老年结直肠癌组织中miR-182表达及其与临床病理参数的关系

目的探讨老年结直肠癌组织中微小RNA(miR)-182的表达及其与临床病理参数的关系。方法选择绍兴市人民医院2010年1月至2011年12月70岁以上老年结直肠癌患者120例结直肠癌组织及其相应的癌旁组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定结直肠癌组织和癌旁组织中miR-182水平。结果结直肠癌组织中miR-182水平明显高于癌旁组织(P0.05)。结直肠癌组织中miR-182水平与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移和远处转移明显相关(P0.05),TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、有远处转移患者结直肠癌组织中miR-182水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、无远处转移患者(P0.05);结直肠癌组织中miR-182水平与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、癌胚抗原(CEA)水平无关(P0.05)。结直肠癌组织中miR-182水平诊断结直肠癌的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.812,95%CI为0.809～0.815,miR-182水平界值为1.623,灵敏度为86.34%,特异度为77.16%。miR-182低表达患者的生存率明显高于高表达者(P=0.009)。结论老年结直肠癌组织中miR-182水平升高,miR-182水平与结直肠癌的临床分期、淋巴结转移、远处转移有关,有望成为结直肠癌诊断和预后预测的潜在指标。     

联合检测血清miR-124与miR-182的表达水平对急性脑梗死诊断与预后评估的价值

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者血清microRNA-124(miR-124)和microRNA-182(miR-182)的表达水平,及二者联合检测对脑梗死诊断及预后评估的价值。方法选取ACI患者120例作为观察组,同期健康体检者80例作为对照组。观察组患者根据脑部梗死体积进一步分为小梗死组(5 cm~3)、中梗死组(≥5 cm~3且≤10 cm~3)和大梗死组(10 cm~3)。检测所有入组患者血清miR-124和miR-182的相对表达量,通过受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-124和miR-182以及二者联合诊断ACI的价值。ACI患者随访1年,分析血清miR-124和miR-182与预后的相关性。结果观察组患者血清miR-124和miR-182的相对表达量分别为(2.63±0.59)和(2.69±0.69),显著高于对照组[分别为(1.08±0.32)和(1.07±0.46)](P0.05)。中梗死组和大梗死组miR-124相对表达量显著低于小梗死组(P0.05),而miR-182相对表达量显著高于小梗死组(P0.05)。Pearson相关分析显示,miR-124相对表达量与脑部梗死体积呈负相关(r=-0.613,P0.01),miR-182相对表达量与脑部梗死体积呈正相关(r=0.761,P0.01)。miR-124以1.34为截断值时诊断ACI的灵敏度为73.33%,特异度为90.00%,ROC曲线下面积为0.775(95%CI 0.715～0.834,P=0.030);miR-182以1.45为截断值时诊断ACI的灵敏度为66.67%,特异度为87.50%,ROC曲线下面积为0.675(95%CI 0.602～0.749,P=0.038);二者联合诊断的灵敏度为88.33%,特异度为86.25%,ROC曲线下面积为0.811(95%CI 0.756～0.866,P=0.028)。联合检测ROC曲线下面积显著高于单项检测(P0.05)。随访预后发现,联合诊断为阳性的患者在治疗后8个月、12个月的死亡率显著高于联合诊断为阴性的患者(P0.05)。结论 miR-124与miR-182在ACI患者血清中呈高水平表达,二者联合检测对ACI的诊断及预后评估有较好的价值。     

结直肠癌组织NDRG4基因启动子甲基化状态观察及其诊断效能分析

目的 观察结直肠癌组织N-Myc下游调节基因4(NDRG4)基因启动子甲基化状态,分析其对结直肠癌的诊断效能。方法 收集结直肠癌石蜡组织43例份,癌旁组织24例份。采用定量甲基化特异性PCR(qMSP)法检测组织NDRG4基因启动子甲基化状态,计算甲基化率;比较不同性别、年龄、肿瘤生长部位、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的结直肠癌患者癌组织甲基化率,绘制其诊断结直肠癌的受试者工作特征(ROC)曲线,评价其诊断效能。结果 结直肠癌组织和癌旁组织NDRG4基因启动子甲基化率分别为65.12%(28/43)和4.17%(1/24),P<0.01。不同性别、年龄、肿瘤生长部位、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的结直肠癌患者的癌组织甲基化率比较均无统计学差异(P均>0.05)。ROC曲线分析结果显示,NDRG4基因启动子甲基化率诊断结直肠癌的曲线下面积为0.823 2(95%CI:0.725 5～0.920 8,P<0.01),敏感度为65.12%(95%CI:49.01～78.54),特异度为95.83%(95%CI:76.88～99.7...     

血清SOD、SA、SAA在不同分期结直肠癌中表达及其早期诊断价值

目的探讨血清SOD、SA、SAA在不同分期结直肠癌中的表达及其早期诊断价值。方法选取79例结直肠癌老年患者作为研究对象,其中TNM分期Ⅰ期13例,Ⅱ期23例,Ⅲ期20例及Ⅳ期23例。另外选取同期体检的79例健康志愿者为对照组。比较两组血清SOD、SA与SAA水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标及联合诊断价值。结果结直肠癌各TNM分期患者的血清SA和SAA与对照组相比明显上调(P<0.05),SOD与对照组相比显著降低(P<0.05);根据ROC曲线可得,血清SOD诊断的临界值为152.25 U/ml,其对应的灵敏度为70.89%,特异度为84.81%,ROC曲线下面积(AUC)为0.787(95%CI 0.746~0.876);血清SA诊断的临界值为420.78 mg/L,其对应的灵敏度为64.56%,特异度为87.34%,ROC曲线下面积为0.745(95%CI 0.668~0.823);血清SAA诊断的临界值为2.35 mg/L,其对应的灵敏度为79.75%,特异度为77.21%,ROC曲线下面积为0.647(95%CI 0.561~0.733)。联合检测的灵敏度为92.40%,特异度为86.08%,ROC曲线下面积为0.861(95%CI 0.802~0.919)。联合检测灵敏度显著高于各指标单独检测(P<0.05),且联合诊断的AUC显著高于各项指标单独检测(P<0.05),联合诊断时,当任一指标为阳性即可确诊结直肠癌。结论血清SOD、SA与SAA三者单独检测对结直肠癌临床诊断具有重要意义,而联合检测可提高结直肠癌诊断的灵敏度,为结直肠癌早期诊断提供一种快速、准确的新方法。     

miR-483与结直肠癌关系的研究

背景:胰岛素样生长因子2(IGF2)基因在多种恶性肿瘤中呈高表达,在肿瘤发生中起重要作用。miR-483位于IGF2基因第7号内含子中,与宿主基因共表达,但其具体功能尚未明确。目的:检测miR-483-3p、miR-483-5p在结直肠癌中的表达情况,探讨其作为结直肠癌分子标记物的可能性。方法:收集75对结直肠癌组织和相应癌旁非癌组织样本,以real-time PCR检测miR-483-3p、miR-483-5p表达并分析两者间以及两者与肿瘤临床病理特征的关系,以ROC曲线分析两者对结直肠癌的诊断性能。结果:结直肠癌组织中的miR-483-3p、miR-483-5p相对表达量均显著高于相应癌旁非癌组织(P0.000 1),且两者在癌组织中的表达量呈显著正相关(rs=0.554 5,P0.000 1)。miR-483-3p和miR-483-5p诊断结直肠癌的最佳截点分别为9.22和11.61,相应诊断敏感性、特异性分别为78.67%、62.67%和50.67%、85.33%;如两者联合检测(并联试验),诊断敏感性可提高至89.48%。两者表达与结直肠癌患者的性别、年龄以及肿瘤大小、部位、分化程度和TNM分期均无相关性。结论:miR-483-3p、miR-483-5p在结直肠癌中呈高表达,可能与肿瘤发生有关。两者有望成为结直肠癌诊断潜在的分子标记物。     

接受TACE治疗的肝细胞癌患者血清miR-335水平变化及其对预后判断的价值分析

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清miR-335水平变化及其在经肝动脉栓塞化疗术(TACE)治疗后,对判断预后的价值。方法 2014年5月～2016年5月收治的HCC患者60例,慢性乙型肝炎患者50例,乙型肝炎肝硬化患者50例和选择的健康人50例,采用实时荧光定量反转录PCR法检测血清miR-335水平。给予HCC患者TACE治疗,并随访2年。计算受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC),分析应用血清miR-335水平预测HCC患者预后的价值。结果 HCC患者血清miR-335水平为(1.18±1.35),显著低于乙型肝炎(1.91±2.11)和肝硬化患者(2.01±0.75),也显著低于正常人【(2.07±1.25),P=0.001】,肝硬化和慢性乙型肝炎患者血清miR-335水平与正常人比,差异均无统计学意义(P0.05);22例存在门静脉癌栓的HCC患者血清miR-335水平显著低于38例无癌栓患者(t=4.586,P0.001),13例死亡患者血清miR-335水平显著低于47例生存患者(t=3.324,P0.001),而不同性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、有无淋巴结转移和血清AFP水平高低患者,血清miR-335水平差异无统计学意义(P均0.05);随访2年,本组HCC患者死亡13例(21.7%)。以血清miR-335水平小于或等于0.820为截断点,判断患者2年内死亡的敏感性为83.0%,特异度为100.0%。结论 HCC患者血清miR-335水平显著降低,其水平越低,预后越差,该结论需要进一步研究。     

结直肠癌组织中miR-338-3p、SMO的表达变化及意义

目的观察结直肠癌组织中微小RNA(miRNA)-338-3p(miR-338-3p)与Smoothened(SMO)的表达变化,并探讨其意义。方法 30例结直肠癌患者,手术时留取癌组织及癌旁组织,抽提其中的总RNA及蛋白质,采用实时荧光定量PCR检测标本中的miR-338-3p,用半定量RT-PCR检测SMO mRNA,Western blot检测SMO蛋白。结果结直肠癌组织中miR-338-3p的表达量(2-ΔΔCt)为0.153 7±0.126 4,SMO mRNA的相对表达量为0.371±0.116,SMO蛋白的灰度值为3.195±1.623,癌旁组织分别为0.901 5±0.426 3、0.366±0.117、0.733±0.305,两种组织中的miR-338-3p、SMO蛋白表达量相比,P均<0.01;miR-338-3p与SMO蛋白的表达呈负相关(r=-0.877,P<0.01)。结论结直肠癌组织中miR-338-3p表达明显下调,SMO蛋白表达明显上升;miR-338-3p可能通过转录后基因沉默机制使SMO蛋白表达下降,从而抑制结直肠癌的发生发展。     

慢性乙型肝炎肝纤维化患者血清微小RNA-30a mRNA与微小RNA-196b mRNA相对表达量及临床意义

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-30a mRNA与miR-196b mRNA在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)肝纤维化患者血清中的相对表达量及临床意义。方法选取2016年1月至2018年12月在江苏省张家港市第一人民医院行经皮肝组织活检确诊为CHB肝纤维化的139例患者为CHB肝纤维化组,选取130例同期健康体检者为对照组。对CHB肝纤维化患者进行肝组织病理学检查。采用Au480全自动生化分析仪检测血清天门冬氨酸氨基移酶(aspartate transferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)及白蛋白水平;采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中金属蛋白酶-1抑制剂(metalloproteinase tissue inhibitor-1,TIMP-1)浓度;采用荧光定量聚合酶链反应检测miR-30a和miR-196bmRNA相对表达量,计算FIB-4指数。对CHB肝纤维化患者进行肝组织病理学检查确定肝纤维化分期。采用Pearson法分析miR-30a mRNA和miR-196bmRNA相对表达量及其与各临床指标的相关性;采用受试者工作特征(receiver operatorcharacteristic,ROC)曲线评价miR-30a和miR-196b对肝纤维化的诊断价值。结果与对照组相比,CHB肝纤维化患者组血清中ALT [(65.34±13.53)U/L vs(18.28±3.14)U/L]、AST [(52.84±14.02)U/L vs(25.84±1.26)U/L]、TIMP-1 [(183.98±42.07)ng/ml vs(80.59±13.09)ng/ml]和FIB-4指数(1.33±0.09 vs 0.78±0.06)显著升高,miR-30a mRNA相对表达量(0.60±0.08 vs 1.00±0.09)和miR-196b mRNA相对表达量(0.45±0.04 vs 1.00±0.02)显著降低,差异均有统计学意义(P均0.05)。139例患者中S0～S1期占32.37%(45/139),S2～S3期占45.32%(63/139),S4期占22.31%(31/139)。S0～S1期患者miR-30a mRNA相对表达量、miR-196b mRNA相对表达量、TIMP-1和FIB-4指数分别为0.83±0.06、0.76±0.05、(142.68±13.21)ng/ml、0.84±0.08,S2～S3期患者上述指标分别为0.69±0.06、0.41±0.08、(257.50±53.05)ng/ml、1.23±0.09,S4期患者上述指标分别0.28±0.02、0.21±0.05、(383.52±62.31)ng/ml、2.48±0.19,血清中miR-30a mRNA相对表达量和miR-196b mRNA相对表达量随纤维化分期的增加而降低,TIMP-1和FIB-4指数随肝纤维化分期的增加而增加(P均0.05)。CHB肝纤维化患者血清miR-30a和miR-196b与TIMP-1、FIB-4和肝纤维化分期呈负相关(P 0.05),与ALT和AST无相关性(P 0.05)。miR-30a mRNA相对表达量、miR-196b mRNA相对表达量、TIMP-1和FIB-4指数诊断CHB肝纤维化患者肝纤维化的ROC曲线下面积(area under ROC curve,AUC)分别为0.847(95%CI:0.756～0.928)、0.942(95%CI:0.860～0.983)、0.792(95%CI:0.721～0.855)、0.895(95%CI:0.821～0.967),miR-196b mRNA相对表达量的AUC显著高于其他指标(P均0.001)。以0.468作为临界值,miR-196b mRNA相对表达量诊断的灵敏度和特异度分别为89.45%和83.60%。结论 CHB肝纤维化患者血清中miR-30a mRNA和miR-196ba mRNA相对表达量降低,检测miR-30a和miR-196ba mRNA相对表达量有助于评估CHB肝纤维化患者的肝纤维化程度。     

miR-503在结直肠癌组织和细胞中的表达及对细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨microRNA-503(miR-503)在结直肠癌组织和细胞中的表达情况及其对细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测54例结直肠癌组织及4种结直肠癌细胞(SW480、Lovo、LS174T和HT-29)中的miR-503水平,分析结直肠癌组织miR-503表达与常见临床病理参数的关系,采用脂质体转染miR-503模拟物(mimics)至miR-503水平最低的细胞,采用MTT法、流式细胞仪及Transwell法检测过表达miR-503对细胞增殖、凋亡、细胞周期和侵袭的影响。结果 54例结直肠癌组织的miR-503相对表达量为(0.257±0.011),低于癌旁组织(P0.05),且miR-503水平与TNM分期、分化情况、肿瘤大小和术前癌胚抗原均有关(P0.05);与人正常结肠细胞系CCD-18Co相比,4种不同恶性程度结直肠癌细胞SW480、Lovo、LS174T和HT-29的miR-503相对表达量依次为(0.342±0.072)、(0.161±0.054)、(0.260±0.041)和(0.415±0.086),差异均有统计学意义(P0.05);与对照组相比,转染miR-503 mimics后的细胞增殖抑制率和凋亡率均升高,G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期细胞比例均降低,穿膜细胞数减少(P0.05)。结论 miR-503在结直肠癌组织和细胞中低表达,且与结直肠癌的临床病理参数有关,上调miR-503水平可抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭并诱导细胞周期阻滞和凋亡。     

miR-552和miR-592在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨miR-552和miR-592在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达情况,分析其与临床病理特征的关系及其诊断价值。方法收集60例胃癌患者的胃癌组织及癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-552和miR-592在癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,分析其与临床病理特征的关系,并进行ROC分析。结果 miR-552、miR-592在胃癌组织中的相对表达量分别为4.73±1.75和5.65±2.11,显著高于癌旁正常组织中两者相对表达量,分别为0.98±0.55和1.22±0.79,差异有统计学意义(P0.001)。胃癌组织中miR-552、miR-592的表达水平均与TNM分期、浸润深度、分化程度、淋巴结转移有关(P0.05)。胃癌组织中miR-552相对表达量与miR-592相对表达量呈正相关(r=0.528,P0.001)。miR-552:AUC=0.949,95%CI:0.909～0.988,miR-592:AUC=0.932,95%CI:0.885～0.979。结论 miR-552、miR-592在胃癌组织中表达均显著上调,对胃癌的发生、发展、侵袭起着重要的作用。miR-552、miR-592对胃癌的诊断价值高,可作为潜在的胃癌诊断标志物和治疗靶点。