银杏叶提取物通过VEGF/PI3 K/Akt1信号通路改善大鼠创伤性脑水肿

目的 观察银杏叶提取物(EGb761)治疗大鼠急性创伤性脑水肿的效果,探讨其可能机制.方法 将64只SD大鼠随机分至假手术组(A组)、创伤性脑损伤(TBI)+等剂量生理盐水组(B组)、TBI+低剂量EGb761(C组)、TBI+高剂量EGb761(D组)各16只.采用Feeney自由落体致伤法建立大鼠顶叶局灶皮质挫裂伤...     

RNA干扰水通道蛋白4抑制创伤性脑水肿的效果及相关机制

目的探究水通道蛋白(AQP)4对创伤性脑水肿(TBE)的抑制效果及相关机制。方法健康雄性Wistar大鼠随机分为治疗组、空质粒组、创伤组和假手术组。治疗组和空质粒组大鼠脑损伤后分别注射AQP4 siRNA质粒和空白质粒,创伤组大鼠脑损伤后无治疗处理,假手术组大鼠假手术后注射生理盐水。于不同时间点检测各组大鼠脑组织含水率、AQP4 mRNA的表达水平和伊凡思蓝(EB)浓度。结果脑损伤后,治疗组、空质粒组和创伤组大鼠脑组织含水率、AQP4 mRNA表达水平和EB浓度均高于假手术组,随时间增加呈上升趋势,48~72 h达到峰值,而假手术组大鼠脑组织含水率、AQP4 mRNA表达水平和EB浓度随时间无明显变化。进一步分析显示AQP4 siRNA治疗组大鼠的脑组织含水率,AQP4 mRNA表达水平和EB浓度均明显低于空质粒组和创伤组(P<0.05或P<0.01)。结论 AQP4 siRNA治疗能够下调AQP4的表达水平,有效减轻大鼠TBE的程度,推测AQP4表达下调可以减少血脑屏障的通透性,抑制脑水肿的发展。     

七叶皂苷钠对脑出血大鼠脑水肿的影响及其机制探讨

目的 观察七叶皂苷钠对脑出血大鼠脑水肿的影响,并探讨其可能的机制.方法 将150只SD大鼠随机分为A、B、C组各40只和D组30只,A、B、C组参照Rosenberg等的方法进行苍白球定位注射制作脑出血模型;D组仅向颅内同部位针刺,留针相同时间,不注射药物.造模成功后,A、B、C组立即向腹腔分别注射溶解于1 mL生理盐水的七叶皂苷钠5、10 mg/(kg·d)及等量生理盐水,各组于脑出血后6h及1、3、5、7d断头取脑,收集脑组织标本.利用干湿重法测定脑组织含水量,免疫组化法检测血肿周围脑组织中的水通道蛋白4(AQP4).结果 A、B、C组出血侧脑组织含水量及血肿周围AQP4表达在6h内即开始明显升高,3d达高峰,随后逐渐下降,7d时仍高于D组(P＜0.05或0.01);A、B组各时点脑组织含水量均明显低于C组(P均＜0.01),B组均亦明显低于相应时间点的A组(P均＜0.05).各组大鼠不同时间点出血侧大脑含水量与血肿周围AQP4表达的灰度值呈正相关(r =0.862,P＜0.01).结论 七叶皂苷钠可能通过抑制血肿周围AQP4表达减轻脑水肿,并具有一定的剂量依赖性.     

银杏叶提取物EGb761对局灶性脑缺血再灌注大鼠XIAP和Smac表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物EGb761对局灶性脑缺血大鼠脑组织X-连锁凋亡蛋白抑制剂(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)和Smac蛋白表达的影响.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、EGb761小剂量组和EGb761大剂量组,每组10只.制作大鼠大脑中动脉闭塞1.5 h再灌注24 h模型.EGb761小剂量组和EGb761大剂量绀于模型制作前1 h分别腹腔注射ECY0761 50 mg/kg和100 mg/kg.大鼠脑组织XIAP和Smac表达用免疫组化方法 检测.结果 EGb761小剂量绀和EGb761大剂量组脑组织XIAP表达分别为18.33±4.01和26.7±3.27,显著高于脑缺血再灌注绀的12.13±3.44(P均<0.01),且EGb761大剂量组高于EGb761小剂量组(P<0.01);EGb761小剂量组和EGb761大剂量组脑组织Smac表达分别为21.33±3.15和11.33±2.10,显著低于脑缺血再灌注组的28.93±4.96(P均<0.05),EGb761大剂最组显著低于EGb761小剂量组(P<0.01).结论 脑缺血再灌注可诱导XIAP和Smae表达,EGn761干预在上调XIAP表达的同时能抑制Smac蛋白表达,提高XIAP/Smac比值,可能是EGb761干预的保护机制之一.     

依达拉奉对创伤性脑水肿大鼠AQP4表达的影响

目的 探讨依达拉奉对创伤性脑水肿大鼠AQP4表达的影响。方法采用Wistar大鼠建立颅脑创伤模型,分成治疗组和模型组,并用假手术处理大鼠作为对照组。治疗组腹腔注射依达拉奉3mg／kg,每12h注射一次;模型组给予相同体积的生理盐水。分别于给药后6h、12h、1d,3d、5d处死各组大鼠,取出脑组织,测定脑含水量及AQP4mRNA表达水平。结果与模型组相比,12h后各个时间点治疗组脑组织含水量明显低于模型组（P均〈0．05）;模型组脑组织AQP4mRNA表达在3d达高峰,然后维持高水平表达,明显高于对照组（P〈0．05）;治疗组在6hAQP4mRNA表达水平最高,然后持续回落,5d时与对照组表达水平接近。结论依达拉奉可明显抑制脑水肿引发的AQP4表达上调,减轻脑水肿形成。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对局灶性脑缺血大鼠脑水肿的影响

目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对大鼠水通道蛋白4(AQP4)表达的影响,以观察其减轻脑水肿的作用及其机制。方法健康雄性SD大鼠198只,随机分为假手术组(18只)、模型组(90只)和PACAP38组(90只),采用koizumi法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,利用干湿重法、免疫组织化学染色、RT-PCR分别检测脑组织含水量、AQP4及AQP4 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组和PACAP38组脑组织含水量、梗死灶周围AQP4、AQP4 mRNA表达明显增加;与模型组比较,PACAP38组能显著减少脑组织含水量,减轻梗死灶周围AQP4、AQP4 mRNA表达。结论PACAP38对局灶性脑缺血大鼠具有减轻脑水肿作用,其作用机制可能与其抑制AQP4的表达有关。     

2型糖尿病合并感染老年患者机体免疫功能变化

目的探讨2型糖尿病合并感染患者机体免疫功能变化。方法 2型糖尿病患者150例、非糖尿病感染患者75例和体检中心健康者75例分为A组(糖尿病合并感染78例)、B组(糖尿病未合并感染72例)、C组(非糖尿病感染)和D组(健康对照)。观察各组血C3、C4、Ig M、Ig A、Ig G水平和血CD8+、CD4+、CD3+、自然杀伤(NK)细胞和B细胞水平。结果与D组比较,A组、B组和C组C3和C4水平均显著升高(P0.05);与B组和C组比较,A组C3和C4水平均显著升高(P0.05)。与D组比较,A组、B组和C组Ig A水平均显著升高(P0.05);与B组和C组比较,A组Ig A水平显著升高(P0.05);与C组和D组比较,A组、B组Ig G水平显著降低(P0.05)。与D组比较,A组、B组和C组CD4+、CD3+和CD4+/CD8+均显著下降(P0.05);与B组和C组比较,A组CD4+和CD4+/CD8+均显著下降(P0.05)。与D组比较,A组、B组和C组NK细胞和B细胞水平均显著下降(P0.05);与B组和C组比较,A组NK细胞和B细胞水平均显著下降(P0.05)。结论 2型糖尿病患者体内存在体液免疫和细胞免疫异常,其中2型糖尿病合并感染者体内体液免疫和细胞免疫异常更加严重。     

EGb761对阿尔茨海默病大鼠脑内ChAT活性及神经元凋亡的影响

目的观察EGb761(商品名:金纳多)对β淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病(AD)大鼠模型脑内胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及神经元凋亡的影响。方法2004年6～11月,在中国医科大学基因工程研究中心将48只大鼠随机分为Aβ-AD模型组、EGb761早期治疗组、EGb761晚期治疗组和对照组,每组12只。采用Aβ脑室内注射方法制作AD大鼠模型,EGb761早期治疗组同时开始EGb761治疗,EGb761晚期治疗组在2周后开始EGb761治疗,均连续14d。在第30天每组取6只对海马、基底节、额叶皮层、顶叶皮层进行ChAT活性测定,另6只相同部位脑组织进行TUNEL细胞凋亡染色,计算凋亡指数(NAI)。结果Aβ-AD大鼠模型脑组织ChAT活性下降,NAI升高,EGb761早期治疗组和晚期治疗组ChAT活性均高于模型组,NAI较模型组明显降低,差异有显著性意义(P<0·01);EGb761早期治疗组ChAT活性高于晚期治疗组,早期治疗组NAI低于晚期治疗组,差异亦有显著性意义(P<0·01)。结论EGb761治疗可使AD大鼠脑内ChAT活性升高,神经元凋亡减少,有预防和治疗AD作用;早期治疗效果优于晚期治疗。     

急性脑梗死患者血清AQP1、AQP4、VEGF表达与脑水肿严重程度的关系

目的探究急性脑梗死患者血清水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白4(AQP4)、血管内皮生长因子(VEGF)表达与脑水肿严重程度的关系。方法选取急性脑梗死患者78例为观察组,另选取健康者80例为对照组,采用酶联免疫吸附试验检测血清AQP1、AQP4、VEGF水平,应用无创脑水肿动态监护仪测定电阻抗扰动系数值判断脑水肿严重程度,根据电阻抗扰动系数将观察组分为重度组(9.5)及轻度组(7.5电阻抗扰动系数≤9.5),分析其血清AQP1、AQP4、VEGF表达与脑水肿严重程度的相关性,应用Logistic回归模型对影响脑水肿严重程度的因素进行分析。结果观察组血清AQP1、AQP4、VEGF水平与电阻抗扰动系数均显著高于对照组(P0.05);血清AQP1、AQP4、VEGF水平均与电阻抗扰动系数呈显著正相关(均P0.05);重度组血清AQP1、AQP4、VEGF均显著高于轻度组(P0.05);高血压、AQP1、AQP4、VEGF是影响脑水肿严重程度的危险因素(均P0.05)。结论急性脑梗死患者血清AQP1、AQP4、VEGF表达异常,呈显著升高趋势,并与脑水肿形成密切相关,其表达水平越高脑水肿程度越严重。     

银杏叶提取物EGb761对铜与高胆固醇共处理家兔主动脉病变的影响

目的 观察银杏叶提取物EGb761对铜和高胆固醇诱导的家兔主动脉病变的保护作用.方法 采用Sparks的方法复制铜和高胆固醇家兔模型,EGb761以50 mg·kg-1·d-1的剂量灌胃3 w后,苏丹Ⅲ和HE染色观察主动脉的大体和镜下形态改变,图像分析测量动脉粥样硬化面积占主动脉面积的百分比,酶法检测血清总胆同醇(TC)、甘油三酯( TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,硫代巴比妥酸( TBA)法测定血清丙二醛(MDA)水平,实时定量RT-PCR法检测肝组织LDLR和LR PI mRNA表达.结果 模型组主动脉可见明显的动脉粥样硬化改变,EGb761组动脉粥样硬化病变较模型组减轻,图像分析结果显示,EGb761组斑块面积百分比显著降低,与模型组相比差别具有统计学意义(P＜0.05).模型组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和MDA水平均显著升高,与正常组相比差别具有统计学意义(P＜0.05);EGb761组血清LDL-C和MDA水平均显著降低,与模型组相比差别具有统计学意义(P＜0.05).EGb761组肝组织LRPI mRNA表达显著升高,与模型组相比差别具有统计学意义(P＜0.05).结论 EGb761具有改善动脉粥样硬化病变的作用,其作用机制与调节血脂水平和抗过氧化损伤有关.     

参附注射液对老年急性失血再灌注大鼠脑水通道蛋白-4的影响

目的探讨参附注射液对老年大鼠急性失血再灌注脑水通道蛋白(AQP)-4的影响。方法建立失血性休克模型动物,在维持低血压60 min后,经由颈静脉缓慢进行全血及液体复苏,输液速度为0.5 ml/min,输液时间为20 min左右。C组推注5%葡萄糖氯化钠溶液(2 ml/kg)、D组推注参附溶液(参附注射液1 ml/kg,加入等量的5%葡萄糖氯化钠溶液稀释至2 ml/kg)、E组推注羟乙基淀粉溶液(2 ml/kg)、F组推注参附溶液(1 ml/kg,以羟乙基淀粉溶液稀释至2 ml/kg)、G组推注该动物的血液、H组推注参附溶液(1 ml/kg,预先混入血液中),补液量与放血量相等[或补液量以平均动脉压(MAP)为标准,当MAP恢复至放血前的水平即停止输液];A组不放血、不输液,仅实施手术;B组放血、不输液;观察2 h。检测大脑组织含水量和脑组织AQP-4的表达。结果各组间脑组织含水量差异无统计学意义(P0.05)。B组、G组AQP4表达显著高于A组(P0.05);C、D、F组与A组AQP-4表达比较差异有统计学意义(P0.01);B、D组AQP-4的表达显著低于C组(P0.05,P0.01);而C、E组AQP-4的表达显著高于B组(P0.01);D组与F、G、H组间比较差异无统计学意义(P0.05);C组与E组AQP-4表达显著高于F、H组(P0.01)。结论急性失血后再灌注早期应用参附注射液可降低AQP-4的表达,改善脑血流。     

EGb761对慢性脑缺血老龄大鼠学习能力及脑少突胶质细胞表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGb761)对慢性脑缺血老龄大鼠学习能力及脑少突胶质细胞的影响.方法 将雄性老龄SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺血组、EGb761干预组.制备慢性脑缺血大鼠模型,药物干预12 w后,使用Y迷宫测试各组大鼠学习能力情况,采用免疫组化方法检测各组大鼠脑组织中少突胶质细胞的表达.结果 EGb761干预组大鼠的学习能力明显好于单纯缺血组(P＜0.05),且其海马、胼胝体、皮质CNPase阳性细胞表达明显高于单纯缺血组(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 慢性脑缺血导致老龄大鼠学习能力明显下降可能与其引起少突胶质细胞减少,影响髓鞘形成有关,而EGb761对少突胶质细胞的缺血性反应有保护作用,促其再生修复从而改善学习能力障碍.     

三七总皂甙对脑出血后大鼠脑水肿及水通道蛋白-4表达的影响

目的观察三七总皂甙对脑出血大鼠脑水肿形成及水通道蛋白-4(AQP4)表达的影响。方法Wistar大鼠198只随机分为A、B、C 3个部分,分别检测脑含水量、AQP4蛋白和AQP4 mRNA,每部分又随机分为假手术组,模型组,治疗组,采用干湿重法、免疫组织化学染色、逆转录聚合酶链反应技术分别测定脑含水量、AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达。结果治疗组和模型组12 h之后脑含水量增加(P<0.05),1天时脑含水量明显增加(P<0.01),3天时脑含水量达到高峰并持续到5天,在相同的时间点,治疗组脑含水量比模型组明显少(P<0.05);模型组和治疗组12 h之后AQP4蛋白和AQP4 mRNA表达水平增加(P<0.05),1天时明显升高(P<0.01),3天达到高峰持续至5天,以后逐渐下降,与模型组比较,治疗组大鼠在各时间点AQP4蛋白、AQP4 mRNA均在低水平表达(P<0.05),1-5天表达水平明显下降(P<0.01)。结论三七总皂甙可能通过抑制AQP4的表达减轻脑出血后脑水肿的形成。     

不同剂量阿托伐他汀对急性脑缺血/再灌注损伤大鼠血管内皮功能的影响及其与自噬相关信号通路Ca~(2+)/AMPK/mTOR的关系研究

背景阿托伐他汀因具有降脂、改善血管内皮功能等作用而常用于预防急性心血管事件及延缓动脉粥样硬化进展,而血管内皮功能与自噬密切相关,因此探讨阿托伐他汀与自噬的关系可能解释其改善血管内皮功能的机制。目的探讨不同剂量阿托伐他汀对急性脑缺血/再灌注损伤大鼠血管内皮功能的影响,并分析其与自噬相关信号通路Ca~(2+)/AMPK/mTOR的关系。方法本实验于2017年6—12月完成。采用随机数字表法将75只SPF级Wistar雄性大鼠分为假手术组(A组)、模型制备组(B组)、阿托伐他汀低剂量组(C组)、阿托伐他汀中剂量组(D组)及阿托伐他汀高剂量组(D组),每组15只。B、C、D、E组大鼠采用改良Zea-Longa线栓法制备急性脑缺血/再灌注损伤模型。模型制备前2周,C、D、E组大鼠分别给予阿托伐他汀5、10、20 mg/kg混悬液灌胃,A组和B组大鼠给予等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃,均1次/d。比较5组大鼠再灌注2、6、24、48、72 h神经功能缺损评分、梗死体积/大脑总体积,再灌注72 h神经元凋亡率,再灌注2、24、72 h脑组织血管内皮生长因子(VEGF)相对表达量及一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)含量,再灌注72 h脑组织LC3-Ⅱ、Beclin-1、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白相对表达量。结果 (1)再灌注2、6、24、48、72 h,A组大鼠神经功能缺损评分均为0,D组和E组大鼠神经功能缺损评分低于B组、C组(P0.05)。(2)再灌注2、6、24、48、72 h,A组大鼠梗死体积/大脑总体积均为0,D组和E组大鼠梗死体积/大脑总体积低于B组、C组(P0.05)。(3)再灌注72 h,B、C、D、E组大鼠神经元凋亡率高于A组,D组和E组大鼠神经元凋亡率低于B组、C组(P0.05)。(4)再灌注2 h,D组和E组大鼠脑组织VEGF相对表达量高于B组、C组,B组大鼠脑组织NO、NOS含量高于A组(P0.05);再灌注24、72 h,D组和E组大鼠脑组织VEGF相对表达量高于B组、C组,B、C、D、E组大鼠脑组织NO、NOS含量高于A组,D组和E组大鼠脑组织NO、NOS含量低于B组、C组(P0.05)。(5)再灌注72 h,B、C、D、E组大鼠脑组织LC3-Ⅱ、Beclin-1、AMPK、mTOR蛋白相对表达量高于A组,D组和E组大鼠脑组织LC3-Ⅱ、Beclin-1、AMPK、mTOR蛋白相对表达量低于B组、C组(P0.05)。结论阿托伐他汀10、20 mg/kg灌胃可有效减轻急性脑缺血/再灌注损伤大鼠神经功能损伤,减少神经元凋亡,改善血管内皮功能,其机制可能与调控自噬相关信号通路Ca~(2+)/AMPK/mTOR有关。     

运动预适应对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的探讨运动预适应(EP)对非动脉硬化大鼠及动脉硬化大鼠急性心肌缺血心肌细胞B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白的影响。方法选取7周龄SD大鼠90只,随机分为5组:对照组(A组)、急性心肌缺血组(B组)、动脉硬化+急性心肌缺血组(C组)、EP+急性心肌缺血组(D组)、动脉硬化+EP+急性心肌缺血组(E组),其中A组10只,其余各组20只。C、E组予维生素D3连续灌胃4 d,喂高脂饲料(猪油、胆固醇、胆酸、丙基硫氧嘧啶)6 w制备动脉硬化模型。B、C、D、E组腹腔注射3 mg/kg异丙肾上腺素(ISO),复制大鼠急性心肌缺血损伤模型。D、E组建立EP大鼠模型进行间歇性游泳运动,以尾部负重体重的3%重物。建模后24 h内采用脊髓脱臼法处死大鼠,取左心室心肌组织,采用免疫组化检测Bcl-2及Bax蛋白的表达,Western印迹检测Caspase-3蛋白。结果与A组比较,B、C、D、E组心肌细胞Bcl-2的表达均显著降低(P<0.05),而Bax表达均显著升高(P<0.05);B组与C组心肌细胞Bcl-2的表达差异无统计学意义(P>0.05),但C组Bax的表达显著升高(P<0.05);D组、E组心肌细胞Bcl-2的表达较B组、C组显著升高(P<0.05),而Bax的表达显著降低(P<0.05);与D组比较,E组Bcl-2的表达显著降低,而Bax的表达显著升高(P<0.05)。与A组相比,B、C、D、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与B组、C组相比,D组、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与D组比较,E组心脏Caspase-3蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);与A组比较,B、C、D、E组细胞凋亡指数(AI)显著增高(P<0.05),其中C组AI最高;与B组、C组比较,D组、E组AI显著降低(P<0.05),而D组比E组AI稍低(P<0.05)。结论EP可能改善急性心肌缺血或是在合并动脉硬化基础上急性心肌缺血大鼠的心肌细胞凋亡,可能基于凋亡相关基因Bcl-2表达升高、Bax表达降低调控及下调Caspase-3蛋白所致。     

不同浓度人参总皂苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织细胞凋亡、免疫球蛋白及LCN2/AQP4蛋白的影响

目的 探究不同浓度人参总皂苷对慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)大鼠肺组织细胞凋亡、免疫球蛋白及脂质运载蛋白(LCN)2/水通道蛋白(AQP)4的影响。方法 选取60只SPF级SD雄性大鼠，随机分为正常组(A组：健康大鼠),模型组(B组：慢阻肺模型大鼠),二陈汤加味组(C组：模型大鼠给予二陈汤干预),低浓度人参总皂苷组(D1组：模型大鼠给予低浓度人参总皂苷干预),中浓度人参总皂苷组(D2组：模型大鼠给予中浓度人参总皂苷干预),高浓度人参总皂苷组(D3组：模型大鼠给予高浓度人参总皂苷干预),每组10只，干湿重法测定肺体脂数(LBF)、肺含水量(LWC),苏木素-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态；流式细胞仪检测肺组织细胞凋亡；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM水平；Western印迹检测肺组织中LCN2、AQP4蛋白表达。结果 B组与A组比较，LBF、LWC含量、细胞凋亡率、LCN2显著升高(P<0.05),与B组比较，C、D1、D2、D3组的含量明显降低(P<0.05),且人参总皂苷各剂量组呈剂量依赖趋势，而C组与D1组相比无明显差异...     

天然蒙脱石对大鼠急性肝衰竭血中内毒素及单核细胞表面Toll样受体4表达的影响

目的研究大鼠急性肝衰竭时血中内毒素（LPS）及单核细胞表面TLR4表达的变化以及天然蒙脱石（思密达）对其表达的影响。方法腹腔注射半乳糖胺建立大鼠急性肝衰竭模型。50只SD雄性大鼠随机分为空白组（A组）、对照组（B组）、模型组（C组）、思密达预防组（D组）和思密达治疗组（E组）。采用双色荧光染色法检测血中LPS;荧光素标记的抗TLR4/抗CD14对大鼠血液单核细胞表面TLR4及CD14分子进行免疫荧光染色,流式细胞仪检测。结果与A组比较,C组、D组和E组LPS及TLR4表达均显著增高（P〈0.01）;与C组比较,D组和E组LPS及TLR4表达显著降低（P〈0.05）;D组与E组相比,D组LPS及TLR4表达较低（P〈0.05）;B组与A组比较LPS及TLR4差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论大鼠急性肝衰竭时,血中LPS及TLR4的表达显著上调,用思密达预防和治疗后显著下调,且预防组下调更为显著。     

依达拉奉对心肺复苏后脑水通道蛋白-4表达的作用分析

目的分析依达拉奉对心肺复苏后脑水通道蛋白-4(AQP-4)表达的干预作用。方法选取雄性、清洁、健康成年SD大鼠96只,将其随机分成依达拉奉处理组(A组)40只、复苏组(B组)40只、假手术组(C组)8只和对照组(D组)8只。A组大鼠制作窒息模型,常规给予心肺复苏,并在复苏后给予依达拉奉进行治疗,按照自主循环恢复(ROSC)后1、6、12、24、72 h,又分为A1~A5亚组,各8只,采集血脑标本;B组大鼠制作窒息模型,常规给予心肺复苏,并在复苏后静脉推注0.9%氯化钠溶液,按照ROSC后1、6、12、24、72 h,又分为B1~B5亚组,采集血脑标本;C组仅给予麻醉、气管插管和动静脉插管,未进行窒息和复苏;D组麻醉后采集血脑标本。比较4组脑组织含水量和神经功能缺损评分(NDS评分)。结果 A组和B组NDS评分均低于C组和D组,A5亚组脑组织含水量低于A组其他时段水平,B4亚组脑组织含水量高于C组和D组(P0.05)。结论依达拉奉可抑制心肺复苏后AQP-4的表达,减轻脑水肿发生,保护脑功能。     

胰性脑病水通道蛋白-4的表达及意义

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在磷脂酶A2诱导的胰性脑病(PE)大鼠脑组织中的表达变化,探讨AQP4与胰性脑病的关系.方法 25只健康成年Wistar大鼠按数字表法随机分为空白组(5只)、对照组(10只)和PE组(10只),应用磷脂酶A2颈内动脉注射(0.1ml/100g体重)方法建立大鼠PE模型.对照组注射等容积生理盐水;空白组无任何处理.注射后1d处死大鼠,测脑湿/干重比值,常规行脑组织病理检查,采用免疫组化法和蛋白质印迹法检测AQP4的表达.结果 空白组、对照组大鼠脑组织无明显病理改变,PE组大鼠脑组织内神经元明显水肿,呈气球样变,炎细胞浸润、聚集,微血管内白细胞聚集及附壁.空白组、对照组、PE组大鼠脑组织含水量分别为(61.44±0.36)％、(63.20±0.32)％和(78.33±0.24)％,PE组大鼠脑组织含水量明显增加(P＜0.05);脑组织AQP4相对表达量分别为0.41±0.27、0.49±0.13、0.98±0.21,PE组大鼠脑组织AQP4表达明显上调(P＜0.05).结论 AQP4可能参与胰性脑病的发病机制.     

针刺预处理对脑梗死大鼠胆碱能抗炎通路的影响研究

目的探讨针刺预处理对脑梗死大鼠胆碱能抗炎通路(CAP)的影响。方法选择40只健康成年SD雄性大鼠,采用随机数字表法将大鼠分为正常组(A组)、假手术组(B组)、脑梗死组(C组)、针刺预处理组(D组)和针刺预处理+甲基牛扁亭(MLA)组(E组),各8只。A组大鼠不做任何处理;B组大鼠只切开皮肤,暴露颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉,不插入线栓,术后缝合皮肤;C组大鼠采用改良Zea Longa方法制备脑梗死模型;D组于造模前7 d开始针刺治疗;E组大鼠于针刺同时腹腔注射MLA,5 mg/kg,1次/d,连续治疗7 d。各组大鼠于造模成功后同步饲养,自由饮食,3 d后处死。于处死前采用Longar 5分制评分法进行神经功能评分;取处死大鼠新鲜脑组织顶叶皮质采用甲醛固定,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况;剩余脑组织采用液氮保存,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IL-1β水平,采用实时定量荧光PCR检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7n AChR)mRNA表达情况。结果 C组、D组、E组大鼠TUNEL阳性细胞多于A组和B组,脑组织中TNF-α、IL-1β水平高于A组和B组(P0.05);C组和E组大鼠α7n AChR mRNA相对表达量低于A组和B组(P0.05);D组大鼠TUNEL阳性细胞少于C组和E组,神经功能评分低于C组和E组,脑组织中TNF-α、IL-1β水平低于C组和E组,α7n AChR mRNA相对表达量高于C组和E组(P0.05)。结论针刺预处理可以改善脑梗死大鼠神经功能,抑制神经元凋亡,降低炎性细胞因子水平,上调α7n AChR mRNA的表达。