胞（ECFCs）成血管能力及自噬水平。方法 取对数生长期的ECFCs，分为缺氧组和常氧组，缺氧组在缺氧环境中培养，常氧组在常氧环境中培养，比较两组成血管能力（细胞OD值、细胞迁移数、细胞迁移率、管分支数及VEGF mRNA、FGF mRNA、VEGF蛋白、FGF蛋白相对表达量）和自噬水平（细胞LC3 mRNA、P62 mRNA、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白、LC3平均荧光强度、P62平均荧光强度）。结果 与常氧组比较，缺氧组培养48、72、96 h的OD值及细胞迁移数、细胞迁移率、管分支数和VEGF mRNA、FGF mRNA、VEGF蛋白、FGF蛋白相对表达量增加（P均<0.05）。与常氧组比较，缺氧组LC3 mRNA、LC3Ⅱ/Ⅰ表达增加及LC3平均荧光强度增强，P62 mRNA、P62蛋白表达减少及P62平均荧光强度减弱（P均<0.05）。结论 缺氧环境中犬ECFCs成血管能力增强，自噬水平升高。     

苦参碱对白血病HL-60细胞增殖、凋亡及其Bcl-2mRNA、Survivin mRNA表达的影响

目的观察苦参碱在体外对急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养HL-60细胞至对数生长期,分别以苦参碱（苦参碱组）、顺铂（顺铂组）和药物溶媒（对照组）处理,MTI＇法检测细胞生长抑制率、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,RT．PCR法检测Bcl-2mRNA、SurvivinmRNA表达。结果与对照组比较,苦参碱组细胞生长抑制率、凋亡率及G,期细胞比例增高,Bcl．2mR—NA、SurvivinmRNA表达均下调,且呈明显的浓度依赖性（P〈0．05或0．01）。结论苦参碱体外可抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖、诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调凋亡基因Bcl一2、Survivin表达有关。