Toll样受体4激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞增殖

目的探讨Toll样受体(TLR)4激活后调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖及其相关机制。方法体外培养BMSCs,应用流式细胞术鉴定BMSCs,用脂多糖(LPS)剌激BMSCs,应用CCK-8法检测BMSCs的增殖能力;采用Western印迹检测大鼠BMSCs中TLR4蛋白表达;实验分为对照组、LPS组、TLR4阻断剂+LPS组、Wnt通路经典抑制剂(DKK-1)+LPS组。应用实时荧光定量PCR法检测BMSCs中β-catenin、c-myc及细胞周期蛋白(cyclin)D1 mRNA表达,应用Western印迹检测蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组BMSCs的细胞增殖能力明显增强,TLR4呈高表达(均P<0.01);LPS组β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著增加(P<0.01)。与LPS组相比,加入TLR4阻断剂后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著下调(P<0.05,P<0.01),加入DDK-1后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著降低(均P<0.01)。结论 TLR4促进BMSCs的增殖,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路有关。     

西红花苷基于Wnt/β-catenin信号通路改善阿尔茨海默病大鼠的空间记忆

目的 观察西红花苷对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马突触小泡蛋白(SYP)和Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为正常对照组、AD模型组、西红花苷组.侧脑室注射 β 淀粉样蛋白(Aβ25～35)建立AD大鼠模型,西红花苷组从次日开始腹腔注射西红花苷(40 mg/kg),连续注射14 d.Morri...     

红景天对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及海马MAPKs通路的影响

目的探讨红景天(Rhodiola crendal)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马MAPKs通路的影响。方法选取SPF级Wistar大鼠40只,鼠龄5～6个月,随机分为假手术组,假手术给药组,模型组,模型给药组(予红景天)。采用海马注射β淀粉样蛋白(Aβ)25～35构建AD模型大鼠,两个给药组连续30 d灌胃给予红景天(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))。学习记忆能力检测采用Morris水迷宫实验;免疫组织化学和Western印迹检测大鼠海马MAPKs(Erk1/2,JNK,p38)的表达。结果行为学检测结果显示,模型组大鼠逃避潜伏期的时间明显长于对照组(P0. 05),给予红景天干预后,逃避潜伏期明显缩短;免疫组化与Western印迹结果显示,模型组海马区MAPKs(Erk1/2,JNK,p38)阳性神经元和蛋白表达明显高于对照组(P0. 05),给予红景天干预后,大鼠海马区MAPKs(Erk1/2,JNK,p38)阳性神经元和蛋白表达明显减少(P0. 05)。结论红景天可以改善AD模型大鼠学习记忆,其机制可能与影响海马MAPKs通路有关。     

姜黄素对淀粉样前体蛋白/早衰素1双转基因小鼠学习记忆能力及Wnt信号通路相关蛋白表达的影响

目的探讨姜黄素对阿尔茨海默病(AD)小鼠空间学习记忆能力、Wnt信号通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)和糖原合成酶激酶(GSK)-3β、海马区突触前蛋白(Synapsin)1、海马区突触后蛋白(PSD)-95表达的影响及意义。方法选取双转基因淀粉样前体蛋白(APP)/早衰素(PS)1雄性小鼠30只随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组和姜黄素组,每组10只;同月龄、同体系野生C57BL/6雄性小鼠作为空白对照组(n=10)。4组给药方式均为灌胃,空白对照组和模型组每天一次给予生理盐水(0.1 ml/10 g)、盐酸多奈哌齐组每天一次给予盐酸多奈哌齐(3.25 mg/kg)、姜黄素组每天一次给予姜黄素(50 mg/kg),4组均为正常饮食,给药时间为8 w。实验结束前5 d开始做Morris水迷宫测试,记录各组逃避潜伏期、经过平台次数和平台象限停留时间。实验结束后取脑组织海马,通过苏木精-伊红染色观察各组脑组织海马区神经细胞的形态学改变;采用免疫组织化学染色法和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各组脑组织海马区Wnt信号通路相关蛋白β-catenin、GSK-3β和海马区与记忆相关的蛋白Synapsin1及PSD-95的阳性表达强度及mRNA水平。结果 (1)形态学观察,盐酸多奈哌齐组和姜黄素组海马区细胞较模型组明显数量增多、体积增大、细胞周隙缩小、细胞固缩坏死减少。(2)Morris水迷宫、免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测,与空白对照组比较,模型组逃避潜伏期明显延长、经过平台次数明显减少、平台象限停留时间明显缩短、β-catenin、GSK-3β、Synapsin1、PSD-95阳性表达强度及mRNA水平明显降低(P0.05);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和姜黄素组逃避潜伏期明显缩短、经过平台次数明显增加、平台象限停留时间明显延长、β-catenin、GSK-3β、Synapsin1、PSD-95 mRNA水平明显升高(P0.05);盐酸多奈哌齐组和姜黄素组各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论姜黄素可能通过上调β-catenin、GSK-3β、Synapsin1、PSD-95阳性表达强度及mRNA水平,提高AD小鼠学习记忆能力以发挥防治AD作用。     

川芎嗪对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力和细胞周期蛋白E、P21表达的影响

目的探讨川芎嗪(TMP)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆和细胞周期蛋白(Cyclin)E、P21表达的影响及作用机制。方法大鼠海马区注入β淀粉样蛋白(Aβ)_(1~42)制作AD模型。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;免疫组化法检测海马区Cyclin E和P21蛋白的表达。结果低、高剂量TMP组均能改善AD大鼠的学习记忆能力(P0.01,P0.05),下调大鼠海马Cyclin E蛋白表达(P0.05),上调P21蛋白表达(P0.05)。低、高剂量TMP组相比无明显差异。结论 TMP能改善AD大鼠学习记忆功能,下调Cyclin E蛋白和上调P21蛋白表达,减轻神经细胞凋亡。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路的干预作用

目的探讨阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织Wnt4/β-catenin信号通路的干预作用。方法 36只SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和阿托伐他汀组,各组分别设7 d、14 d两个时间点。HE、Masson、PAS染色法观察肾脏病理改变;免疫组化观察Wnt4和β-catenin蛋白在肾组织的表达;Western印迹检测各组大鼠肾皮质Wnt4、β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、Ecadherin、α-SMA和CollagenⅠ蛋白的相对表达量。结果与假手术组相比,模型组肾皮质Wnt4和β-catenin、p-GSK-3β、α-SMA蛋白表达显著增多(P<0.05),CollagenⅠ沉积增多(P<0.01),E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.01),GSK-3β在各组大鼠肾组织表达无差异;与模型组相比,阿托伐他汀组肾组织Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β和α-SMA蛋白表达减少(P<0.05),CollagenⅠ蛋白沉积显著减少(P<0.05),并伴有E-cadherin蛋白表达显著增多(P<0.05),而GSK-3β蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论 Wnt4/β-catenin信号通路的活化促进了UUO大鼠肾脏纤维化的发生发展,阿托伐他汀能改善肾脏纤维化病变,减轻肾间质细胞外基质的沉积,可能与其抑制Wnt4/β-catenin信号通路的激活和传导有关。     

肉苁蓉多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路对6-HODA致帕金森病大鼠的神经保护作用

目的探讨肉苁蓉多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路对6-羟多巴胺(6-HODA)所致帕金森病大鼠受损神经的保护作用。方法将45只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和肉苁蓉多糖治疗组,采用6-HODA立体定向微量注射制备帕金森病大鼠模型。第32天观察实验动物行为学改变,之后将大鼠处死,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)检测大鼠脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组游泳静止时间缩短,自主活动站立次数下降,肉苁蓉多糖治疗后上述两种行为得到恢复;模型组脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白水平低于假手术组;肉苁蓉多糖治疗组脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白水平高于模型组(P0.05);模型组脑黑质内GSK-3βmRNA高于假手术组;肉苁蓉多糖治疗后,帕金森病大鼠脑黑质内GSK-3βmRNA水平下降(P0.05)。结论肉苁蓉多糖能改善6-HODA所致帕金森病SD大鼠模型临床症状,这种作用可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制GSK-3β活性,进而发挥多巴胺神经保护作用。     

β连环蛋白在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制研究

目的探讨肝硬化大鼠心肌中的β连环蛋白(β-catenin)表达,以阐明β-catenin在肝硬化大鼠心肌肥厚中的作用机制。方法建立肝硬化大鼠模型,通过模型组和对照组比较,免疫组化法检测各组心肌组织中β-catenin表达水平; Western blot检测大鼠心肌中的β-catenin和Wnt诱导的分泌型蛋白1(WISP-1)表达差异。结果模型组体重增长较慢,且小于对照组。免疫组化及Western blot结果显示对照组β-catenin蛋白的表达水平低,肝硬化模型组β-catenin蛋白的表达水平高,二者比较差异有统计学意义(P 0. 01)。结论 Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白)信号通路参与肝硬化所致心肌肥厚的病理过程。     

下调GPC-3转录经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌生长的抑制作用

目的研究干预磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3, GPC-3)活化经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的抑制作用。方法将miRNA干扰质粒转染GPC-3高表达的HepG2和Hep3B细胞,以CCK-8法检测细胞增殖,平板法分析克隆形成,以流式细胞术分析细胞周期;以裸鼠移植瘤模型观察成瘤时间、体积、生长曲线;以免疫组化法和免疫印迹法分析GPC-3及Wnt/β-catenin通路关键分子β-catenin、p-GSK3β及Cyclin D1的变化。结果特异性miRNA成功转染HepG2和Hep3B细胞后,体外研究显示HCC细胞增殖受到抑制、克隆形成明显降低和发生G_1期阻滞,差异有显著统计学意义(P0.01),β-catenin及p-GSK3β显著降低(P0.01);体内研究显示,移植瘤成瘤时间延长(t=12.89,P0.01)、瘤体小(t=15.29,P0.01);瘤内GPC-3表达明显下降(t=6.67,P0.01)、相关信号分子β-catenin(t=9.61,P0.01)、p-GSK3β(t=4.81,P0.01)及Cyclin D1(t=5.90,P0.01)表达均显著下调。结论干预GPC-3活化经Wnt/β-catenin通路抑制HCC细胞增殖和生长,提示GPC-3为HCC治疗的潜在靶目标。     

Wnt/β-catenin信号通路通过下调自噬改善大鼠脑缺血再灌注损伤

目的观察Wnt/β-catenin信号通路通过调控大鼠皮层神经元细胞自噬水平对脑缺血再灌注(CIR)损伤的影响。方法将56只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、CIR组、Wnt/β-catenin激动剂氯化锂(Li Cl)处理组(Li Cl+CIR组)、生理盐水(NS)处理组(NS+CIR组),每组14只。采用大脑中动脉线栓阻塞法建立大鼠CIR损伤模型,缺血2 h后再灌注24 h。采用Garcia神经功能缺陷评分评估各组大鼠神经行为学改变;氯化三苯基四氮唑染色测定脑梗死体积;Western blot测定大鼠皮层β-catenin、LC3-Ⅱ及P62蛋白表达。结果再灌注24 h后,与Sham组相比,CIR组神经行为学评分升高,脑梗死体积增加,皮层β-catenin表达降低,LC3-Ⅱ表达升高,P62蛋白表达水平下降(P0.05);与CIR组相比,Li Cl+CIR组神经行为学评分降低,脑梗死体积减少,皮层β-catenin表达增加,LC3-Ⅱ表达降低,P62蛋白表达水平增加(P0.05)。结论 Wnt/β-catenin信号通路通过调控自噬改善大鼠CIR的神经损伤。     

针灸预处理对Alzheimer大鼠Wnt1表达的影响

目的 建立老年性痴呆(AD)大鼠模型,探讨针灸预处理对AD模型大鼠Wnt1信号转导通路的影响及防治AD的机制.方法 建立AD大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、预艾灸组、预电针组、预电针加灸组.通过实时定量PCR技术检测Wnt1基因表达.结果 模型组大鼠海马Wnt1信号异常减弱,与正常组和假手术组比较差异显著(P＜0.01).而预艾灸组、预电针组、预电针加灸组大鼠海马Wnt1的信号均有不同程度的增强.结论 针灸防治AD的作用机制可能是通过调节Wnt信号转导通路影响学习记忆相关酶及蛋白在海马区的表达而发挥作用.     

IGF-1对Alzheimer大鼠认知功能和海马Aβ1-40表达的影响

目的建立凝聚态淀粉样蛋白(Aβ1-40)诱导的模拟老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)动物模型,观察Aβ1-40对Wister大鼠行为学及病理的改变,以及皮下注射胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对拟AD模型大鼠学习记忆能力和海马CA1区淀粉样蛋白(Aβ1-40)表达的影响。方法设立正常组、拟AD模型组、盐水治疗对照组及IGF-1治疗组共4组。采用凝聚态Aβ1-40进行海马CA1区微量注射建立拟AD大鼠模型,术后第二天治疗组分别皮下注射生理盐水(1ml/kg)和IGF-1(50μg/kg)。造模2周后4组分别进行水迷宫行为学试验检测大鼠学习记忆能力,用药3周后行病理学检查(包括HE、刚果红)和免疫组化方法观察海马CA1区Aβ1-40的表达。结果 IGF-1组与拟AD模型组比较,定位航行试验第3天开始平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),在空间探索试验中,跨越原平台位置的次数明显增多(P<0.01)。拟AD模型组和盐水治疗组海马点附近可见颗粒细胞带明显受损,弥漫性胶质细胞浸润,局部神经元大量缺失,细胞排列疏松紊乱,IGF-1组海马注射区可见颗粒细胞带轻度受损,神经元排列尚规则,与模型组之间有统计学意义(P<0.01)。IGF-1组大鼠海马CA1区Aβ1-40的表达,与拟AD模型组比较明显减少(P<0.01),生理盐水对治疗没有影响。结论凝聚态Aβ1-40海马注射可以模拟AD的学习记忆障碍和神经元损伤等行为学和病理学特征。IGF-1减少海马CA1区Aβ1-40的表达,减轻凝聚态Aβ1-40对大鼠海马的病理损害,有显著改善拟AD模型大鼠学习记忆能力和病理改变的作用。     

急性脑缺血再灌注大鼠海马CA1区细胞凋亡与β-catenin、GSK-3β蛋白表达的关系

目的探讨急性脑缺血再灌注(IR)大鼠海马CA1区细胞凋亡与Wnt信号通路β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)蛋白表达的关系。方法选择雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组6只、脑IR组30只,脑IR组又分为IR后3、6、24、48、72 h各6只,采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。应用原位末端标记法检测各组细胞凋亡情况,免疫组化法及Western blotting蛋白印记法分别检测β-catenin、GSK-3β蛋白表达;并对IR组的β-catenin、GSK-3β蛋白表达与细胞凋亡进行相关性分析。结果与假手术组比较,IR组各时间点细胞凋亡数、GSK-3β蛋白阳性数及β-catenin蛋白表达量明显增加(P均<0.01),β-catenin蛋白阳性数、GSK-3β蛋白表达量增加,但无统计学意义(P均>0.05)。脑IR后不同时间点的细胞凋亡数与GSK-3β蛋白阳性数呈正相关(P<0.05),与β-catenin蛋白阳性数无相关性(P>0.05)。结论 Wnt信号通路在脑IR组损伤中可能发挥重要作用,GSK-3β蛋白对缺血性脑损伤的细胞凋亡起促进作用。     

电刺激小脑顶核对AD大鼠海马神经元c—Rel和Bcl—xl表达的影响

目的 研究电刺激小脑顶核(FNS)对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及脑内海马神经元c-Rel和Bcl-xl表达的影响.方法 40只SD大鼠随机分成4组:Aβ1-40微量注射组(AD组)、假手术组(SC组)、Aβ1-40微量注射+电刺激小脑顶核组(FNS组)和Aβ1-40微量注射+电刺激齿状核组(DNS组),采用Morris水迷宫检测电刺激小脑顶核对AD大鼠认知功能的影响;通过HE染色、电镜观察电刺激小脑顶核对AD大鼠的海马神经元形态的影响;采用免疫组化法观察电刺激小脑顶核对AD大鼠海马神经元c-Rel和Bcl-xl的表达的影响.结果 与SC组比较,AD组、FNS组和DNS组每天隐匿平台逃避潜伏期明显延长(P＜0.05)、海马CA1区的Bcl-xl和c-Rel阳性细胞OD值差异显著(均P＜0.05); FNS组与AD组比较,大鼠每天逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05),FNS组海马CA1区Bcl-xl和c-Rel阳性细胞OD值为(0.46±0.04、0.65±0.09),较AD组阳性细胞OD值明显增高(P＜0.05),但齿状核刺激(DNS)组与AD组比较大鼠每天逃避潜伏期和海马CA1区Bcl-xl和c-Rel阳性细胞OD值无显著差异(P＞0.05).结论 电刺激小脑顶核能通过增强C-Rel及Bcl-xl的表达,抑制海马神经元的凋亡,改善AD大鼠学习记忆能力.     

苦参碱通过PKA/CREB信号通路对阿尔茨海默病大鼠认知障碍及神经炎症的调节作用

目的探讨苦参碱通过蛋白激酶A(PKA)/CAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路对阿尔茨海默病(AD)认知障碍及神经炎症的调节作用。方法 48只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、苦参碱组。处理7 d后,Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能;放射免疫检测大鼠血清及海马组织中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6含量;Western印迹检测胶质细胞标记蛋白如离子钙结合蛋白(Iba)-1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及PKA/CREB信号通路蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长,空间探索能力明显下降,Iba-1、GFAP的表达显著增高,炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6含量明显增多,p-PKA及p-CREB表达显著降低(均P<0.01)。与模型组相比,苦参碱组大鼠逃避潜伏期明显缩短,空间探索能力显著增强,Iba-1、GFAP的表达明显降低,炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的含量明显下降,p-PKA及pCREB表达明显增强(均P<0.01)。与假手术组相比,苦参碱组各检测指标均无显著性差异(P>0.05)。结论苦参碱能显著改善AD大鼠认知障碍,抑制神经炎症,作用机制可能与PKA/CREB信号通路的活化有关。     

Wnt信号通路的组件蛋白DKK-1、β-链接素及周期素D1蛋白表达与胃癌的相关性

目的探讨Wnt信号通路中的组件蛋白DKK-1、β-catenin及周期素(Cyclin)D1在胃癌的发生、发展及转移的相互关系。方法采用免疫组织化学方法标记DKK-1、β-catenin及Cyclin D1蛋白在80例胃癌组织标本,10例正常胃组织中的表达情况。结果 1DKK-1在胃癌组织中的表达明显低于胃正常组织(P0.05),高、中分化胃癌的表达高于低分化胃癌的表达(P0.05),伴有淋巴结转移的胃癌组织DKK-1较无转移病例阳性率低(P0.05)。2β-catenin在胃癌组织中的阳性表达率明显高于胃正常组织(P0.05),高、中分化胃癌的表达低于低分化胃癌的表达(P0.05),伴有淋巴结转移的胃癌组织β-catenin较无转移病例阳性率高(P0.05)。3Cyclin D1在胃癌组织中的表达明显高于胃正常组织(P0.05),高、中分化胃癌的表达低于低分化胃癌的表达(P0.05),伴有淋巴结转移的胃癌组织Cyclin D1较无转移病例阳性率较高(P0.05)。4在胃癌组织中DKK-1与Cyclin D1呈负相关关系(r=-0.453,P0.01),DKK-1与β-catenin呈负相关关系(r=-0.553,P0.01),Cyclin D1与β-catenin呈正相关关系(r=0.562,P0.05)。结论 Wnt信号通路中的组件蛋白DKK-1、β-catenin及Cyclin D1在胃癌的发生、发展及转移有一定的相互关系。     

脑缺血后处理通过调控细胞周期改善大鼠缺血性脑卒中损伤

目的探讨缺血后处理(CIP)对全脑缺血大鼠海马区细胞周期的影响。方法 96只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CIR组、脑缺血后处理组(CIP组)。全脑缺血模型利用改良的Pulsinelli四血管阻断法制作;大鼠模型制作成功后通过水迷宫检测学习记忆能力;在6、24、48、72 h时间点运用苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织细胞形态变化;运用免疫组化和Western印迹法观察各时间点细胞周期蛋白(Cyclin) D1、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK) 4在海马区的表达情况。结果与Sham组比较,CIR组逃避潜伏期明显延伸、穿台次数明显减少(P0. 05),海马区存活细胞率显著降低(P0. 05),CyclinD 1、CDK4阳性细胞数及CyclinD 1、CDK4蛋白表达显著增加(P0. 05);与CIR组比较,CIP组在相应时间点的潜伏期明显缩短、穿台次数明显增加(P0. 05),海马区存活细胞率显著升高(P0. 05),CyclinD 1、CDK4阳性细胞数及CyclinD 1、CDK4蛋白表达水平明显降低(P 0. 05)。结论 CIP通过降低全脑缺血大鼠海马区CyclinD 1、CDK4的表达从而起到调控细胞周期而保护神经元的作用。     

芪归健脑颗粒抑制老年痴呆大鼠海马组织iNOS表达及NO含量的影响

目的研究芪归健脑颗粒对老年性痴呆(AD)大鼠海马组织诱导型一氧化氮分酶(iNOS)表达及一氧化氮(NO)含量的影响。方法 SD大鼠海马内注射Aβ25-35,制备AD大鼠模型,实验分为3组:假手术组、模型组和治疗组。治疗组在造模前后用芪归健脑颗粒灌胃。用Morris水迷宫测定各组大鼠的学习记忆能力;Western blot测定各组大鼠海马组织iNOS蛋白表达;硝酸还原酶法检测各组大鼠海马组织NO含量。结果模型组的逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,海马组织iNOS的表达水平及NO含量均升高,与假手术组比较均有统计学意义(P0.05);治疗组的逃避潜伏期缩短,单位时间内跨越原平台次数增多,iNOS表达水平及NO含量下降,与模型组比较均有统计学意义(P0.05)。结论芪归健脑颗粒对Aβ25-35所致AD模型大鼠学习记忆障碍具有明显的改善作用,其机制可能是芪归健脑颗粒通过抑制iNOS的表达和NO的生成,减轻Aβ25-35的毒性作用。     

SOX1过表达抑制食管癌细胞的增殖并促进凋亡的发生

目的 探索SOX1过表达对食管癌细胞增殖及凋亡的作用及其机制。方法 构建SOX1过表达细胞株，检测SOX1 mRNA和蛋白表达，CCK-8检测细胞增殖，细胞划痕及结晶紫染色检测细胞的迁移及克隆形成能力，Hochest染色实验检测细胞凋亡情况，Western blotting检测GSK-3β及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平。结果 SOX1过表达组mRNA显著高于对照组(P<0.01)。CCK-8 OD值及增殖曲线绘制表明SOX1过表达组增殖速率显著降低(P<0.05);SOX1过表达组细胞的迁移速率和克隆形成能力明显下降(P<0.05);显微镜下观察到SOX1过表达组细胞的皱缩明显，提示凋亡的发生；Western blotting检测结果表明，SOX1过表达组GSK-3β上调，Wnt信号通路相关基因β-catenin、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论 SOX1通过抑制Wnt/β-catenin信号传导抑制食管癌细胞的增殖和促进凋亡。     

β连环蛋白在大鼠酒精性肝纤维化中的表达及意义

目的 研究Wnt信号通路的核心因子β连环蛋白(β-catenin)在大鼠酒精性肝纤维化(AHF)中的表达及意义.方法 采用白酒辅以玉米油、吡唑混合食料灌胃的方法制备大鼠AHF模型,于造模12 w后,采用Masson染色法观察肝组织纤维化程度,采用Elisa法检测大鼠血清层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原前蛋白(PⅢP)水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠肝组织β-catenin mRNA的表达.结果 正常肝组织中有少量β-catenin表达,12 w末模型组大鼠肝组织中β-catenin表达明显升高.β-catenin的表达量与肝组织纤维化程度,以及血清LN、PⅢP水平呈正相关(r =0.926,0.893,0.902,P＜0.01).结论 Wnt信号通路在AHF发生发展过程中可能发挥了重要的作用.