“骨宝丸”防治佝偻病的实验研究

本文观察了佝偻病大鼠在用中药“骨宝丸”治疗前后血清钙、磷、碱性磷酸酶、２５羟基维生素Ｄ３及骨组织形态学和骨计量学的变化，并与维生素Ｄ３进行了比较。结果表明：“骨宝丸”防治佝偻病有效，特别是在提高血钙、血磷和降低血碱性磷酸酶以及促进类骨质矿化方面效果显著，但其作用机理与维生素Ｄ３不同。     

维甲酸诱导雌性大鼠骨质疏松的效果及机理分析

目的观察维甲酸诱导的大鼠骨质疏松模型的效果,并分析其机理.方法SD雌性大鼠48只,随机分为正常组和维甲酸组,后者连续维甲酸80mg@kg-1.d-1灌胃15d,诱导骨质疏松.实验时间75d,分别于停药后0、30和60d处死大鼠,观察血清AKP、TRAP含量及股骨松质骨、皮质骨形态计量学变化.结果维甲酸诱导15d后,大鼠股骨松质骨和皮质骨骨量减少,松质骨破骨细胞数明显增多,功能活跃,血清AKP、TRAP显著增高;停药后30d维甲酸组松质骨和皮质骨仍表现骨量减少,松质骨破骨细胞数和血清AKP虽较前降低仍显著高于正常组;停药后60d维甲酸组股骨松质骨骨量依然显著减少,但皮质骨骨量、松质骨破骨细胞数和血清中AKP、TRAP无明显差异,松质骨成骨细胞数明显增多.结论维甲酸诱导骨质疏松大鼠模型的近期效果好,远期效果较差;模型大鼠骨量丢失松质骨比皮质骨明显而持久;停药后随时间的延长,大鼠疏松的骨质有通过自身修复的作用.维甲酸诱导骨质疏松的机理主要是破骨细胞数量及活性增加,骨吸收增强.     

维甲酸对骨发生及骨改建的调控作用

维甲酸具有调控多种组织细胞的形态发生、增殖分化等生物作用，也是肿瘤的诱导分化及皮肤病治疗中不可缺少的监床用药。本文着重探讨维甲酸对骨发生及骨改建的调控作用。     

“骨宝丸”促进骨折愈合作用的临床疗效观察与实验研究

“骨宝丸”促进骨折愈合作用的临床疗效观察与实验研究佛山市中医院（广东５２８０００）杨海韵，陈逊文，陈志维陈渭良指导“骨宝”是广东佛山市中医院陈渭良院长的经验方，主要药物组成为熟地、当归、淮山药、山萸肉、杜仲等，功能为补益肝肾，养血活血。用于骨折中后期...     

大豆苷元磺酸钠对维甲酸诱导大鼠骨质疏松的保护作用

目的研究大豆苷元磺酸钠对维甲酸诱导大鼠骨质疏松的保护作用。方法以70mg／kg维甲酸诱导大鼠形成骨质疏松模型。自实验开始当天下午各组大鼠依次经口给予以下药物：阴性对照组（Control）、病理模型组（Model）0．5％CMC．Na溶液5ml／kg；骨疏康组（Gsk）4g／kg；大豆苷元磺酸钠高、中、低剂量组（H．SDS300mg／kg；M-SDS150mg／kg；L-SDS75mg／kg）。连续给药5周。结果大豆苷元磺酸钠连续给药5周后，高、中剂量组骨钙素（s-BGP）均与对照组水平相当，并且可明显增加股骨骨密度；高剂量组灰重系数和骨钙含量均较模型组显著增加。高、中、低3个剂量组骨小梁形态结构趋于完整，骨髓腔呈圆形或卵圆形且腔隙较小；骨小梁面积（TS％）和平均骨小梁宽度（MTT）明显增加；骨表面平整光滑。结论大豆苷元磺酸钠对维甲酸诱导的骨质疏松大鼠的骨小梁具有保护作用，能防治维甲酸诱导的大鼠骨质疏松症。     

维甲酸致雌性大鼠骨代谢变化的实验研究

目的：建立维甲酸诱导的雌性成年大鼠骨质疏松模型，以探讨其密质骨代谢变化。方法：采用１６只３月龄雌性ＳＤ大鼠，随机分为对照组和维甲酸模型组，后者连续ｉｇ维甲酸７０ｍｇ．ｋｇ－１．ｄ－１，２１天后处死并取内脏称重，胫骨中段制不脱钙骨片用半自动图象分析仪进行测算和分析。结果：维甲酸组卵巢重量显著减轻，子宫萎缩；胫骨中段总面积无明显变化，但骨髓腔变大，皮质变薄；骨外膜动态指标变化不显著，而内膜面荧光周长百分率、骨形成率与骨吸收均有增高趋势，呈骨高转化型改变，但骨吸收大于骨形成，同时类骨质增多。结论：维甲酸在短期内可引起雌性ＳＤ大鼠密质骨丢失，但同时类骨质增多，提示维甲酸造成骨钙化缺陷。     

镓盐对维甲酸致大鼠骨质疏松模型影响的实验研究

目的 研究镓盐对维甲酸致骨质疏松大鼠骨代谢的影响,为镓盐治疗骨质疏松提供实验依据。方法 用维甲酸建立大鼠骨质疏松模型,并通过氯化镓灌胃给药治疗两个月,应用生化、病理等方法研究其对反映骨质疏松相关指标的影响。结果 维甲酸可导致大鼠骨结构改变,密度降低,骨有基质含量下降,血清抗酒石酸酸性磷酸酶（TPAP）上升。应用氯化镓后,可增加骨密度,增加骨皮质厚度和骨小梁百分比,降低TRAP活性和碱性磷酸酶（AKP）活性,从而降低骨转换率。结论 镓盐是一种有效的降低骨转换率的药物。     

环磷酰胺致小鼠骨质疏松及何首乌的防治作用

目的观察环磷酰胺对小白鼠骨质量的影响,建立骨质疏松模型,并探讨何首乌与葡萄糖酸钙的防治作用.方法模型组用环磷酰胺按每天20mg/kg灌胃给予小白鼠,连续15 d,造成以骨丢失为主的骨质疏松模型;预防组分别用何首乌5g/kg和葡萄糖酸钙1g/kg灌胃给药,每天1次,连续15 d,另设生理盐水正常对照组.各组实验结束后用原子吸收分光光度法和羟脯氨酸法测定该模型小鼠股骨的骨钙及骨羟脯氨酸含量.同时观察对照组和用药组的胸腺、肝、脾重量并进行比较.结果环磷酰胺模型组与正常对照组比较,小鼠的胸腺萎缩,胸腺重量下降51.7%(P＜0.05);骨钙总含量下降33.6%(P＜0.01);骨羟脯氨酸总含量下降33.2%(P＜0.01).何首乌可使环磷酰胺小鼠的胸腺萎缩受到抑制,胸腺重量增加53.1%(P＜0.05);骨钙总含量增加62.8%(P＜0.001);骨羟脯氨酸总含量增加63.8%(P＜0.001).葡萄糖酸钙也可使环磷酰胺小鼠胸腺萎缩受到抑制,胸腺重量增加99.3%(P＜0.01);骨钙总含量增加47.4%(P＜0.01);但对骨羟脯氨酸总含量没有显著影响,与正常对照组相比,骨羟脯氨酸总含量下降40.2%(P＜0.001).结论环磷酰胺每天按20 mg/kg灌胃给予小白鼠,连续15 d可造成小白鼠骨质疏松的病理模型,其特征为小白鼠骨钙及骨羟脯氨酸含量减少和胸腺萎缩.何首乌对此模型有明显的防治作用.葡萄糖酸钙也有阻止骨钙丢失和胸腺萎缩的作用,但不能阻止骨羟脯氨酸的减少.     

葛根素和丹参酮II A对维甲酸诱导骨质疏松大鼠生殖系统的修复作用

目的探讨和比较葛根素(puerarin,PUE)、丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA)两种植物雌激素对维甲酸诱导的雌性骨质疏松大鼠生殖系统的修复作用。方法 12周龄SPF级健康雌性SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、葛根素组[50 mg/(kg·d)]、丹参酮ⅡA组[200 mg/(kg·d)]、苯甲酸雌二醇阳性对照组[40μg/(kg·d)]。除正常组外,其余各组每日给予维甲酸80mg/(kg·d)灌胃,建模21 d。建模21 d后除模型组外,其余各组进行给药,给药70 d后,检测各组大鼠体重,生殖系统(子宫、阴道、卵巢)湿重,ELISA测定血清雌二醇(estradiol,E2)含量,采集子宫、阴道组织进行石蜡包埋、HE染色,观察子宫及阴道形态,并用病理图像分析系统进行组织形态计量学测定。结果通过生殖系统脏器指数计算、血清雌二醇检测以及子宫和阴道组织形态计量学分析显示,模型组脏器指数、血清E2含量较正常组显著降低(P0.05),模型组大鼠子宫腔径、管径厚度、上皮厚度、肌层厚度、腺体数量较正常组显著减少(P0.01),阴道出现不同程度萎缩,阴道上皮厚度较正常组显著降低(P0.01);葛根素组上述指标较模型组显著增加(P0.05);丹参酮ⅡA组上述指标较模型组显著增加(P0.01);丹参酮组与葛根素组相比,丹参酮组子宫管径厚度,阴道上皮厚度,显著高于葛根素组(P0.01)。结论葛根素和丹参酮ⅡA均对维甲酸诱导的骨质疏松大鼠生殖系统损伤具有修复作用,且丹参酮ⅡA对生殖系统的修复作用优于葛根素。     

杜仲腰痛丸调控p53对老年骨质疏松症患者骨密度、骨代谢及骨形成影响的作用机制

目的 探讨杜仲腰痛丸调控p53对老年骨质疏松症(osteoporosis,OP)患者骨密度(bone mineral density,BMD)、骨代谢及骨形成影响的作用机制.方法 选取自2018年3月至2019年8月期间,在甘肃省中医院门诊就诊的老年骨质疏松症患者30例,口服碳酸钙D3咀嚼片(钙尔奇D)+骨化三醇胶丸(...     

仙灵骨葆胶囊治疗绝经后骨质疏松症有效性的系统评价和Meta分析

目的评价仙灵骨葆胶囊治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性。方法电子检索中、英文数据库共7个(自建库时间至2017年11月),按照纳入标准和排除标准筛选文献,依据Cochrane Handbook for Systematic Reviews of Interventions(version 5.35)质量评估,并用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果检索到文献共1 779篇,筛选后纳入文献16篇(19项原始研究),总样本量1 492例。Meta分析得出单用仙灵骨葆胶囊对于提高腰椎骨密度疗效优于常规治疗[MD=0.08,95%CI(0.03,0.14),P=0.002];仙灵骨葆胶囊加常规干预对于提高临床有效率[OR=3.35,95%CI(1.86,6.05),P0.000 1]、改善疼痛[MD=-1.71,95%CI(-2.39,-1.03),P0.000 01]疗效优于常规治疗;在改善腰椎骨密度方面,仙灵骨葆胶囊+单一常规干预疗效明显优于单一常规干预[MD=0.06,95%CI(0.04,0.07),P0.000 01];仙灵骨葆胶囊联合常规干预在提高髋部骨密度疗效上可能优于常规干预[MD=0.08,95%CI(0.03,0.14),P=0.001]。结论仙灵骨葆胶囊在改善腰椎骨密度、提高临床有效率及改善疼痛方面疗效确切;但在改善髋部骨密度方面证据不足,总疗程可能是其重要影响因素;仙灵骨葆胶囊联合单一抗骨质疏松药物具有增效作用,与两种或以上抗骨质疏松药物联用叠加增效作用尚待研究。     

miR-214通过对BMP-2和Smad4的靶向调控作用对骨质疏松的影响

目的探究miR-214能否靶向调控BMP-2和Smad4对骨质疏松症产生影响。方法将大鼠分为2组(假手术组、手术组),对手术组进行手术构建去卵巢骨质疏松模型,对两组大鼠血清中相关因子、骨密度、股骨进行病理学染色观察,同时将各组大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行体外培养,使用q PCR检测其miR-214表达水平,Western blot检测其BMP-2和Smad4相关蛋白表达水平。体外培养大鼠成骨细胞,将细胞分为3组(对照组、过表达组和抑制组),向过表达组和抑制组分别转染miR-214 mimics及anti-miR-214,对各组大鼠成骨细胞的增殖能力、细胞凋亡情况和BMP-2和Smad4相关蛋白表达水平进行检测。结果与假手术组相比,手术组大鼠血钙、碱性磷酸酶(ALP)水平及骨密度(BMD)明显下降,血磷水平明显上升,差异具有统计学意义(P0.05)。两组大鼠的BMSCs增长速率相比差异无统计学意义(P0.05),同时假手术组大鼠BMSCs ALP水平显著高于手术组,差异具有统计学意义(P0.05)。手术组与假手术组的BMSCs相比较,细胞中miR-214表达明显上升,BMP-2及Smad4表达水平明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。对转染后各组大鼠成骨细胞检测,与对照组相比,过表达组细胞增殖能力明显下降,细胞凋亡情况显著增高,BMP-2及Smad4水平下降,抑制组细胞增殖能力显著升高,细胞凋亡数量明显下调,BMP-2及Smad4表达水平升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 miR-214可能通过靶向调控BMP-2与Smad4抑制成骨细胞的增殖,从而发生或发展成骨质疏松症。     

维生素K2（MK-7）防治骨质疏松的作用机制研究进展

维生素K2具有抗骨质疏松的骨骼健康效应。在维生素K2系列中MK-7的活性最强。经成骨细胞、破骨细胞培养的体外机制分析及去卵巢骨质疏松模型、去神经骨质疏松模型、悬吊骨质疏松模型、肥胖骨质疏松模型和临床研究,揭示MK-7抗骨质疏松的作用机制:①通过维生素K2依赖性蛋白的γ-羧基化途径,将骨钙素分子中的谷氨酸残基羧化;②通过刺激成骨细胞分化、调控骨细胞外基质矿化、上调骨标志物基因表达、抑制破骨细胞生成,促进骨形成和降低骨吸收。     

仙灵骨葆胶囊联合阿仑膦酸钠对骨质疏松骨折大鼠骨痂血管形成的影响

目的探讨仙灵骨葆胶囊联合阿仑膦酸钠对骨质疏松性骨折大鼠骨痂血管形成及VEGF、BMP-2表达的影响。方法50只雌性SD大鼠随机分为假手术组(SHAM组)、模型组(MODEL组)、仙灵骨葆组(XLGB组)、阿仑膦酸钠组(ALLSN组)、联合药物组(LHYW组),10只/组,构建骨质疏松性骨折大鼠模型,放射性X线观察评估骨折愈合,双能X线检测骨密度,Mirco-CT检测骨结构形态学参数,番红O固绿染色观察骨痂组织形态学,免疫组化检测骨痂VEGF和BMP-2蛋白表达。结果所有实验大鼠均进入结果分析。与SHAM组比较,MODEL组大鼠骨折愈合评分、骨密度、骨组织形态学参数、骨痂VEGF和BMP-2表达均显著降低(P0.05),与MODEL组比较,XLGB组、ALLSN组和LHYY组骨折愈合评分、骨密度、骨组织形态学参数、骨痂VEGF和BMP-2表达均显著升高(P0.05),尤以LHYY组最高。SHAM组骨小梁结构正常,几乎均为骨性骨痂。MODEL组骨小梁明显稀疏、断裂,未见明显骨性骨痂。XLGB组和ALLSN组骨小梁增多,排列稍紊乱,大部分为骨性骨痂。LHYW组骨小梁明显增多,排列密集整齐,大量骨性骨痂。结论仙灵骨葆胶囊联合阿仑膦酸钠可能通过介导提高骨质疏松性骨折大鼠骨生长因子VEGF和BMP-2表达,促进骨痂血管形成,加速骨痂形成,增加骨密度,改善骨结构形态,促进骨折愈合。     

温肾固疏方干预绝经后骨质疏松药理研究

目的观察温肾固疏方对骨代谢造成的影响。方法将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、雌激素组、温肾固疏方高、中、低剂量组。假手术组仅切除卵巢周围脂肪组织,不切除卵巢,其余大鼠切除双侧卵巢,建立绝经后骨质疏松模型。造模1 m后,中药汤剂灌胃干预8 w,末次给药结束后放血处死。双能X射线法测定去势大鼠离体股骨、腰椎骨密度(bone mineral density,BMD)、骨矿含量(bone mineral content,BMC),电子式双柱万能材料试验机测定股骨弾性模型、最大承载力、刚性、最大应力,全自动生物仪测HDL-C、LDL-C、TG、TC,计算动脉粥样硬化指数(atherogen icindex,AI),采用酶联免疫吸附测定(Elisa)法测量大鼠血清OT/BGP、Lipid、Apo E、sRANKL、OPG、BMPs。结果与假手术组对比,模型组BMD、BMC下降(P0.05);股骨弾性模型、最大承载力、刚性、最大应力皆下(P0.05);OPG、BMPs下降(P0.05);Lip上升(P0.05);Apo E上升(P0.01);LDL-C上升(P0.05)。与模型组对比,雌激素、低、高剂量组大鼠股骨BMD、BMC上升(P0.05);雌激素组、中剂量组弾性模型增高(P0.05);雌激素组、高剂量组最大承载力增高(P0.05);低、高剂量组刚性增高(P0.05);雌激素组、低、高剂量组最大应力增高(P0.05);雌激素组、低、高剂量组血清OT/BGP上升(P0.05);低、高剂量组sRANKL下降(P0.05);雌激素组、低剂量组血清OPG上升(P0.05);雌激素组、低、高剂量组BMPs上升(P0.05);高、中、低剂量组血清Lip下降(P0.05);低剂量组Apo E下降(P0.05);低、高剂量组LDL-C下降;低剂量组TG下降(P0.05);低、高剂量组动脉粥样硬化指数下降(P0.05)。结论去势大鼠骨质疏松模型的脂代谢是重要调节点,温肾固疏方可以通过调控Apo E水平影响血清脂代谢与骨代谢,对绝经后骨质疏松有一定防治效果,不同剂量的温肾固疏方汤剂对绝经后骨质疏松症的防治效果不同,高剂量组较为明显。     

绝经后骨质疏松的骨免疫学机制

绝经后骨质疏松是雌激素缺乏引起骨形成与骨吸收解耦联,导致骨吸收大于骨形成,进而引起骨量减少,一般表现为骨密度的降低及骨微结构的破坏,最终骨脆性增加易于骨折。随着我国社会经济的发展,人口老龄化日益增加,绝经后骨质疏松的患病率也日趋上升,给患者家庭及社会医疗带来了极大的挑战。绝经后骨质疏松被认为是一种慢性低度炎症的全身性疾病。雌激素缺乏使得B细胞及T细胞被激活,激活的淋巴细胞分泌TNF-α、IL-17、IL-6及RANKL等促骨吸收因子促进破骨细胞骨吸收。目前认为雌激素缺乏导致的骨丢失与趋化因子、免疫细胞及其分泌的细胞因子密切相关,即绝经后骨质疏松的骨免疫学机制。     

二甲双胍对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响及机制研究

目的 以雌二醇为对照,观察二甲双胍(metformin, MF)对去卵巢大鼠骨密度及骨矿含量的影响,并从细胞、分子水平探究MF可能的骨保护机制。方法 将60只雌性SD大鼠随机均分4组：假手术（SHAM）组、去卵巢（OVX）组、去卵巢+二甲双胍（OVX+MF）组和去卵巢+雌二醇(OVX+E2 )组。分组灌胃给药60 d后测量大鼠右侧胫骨骨密度和骨矿含量;分离培养各组大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）并诱导其向成骨细胞分化,用MTT法测定细胞活性及增殖能力;测定各组碱性磷酸酶（ALP）活性、矿化结节数目、钙含量以及I型胶原（collagen type I）、骨钙素（OC）、骨保护素 (OPG)、NFκB受体的配体 (RANKL)、白细胞介素-6（IL-6）基因表达水平。结果 与OVX组相比,OVX+MF组和OVX+E2组成骨细胞的增殖能力与ALP活性明显增强,骨密度、骨矿含量以及钙沉积量显著增加(P均<0.05),且两组collagen type I、OC、OPG mRNA的表达水平显著升高,而RANKL、IL-6mRNA表达明显受到抑制;但OVX+MF组去卵巢大鼠成骨细胞的增殖能力、ALP活性、钙沉积量、collagen type I、OC、OPG mRNA表达水平低于OVX+E2组,RANKL、IL-6mRNA表达高于OVX+E2组（P均<0.05）;与SHAM组比较,OVX+MF组的collagen type I、OC、OPG mRNA的表达水平更高（P<0.05）。结论 二甲双胍可能通过OPG/RANKL/RANK信号通路促进BMSCs向成骨细胞分化,有效逆转去卵巢大鼠骨质疏松的状态,这种潜在的骨保护作用可能会改善糖尿病引起的骨质疏松。     

BMP-2联合BMP-7在截骨延长时促进成骨的实验研究

目的 探究在截骨延长成骨过程中联合应用BMP-2和BMP-7对成骨的促进作用.方法 采用健康成年日本大耳白兔30只,完全随机分为三组.A组作为对照组正常牵拉不做其他处理;B组在截骨后于截骨处加入rhBMP-2药片;C组在截骨后于截骨处加入rhBMP-2药片,7d后在延长区经皮注射rhBMP-7溶解液.在术后第7天、第3...     

Vaspin对去卵巢大鼠骨质疏松的保护作用及机制研究

目的 观察内脏脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral adipose tissue derived serine protease inhibitor,Vaspin）对去卵巢大鼠骨质疏松的保护作用,并探讨潜在的机制。方法 30只雌性SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、去卵巢组（OVX）以及OVX+Vaspin治疗组,每组10只,OVX组及OVX+Vaspin治疗组均给予去卵巢手术构建绝经后骨质疏松模型,OVX+Vaspin组大鼠每天给予Vaspin 1 μg/kg腹腔注射治疗,Sham及OVX组给予等量生理盐水腹腔注射,干预12周后,检测血清1型胶原前N末端前肽(P1NP)、骨钙素(OCN)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、1型胶原C末端肽(CTX)、白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的水平;再分别进行骨病理组织学检查、生物力学分析、microCT检查,评价骨微观结构和骨强度,并通过qRT-PCR和Western blot检测Vaspin对骨组织中OPG及RANKL的mRNA和蛋白表达的影响。结果 Vaspin干预治疗12周后,与OVX组相比,OVX+Vaspin组大鼠的血清P1NP和OCN明显升高,血清TRAP、CTX及IL-1β、TNF-α明显降低(P<0.05),骨强度和显微结构特征改善, 大鼠骨组织中OPG的mRNA和蛋白表达水平均上调,RANKL的mRNA和蛋白表达水平均下调。结论 Vaspin可能通过上调OPG的表达、下调RANKL的表达介导对OVX大鼠骨代谢的调节作用,改善骨微观结构和提高骨强度,从而发挥抗骨质疏松的作用。     

外泌体来源miRNAs对骨质疏松症的作用与机制的研究进展

骨质疏松症是与年龄相关的全身代谢性骨疾病,该疾病不仅发病率高,还极大地增加了患者跌倒、骨折、截瘫、死亡等风险。骨质疏松的发病与骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化的失平衡密切相关,而大量证据表明,不同外泌体来源的miRNAs(微小RNA)在调控骨髓间充质干细胞谱系分化命运中发挥重要功能。笔者从调控骨髓间充质干细胞成骨分化与成脂分化的角度,对外泌体来源miRNAs在骨质疏松疾病中的作用与机制进行综述,为骨质疏松症的诊治提供潜在靶点和新的思路。