s-油酰丙醇胺对人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的影响

目的探讨s-油酰丙醇胺对用肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞黏附分子(VCAM-1,I-CAM-1,E选择素)表达的影响。方法从新鲜的脐带中分离出人脐静脉内皮细胞,培养至3~9代,用不同浓度的s-油酰丙醇胺(10,50,100μmol/L)孵育12 h后,用TNF-α(20 ng/mL)孵育8 h,采用荧光实时定量PCR和细胞酶联免疫吸附试验分别检测VCAM-1,ICAM-1,E选择素的mRNA及蛋白的表达,同时采用细胞黏附实验检测其对细胞黏附的影响。结果相对于正常的人脐静脉内皮细胞,TNF-α诱导后的人脐静脉内皮细胞黏附分子(VCAM-1,ICAM-1,E-选择素)的表达明显增加。s-油酰丙醇胺可以显著的抑制VCAM-1的表达,并呈现出一定的剂量依赖性,而且对人急性单核细胞性白血病细胞(THP-1)的黏附也有明显的抑制作用,但对ICAM-1,E-选择素的表达却没有影响。结论s-油酰丙醇胺和大多数的PPARα激动剂一样,能够抑制慢性炎症,减少单核细胞的黏附,抑制VCAM-1的表达,而对急性炎症没有作用,如对E-选择素的表达无影响。     

活化蛋白C经胞外信号调节激酶途径抑制肿瘤坏死因子-α介导的炎症反应

目的观察活化蛋白C(APC)能否经胞外信号调节激酶(ERK)途径抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的炎症反应。方法分离培养并分成3组:正常对照组、TNF-α组、TNF-α+rhAPC组人脐静脉内皮细胞。分别用ELISA法检测细胞上清液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)浓度;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与western bloting技术,检测人脐静脉内皮细胞ERKmRNA、磷酸化ERK蛋白的表达。结果 TNF-α组,细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的浓度较正常对照组显著升高(均P<0.05)。TNF-α+rhAPC组,细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的浓度较TNF-α组显著降低(均P<0.05)。TNF-α组,人脐静脉内皮细胞ERK mRNA、磷酸化蛋白表达水平较正常对照组均显著升高(均P<0.05)。TNF-α+rhAPC组,ERK mRNA、磷酸化蛋白表达水平较TNF-α组均显著降低(均P<0.05)。结论活化蛋白C通过抑制黏附分子的产生来调节TNF-α介导的炎症反应,其作用机制之一可能是通过ERK途径来实现。     

脂联素对大鼠血管平滑肌细胞VCAM-1和ICAM-1表达的影响

目的 探讨脂联素对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达及其意义.方法 复苏培养大鼠血管平滑肌细胞,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫蛋白印迹法(Western blot)观察脂联素对TNF-α诱导的血管平滑肌细胞VCAM-1、ICAM-1蛋白及mRNA的影响.结果 TNF-α(10 ng/ml)刺激后血管平滑肌细胞VCAM-1和ICAM-1表达明显增强(P<0.01);脂联素对其则呈浓度依赖性抑制作用.结论 脂联素可抑制TNF-α诱导的血管平滑肌细胞VCAM-1和ICAM-1的表达,这可能对减轻血管壁的炎症反应、延缓动脉粥样硬化的发生、发展起一定作用.     

腺苷酸环化酶抑制剂和激动剂在脂多糖诱导的急性肺损伤中的作用

目的探讨腺苷酸环化酶抑制剂(SQ22536)和激动剂(Forskolin)在脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用。方法 ICR小鼠随机分为生理盐水组(N组)、模型组(L组)、地塞米松组(D组)、SQ22536组(SQ组)和Forskolin组(F组),气道内滴入LPS制备ALI模型。6 h后观察肺组织病理改变,测定肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、中性粒细胞和白蛋白含量,检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL~(-1)β)、白介素-6(IL-6)和c AMP含量。结果 Forskolin可明显改善肺组织病理变化,降低BALF中白细胞、中性粒细胞和蛋白含量,MPO活性和TNF-α含量明显降低,c AMP含量升高;SQ22536与M组相比差异均无显著性。结论 Forskolin对ALI的保护机制可能与升高c AMP水平、抑制中性粒细胞黏附和趋化及降低TNF-α等相关炎症因子含量有关。     

生姜对全脑缺血再灌注大鼠脑组织炎性细胞因子和黏附分子含量的影响

目的观察生姜对全脑缺血再灌注大鼠脑组织炎性细胞因子和黏附分子含量的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(30mg/kg)和生姜水提物组(100mg/kg),Pulsinelli’s四动脉阻断法造成SD大鼠全脑缺血再灌流损伤模型,分别于手术前1日、术前1h和再灌注前30minig给药,共3次。酶联免疫吸附法(ELISA)测定脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞间粘附分子-1(VCAM-1)、内皮细胞选择素(E-seletin)、血小板选择素(P-seletin)含量。结果与假手术组比较,模型对照组大鼠脑组织TNF-α、ICAM-1、P-selectin显著升高(P<0.05);其他炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8)和黏附分子(VCAM-1、E-selectin)均有不同程度的升高,但无统计学意义(P<0.05)。生姜水提物能明显降低大鼠脑组织TNF-α、ICAM-1、P-selectin含量(P<0.05~0.01),对其他炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、IL-8)和黏附分子(ICAM-1、VCAM-1、E-selectin)均有不同程度的降低作用,但无统计学意义(P<0.05)。结论炎性细胞因子与黏附分子及由此介导的炎症级联反应参与缺血再灌注性脑损伤的病理过程,生姜治疗脑缺血再灌注损伤的机制之一与降低炎性细胞因子与黏附分子含量、抑制炎症级联反应有关。     

NF-κB p65 siRNA对延迟性排斥反应的抑制作用

目的 探讨核因子kappa B(NF-κB) p65的小干扰RNA (siRNA)对延迟性排斥反应的抑制作用.方法血管内皮细胞(EOMA)分为7组:A组(空白对照),B组(阴性对照),C组(TNF-α处理),D组(siRNA处理),E组(scramble siRNA处理),F组(TNF-α+ siRNA处理),G组(TNF-α+scramble siRNA处理).用阳离子脂质体LipofectamineTM 2000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65 siRNA转染入相应的EOMA细胞,24 h后在C组、F组和G组中加入TNF-α(终浓度为20 ng/ml).于TNF-α加入后的6h提取各组细胞总RNA,RT-PCR法测定EOMA细胞内E选择素(E-selectin)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白细胞介素1α(IL-1α)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)水平.结果 F组EOMA细胞内E-selectin、ICAM-1、IL-1α和VCAM-1表达明显高于A组,的明显低于C组和G组(P＜0.01).结论 特异性siRNA抑制NF-κB p65表达可以有效抑制延迟性排斥反应.     

芍药苷对TNF-α诱导的川崎病血管内皮细胞氧化应激和炎症的影响

目的 探讨芍药苷(PF)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的川崎病(KD)血管内皮细胞氧化应激和炎症的影响及其作用机制。方法 体外培养人冠状动脉内皮细胞(HCAECs),将细胞随机分为Control组、PF组、KD组、PF+KD组,Control组不给予任何处理,PF组和PF+KD组给予25μg/ml的PF预处理24 h; KD组和PF+KD组给予50 ng/ml的TNF-α处理6 h。采用CCK-8法检测各组的增殖活性,DCFH-DA法检测活性氧(ROS)水平,WST-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,ABTS法检测总抗氧化能力(T-AOC),qRT-PCR法检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)、E-选择素mRNA表达量,Western Blot法检测IL-1β、IL-6、红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)、血红素氧化酶-1(HO-1)、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)、Keap1、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)蛋白表达。结果 与Control组比...     

木香乙醇提取物对高糖诱导血管内皮细胞损伤的作用及机制

目的 观察木香乙醇提取物(ESL)对高糖诱导血管内皮细胞损伤的作用及相关机制。方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为空白组、模型组(25 mmol·L^-1葡萄糖)、不同浓度ESL组(25、50、100、200μg·m L-1 ESL)。ESL预处理2 h后,模型组与ESL组均经葡萄糖诱导24 h,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β及细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞黏附分子(VCAM)-1、E选择素(E-selectin)含量。通过单核细胞黏附实验观察HUVEC与人髓系白血病单核细胞(THP-1)黏附情况。采用小干扰RNA(siRNA)转染技术沉默细胞中的血红素加氧酶(HO)-1基因后观察ESL抗炎作用的变化。Western blot法检测细胞中HO-1、NF-E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达。结果 与空白组相比,模型组细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1和E-selectin含量均显著升高(P <0.05)。与模型组相比,不同浓度ESL组TNF-α、IL-6、IL-...     

腺苷预适应对体外循环中未成熟肺损伤的影响

目的研究腺苷预适应对体外循环中未成熟肺损伤的影响。方法选取2011年1月—2015年9月在河北工程大学附属医院行体外循环下先天性心脏病手术的60例患儿,随机分为对照组和腺苷预处理组,各30例。腺苷预处理组在麻醉诱导后经颈静脉留置管由微量泵给予腺苷,对照组给予等量0.9%氯化钠溶液泵入。分别于体外循环前（T₁）、体外循环开始40min（T₂）、体外循环停机（T₃）、停机后2h（T₄）、停机后6h（T₅）和停机后24h（T₆）6个不同时间点测定中性粒细胞计数、血浆中可溶性细胞黏附因子-1（s ICAM-1）与白介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。体外循环开始前及结束时取左右心房血测定中性粒细胞计数,计算中性粒细胞跨肺比值。结果中性粒细胞计数、TNF-α、s ICAM-1、IL-8均有交互作用,差异有统计学意义（P<0.05）,中性粒细胞计数、TNF-α、s ICAM-1、IL-8时间间比较,差异有统计学意义（P<0.05）,中性粒细胞计数、TNF-α、s ICAM-1、IL-8组间比较,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患儿外周血中性粒细胞计数、s ICAM-1、IL-8在T₂、T₃、T₄、T₅、T₆比较,差异有统计学意义（P<0.05）,TNF-α在T₂、T₄、T₅、T₆比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两组患儿体外循环时间、主动脉阻断时间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。两组患儿中性粒细胞跨肺差值在体外循环停机时比较,差异有统计学意义（P<0.01）。结论腺苷能通过降低血中s ICAM-1、TNF-α、IL-8水平,减少中性粒细胞在肺内扣押程度,从而减轻体外循环对未成熟肺的损伤。     

血小板微颗粒对人脐静脉内皮细胞黏附因子表达的影响

目的:探讨血小板微颗粒(PMPs)对人脐静脉内皮细胞黏附因子表达的影响及PMPs在冠心病中的可能作用机制。方法:分离制备血小板微颗粒,与人脐静脉内皮细胞CRL-1730共培养,应用半定量逆转录聚合酶链反应技术测定不同浓度PMPs作用不同时间的内皮细胞黏附因子E-选择素、细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞间黏附分子(VCAM)-1的表达。结果:当PMPs达到一定浓度,可促使内皮细胞(CRL-1730)表达E-选择素、ICAM-1和VCAM-1升高,差异有统计学意义(P<0.05);而PMPs刺激内皮细胞(CRL-1730)不同时间,E-选择素、ICAM-1的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:PMPs可促使体外培养的人脐静脉内皮细胞(CRL-1730)表达E-选择素、ICAM-1和VCAM-1升高,从一方面解释了PMPs在冠心病中的可能的作用机制。     

双苯氟嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注后E-选择素、P-选择素和细胞间黏附分子-1表达的影响

目的研究双苯氟嗪对大鼠脑缺血再灌注后E-选择素(E-selectin)、P-选择素(P-selectin)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达及中性粒细胞浸润的影响。方法采用Zea-Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。采用HE染色、免疫组化、流式细胞术以及生化的方法，观察双苯氟嗪对大鼠缺血再灌注后脑组织形态学、P-选择素、E-选择素和ICAM-1表达以及髓过氧化酶(MPO)活性的影响。结果双苯氟嗪可改善缺血再灌注后脑损伤的形态学表现；降低P-选择素、E-选择素和ICAM-1的表达以及MPO的活性。结论双苯氟嗪减轻缺血再灌注后炎症反应，对缺血再灌注性脑损伤具有保护作用。     

银杏提取物对培养的脑微血管内皮细胞与单核细胞和中性粒细胞粘附的拮抗作用(英文)

目的:探讨银杏叶提取物(GbE)对培养的新生牛脑微血管细胞(BCMEC)和大鼠血单核细胞(Mon),中性粒细胞(Neu)粘附的影响及可能机制,方法:用流式细胞仪测定粘附到肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导培养的BCMEC上的单核细胞,中性粒细胞数目.结果:BCMEC经TNF-α处理后,使Mon粘附到BCMEC的百分率从12.5％±0.2％增加到31.3％±0.5％,Neu粘附率也增加到32.1％±0.5％(对照组为13.8％±0.4％).用GbE(1-100 mg·L~(-1))预处理BCMEC后,再用TNF-α诱导,则GbE剂量依赖性地抑制TNF-α的作用,用抗E-选择素单克隆抗体与TNF-α共孵育BCMEC后,TNF-α的诱导作用被明显阻断,结论:GbE使脑微血管内皮细胞减少E-选择素表达,进而抑制Mon,Neu与BCMEC的粘附。     

血清TNF-α、IL-1β、TGF-β1、E-选择素和L-选择素在肾综合征出血热发病机制中的作用

目的 研究血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、转化生长因子β1(TGF-β1)、E-选择素和L-选择素在肾综合征出血热(HFRS)发病机制中的作用.方法 41例HFRS患者(轻症组22例,重症组19例)接受了研究,按病期采血,分别用放射免疫法和ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、TGF-β1、E-选择素和L-选择素,并同期作肝、肾功能和血常规检查.结果 从发热期至多尿期,血清IL-1β、TNF-α、E-选择素、L-选择素均显著升高,与ALT、BUN的变化趋势相一致;与此相反,血清TGF-β1含量、TGF-β1/IL-1β和TGF-β1/TNF-α比值在病程前三期均见降低,与Plt的变化趋势相似.结论 HFRS急性期血清IL-1β、E-选择素、L-选择素升高和TGF-β1水平下降是造成失控性全身炎症反应和肝、肾功能损害的重要因素,在HFRS发病机制中起重要作用;合理的对症治疗和适量使用免疫调节剂可望改善本病的预后.     

西洋参茎叶总皂苷对大鼠局灶性脑缺血损伤及其炎症反应的影响

目的探明西洋参茎叶总皂苷对大鼠局灶性脑缺血损伤炎症反应的影响。方法从西洋参茎叶中提取分离得到茎叶总皂苷。Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、阳性药尼莫地平组、西洋参总皂苷(0.18、0.36、0.72 g·kg-1)组6组,采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型。造模前,西洋参茎叶总皂苷治疗组采用灌胃给药的方式,每日1次,连续7 d。局灶性脑缺血24 h后进行大鼠神经功能损伤评分,TTC染色法观察脑梗死面积,干湿重法测定脑含水量,ELISA法检测大鼠脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的含量。结果与模型组比较,西洋参总皂苷各个剂量组均能在一定程度上改善大鼠局灶性脑缺血损伤后神经缺陷症状,明显减小脑梗死体积,降低脑组织含水量,抑制脑组织中TNF-α、IL-1β、ICAM-1和VCAM-1的表达水平。结论西洋参茎叶总皂苷可通过降低TNF-α、IL-1β、ICAM-1和VCAM-1炎性细胞因子的表达,减缓炎症反应,减轻脑水肿,降低大鼠脑神经功能损伤程度,进而对局灶性脑缺血损伤起到一定的保护作用。     

脑梗塞患者血清TNF-α、sICAM-1的变化及意义

人们很早就发现脑梗塞伴发炎性反应,但直到近年才对其有了较为清楚的认识,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是主要的致炎因子。TNF-α的释放,可激活中性粒细胞,增加白细胞—内皮细胞黏附分子的表达。本研究通过测定急性脑梗死血清中的TNF-α、可溶性细胞间黏附分子—1)     

活化蛋白C通过NF-κB抑制TNF-α介导的炎症反应

目的观察活化蛋白C(APC)是否能够通过核因子-κB(NF-κB)途径抑制TNF-α介导的炎症反应。方法分离培养正常组、TNF-ɑ组、TNF-ɑ+rhAPC组的人脐静脉内皮细胞细胞(HUVECs)。用ELISA法,检测细胞上清液中的细胞内粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)及选择素浓度。用逆转录聚合酶链反应、Western bloting技术检测HUVECs NF-κBmRNA、NF-κB蛋白的表达。结果细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1及E选择素浓度,TNF-ɑ组较正常组显著升高(均P<0.05);而TNF-ɑ+rhAPC组较TNF-ɑ组显著降低(均P<0.05)。HUVECs NF-κB mRNA、蛋白表达水平,TNF-ɑ组较正常组均显著升高(均P<0.05);而TNF-ɑ+rhAPC组较TNF-ɑ组均显著降低(均P<0.05)。结论 APC通过抑制黏附分子的产生来调节TNF-α介导的炎症反应,其可能是通过NF-κB途径来实现。     

非诺贝特对内皮细胞分泌E-选择素和细胞间黏附分子1的影响

目的 研究非诺贝特对内皮细胞产生E-选择素和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的影响.方法 培养人内皮细胞株(ECV304),用肿瘤坏死因子α(TNF-α,浓度5、10、25、50、100ng/ml)刺激;用100μM非诺贝特刺激不同时间(1、6、8、12、18、24h)后用10ng/ml TNF-α刺激24h;用不同浓度非诺贝特(0、1、10、100μM)刺激后用10ng/ml TNF-α刺激24h;用ELISA的方法检测培养上清液中的可溶性E-选择素和ICAM-1浓度.结果 各浓度的TNF-α刺激24h后E-选择素和ICAM-1浓度明显增加(P＜0.05);100μM非诺贝特刺激12、18、24h刺激后抑制E-选择素和ICAM-1分泌增多(P＜0.05);用10、100μM非诺贝特刺激后抑制E-选择素和ICAM-1分泌增多(P＜0.05).结论 非诺贝特可以抑制E-选择素和ICAM-1分泌.     

缺氧缺血性脑病新生儿血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α和可溶性细胞间黏附分子1的变化及意义

目的 观察新生儿缺氧缺血性脑病( HIE)患儿血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)的水平变化,并探讨其临床意义.方法 选择60例HIE患儿(轻度28例,中重度32例).应用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、TNF-α和sICAM-1的水平,另选择同期分娩的健康足月顺产新生儿20例作为对照(健康对照组).结果 HIE患儿血清IL-6、TNF-α和sICAM-1水平均高于健康对照组(t=5.18,5.71,4.99,均P＜0.05);中重度HIE患儿血清IL-6、TNF-α和sICAM-1水平高于轻度HIE组(t=4.28,4.39,3.87,均P＜0.05).结论 IL-6、TNF-α和sICAM-1可能参与HIE患儿的病理生理过程,检测血清IL-6、TNF-α和sICAM-1水平对了解HIE严重程度和预后的具有重要价值.     

蒙花苷对TNF-α诱导的血管内皮细胞炎症损伤及TLR4/IκBα/NF-κB信号通路的影响

目的 以肿瘤坏死因子(TNF-a)刺激人脐静脉内皮细胞(EA.hy926),体外模拟血管内皮细胞炎症损伤模型,探讨蒙花苷(Buddleoside,BUD)对血管内皮细胞的保护作用和机制。方法 MTT法检测TNF-a和蒙花苷对EA.hy926细胞活性的影响;采用TNF-a(50 ng.mL_-1)刺激EA.hy926细胞,加入不同浓度(5、15和25 mmol.L_-1)蒙花苷处理,DAPI染色法测定EA.hy926细胞与单核细胞(THP-1)的黏附能力;Western Blot法检测细胞中Toll样受体(TLR4)、核因子-kB抑制蛋白(IκB-α)、核因子-kB(NF-kB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)等蛋白表达;RT-PCR法检测ICAM-1、VCAM-1等基因mRNA的表达;ELISA法检测细胞上清液中白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的含量。结果 蒙花苷可显著抑制TNF-a刺激EA.hy926细胞与THP-1细胞间黏附作用,降低EA.hy926细胞分泌的炎症因子IL-1、IL-6和IL-8水平。Western blot和RT-PCR结果表明蒙花苷能减少EA.hy926细胞中TLR4、NF-kB、ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达量及ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表达量,同时能升高细胞中IκB-α的蛋白表达量。结论 蒙花苷能缓解血管内皮细胞炎症损伤,其作用机制可能主要是通过抑制TLR4/IΚBα/NF-κB信号通路发挥效用。     

自身免疫性肝炎患者调节性T细胞及相关细胞因子与肝功能损伤的相关性研究

目的 观察自身免疫性肝炎(AIH)患者不同时期外周血CD4+、(CD+25)调节性T细胞亚群表达及细胞因子白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(1L-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,探讨其与肝功能损伤的关系.方法 选择AIH患者39例作为未治疗组,治疗后临床症状缓解23例,作为缓解组...