中性粒细胞胞外诱捕网在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化作为一种炎症反应性疾病,已成为心脑血管病领域的共识.而参与动脉粥样硬化炎症反应的细胞成分多种多样,包括单核-巨噬细胞、树突状细胞、T淋巴细胞及中性粒细胞等.中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞活化时释放的网状物质,它具有抗炎、促炎、促凝等多种生物活性,并参与多种疾病的病理进程.研究发现:中性粒细胞可以在某些刺激因子作用下活化并释放出NETs,而NETs具有细胞毒性和血栓形成效应,并且能够与巨噬细胞产生交互作用,它作为将炎症和血栓形成联系起来的桥梁,在动脉粥样硬化的病理进程中发挥了重要作用.     

肺炎链球菌诱导中性粒细胞胞外捕获网形成

目的初步探究肺炎链球菌诱导中性粒细胞胞外捕获网(NETs)形成的作用及调节机制,为进一步研究奠定基础。方法采用免疫磁珠法分选C57BL/6小鼠骨髓中性粒细胞,肺炎链球菌刺激中性粒细胞,分别采用脱氧核糖核酸酶(DNase)降解NETs和NADPH氧化酶抑制剂二苯基氯化碘盐(DPI)预处理中性粒细胞阻断活性氧簇(ROS)生成,免疫荧光染色观察NETs结构,检测游离DNA定量观察NETs的生成。结果肺炎链球菌刺激中性粒细胞释放NETs,DNase降解NETs结构,阻断ROS生成后NETs形成受抑。结论肺炎链球菌能够诱导NETs形成,DNase直接降解NETs或DPI抑制NETs形成可以成为调节NETs生成的有效途径。     

NETs与急性呼吸窘迫综合征的研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是一种新型抗菌形式,但过量的NETs也能通过直接或者间接的方式造成肺损伤,促进炎性反应.NETs与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)病情进展息息相关,可为其治疗带来新的线索.     

中性粒细胞胞外诱捕网在肺部疾病中作用的研究进展

中性粒细胞是肺部的常驻免疫细胞，受到刺激后，可释放含有中性粒细胞弹性蛋白酶、髓过氧化物酶、瓜氨酸组蛋白、细胞骨架蛋白的解凝染色质，即中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)。NETs在肺部疾病中发挥抗感染作用，但过量的NETs释放也会导致肺部组织损伤、炎性反应增强和促进肿瘤转移。本文简要总结NETs的相关研究进展，为研发治疗肺部疾病的潜在药物提供新的思路。     

ELR+ CXC趋化因子诱导NETs生成的作用机制

目的探讨ELR~+ CXC趋化因子诱导中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)生成的作用及机制。方法分离人外周血中性粒细胞,通过荧光染色和总MPO定量检测比较ELR~+ CXC趋化因子、ELR-CXC趋化因子和非趋化性细胞因子对NETs的诱导作用。以CXCL8为代表性ELR~+ CXC趋化因子,检测其诱导NETs的时效、量效关系,明确参与NETs生成的酶类成分,胞膜受体以及胞内信号分子机制。检测CXCL8对中性粒细胞ROS的上调效应及其在介导NETs生成中的作用。结果仅有ELR~+ CXC趋化因子可刺激NETs释放(P0.05或0.01)。其代表性因子CXCL8诱导NETs具有时间和剂量依赖性。抑制MPO、NE和PAD4活化,或者抑制CXCR1受体内化以及胞内ERK和p38的磷酸化,均可显著下调CXCL8诱导的NETs生成(P0.01)。CXCL8还通过上调NOX2并增加胞内ROS水平介导NETs生成。结论 ELR~+ CXC趋化因子可诱导NETs生成,该作用与其结合CXCR1,激活ERK和p38,诱导NOX2活化和上调ROS生成有关。     

中性粒细胞胞外诱捕网的研究进展

中性粒细胞是体内固有免疫系统的主要成员之一,通过杀伤外来病原体来保护宿主.除了能够吞噬消灭病原体以外,中性粒细胞也能通过一种由颗粒蛋白和DNA构成的称作中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的结构来捕获病原体.总结近年来关于NETs的结构、产生及其生物学特性的研究进展,并设想NETs可能成为炎症和相关疾病治疗中新的研究靶点.     

中性粒细胞胞外诱捕网与相关疾病的研究进展

中性粒细胞是机体防御系统的第一道防线,当机体遭受病原微生物的入侵,中性粒细胞即发挥强大的作用.研究发现,活化的中性粒细胞可以释放出非浓缩染色质形成网状支架,对病原体进行包围及限制,这一过程称为中性粒细胞胞外陷阱(neutrophil extracellular traps,NETs)形成(NETosis).NETs是由DNA骨架、组蛋白、颗粒成分以及胞浆蛋白组成的网状物,其能够网罗、杀伤病原体从而参与机体自身免疫应答,维护机体健康.然而,中性粒细胞胞外诱捕网的产生是一把双刃剑,近年来有研究表明,它可以引发代谢性疾病,如糖尿病(diabetes mellitus,DM),引起心血管疾病动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS),参与自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮(system lupus erythematosus systemic lupus erythematosus,SLE)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的产生,还可以使自身凝血异常,刺激血栓形成并为其提供支架,因而研究NETs及其与疾病之间的关系具有重要意义.     

白蛋白对脂多糖诱导中性粒细胞胞外诱捕网生成的抑制作用

目的探讨白蛋白对脂多糖(LPS)诱导人外周血中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)生成的抑制作用及机制。方法分离人外周血中性粒细胞,分别培养于无白蛋白和含生理浓度白蛋白的培养体系中,加入LPS刺激,同时使用钙离子(Ca~(2+))以及自噬调节剂干预,采用sytox green染色法检测NETs,采用Fluo-4 AM染色法检测胞内Ca~(2+)水平,免疫荧光法检测NETs相关蛋白髓过氧化物酶(MPO)、弹性蛋白酶(NE)和瓜氨酸化组蛋白H3(cit-H3)以及自噬体相关蛋白LC3B的表达。结果 LPS可诱导中性粒细胞释放NETs,白蛋白可抑制NETs生成;白蛋白可降低LPS刺激下中性粒细胞胞内Ca~(2+)浓度和自噬水平。Ca~(2+)载体可增强中性粒细胞自噬水平并促进LPS诱导的NETs生成,Ca~(2+)螯合剂可降低自噬水平并抑制NETs生成。自噬激动剂可显著增强NETs,自噬抑制剂则显著抑制NETs。结论白蛋白对LPS诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)生成具有抑制作用,其作用机制可能与减少中性粒细胞Ca~(2+)内流进而抑制自噬有关。     

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的研究现状

中性粒细胞是人体固有免疫系统的重要组成之一,可借助其强大的趋化作用和吞噬功能杀灭病原体。近年来研究表明活化的中性粒细胞也可以通过形成胞外诱捕网(NETs)来捕获并消灭病原体。然而,NETs也可以对自身正常细胞和组织产生损伤。本文通过总结NETs的产生机制、结构组成、信号通路、对机体的利弊等方面对NETs的最新研究进展做一概述。     

琼脂糖明胶皮下埋植法富集、分离具有自发NETs倾向的小鼠中性粒细胞

目的建立小鼠中性粒细胞富集、分离的方法,为进一步探讨中性粒细胞及中性粒细胞胞外捕网(NETs)的免疫损伤效应奠定基础。方法制备2%琼脂糖0.2%明胶块,埋植于健康6~8周龄C57雌性小鼠皮下富集中性粒细胞,96 h后取出明胶块置于PBS中进行游离释放,收集细胞。荧光染色进行细胞形态学观察,采用Gr-1及CD11b进行流式细胞分析鉴定。结果不同表面积的明胶能够分离出106~107数量级细胞,具有中性粒细胞典型的分叶核形态学特征,流式细胞分析鉴定为Gr-1+CD11b+的中性粒细胞,纯度可达95.7%,并观察到典型NETs形成,其数量随分离时间的延长而增加。结论通过皮下埋植琼脂糖明胶成功富集、分离大量高纯度且具有自发NETs倾向小鼠中性粒细胞。     

分子伴侣性自噬参与LAMP-2抗体诱导中性粒细胞胞外捕网形成

目的探讨分子伴侣性自噬在LAMP-2抗体诱导中性粒细胞胞外捕网(NETs)形成的作用及机制。方法采用PolymorphprepTM方法分离健康志愿者和抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)患者外周静脉血中的中性粒细胞,直接离体或LAMP-2抗体刺激健康人外周血中性粒细胞,通过自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和放线菌酮(CHX)进行干预,免疫荧光观测NETs的形成,免疫荧光法和免疫印迹法检测分子伴侣自噬相关蛋白LAMP-2A、Hsc70的表达。结果与正常中性粒细胞组相比,AAV患者中性粒细胞LAMP-2A表达增加(P=0.002 3);LAMP-2抗体可诱导中性粒细胞LAMP-2A、Hsc70蛋白表达明显上调(P<0.01),CHX能明显降低LAMP-2抗体引起的LAMP-2A、Hsc70蛋白表达(P<0.000 1);与3-MA组相比,CHX组能明显减少LAMP-2抗体诱导的NETs形成(P<0.000 1)。结论 LAMP-2抗体可诱导人中性粒细胞分子伴侣性自噬增强及NETs形成,放线菌酮可抑制此过程,提示分子伴侣性自噬可能参与了NETs的形成。     

中性粒细胞胞外诱捕网与糖尿病足溃疡的研究进展

中性粒细胞活化后形成中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)发挥捕获和消灭病原体作用,这是固有免疫的重要发现。NETs是把双刃剑,过多或持续存在的NETs可导致糖尿病足溃疡创面愈合迟缓。     

溶酶体膜蛋白-2抗体诱导中性粒细胞胞外捕网形成的实验研究

目的研究溶酶体膜蛋白-2抗体(LAMP-2-antibody)诱导中性粒细胞胞外捕网形成(NETosis)的作用,为进一步探讨这种新型细胞死亡模式在系统性小血管炎中的作用及机制奠定基础。方法采用PolymorphprepTM进行密度梯度离心法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,抗LAMP-2抗体刺激中性粒细胞,以及通过NADPH氧化酶抑制剂二甲苯基碘(DPI)阻断活性氧簇的产生,电镜、免疫荧光观测胞外捕网的形成,激光共聚焦检测自身抗原LAMP-2、PR3、MPO的表达。结果 LAMP-2抗体促进中性粒细胞胞外捕网NETs形成,自身抗原MPO、PR3及LAMP-2包含在NETs内,抑制NADPH氧化酶的活性可以阻断NETs形成。结论 LAMP-2抗体可能通过诱导中性粒细胞异常死亡,释放内源性危险信号,激活自身免疫反应等来维持血管炎的恶性持续状态。     

活性氧在中性粒细胞胞外诱捕网形成中的作用

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是胞外的一种DNA网状结构,其可网罗、杀伤病原体从而参与机体固有免疫应答.然而在某些情况下NETs会引发一系列自身免疫性疾病.研究表明,在NETs形成过程中活性氧(ROS)起到至关重要的作用.阐述活性氧与NETs形成的相互作用,进一步讨论了尚未完全明确的活性氧与NETs的关系,包括还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶产生的ROS的作用,依赖NADPH氧化酶产生NETs的分子机制,以及非NADPH氧化酶产生的ROS的作用,从多方面分析ROS与NETs形成的关系.     

类风湿关节炎患者SIRL-1表达及其调控NETs形成的作用

目的：探讨白细胞信号抑制受体-1(SIRL-1)在类风湿关节炎（RA）患者关节滑膜组织和外周血中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞中的表达及其对中性粒细胞外捕网（NETs）形成的影响。方法：免疫组织化学染色比较RA患者和骨关节炎（OA）患者滑膜组织中表达SIRL-1的阳性细胞数；流式细胞术分析RA患者和健康志愿者（HC）外周血中性粒细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞表面SIRL-1表达；密度梯度离心法分离RA患者和HC外周血中性粒细胞，分析SIRL-1单克隆抗体（SIRL-1mAb）自发形成NETs的影响。结果：RA滑膜组织中表达SIRL-1的阳性细胞数少于OA滑膜组织（P=0.040 2）；与健康对照组相比，RA患者外周血中性粒细胞和单核细胞表面SIRL-1表达明显降低（P=0.029 8,P=0.006 7），但两组人群嗜酸性粒细胞SIRL-1表达差异无统计学意义（P=0.401 7）;RA患者中性粒细胞比健康对照组更易自发形成NETs(P=0.000 2)；与未使用SIRL-1 mAb组相比，SIRL-1 mAb处理的RA患者形成NETs水平明显降低（P=0.036 8）,SIRL-1 ...     

中性粒细胞在特发性炎性肌病中的作用

特发性炎性肌病(idiopathic inflammatory myopathy, IIM)是自身免疫性炎症性疾病,主要有对称性四肢的近端肌无力、肌酶升高、皮疹等表现,并伴多系统器官受累,该病的病因及发病机制目前尚不清楚。中性粒细胞是免疫系统重要的组成部分,近10年诸多研究者参与对中性粒细胞的深入研究,发现它在固有免疫和适应性免疫中都能发挥重要作用。中性粒细胞可以通过释放蛋白酶、促炎细胞因子级联等方式促进自身免疫性疾病的发生,同时通过形成中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap, NET)调节免疫反应。该文就中性粒细胞在IIM发病机制中的作用进行综述,希望对IIM发病机制的研究有所帮助。     

中性粒细胞胞外诱捕网及其在相关疾病中的作用

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是由激活的中性粒细胞释放到胞外的一种网状结构,不但可以包裹病原体,也具有很强的细胞毒性,与多种疾病的发病及进展密切相关.随着近年来对其代谢过程和影响因素的研究逐渐深入,NETs有望成为多种疾病诊断和治疗的新靶点.     

中性粒细胞胞外诱捕网在非感染性炎性疾病中的作用

研究证实中性粒细胞胞外诱捕网参与病原微生物引起的先天免疫应答反应。最近研究发现在非感染性炎性疾病中也存在中性粒细胞胞外诱捕网。中性粒细胞胞外诱捕网形成增多或者降解异常都会影响急、慢性炎性疾病的病理过程。本篇文章介绍了中性粒细胞胞外诱捕网的形成及作用,着重介绍在非感染性炎性疾病的意义。     

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的研究进展

通常认为早期的感染是致病菌繁殖、传播的能力与宿主对致病菌隔离和杀灭的能力之间的较量。作为机体的第一道防线,中性粒细胞在感染初期的防御中起着重要作用。中性粒细胞杀灭病原体的方式主要为吞噬及脱颗粒作用,而最近又发现了另一种新的机制——中性粒细胞胞外诱捕网络(neutrophil extracellular traps,NETs)的形成。但研究证实NETs对我们的机体来说也是把双刃剑。本文就NETs的组成、影响其生成的因素及其对机体的利与弊做一概述。     

还原型谷胱甘肽对活性氧介导的系统性红斑狼疮患者中性粒细胞NETosis的影响

目的　探讨抗氧化剂还原型谷胱甘肽（GSH）能否通过调控中性粒细胞ROS水平从而抑制中性粒细胞发生NETosis,减少中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps, NETs）的形成,为临床开发新的治疗系统性红斑狼疮（SLE）的药物提供理论基础。 方法　采用梯度离心法分离SLE患者外周血中性粒细胞,利用佛波酯（PMA）诱导中性粒细胞发生NETosis后,检测各组中性粒细胞胞内ROS水平并观察其NETs产生情况。 结果　与PMA处理组比较,经过GSH预处理的SLE患者中性粒细胞体外诱导NETs产生明显减少。同时,GSH也能明显降低SLE患者中性粒细胞胞内ROS水平。 结论　GSH可能通过调控SLE患者中性粒细胞ROS的水平,从而抑制其发生NETosis,提示GSH可能在SLE治疗中发挥作用。