创伤性脑损伤后大鼠脑组织12/15-脂氧合酶的表达及作用研究

目的 12/15-脂氧合酶(12/15-lipoxygenase,12/15-LOX)参与多种中枢神经系统疾病病理过程,与神经系统氧化应激、神经细胞炎症和凋亡密切相关,但对12/15-LOX代谢途径在创伤性脑损伤(traum atic brain in jury,TB I)病理机制中的研究尚少见报道。文中探讨12/15-LOX在TB I后的表达及其对TB I后皮层凋亡和炎症中的调节作用。方法探讨TB I后12/15-LOX的表达时相变化,选择12/15-LOX表达最高的时间点,观察应用其抑制剂黄芩素对神经细胞炎症及凋亡的影响。结果 12/15-LOX在TB I后表达显着增加,TB I后6 h甚至更早即开始升高,第2天达到高峰,第7天恢复至正常水平。与TB I组相比,应用黄芩素抑制12/15-LOX能显著减少神经细胞凋亡,降低脑组织IL-6和TNF-α的表达。皮层神经细胞凋亡指数从(57.97±5.08)%下降至(47.70±4.63)%,脑组织中炎症因子IL-6含量从(0.65±0.08)ng/g降至(0.56±0.05)ng/g,TNF-α含量从(2.55±0.32)ng/g降至(2.10±0.20)ng/g。结论 12/15-LOX在TB I后炎症及凋亡的病理过程中起重要作用。12/15-LOX抑制剂可能成为有效的治疗TB I的神经保护剂。     

脂氧合酶-5及血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及临床意义

目的检测脂氧合酶-5(LOX-5)及血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的表达,分析LOX-5、VEGF在乳腺癌发生发展中的作用及其与临床病理因素的关系。方法采用免疫组化方法检测60例乳腺癌组织、20例乳腺纤维腺瘤组织及20例癌旁正常组织中LOX-5与VEGF的表达情况,分析其与临床病理因素的相关性。结果 60例乳腺癌组织中LOX-5阳性表达率为85.0%,明显高于癌旁组织(15.0%)及乳腺纤维腺瘤组织(5.0%)(P<0.05);60例乳腺癌组织中VEGF阳性表达率为81.7%,明显高于癌旁组织(35.0%)及乳腺纤维腺瘤组织(20.0%)(P<0.05)。LOX-5、VEGF的表达与肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移相关(P<0.05,P<0.01),与患者年龄、雌激素及孕激素受体情况无关。经Spearman等级相关检验,提示LOX-5与VEGF阳性表达呈正相关(r=0.5151,P<0.01)。结论 LOX-5、VEGF在乳腺纤维腺瘤组织及癌旁组织中低表达,在乳腺癌组织中高表达,其高表达与肿瘤浸润、转移等预后不良的因素相关。     

补阳还五汤对脑缺血后12/15-脂氧合酶及相关炎性产物影响

目的 观察补阳还五汤对脑缺血再灌注后12/15-脂氧合酶（12/15-LOX）及下游相关代谢产物的影响。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和12/15-LOX抑制剂PD146176组。假手术组只分离组织和剥离血管,模型组建立大鼠大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,补阳还五汤组于造模术后给予补阳还五汤16 g·kg-1灌胃,2次/d,PD146176组于造模术前30 min给予PD14617610 mg·kg-1皮下注射（同补阳还五汤组做阳性对照）。缺血再灌注后6 h、24 h、48 h和72 h运用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脑组织12/15-LOX的表达水平;免疫荧光（IF）法观察大鼠脑组织中12/15-LOX蛋白与神经元标记物（NeuN）、小胶质细胞标记物（Iba1）及星形胶质细胞标记物（GFAP）的共定位;酶联免疫吸附（ELISA）法检测12/15-LOX抗炎代谢产物消退素D1(RvD1)的含量,以及促炎代谢产物12-羟基廿碳四烯酸（12-HETE）和15-羟基廿碳四烯酸（15...     

5-脂氧合酶在大鼠外科脑损伤模型脑组织中的表达及作用

目的 研究大鼠外科脑损伤(SBI)模型脑组织中5-脂氧合酶(5-LOX)表达的空间分布、细胞定位和随时间变化的规律,并探讨其在SBI发病中的可能作用机制.方法 将72只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组及SBI术后1 d(SBI-1d)组、3 d(SBI-3d)组、7 d(SBI-7d)组,每组18只.对SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠采用右侧额叶切除法建立SBI模型,Sham组大鼠只移除相应部位的颅骨,不伤及硬脑膜.采用干湿质量法测量损伤同侧、对侧脑组织的含水量;Garcia评分和杠杆平衡评分评估各组大鼠的神经行为学功能;免疫荧光化学染色确定5-LOX的空间分布及细胞定位;蛋白质印迹法检测5-LOX和核转录因子(NF)-κB的蛋白表达;生物化学法测定损伤区周围脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 (1)与Sham组相比,SBI-1d和SBI-3d组大鼠损伤侧脑组织含水量增加(P＜0.05);SBI-1d、SBI-3d和SBI-Td组大鼠出现神经功能障碍(P＜0.01),SBI-Td组大鼠的Garcia评分较SBI-1d、SBI-3d组改善(P＜0.05).(2)5-LOX主要分布在损伤区周围的脑组织中,其中以神经元表达为主,星形胶质细胞和小胶质细胞也有表达.(3)与Sham组相比,SBI-1d和SBI-3d组大鼠损伤区周围脑组织中5-LOX、NF-κB表达增加(P＜0.05),而SBI-7d组两者表达低于SBI-1d和SBI-3d组(P＜0.05),其中5-LOX表达增加在SBI术后第1天最明显.(4)与Sham组相比,SBI-1d、SBI-3d和SBI-7d组大鼠损伤区周围脑组织中SOD活性降低(P＜0.05),SBI-1d和SBI-3d组MDA含量增加(P＜0.05).结论 SBI后,5-LOX主要表达于损伤区周围神经元,星形胶质细胞和小胶质细胞也有表达;且在SBI术后1d表达最多.5-LOX加重脑损伤可能与NF-κB表达增多以及氧化应激增加有关.     

5-脂氧合酶在急性肝衰竭大鼠中的表达变化及意义

目的探讨5-脂氧合酶（5-lipoxvgenase,5-LO）及其产物白三烯B4（LeukotrieneB4,LTB4）在急性肝衰竭大鼠模型中的变化及其在肝脏炎性损伤中的作用。方法30只成年雄性Wistar品系大鼠分为实验对照组（6只）和肝衰竭模型组（24只）。通过腹腔注射D-氨基半乳糖及脂多糖建立大鼠急性肝衰竭模型,动态观察4、8、16、24h各时间点大鼠肝组织的病理变化以及血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（T—BIL）的变化。荧光定量PCR测量肝组织5-LOmRNA变化．免疫组化法及蛋白质印迹法检测5-LO蛋白表达,ELISA试剂盒检测肝组织LTB4含量。结果联合腹腔注射D-氨基半乳糖／月旨多糖后,血清中ALT、AST及T-BIL逐渐升高,24h时达高峰．ALT（3992．6±290．7）U／L、AST（10114．7±l014．2）U／L,T—BIL（32．9±2．0）μmmol／L,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。24h病理改变表现为肝细胞坏死、肝索解离,小叶及汇管区大量炎性细胞浸润。5-LOmRNA表达于造模后升高,8h表达最高;与对照组比较,肝衰竭4、8、16h的表达差异有统计学意义（P〈0．01）。造模后肝组织5-LO表达呈持续升高,24h表达最高。LTB4含量与5-L0变化趋势相同,于造模后24h浓度最高,为（355．4±22．2）pg／ml。结论5-LO及其产物LTB4参与急性肝衰竭的病理生理过程．并发挥重要的作用。     

5-脂氧合酶在肿瘤中的作用和机制

5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5LO)是催化花生四烯酸(arachidonic acid,AA)转化为白三烯(LT)和氢氧化物5-羟基花生四烯酸(5-HETE)的关键酶。近年来,多聚不饱和脂肪酸代谢与肿瘤形成之间关系的分子学研究,为肿瘤的发生和发展提供了新的理论,也为肿瘤的预防和治疗提供了新的靶作用分子。大量研究发现抑制5LO能够抑制多种恶性肿瘤的增殖,并诱导细胞凋亡。现就5-脂氧合酶在肿瘤中的作用和机制作一综述如下。     

5- 脂氧合酶在人体组织中的表达及其与疾病的关系

5-脂氧合酶(5-1ipoxygenase,5-LOX)是LOX同工酶中研究较为深入的一种氧化代谢酶,它普遍存在于人体 各种组织细胞中,参与内源和外源化学物的氧化代谢,产生多种代谢产物,与人体的炎症、哮喘、动脉粥样硬化和 肿瘤等疾病的发生有关。5-LOX在人体正常组织或器官中表达很少,而当组织或器官发生异常时表达增多,甚至过度 表达。5-LOX与人体的卵巢、脑、心血管、肺、肝、胰腺等组织的许多疾病有关,其异常表达往往会促进疾病的发生 和发展。     

AA861对人胃癌细胞凋亡及5-脂氧合酶mRNA表达的影响

目的探讨5-脂氧合酶(5-LOX)选择性抑制剂AA861对胃癌AGS细胞株凋亡及其5-LOX mRNA表达的影响。方法体外培养人胃癌AGS细胞,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(25,50,100μmol/L)组AA861不同作用时间(24,48,72 h)后AGS细胞的存活率。TUNEL染色法计数细胞凋亡指数。透射电子显微镜技术检测细胞的凋亡形态。RT-PCR检测AGS细胞5-LOX mRNA表达及AA861对其5-LOX mRNA表达的影响。结果AA861以时间剂量依赖的方式抑制AGS细胞的生长,与对照组比较差别有统计学意义(P<0.05,25μmol/L作用24 h除外),不同药物浓度作用后72 h细胞存活率最高为59.9%(25μmol/L组),最低为36.2%(100μmol/L组);TUNEL染色法显示50,100μmol/L作用48 h后细胞凋亡率为(24.6±3.3)%和(51.2±1.8)%,均高于对照组(P<0.01);透射电镜观察到典型的细胞凋亡形态。AGS细胞存在5-LOX mRNA的表达,AA861作用前后细胞5-LOX mRNA表达无改变。结论AA861能抑制AGS细胞株的生长,亦能诱导其凋亡,但不影响其5-LOX mR-NA的表达。     

5-脂氧合酶基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测5-脂氧合酶(5-1ipoxygenase,5-LOX)在胃癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用半定量RT-PCR法检测42例胃癌组织及22例浅表性胃炎组织中5-LOX的表达。结果:5-LOX mRNA在胃癌组织中的表达阳性率(81.0%)及相对表达量(1.039±0.240)均明显高于浅表性胃炎组织,差异有统计学意义(P<0.05);5-LOXmRNA表达阳性率及相对表达量与胃癌的分化程度有关,分化程度越低,阳性率及相对表达量越高,低分化胃癌与高分化胃癌间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:5-LOX基因在胃癌中的表达与肿瘤分化程度有关,且表达阳性率及相对表达量高于浅表性胃炎组织,提示5-LOX基因的高表达可作为判断预后及分化程度的指标。     

缺氧时15-脂氧化酶在体外牛肺动脉内皮细胞的表达

目的探讨急性缺氧时,15-脂氧化酶（15-LO）在体外肺动脉内皮细胞的表达部位及程度。方法通过细胞培养,然后牛肺动脉内皮细胞分别缺氧0h、0．5h、1h、2h、3h,在倒置显微镜下观察细胞形态,通过做免疫组化,观察牛肺动脉内皮细胞15-LO的表达情况及表达部位。结果正常情况下,牛肺动脉内皮细胞,倒置显微镜下呈扁平或多角形。通过免疫组化实验可观察到,15-LO在牛肺动脉内皮细胞胞质内有表达,而且在不同缺氧时间均有表达,15-LO被染成褐色,缺氧0h时胞质内无褐色颗粒。结论缺氧条件下,在体外牛肺动脉内皮细胞15-LO确有表达,而且随缺氧时间增加,表达增强。     

Sirt1抑制由ox-LDL诱导的人冠状动脉内皮细胞的炎症反应

目的:探讨Sirt1对动脉粥样硬化中人冠状动脉内皮细胞炎症反应的影响.方法:选取人冠状动脉内皮细胞,分别用不同浓度的ox-LDL诱导并筛选出最适浓度建立体外动脉粥样硬化细胞模型;将细胞分为正常对照组、空质粒对照组、空质粒+ox-LDL组、Sirt1过表达+ox-LDL组、Sirt1干扰+ox-LDL组;用荧光显微镜观察...     

血管内皮生长因子基因修饰内皮祖细胞对内膜损伤血管修复的影响

目的 探讨人血管内皮细胞生长因子165(hVEGF165)基因转染骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)及对EPCs增殖的影响,在体研究VEGF基因修饰EPCs对内膜损伤血管再内皮化的影响.方法 体外分离、培养、鉴定EPCs,脂质体介导pcDNA3-hVEGF165质粒转染组、pcDNA3空质粒转染组、空白对照组.ELISA法检测EPCs表达VEGF蛋白,MTT法检测hVEGF165基因修饰对EPCs增殖的影响.基因修饰EPCs移植到内膜损伤血管模型中,观察基因修饰对EPCs修复内膜损伤的效应.结果 FITC-UEA-Ⅰ和DiⅠ-acLDL荧光双染证实分化的EPCs,脂质体介导pcDNA3-hVEGF165质粒转染组EPCs培养基上清中表达VEGF,hVEGF165基因转染促进EPCs迁移、黏附和增殖.基因修饰EPCs促进损伤内膜修复.结论 EPCs可以成功转染hVEGF165基因,并且促进EPCs的迁移、黏附和增殖,增强EPCs对损伤内膜修复的能力.     

颈动脉粥样硬化、血管内皮功能与冠心病的相关性研究

【目的】探讨颈动脉粥样硬化、肱动脉血管内皮功能与冠心病之间的关系。【方法】120例患者进行颈动脉超声、血管内皮舒张功能及64排冠状动脉CT检查。根据冠脉CT结果将入选患者分为冠心病（Coronary arterosclerotic heart disease,CHD）组及非CHD组。比较两组颈动脉粥样硬化、肱动脉血管内皮舒张功能。【结果】CHD组颈动脉硬化斑块较非CHD组明显增多;血管内皮舒张功能在CHD组与非CHD组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。【结论】颈动脉粥样硬化与血管内皮功能可预测冠心病的发生,可作为监测和评估冠心病的指标。     

阿托伐他汀对血管内皮细胞增殖过程中FKBP12mRNA和细胞上清液ET-1的影响

目的探讨不同浓度阿托伐他汀对血管内皮细胞（VEC）增殖过程中FK506结合蛋白12（FKBP12）表达和细胞上清液ET-1的影响。方法培养大鼠VEC并传代,观察其不同浓度阿托伐他汀作用下的不同时期FKBP12mRNA水平的表达和细胞上清液ET-1的变化。结果阿托伐他汀抑制血管内皮细胞增殖过程中FK—BP12的表达,抑制血管内皮细胞合成和分泌ET-1;血管内皮细胞FKBP12表达和ET-1分泌基本一致,呈正相关,阿托伐他汀对它们的抑制作用且呈时间依赖性和剂量依赖性。结论阿托伐他汀通过降低FKBP12表达抑制血管内皮细胞增殖并对ET-1合成和分泌起负性调节作用。     

阿托伐他汀对高胆固醇血症患者的血脂和血管内皮功能的影响

目的研究阿托伐他汀对高胆固醇血症血脂和血管内皮功能的影响.方法将高脂血症患者128例随机分为阿托伐他汀组(n＝64)和辛伐他汀组(n＝64),服药前及服药后4、8周测定血脂,并应用高频超声测定反应性充血时和含服硝酸甘油后肱动脉内径.结果服药4周后两组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及甘油三酯(TG)均明显降低(P<0.01),两组作用相似.治疗后两组反应性充血时和含服硝酸甘油后肱动脉内径均高于治疗前,两组比较无明显差异.含服硝酸甘油后肱动脉内径的扩张程度阿托伐他汀组强于辛伐他汀组.结论阿托伐他汀能显著降低高胆固醇血症患者血清TC、LDL-C及TG和改善血管内皮功能,并且其作用与辛伐他汀相似.     

5-脂氧合酶抑制剂齐留通对N-甲基-D-门冬氨酸诱导的小鼠脑损伤的保护作用

[目的]观察5-脂氧合酶(5-LOX)抑制剂齐留通对N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)皮层注射诱导的小鼠脑损伤的影响。[方法]NMDA(100 nmoL)皮层直接注射建立脑损伤模型,用干湿重法评价脑水肿,脑切片TTC染色检测梗死体积,甲苯胺蓝染色法评价神经元的损伤。以NMDA拮抗剂氯胺酮(30mg.kg-1)为阳性对照药,3、10、30 mg.kg-1齐留通在NMDA皮层注射前30 min腹腔注射给药1次,NMDA注射后24 h评价上述指标。[结果]干湿重法显示皮层注射NMDA并未引起脑水含量的变化,齐留通对脑水含量没有影响;NMDA(100nmoL)皮层注射能诱导大面积脑梗死,中、高剂量的齐留通(10、30mg.kg-1)和氯胺酮(30 mg.kg-1)能明显降低梗死灶体积;NMDA诱导神经元变性,中、高剂量的齐留通和氯胺酮减轻神经元变性,增加损伤区神经元数量。[结论]5-LOX抑制剂齐留通对NMDA皮层注射诱导的小鼠脑损伤有保护作用。     

应用ET评价血压对颈动脉内皮功能与腔隙性脑梗死的影响

目的：应用血管回声跟踪技术（E-Tracking,ET）评价血压对颈动脉内皮功能及腔隙性脑梗死的影响。方法采用随机抽样法抽取我院2009年2月-2013年8月采用ET技术及颅脑MRI检查的门诊及住院患者,其中正常血压与各级高血压各60例,将各组间ET参数中的血管僵硬度（β）、弹性模量（Eρ）、血管顺应性（AC）及不稳定粥样硬化斑块及MRI检测出的腔隙性梗死进行比较。结果血管僵硬度（β）、弹性模量（Eρ）、不稳定斑块及腔隙性梗死统计数据随血压升高而升高,血管顺应性（AC）随血压升高而降低。结论血压升高与血管内皮功能损伤及腔隙性脑梗死密切相关,在高血压早期,即使颈动脉未发生形态及结构的改变,血压已成为血管内皮功能损伤的独立危险因素。     

生长因子-1诱骗寡核苷酸对大鼠颈总动脉球囊损伤后血小板源性生长因子-BB表达的影响

目的探讨针对早期生长反应因子-1（Egr-1）的诱骗性寡脱氧核苷酸（decoy ODN）对大鼠动脉损伤后内膜增生的影响和可能的机制。方法制备大鼠颈动脉球囊损伤模型,将96只Wistar大鼠随机分为假手术组、单纯损伤组、杂码寡脱氧核苷酸（SCR）组和治疗组,每组24只。术后3、7、14、21 d处死动物,每组6只。应用HE染色、Real time RT-PCR和Western blot方法观察大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生情况、Egr-1和血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）的表达及Egr-1 decoy ODN对它们的影响。结果①内皮损伤后3 d内膜增厚不明显,7 d内膜开始增厚,14、21 d时内膜明显增厚。②Egr-1 mRNA和蛋白水平于术后3 d开始升高,21 d时达到顶峰,而PDGF-BB的mRNA和蛋白水平均于3 d开始升高,14 d时达到顶峰。③转染Egr-1 decoy ODN治疗后,在各个时间点内膜增厚程度减轻,与对照组比较,Egr-1和PDGF-BB表达明显减少,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。结论 Egr-1 decoy ODN可能是通过特异性抑制Egr-1的表达,进而抑制PDGF-BB的表达,达到减轻新生内膜厚度、从而减轻血管损伤后内膜增生的目的。     

人参皂苷Rg1对大鼠血管球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响

目的 观察人参皂苷Rg1( Rg1)对大鼠颈动脉球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响,补充说明Rg1对球囊损伤所致血管狭窄形成的防治机制.方法 建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,制模后随机分为假手术组、模型组、Rg1低剂量(4 mg/kg)组和Rg1高剂量(16 mg/kg)组.制模次日腹腔注射给药,模型组及假手术组给予等体积生理盐水,连续给药14d后取损伤侧颈总动脉,行H.E.染色并测量管腔面积(Lumen area,LA)以判定血管腔狭窄程度;采用实时荧光定量RT-PCR (real-time RT-PCR)法检测管壁c-myc mRNA的表达.结果 颈总动脉球囊损伤模型组大鼠血管腔面积较假手术组明显狭窄(P＜0.01).Rg1低剂量及高剂量均明显改善球囊损伤所致的颈动脉狭窄,使球囊损伤后狭窄的血管腔面积增大(P＜0.05);Rg1高剂量显著下调损伤血管壁的c-myc mRNA表达(P＜0.01).结论 Rg1能减轻球囊损伤所致大鼠颈动脉狭窄,可能与其下调c-myc基因的表达有关.