SOCS-1在肝癌中的表达及其与BCL-XL的关系

目的 探讨SOCS-1在肝癌中的表达及其对BCL-XL表达的影响.方法 采用免疫组织化学SP法检测36例肝细胞癌,8例肝硬化以及4例正常肝组织中SOCS-1和BCL-XL蛋白的表达水平.结果 SOCS-1在正常肝组织和肝硬化组织中呈强胞浆表达.66.7%(24/36)的肝细胞癌组织SOCS-1异常低表达与BCL-XL过表达显著相关(P=0.00011).36例肝癌中20例(55.6%)显示SOCS-1异常低表达伴BCL-XL阳性染色.10例(27.8%)显示SOCS-1正常表达伴BLC-XL阴性染色.结论 SOCS-1异常低表达与肝癌的进展和转移有关.其机制可能是通过上调BCL-XL基因的表达,促使肝细胞增殖和恶化转化而实现.     

Skp2、p27kip1蛋白在结直肠癌中的表达及其意义

目的 探讨Skp2蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用及其与p27kip1蛋白表达的关系.方法 应用免疫组织化学法结合计算机图像分析检测结直肠癌(80例)、腺瘤(20例)、正常组织(20例)中Skp2蛋白和p27kip1蛋白的表达.结果 由正常结直肠黏膜、腺瘤到癌,Skp2阳性表达率为0%、55%、93.8%,呈上升趋势(P＜0.01);p27kip1阳性表达率为100%、95%、87.5%,呈下降趋势(P＜0.05).结直肠癌中Skp2表达与p27kip1表达呈负相关(r=-0.311,P＜0.01).Skp2蛋白在癌组织中的表达与结直肠癌的分化程度、淋巴转移有关(P＜0.05).结论 结直肠癌skp2蛋白过表达与p27kip1蛋白降解有关,Skp2蛋白过表达可能是结直肠癌发生、发展的原因之一.     

Survivin在肝癌中的表达及其与肝癌增殖活性的相关分析

目的研究survivin在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌增殖活性的相关意义.方法应用免疫组织细胞化学技术检测31例肝细胞癌组织,8例肝硬化组织和4例正常肝组织中survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果正常肝组织和肝硬化组织中均无survivin表达,31例肝细胞癌组织中19例(61.3%)survivin表达阳性.与正常肝组织和肝硬化组织相比,survivin在肝癌组织中表达率显著升高(P＜0.001).低分化肝癌其survivin表达阳性率显著高于高分化肝癌.此外,survivin表达与肝癌增殖活性显著相关,survivin阳性肿瘤具有较高的增殖活性,其PCNA指数30.5%明显高于survivin表达阴性肿瘤15.8%(P＜0.05).结论 survivin在肝癌中呈现高表达,这种特异性表达与肝癌的低分化性和高增殖有关,可能涉及到肝癌的发生和进展.survivin基因有望成为肝癌诊断和治疗的新靶点.     

肝硬化环境下黏附分子表达对肝癌转移的影响

目的 探讨肝硬化环境对肝癌肝内、外转移的影响.方法 健康雄性BALB/c小鼠,采用CCl4诱导建立肝硬化小鼠模型并设正常对照组.分别在肝硬化组及对照组的肝脏左叶上原位种植小鼠肝癌细胞,术后1、2、3周收取标本.通过大体及病理切片观察肿瘤的生长及转移行为.检测了肝脏组织中血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)和E-钙黏附素(E-cadherin)的表达情况.结果 术后观察发现,肝硬化基础上的肝癌更容易出现肝内转移(14/19)与远处转移(4/19),与对照组相比(5/17,1/17)差异具有统计学意义(P＜0.05).同时肝硬化组黏附类分子较对照组表达明显上调(P＜0.01).钙黏附素表达则无明显差异.结论 肝硬化环境更利于肝癌发生肝内、外转移.这种转移行为可能与肝硬化组织中各种黏附因子表达增高有关.     

skp2,C-myc在肝细胞肝癌中的表达及其意义

目的: 研究skp2和C-myc在肝细胞肝癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系。方法:用免疫组化PV9000二步法检测skp2和C-myc蛋白在48例肝细胞肝癌、20例肝硬化患者和16例正常肝组织中的表达。结果:肝细胞肝癌组织中skp2的阳性表达率（33.3%）显著高于肝硬化组织(均为阴性表达)(P=0.008)和正常肝组织(均为阴性表达)（P=0.020）。skp2在肝细胞肝癌中的表达与组织分化程度及转移有关（P<0.001及P=0.017）,但与肿瘤大小无关(P=0.058)，skp2在高分化肝细胞肝癌中无表达。肝细胞癌组织中C-myc 蛋白的的阳性表达率为58.3%，显著高于肝硬化组织的15%（P=0.001）和正常肝组织(阴性表达)（P<0.001）。C-myc 蛋白阳性表达与组织分化程度、转移及肿瘤大小有关，组间差异依次为P<0.001,=0.023及=0.007。肝细胞癌中skp2蛋白的表达与C-myc的表达呈正相关（r=0.508,P<0.001）。 结论:C-myc可能与肝细胞肝癌的发生发展有关。Skp2的表达提示预后不良。C-myc可能对skp2的表达起正性调节作用。     

KLF8在不同肝癌细胞株及肝癌组织中的表达及其意义

目的 观察不同肝癌细胞株及肝癌组织中Krappel样因子8(KLF8)的表达,并探讨其意义.方法 用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、免疫化学方法分别检测不同肝癌细胞株及肝(癌)组织中KLF8的mRNA和蛋白质水平.结果 KLF8的mRNA及蛋白质水平随肝癌细胞株侵袭转移潜能的增强而明显升高(P<0.05);正常肝组织(6例)、无转移肝癌组织(17例)、有转移肝癌组织(6例)中KLF8 mRNA的相对表达量分别为0.2377±0.0658、0.4683±0.2073、0.6669±0.0239(P<0.05);在正常肝组织和肝硬化组织中KLF8蛋白表达的阳性率分别为16.7%(1/6)和33.3%(2/6),均为弱阳性,在肝癌组织中强阳性率为81.8%(27/33),肝癌转移灶中强阳性率为83.3%(5/6)(P<0.01).结论 KLF8可能参与肝癌的发生和侵袭转移.     

原发性肝细胞癌Survivin,CyclinD1的表达及其临床意义

目的：探讨Survivin和CyclinD1在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及两者在肝癌发病机制中的作用和临床意义.方法：利用免疫组织化学SP法检测50例原发性肝癌组织、20例正常肝组织中Survivin和CyclinD1蛋白表达情况.结果：Survivin蛋白在肝癌中的阳性表达率为66.0%（33/50）,显著高于正常肝组织组（均为阳性表达）（P＜0.001）,阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的多发性有关（P=0.019,P=0.030）.CyclinD1蛋白在肝癌中的阳性率为44.0%（22/50）,显著高于正常肝组织组（均为阴性表达）（P＜0.001）,阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P=0.035,P=0.036）.Survivin的阳性表达与CyclinD1的阳性表达呈正相关（r=0.466,P＜0.001）.Survivin和CyclinD1的过表达均与患者术后＜3年生存期相关（P=0.018,P=0.013）.结论：Survivin与CyclinD1在肝细胞癌的发生及发展过程中起着不同程度的作用,联合检测Survivin与CyclinD1对判定原发性肝细胞癌预后可提供一定的依据.     

原发性肝癌PTEN和p27表达的相关研究

目的：研究PTEN和p27两种抑癌基因在原发性肝癌中的表达和两者间的关系。方法：应用免疫组化方法，对43例原发性肝癌患者、21例份肝硬化患者和16例正常对照的正常肝脏组织进行PTEN和p27的免疫组化研究。结果：原发性肝癌组PTEN的阳性表达率为41．9％（18／43），比肝硬化组和正常对照组明显下降：原发性肝癌组p27的阳性表达率为86．0％，比肝硬化组和正常对照组显著升高。PTEN的表达与肿瘤数目、分化高低、有无血管侵犯有关；p27的表达与原发性肝癌的大小、肿瘤数目、分化高低、有无血管侵犯有关。PTEN蛋白和p27蛋白在原发性肝癌中无相关关系。结论：PTEN作为抑癌基顺在原发性肝癌中发挥作用，p27有其组织特异性，PTEN和p27表达在原发性肝癌中无相关性。     

p27kip1及相关分子skp2在人肝癌组织中的表达变化

目的探讨细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白27（p27^kip1）和细胞S相激酶相关蛋白2（skp2）表达与人肝癌发生的关系。方法用免疫组织化学SP法检测62例肝癌组织中p27^kip1、skp2蛋白的表达，并与22例癌旁正常肝组织作对比。结果p27^kip1蛋白阳性表达率在肝癌中为46．77％，而癌旁肝组织中为95．45％（P〈0．01）。skp2蛋白阳性表达率在肝癌中为32．26％，而癌旁正常肝组织中为13．64％（P〈0．05）。p27^kip1、skp2蛋白在肝癌中的表达呈负相关（P〈0．01）。结论p27^kip1、skp2蛋白检测有助于肝癌的临床诊断及判断预后。     

LGR5参与了肝癌上皮间质转化

目的 研究LGR5与原发性肝癌侵袭转移过程中上皮间质转化(EMT)间的关系。方法 采用免疫组织化学的方法(SP法)分别检测20例原发性肝癌组织、20例癌旁组织及14例正常肝组织中LGR5、E-钙粘蛋白(E-CAD)及N-钙粘蛋白(N-CAD)的表达情况。并分析它们与原发性肝癌临床病理参数的关系。结果 (1)LGR5、E-CAD、N-CAD的表达:在20例肝癌组织中,LGR5、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白的阳性表达分别为15例(75%)、7例(35%)及16例(80%)。在20例癌旁组织中,阳性表达分别为11例(55%)、11例(55%)及10例(55%)。在14例正常肝组织中,阳性表达分别为例4(29%)、11例(79%)及4例(29%)。统计分析表明,LGR5在肝癌中的阳性表达率均明显高于癌旁及正常组织(Ρ0.05)。而E-钙粘蛋白在肝癌中的阳性表达率则明显低于癌旁及正常组织中的阳性表达(Ρ0.05)。同时,N-钙粘蛋白在肝癌中的阳性表达率明显高于癌旁及正常组织(Ρ0.05)。(2)LGR5、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白在原发性肝癌中的表达与临床病例参数的关系:LGR5的表达与患者术前肝功能有关(Ρ0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤TNM分期、分级、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等无关(Ρ0.05);E-CAD的表达与术前肝功能、年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤TNM分期、分级、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均无关(Ρ均0.05);N-CAD的表达与患者的术前肝功能、年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤TNM分期、分级、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均无关(Ρ均0.05)。结论 原发性肝癌中存在明显的上皮间质转化现象;LGR5与原发性肝癌侵袭转移过程中上皮间质转化有关,可能是通过Wnt/β-catenin信号传导通路介导原发性肝癌的上皮间质转化。     

磷酸化蛋白p27在肝细胞肝癌中表达及其意义

目的 探讨人肝细胞肝癌组织中磷酸化蛋白p27的表达及其与临床病理特征的关系.方法 利用Ti4+-IMAC富集和LC-MS2-MS3检测磷酸化蛋白的方法鉴定人肝细胞肝癌组织磷酸化蛋白,进一步利用Western blot检测40例肝细胞肝癌、相应癌旁组织和12例正常肝组织中T187、S10磷酸化p27蛋白(P-p27T187、P-p27S10)的表达.结果在肝癌组织磷酸化蛋白的筛选中鉴定到磷酸化蛋白p27,并确定IPI、磷酸化位点、蛋白激酶等信息,Western blot检测提示P-p27T187与P-p27S10在肝细胞肝癌组织表达明显高于癌旁、正常肝组织,其相对表达量分别为0.635±0.108、0.306±0.078和0.149±0.031,差异有统计学意义(P<0.05).且P-p27T187和P-p27S10与肝癌病理分级、临床分期及转移相关,而与发病年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数目等无明显相关(P>0.05).结论 磷酸化蛋白p27在肝细胞肝癌中表达水平明显升高,与肝癌的发生发展及转移相关.     

Hedgehog信号通路转录因子Gli2表达对肝癌进展和生存预后的影响

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路转录因子Gli2在肝癌中的表达及其与预后的关系。 方法选取68例肝癌及20例肝血管瘤旁肝组织切除标本,采用免疫组织化学法检测Gli2蛋白表达,并分析Gli2表达与肝癌临床病理特征及预后的关系。 结果Gli2蛋白在肝癌组织中的表达率（63.2%）高于癌旁组织（11.8%）及正常肝组织（10.0%）(χ²=38.431、17528,均P<0.01);Gli2表达水平与肝癌分化程度、包膜是否完整、有无血管侵犯、早期复发及肝内转移相关（P<0.05）;Gli2蛋白高表达患者术后总生存率和无瘤生存率明显低于低表达者（P<0.05）;多因素分析表明,Gli2蛋白表达水平是影响肝癌患者术后总生存率及无瘤生存率的独立预后因素（HR=2.239,P<0.05;HR=1.917,P<0.05）。 结论Gli2的高表达与肝癌的侵袭转移特性相关,可作为评价肝癌患者术后预后的标志物之一。     

肝癌、肝硬化组织中CD3、CD57、CD20细胞数量与临床病理表现及预后的关系

目的探讨CD3、CD57、CD20细胞在原发性肝细胞癌(HCC)、癌旁、肝硬化及正常肝组织中的数量及意义.方法HCC 60例,单纯性肝硬化62例,正常肝组织23例,以免疫组化SP法进行CD3、CD57、CD20染色,对阳性细胞数进行定量分析并与临床资料进行相关探讨.结果(1)各组CD3+细胞平均数从高到低为癌旁组织、癌组织、肝硬化组织、正常肝组织(P＜0.05);各组CD57+细胞平均数从高到低为癌组织、癌旁组织、正常肝组织、肝硬化组织(P ＜0.05);各组CD20+细胞平均数从高到低为癌组织、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织(P ＜0.01).(2)HCC中CD3+细胞、CD57+细胞、CD20+细胞与组织学分级均无明显关系.(3)HCC中CD57+细胞和CD20+细胞随着临床分期的发展有下降的趋势(P ＜0.05);HCC中CD3+细胞平均数与临床TNM分期无关.(4)HCC中15月内有转移组的CD57+、CD3+细胞数均少于无转移组(P＜0.01).HCC患者15月内有无转移与HCC和癌旁组织中的B细胞分布均无关.结论临床上,随着HCC患者的病情恶化,CD3+、CD57+、CD20+细胞逐渐减少.CD3+、CD57+、CD20+细胞可成为反映机体抗肿瘤特异性细胞免疫状态和生物学行为及判断患者预后的重要指标.     

肝细胞肝癌DNA损伤修复基因MGMT的表达及其与p53的关系

目的探讨原发性肝细胞肝癌(HCC)中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)的表达与临床病理特征以及突变型p53(mutant p53,mtp53)表达的关系。方法应用免疫组化S-P二步法分别检测10例正常肝组织、40例结节性肝硬化组织和103例人原发性肝细胞性肝癌组织中MGMT和mtp53表达情况。结果MGMT在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中均可表达,正常组表达显著高于肝硬化组(P<0.01)和HCC组(P<0.05),同时HCC组的平均得分又明显高于肝硬化组(P<0.05)。在HCC组织中MGMT表达与mtp53呈显著负相关(P<0.01)。结论MGMT表达的改变与P53基因突变存在密切联系,对于HCC的发生、发展可能有重要作用,MGMT在肝组织中表达的改变可能作为肝肿瘤易感性标志物。     

肝细胞癌Period1 表达与预后的关系

目的：探讨Period1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及意义。 方法：用RT-PCR与Western blot法检测30例HCC组织与其癌旁肝组织及5例正常肝组织中Period1 mRNA与蛋白表达;甲基化特异性PCR检测HCC组织与癌旁肝组织中Period1启动子甲基化水平;免疫组化检测67例HCC组织及其癌旁肝组织石蜡切片中Period1蛋白的表达;分析Period1的表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。 结果：HCC组织Period1 mRNA和蛋白的表达水平均较癌旁肝组织与正常肝组织明显降低（均P<0.05）,而两者在癌旁肝组织与正常肝组织间差异无统计学意义（均P>0.05）;HCC组织Period1启动子甲基化水平较其癌旁肝组织明显增高（均P<0.05）。HCC组织石蜡切片中Period1阳性表达率为47.8%,而癌旁肝组织阳性表达率为83.6%,差异有统计学意义（P<0.05）;Period1表达与HCC分化程度、结节数目、有无静脉浸润有关（均P<0.05）;Period1阳性表达HCC患者中位复时间与中位生存时间均明显短于阳性者（均P<0.05）。 结论：Period1在肝癌中表达下调可能与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关;启动子甲基化可能是Period1表达下调的重要机制。     

Caveolin-1在肝细胞癌表达及与肿瘤血管生成的关系

目的：探讨caveolin-1与肝细胞癌（HCC）侵袭转移的关系及其可能的机制。方法：应用实时PCR方法检测伴肝内转移的 HCC组织、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织中 caveolin-1 mRNA的表达;用Western blot方法检测伴肝内转移的 HCC组织、癌旁组织中caveolin-1蛋白的表达;用免疫组化方法检测75例HCC组织中caveolin-1,血管内皮生长因子（VEGF）,CD34,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,分析caveolin-1,VEGF的表达以及肿瘤微血管密度（MVD）,非成对动脉（UA）计数与临床病理因素的关系。结果：在伴肝内转移的HCC组织中,caveolin-1 mRNA表达明显高于癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织（均P<0.05）,其蛋白表达明显高于癌旁组织;caveolin-1表达水平的升高与肿瘤转移有关（P<0.05）,且caveolin-1的表达与VEGF表达及MVD和UA计数呈正相关（r=0.293,P=0.011;r=0.361,P=0.001;r=0.388,P=0.001）。结论：caveolin-1表达升高促进HCC的侵袭转移,其机制可能是通过诱导HCC表达VEGF,促进肿瘤新生血管生成而实现的。     

肝细胞癌中Ephrin-A1及其受体的表达与血管生成的关系

目的:探讨Ephrin-A1 及其受体与肝细胞癌血管生成之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测52例肝细胞癌（肝癌组）和癌旁组织（癌旁组）标本中Ephrin-A1及其受体EphA1和EphA2蛋白及mRNA的表达情况，并分析其与肝细胞癌的临床病理因素及微血管密度(microvessel density, MVD)之间的关系。结果:在52例肝癌组中 Ephrin-A1及其受体EphA1，EphA2的蛋白阳性表达率分别为59.6%(31/52)，53.8%(28/52)和17.3%(9/52),而癌旁组织中的蛋白阳性表达率分别为23.1%(12/52)，28.9% (15/52)以及21.2%(11/52)。Ephrin-A1及其受体EphA1在两组中的差异有统计学意义(P<0.05)，而EphA2在两组间的差异无显著性（P>0.05）。Ephrin-A1及其受体EphA1mRNA在肝癌组的阳性表达率为67.3%(35/52)和73.7%(38/52)，明显高于癌旁组中的阳性表达42.3%(22/52)和48.1% (25/52) (P<0.05)，而EphA2mRNA在两组间的差异无显著性（P>0.05）。Ephrin-A1蛋白的高表达与患者的甲胎蛋白(AFP)水平及有无门静脉癌栓有关(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示，在肝癌组中Ephrin-A1的表达与EphA1的表达呈正相关(r=0.671,P<0.01);而Ephrin-A1与EphA2的表达无相关性;肝癌组中Ephrin-A1的表达与MVD呈正相关(r=0.826,P<0.01)。结论:Ephrin-A1通过与其受体EphA1相结合，促进肝细胞癌的血管生成，从而促进肝细胞癌的生长、浸润和转移; Ephrin-A1及其受体EphA1有望成为肝癌抗血管生成治疗新的靶点。     

肝细胞癌组织中CYP27A1的表达及其临床意义

目的:探讨CYP27A1在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库,利用R软件采用Wilcoxon秩和检验、配对资料Wilcoxon符号秩检验比较CYP27A1在肝细胞癌和正常肝组织中的表达情况。采用Kaplan-Meier分析及Cox回归分析评估CYP27A1和生存率之间的相关性并探索HCC独立危险因素。采用基因富集分析(GSEA)结合蛋白互作网络进行CYP27A1的生物学功能研究。结果:CYP27A1在肝癌组织中的表达显著低于正常肝组织(P<0.01);CYP27A1表达水平与HCC患者临床分期显著相关,临床分期越高,CYP27A1表达越低(P<0.01);CYP27A1低表达与HCC患者不良预后相关,并且是影响HCC患者预后的独立危险因素(P均<0.05);CYP27A1低表达样本富集到细胞周期、粘着力、胞吞作用、基因复制等功能及ErbB信号通路和p53信号通路。结论:CYP27A1表达与HCC临床分期及预后相关,可能成为临床诊治HCC的生物标志物。