LncRNA ZFAS1/miR-150-5p轴表达与胃癌根治术患者病理特征及预后的相关性

目的 研究LncRNA ZFAS1/miR-150-5p轴表达与胃癌根治术患者病理特征及预后的相关性.方法 选择2015年在冀中能源峰峰集团有限公司总医院进行胃癌根治术的患者,收集胃癌组织及癌旁组织,检测lncRNA ZFAS1、miR-150-5p的表达水平并分析其相关性,随访胃癌患者的总生存期,采用Kaplan-M...     

外泌体miR-150-5p通过靶向调控p53促进肝细胞癌的增殖、侵袭和迁移

目的 探讨外泌体miR-150-5p通过靶向调控p53对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及分子机制。方法 选取吉安市中心人民医院2019年1月至2022年12月收治的39例肝癌(HCC)患者癌组织及癌旁组织,采用差速离心法提取外泌体并鉴定,qRT-PCR检测肿瘤组织及外泌体中miR-150-5p和p53表达;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与p53的互作;培养人肝癌细胞株(HCCLM3),给予癌组织及癌旁组织分离提取的外泌体处理(Exo^Nor和Exo^HCC),同时给予GW 4869抑制细胞本身分泌外泌体,激光共聚焦显微镜对外泌体与受体细胞结合内化进行追踪;同时采用脂质体3000向HCCLM3细胞转染miR-150-5p mimics和miR-150-5p inhibitor; Transwell检测肝癌细胞迁移及侵袭能力,CCK-8检测细胞增殖,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR检测各组细胞miR-150-5p和p53表达,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和p53蛋白表达。结果 ...     

胃癌组织中miR-143-3p、LASP1表达与临床病理特征和预后的关系

目的 探讨胃癌组织中微小RNA-143-3p(miR-143-3p)、LIM和Src同源结构域3蛋白1(LASP1)表达与临床病理特征和预后的关系。方法 选取113例胃癌患者,采用qPCR法检测胃癌组织和癌旁组织中miR-143-3p、LASP1 mRNA表达。采用Spearman相关性分析胃癌组织中miR-143-3p与LASP1 mRNA表达的关系,比较不同临床病理特征患者miR-143-3p、LASP1 mRNA表达。对患者进行随访,采用Kaplan-Meier法绘制胃癌组织中不同miR-143-3p、LASP1 mRNA表达患者生存曲线。结果 与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-143-3p表达下调,LASP1 mRNA表达上调（P均<0.05）。Spearman相关性分析显示,胃癌组织中miR-143-3p与LASP1 mRNA表达呈负相关（r=-0.810,P<0.01）,二者与TNM分期和淋巴结转移有关（P均<0.05）。随访3年,113例胃癌总生存率为69.03%(78/113)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-143-3p高表达者3年...     

老年胃癌组织miR-183、miR-144-3p表达及其与预后的关系

目的 探讨老年胃癌患者胃癌组织微小RNA-183(miR-183)、miR-144-3p表达水平及其与预后的关系。方法 手术切除治疗的胃癌患者75例采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测癌组织及癌旁正常组织中miR-183、miR-144-3p表达水平,分析两者与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,并采用Cox回归分析进行预后影响因素分析。结果 胃癌组织miR-183相对表达量(2.56±0.28)显著高于癌旁正常组织(1.05±0.17);胃癌组织miR-144-3p相对表达量(0.45±0.11)显著低于癌旁正常组织(0.96±0.18,均P<0.05)。胃癌组织miR-183、miR-144-3p表达水平与TNM分期、脉管癌栓、淋巴结转移均显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,miR-183高表达组总生存(OS)率及无进展生存(DFS)率均显著低于miR-183低表达组,miR-144-3p低表达组OS率及DFS率均显著低于miR-144-3p高表达组(P<0.05)。Cox回归分析显示,淋巴结...     

冠心病患者血清外泌体微小核糖核酸-141-3p对内皮细胞损伤的影响研究

目的:检测冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清外泌体中微小核糖核酸-141-3p(miR-141-3p)的表达变化,并分析miR-141-3p对人血管内皮细胞损伤的影响.方法:收集冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清(n=8)和健康人对照(n=8),用外泌体提取试剂盒提取血清外泌体RNA,使用qRT-PCR的方法检测血清外泌体...     

血浆外泌体miR-452作为胃癌诊断的生物标志物

目的筛选胃癌血浆外泌体中差异表达的miRNA,分析其对胃癌诊断的敏感性与特异性及与胃癌患者的疾病特点之间的相关性。方法收集南京医科大学第一附属医院消化内科病理确诊为胃癌的住院患者与消化内科及体检中心的无癌健康对照人群的血液样本,离心后试剂盒抽提血浆外泌体及其RNA,通过透射电子显微镜观察、蛋白质印迹分析(Western blotting)鉴定标志蛋白及纳米粒径分析(nanoparticle tracking analysis, NTA)对血浆外泌体进行鉴定,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)鉴定与胃癌发病相关的miRNA。结果共纳入胃癌患者80例和健康对照80名。成功对2例血浆外泌体(GC1和NC1)进行鉴定以证实其相关特性。在初始筛选阶段,对12例胃癌和12名健康对照者的血浆外泌体RNA进行qRT-PCR验证并依据其各自的2~(-△Ct)值,分析受试者的诊断ROC曲线下面积(AUC)。与健康对照者相比,胃癌的血浆外泌体miR-452-5p表达量显著升高(P=0.002),miR-452-5p的AUC值为0.798(95%CI:0.552～0.883)。而后纳入新的68对样本对筛选结果进一步验证,miR-452-5p的表达趋势与初始筛选一致,且诊断AUC值为0.733(95%CI:0.647～0.818)。分析已验证的miR-452-5p表达水平与胃癌病理特征无相关性(P0.05)。结论血浆外泌miR-452-5p可能为检测胃癌的新型潜在生物标志物,然而其对疾病的病理特性的影响仍需更大样本量的实验进一步研究。     

结直肠癌组织中miR-876-5p、PAX6 mRNA表达变化及意义

目的 探讨结直肠癌组织中微小RNA-876-5p(miR-876-5p)、配对框基因6(PAX6) mRNA的表达变化及意义。方法 选取86例结直肠癌患者，术中留取部分癌组织和癌旁组织。用RT-qPCR法检测组织中miR-876-5p、PAX6 mRNA表达；用TargetScan数据库预测miR-876-5p与PAX6的关系，用Pearson相关法分析二者的相关性；随访3年，统计患者3年累积生存率，根据结直肠癌组织中miR-876-5p、PAX6 mRNA表达水平将患者分为miR-876-5p高表达组、miR-876-5p低表达组，PAX6 mRNA高表达组、PAX6 mRNA低表达组，比较各组3年累积生存率。结果 结直肠癌组织中miR-876-5p相对表达量低于癌旁组织，PAX6 mRNA相对表达量高于癌旁组织（P均<0.05）。经在线网站https：//www. targetscan. org/预测，miR-876-5p与PAX6的3’-非翻译区691-697存在结合位点。Pearson相关分析显示，结直肠癌组织中miR-876-5p表达与PAX6 mRNA表达呈负相关（r...     

非小细胞肺癌患者外周血外泌体中差异表达的微小RNAs研究

背景目前,临床上尚缺乏早期、有效诊断非小细胞肺癌(NSCLC)的指标,来源于癌组织的外泌体及其内部物质因可反映亲本细胞性质而有望成为早期诊断肿瘤的生物学标志物。目的通过高通量测序技术筛选NSCLC患者外周血外泌体中差异表达的微小RNAs (miRNAs)。方法收集2018年1月—2019年1月于深圳市人民医院就诊的4例NSCLC患者的外周血样品,其中肺腺癌(LUAD) 2例、肺鳞状细胞癌(LUSC) 2例;另收集同期4例健康志愿者的外周血样品作为对照。采用HiSeq 2500高通量测序仪进行miRNAs测序,采用DESeq2软件筛选差异表达的miRNAs;在癌症基因组图谱(TCCGA)中选取并比较39对LUAD组织及其配对癌旁正常组织、45对LUSC组织及其配对癌旁正常组织miRNA-9-3p测序结果。结果 (1)高通量测序结果显示,4例NSCLC患者外周血外泌体中平均检测到776种miRNAs,4例健康志愿者外周血外泌体中平均检测到238种miRNAs。(2) LUAD与LUSC患者外周血外泌体中差异表达最显著的10种miRNAs中有6种是重合的,分别为miRNA-1228-5p、miRNA-129-5p、miRNA-760、miRNA-885-3p、miRNA-9-3p、miRNA-95-3p。(3) LUSC-1、LUSC-2、LUAD-1及LUAD-2外周血外泌体中miRNA-9-3p表达量分别为71.51、15.61、13.99、16.11转录本数,4例健康志愿者外周血外泌体中miRNA-9-3p表达量均为0。TCCGA中LUAD组织和LUSC组织miRNA-9-3p表达量均高于其配对癌旁正常组织(P0.01)。结论通过高通量测序技术发现miRNA-1228-5p、miRNA-129-5p、miRNA-760、miRNA-885-3p、miRNA-9-3p、miRNA-95-3p可能是NSCLC患者潜在的特异性miRNAs,其中miRNA-9-3p主要来源于NSCLC患者癌组织,这为后续通过外周血外泌体miRNAs测序而实现NSCLC的早期、无创诊断奠定了研究基础。     

Hp阳性胃癌组织miR-1290、miR-490-3p表达变化及其临床意义

目的 探讨幽门螺旋杆菌(Hp)阳性胃癌组织微小RNA-1290(miR-1290)、微小RNA-490-3p(miR-490-3p)表达变化及其临床意义.方法 选择胃癌患者92例,其中Hp阳性61例、Hp阴性31例.采用RT-qPCR法检测胃癌组织及其配对的癌旁正常组织miR-1290、miR-490-3p表达.分析胃...     

冠心病患者外周血外泌体中microRNA基因芯片的差异性表达

目的:通过基因芯片筛选并分析健康成年人与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者、稳定型心绞痛(SA)患者外周血外泌体中microRNA的表达差异,寻找临床诊断和治疗冠心病的新靶点。方法:入选STEMI患者、SA患者和健康成年人各3例,采集受试者静脉血,通过超高速离心法提取血清中的外泌体,运用基因芯片技术对外泌体中的microRNA进行测序。两两对比,从中筛选出差异性表达的microRNA,对差异性表达的microRNA的靶基因进行GO功能富集分析和KEGG Pathway富集分析。结果:STEMI组、SA组和健康组外周血中外泌体所含有的microRNA表达有明显差异。SA组与健康组对比,miR-5195-3p、miR-328、miR-130a-3p上调表达差异较明显[FC(abs)2];SA组与STEMI组对比,miR-483-3p下调表达差异较明显[FC(abs)2];STEMI组与健康组对比,miR-4787-3p、miR-423-5p、miR-151b上调表达差异较明显[FC(abs)2],miR-140-3p、miR-29a-3p、miR-765、miR-939-5p下调表达较明显[FC(abs)2]。结论:STEMI患者、SA患者和健康成年人外周血中外泌体所含有的microRNA表达有显著差异,其中部分特异性的microRNA与心血管疾病的发生发展有着密切的关系,可以作为冠心病诊断和治疗的新靶标。     

LncRNA MIR503HG靶向miR-32-5p调控 ITGA6表达对非小细胞肺癌增殖与迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIR503HG、微小RNA(miRNAs)-32-5p、整合素α(ITGA)6在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对NSCLC细胞增殖和迁移的影响。方法 从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中提取273例NSCLC患者癌组织及其对应癌旁组织的LncRNA、miRNA及转录组mRNA的芯片数据,R软件中MAX STAT函数包统计分析LncRNA MIR503HG、miR-32-5p、ITGA6在NSCLC中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测80例NSCLC患者癌组织标本和NSCLC细胞系中LncRNA MIR503HG、miR-32-5p、ITGA6 mRNA表达。双荧光素酶实验证明LncRNA MIR503HG、miR-32-5p、ITGA6的关系。依次以LncRNA MIR503HG-mimic-NC、LncRNA MIR503HG-mimic、miR-32-5p-agomir-NC、miR-32-5p-agomir、LncRNA MIR503HG-mimic+miR-32-5p-agomir、LncRNA MIR50...     

血清外泌体来源的microRNA-221-3p在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清外泌体来源microRNA(miRNA)-221-3p的表达水平及分析其临床意义。方法选取2010年2月-2014年12月南京大学医学院附属南京鼓楼医院经手术治疗后诊断为HCC的66例患者作为HCC组,选取25例同期在本院接受健康检查的体检者作为对照组。通过外泌体提取试剂盒分离HCC组和对照组血清中的外泌体,采用蛋白免疫印迹检测外泌体标记蛋白分子,透射电镜鉴定血清外泌体形态;实时荧光定量PCR方法检测两组血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平。计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验,计数资料两组间比较采用χ~2检验。采用Kaplan-Meier方法及logrank检验分析血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达与预后关系,采用Cox比例风险回归模型分析预后影响因素。结果血清来源的外泌体是直径为40～100 nm囊泡体,表达HSP70、Alix及CD63。HCC组血清来源外泌体中miRNA-221-3p较对照组表达水平升高,差异具有统计学意义(U=354.00,P0.001)。HCC患者血清外泌体miRNA-221-3p高表达与肿瘤大小(χ~2=6.016,P=0.014)、包膜侵犯(χ~2=7.580,P=0.006)和TNM分期(χ~2=6.340,P=0.012)有关。此外,血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平较高的HCC患者总体生存率较低,差异具有统计学意义(χ~2=17.105,P0.001)。多因素分析结果表明血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平(风险比=2.434,95%可信区间:1.178～5.027,P=0.016)及肿瘤分期(风险比=2.653,95%可信区间:1.222～5.760,P=0.014)是影响HCC患者预后的独立危险因素。结论 HCC患者血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平明显升高,对HCC诊断及预后判断具有参考价值。     

卵巢癌组织中LncRNA SNHG11、miR-184表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的 探讨卵巢癌组织中长链非编码核糖核酸（LncRNA）小核仁核糖核酸宿主基因11(SNHG11)、微小核糖核酸184(miR-184)的表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法 收集手术切除的104例卵巢癌组织及其癌旁组织（距离癌组织边缘≥2 cm且经病理检查为正常组织）,实时荧光定量PCR法检测LncRNA SNHG11、miR-184表达,并分析二者的相关性。根据卵巢癌组织中LncRNA SNHG11、miR-184表达均值将患者分为高/低表达组,比较两组的生存率;用多因素Cox回归分析卵巢癌患者预后的影响因素。结果 卵巢癌组织中LncRNA SNHG11表达高于癌旁组织,miR-184表达低于癌旁组织（P均<0.05）。用StarBase软件预测发现,LncRNA SNHG11与miR-184存在结合位点。Pearson相关分析显示,卵巢癌组织中LncRNA SNHG11与miR-184表达呈负相关（r=-0.711,P<0.05）。不同分化程度、FIGO分期、淋巴结转移的卵巢癌组织中LncRNA SNHG11、miR-184表达比较差异有统计学意义（P均<0...     

外周血miR-338-5p、miR-140-5p在HBV相关肝细胞癌患者中表达水平及临床意义

目的?探讨外周血血清中微小RNA（microRNA, miR）-338-5p、miR-140-5p在HBV相关肝细胞癌患者中表达水平及临床意义。方法?选取2017年11月—2020年11月我院收治的HBV相关肝细胞癌患者95例作为肝细胞癌组，另选取同时期HBV相关良性肝病患者100例作为良性组，及健康体检者100例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p表达水平及HBV DNA载量，采用Pearson相关分析分析HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p表达水平与HBV DNA载量的关系，采用多因素Logistic回归模型分析影响HBV相关肝细胞癌发生的危险因素；ROC曲线分析miR-338-5p、miR-140-5p、异常凝血酶原-Ⅱ（abnormal prothrombin-Ⅱ, PIVKA-Ⅱ）表达对HBV相关肝细胞癌的诊断价值。结果?外周血血清中miR-338-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平从高至低依次为肝细胞癌组[（2.73±0.88）、（103.14，319.19）mAU/ml]、良性组[（1.48±0.40）、（32.70，87.15）mAU/ml]、对照组[（1.00±0.27）、（10.36，16.82）mAU/ml]，外周血血清中miR-140-5p表达水平从高至低依次为对照组（1.00±0.25）、良性组（0.72±0.20）、肝细胞癌组（0.38±0.12），两两比较差异均具有统计学意义（P均＜0.05）；肝细胞癌组患者HBV DNA载量（144.97±47.32）明显高于良性组（75.66±21.91）（P＜0.05）。不同TNM分期患者间比较，外周血血清中miR-338-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平及HBV DNA载量从高至低依次为TNM Ⅳ期、Ⅲ期、Ⅱ期、Ⅰ期，外周血血清中miR-140-5p表达水平从高至低依次为TNM Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期，两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）。HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p表达水平与HBV DNA载量呈正相关（P＜0.05），而miR-140-5p表达水平与HBV DNA载量呈负相关（P＜0.05）。HBV相关肝细胞癌发生与患者有无糖尿病史、有无长期饮酒史、HBV DNA载量及外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平有关（P均＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示外周血血清中PIVKA-Ⅱ＞40 mAU/ml、miR-338-5p高表达、miR-140-5p低表达是影响HBV相关肝细胞癌发生的独立危险因素（P＜0.05）。外周血血清中miR-338-5p、miR-140-5p、PIVKA-Ⅱ表达水平联合诊断HBV相关肝细胞癌的AUC为0.930，明显高于3指标单独诊断的AUC（P均＜0.05），联合诊断的敏感度为98.90%，特异度为87.00%。结论?HBV相关肝细胞癌患者外周血血清中miR-338-5p高表达，miR-140-5p低表达，2者可作为评估HBV相关肝细胞癌发生的血清指标，2者联合PIVKA-Ⅱ更有利于诊断HBV相关肝细胞癌。     

LncRNA CDKN2BAS通过调控miR-627-3p影响肺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的机制

目的 探讨LncRNA CDKN2BAS对肺癌细胞NCI-H1299增殖、凋亡和放射敏感性的影响及其分子机制。方法 选取42例肺癌组织及相应癌旁组织;体外培养人正常肺支气管上皮细胞和肺癌细胞系;将NCI-H1299细胞分为NC组、si-NC组、si-LncRNA CDKN2BAS组、miR-NC组、miR-627-3p组、si-LncRNA CDKN2BAS+anti-miR-NC组、si-LncRNA CDKN2BAS+anti-miR-627-3p组;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA CDKN2BAS、miR-627-3p mRNA相对表达水平;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;克隆形成实验检测放射敏感性;Western印迹检测相关蛋白的表达;双荧光素酶报告实验检测LncRNA CDKN2BAS和miR-627-3p的靶向关系。结果 与癌旁组织比较,肺癌组织中LncRNA CDKN2BAS mRNA表达明显升高,miR-627-3p mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与BEAS-2B细胞比较,肺癌细胞NCI-H1299、...     

miR-483-3p对结直肠癌DLC1基因表达的影响

背景:抑癌基因表达抑制在肿瘤发生、发展过程中起重要作用。一些microRNAs可通过调节抑癌基因的表达影响肿瘤发生。目的:探讨miR-483-3p对结直肠癌肝癌缺失基因1(DLC1)表达的靶向调节作用。方法:纳入2012年10月~2013年4月南京鼓楼医院收治的结直肠癌患者16例,采用蛋白质印迹法检测癌组织及其相应癌旁非癌组织的DLC1表达,qRT-PCR检测miR-483-3p表达。构建含DLC1 3’非翻译区(3’UTR)的双荧光素酶报告基因质粒,在人结肠癌细胞株HCT116中验证miR-483-3p对DLC1表达的调节作用。以miR-483-3p mimic转染HEK293T细胞,采用蛋白质印迹法检测DLC1表达;以miR-483-3p mimic转染HCT116细胞,采用CCK-8实验检测细胞增殖。结果:结直肠癌组织的DLC1表达水平显著低于癌旁非癌组织,miR-483-3p表达水平显著高于癌旁非癌组织(P0.05)。miR-483-3p mimic可靶向结合DLC1的3’UTR而抑制其表达。转染miR-483-3p mimic的HCT116细胞增殖能力显著增强(P0.05)。结论:DLC1是miR-483-3p的靶基因,miR-483-3p可在转录后水平抑制DLC1表达,参与促进结直肠癌发生。     

miR-660-3p下调REG4对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的研究miR-660-3p对胃癌MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的分子机制。方法 qRT-PCR检测134例胃癌组织和癌旁组织中miR-660-3p的表达,MTT法和Transwell实验测定过表达miR-660-3p和REG4后MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot检测REG4、Cyclin D1、p21、E-cadherin和MPP-2蛋白的表达,双荧光素酶报告系统验证miR-660-3p与REG4的调控关系。结果与正常癌旁组织相比,胃癌组织中的miR-660-3p表达量显著降低(P 0. 05);抑制miR-660-3p可抑制MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭,抑制MGC-803中REG4、Cyclin D1和MPP-2表达(P 0. 05),促进p21和E-cadherin表达(P 0. 05); miR-660-3p靶向负调控REG4的表达;过表达REG4可逆转过表达miR-660-3p对MGC-803细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-660-3p通过靶向REG4抑制MGC-803细胞的增殖、迁移和侵袭。miR-660-3p是胃癌的潜在分子靶点。     

胃癌患者血清中微小RNA分子的特异性表达及其临床意义

目的 探讨胃癌患者血清中微小RNA(miRNA,miR)的表达差异及其与胃癌发生发展的可能关系.方法 用miRNA芯片分析24例胃癌患者及24例健康人血清样本中miRNA表达谱,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对差异表达的miRNA在99例胃癌患者及89例健康人血清中进行大样本验证.最后用TargetScan等生物信息学软件分析所筛选miRNA的靶基因.结果 miRNA表达谱芯片分析发现胃癌患者血清中有29条miRNA的表达水平呈现明显变化.qRT-PCR结果表明在胃癌患者血清中miR-27a、miR-370、miR-491-5p和miR-516-3p的表达水平明显下调.生物信息学分析及文献检索发现miR-27a、miR-370、miR-491-5p和miR-516-3p具有肿瘤抑制因子功能,其表达下调与消化道肿瘤的发生发展密切相关.结论 胃癌患者血清中具有特异性miRNA表达谱,miR-27a、miR-370、miR-491-5p和miR-516-3p的表达下调可能在胃癌发生发展中起着重要作用.     

LncRNA DDX11-AS1通过靶向miR-497-5p调控胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的机制研究

背景:LncRNA在胃癌中表达上调或下调,其在胃癌发生、发展中的作用机制尚未完全阐明。目的:探讨LncRNA DDX11-AS1通过靶向miR-497-5p表达来调控胃癌细胞增殖、迁移、凋亡的机制。方法:采用qRT-PCR检测胃癌组织和细胞株中DDX11-AS1和miR-497-5p的表达,Pearson法分析胃癌组织中DDX11-AS1与miR-497-5p的相关性。将胃癌HGC-27细胞随机分为NC组、si-con组、si-DDX11-AS1组、miR-con组、miR-497-5p组、si-DDX11-AS1+anti-miR-con组、si-DDX11-AS1+anti-miR-497-5p组。MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况; Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;双萤光素酶报告系统验证DDX11-AS1与miR-497-5p的靶向调节关系;蛋白质印迹法检测cyclin D1、cleaved caspase-3、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:胃癌组织和细胞株中DDX11-AS1表达显著升高(P 0.05),而miR-497-5p表达显著降低(P 0.05),DDX11-AS1与miR-497-5p呈负相关(r=-0.754,P 0.05)。干扰DDX11-AS1表达或上调miR-497-5p表达可显著抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭(P 0.05),诱导细胞凋亡(P 0.05),cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达显著降低(P 0.05),cleaved caspase-3表达显著升高(P 0.05)。双萤光素酶报告实验证明DDX11-AS1可负向调控miR-497-5p的表达和活性。抑制miR-497-5p表达可逆转干扰DDX11-AS1表达对胃癌细胞生物学行为的影响。结论:干扰LncRNA DDX11-AS1表达能通过靶向结合并上调miR-497-5p的表达而抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。