橙皮素对结肠癌HCT116细胞凋亡、迁移与侵袭的影响及机制研究

目的观察橙皮素对结肠癌HCT116细胞凋亡、迁移与侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用不同浓度的橙皮素(100、200、400、600、800μM)处理结肠癌HCT116细胞和正常结肠上皮NCM460细胞,作用24、48h后,CCK-8检测细胞增殖。选取200μM和400μM橙皮素处理HCT116细胞24h后,采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3和细胞迁移与侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9以及AKT和p-AKT的表达水平。结果橙皮素对结肠癌HCT116细胞增殖有显著抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;而对正常结肠上皮NCM460细胞增殖抑制作用影响不大。与对照组相比,橙皮素(200μM、400μM)能明显诱导HCT116细胞发生凋亡,能够有效抑制HCT116细胞的迁移和侵袭能力。橙皮素明显下调HCT116细胞中Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,上调Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平,同时橙皮素可以下调p-AKT水平,但对总AKT水平无明显影响。结论橙皮素抑制结肠癌HCT116细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低迁移和侵袭能力,与抑制AKT的活化相关。     

异甘草素对人骨肉瘤细胞MG-63增殖及侵袭的影响

目的探讨异甘草素(ISL)对人骨肉瘤细胞MG-63增殖及侵袭的影响及可能机制。方法采用不同浓度异甘草素(0,5,10,20μg/ml)作用于MG-63细胞后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察ISL对MG-63细胞生长的抑制作用。单一浓度的异甘草素(20μg/ml)处理MG-63细胞48h后,Transwell实验检测MG-63细胞侵袭能力变化,Western blot方法检测Bcl-2、Bax及自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达,实时PCR方法检测Bcl-2mRNA与Bax mRNA的表达水平。结果 ISL以浓度依赖性抑制MG-63细胞增殖。经20μg/ml异甘草素处理后,MG-63细胞侵袭能力显著降低,Bcl-2蛋白的表达下调,Bax及自噬相关蛋白Beclin1、LC3蛋白的表达上调,Bcl-2 mRNA的表达水平下调,Bax mRNA的表达水平上调。结论异甘草素在体外能够抑制MG-63细胞增殖与侵袭,与激活线粒体凋亡通路及自噬通路相关。     

水飞蓟素抑制肝癌细胞系MHCC97侵袭及迁移

目的探讨水飞蓟素(SM)对人肝癌细胞系MHCC97侵袭和转移能力的影响及可能涉及的分子机制。方法 MTT法检测细胞增殖; Transwell、划痕实验和细胞-基质黏附实验分别检测细胞侵袭、迁移及黏附能力; RT-PCR和Western blot检测MMP-9、VEGF、E-cadherin、integrinβ1和Akt mRNA及蛋白的表达。结果和对照组相比,水飞蓟素抑制细胞增殖(P0. 05),显著降低细胞侵袭、迁移和黏附能力(P0. 05)。水飞蓟素处理组MMP-9、VEGF、integrinβ1和Akt的mRNA及蛋白表达量降低(P0. 05),而E-cadherin的mRNA及蛋白表达量增高(P0. 05)。结论水飞蓟素可抑制MHCC97细胞增殖,并且降低细胞侵袭、迁移和黏附能力。     

汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制

目的探讨汉黄芩素对胶质瘤U87细胞增殖、侵袭的影响及其相关机制。方法 U87细胞随机分为对照组(加入20μL的培养液)、(0、50、100)μmol/L汉黄芩素处理组;细胞培养48h,应用MTT法检测细胞增殖情况,通过TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,荧光实时定量PCR测定ezrin mRNA表达,Western blot法检测ezrin、Bcl-2、Bax蛋白表达及ezrin蛋白磷酸化水平,用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果与0μmol/L汉黄芩素组以及对照组相比,(50、100)μmol/L汉黄芩素组细胞增殖抑制率增加,且100μmol/L汉黄芩素组细胞增殖抑制率明显高于50μmol/L汉黄芩素组。随着汉黄芩素浓度的增加,平均穿膜细胞数以及ezrin mRNA、ezrin蛋白、ezrin蛋白磷酸化水平、Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低,而Bax蛋白表达水平、AI逐渐增加;0μmol/L汉黄芩素组与对照组相比,无显著性差异。结论汉黄芩素能够减少胶质瘤U87细胞增殖、侵袭,下调ezrin蛋白表达和磷酸化活性,并诱导细胞凋亡。     

芹菜素对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的探讨芹菜素对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移与侵袭的影响及可能机制。方法 MTT法检测不同浓度的芹菜素(0、20、40、80μmol/L)对喉癌Hep-2细胞增殖的影响。40μmol/L芹菜素处理Hep-2细胞48h后,Transwell实验检测Hep-2细胞体外迁移和侵袭能力变化;实时PCR和Western blot检测Hep-2细胞Wnt1、β-catenin、环氧合酶2(COX2)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白与mRNA的表达水平。结果芹菜素抑制喉癌Hep-2细胞增殖,并呈时间浓度依赖性;40μmol/L芹菜素处理Hep-2细胞48h能够有效抑制Hep-2细胞的迁移和侵袭能力,降低Wnt1、β-catenin、COX2与MMP-2 mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结论芹菜素抑制喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力与抑制喉癌Hep-2细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关。     

汉黄芩素对皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖与侵袭的影响及其作用机制

目的探讨汉黄芩素对皮肤鳞癌细胞的增殖和侵袭能力的影响及其潜在作用机制。方法检测正常皮肤组织和皮肤鳞癌组织中Notch1 mRNA和蛋白表达水平。使用0、5、10、和20μmol/L浓度的汉黄芩素处理皮肤鳞癌A431细胞系24、48、72 h,分别用MTT法检测各组细胞增殖能力;使用0、5、10、和20μmol/L浓度的汉黄芩素处理细胞48 h,随后采用Transwell侵袭试验检测各组细胞侵袭能力,Real time PCR (RT-PCR)和Western blot法检测Notch1基因的mRNA及蛋白表达。使用Notch1激活剂多西环素处理后,进一步采用MTT法检测各组细胞增殖能力、Transwell法检测各组细胞侵袭能力。结果与正常皮肤组织相比,皮肤鳞癌组织中Notch1基因的mRNA及蛋白表达水平均显著升高,差异具有统计学意义(P 0. 05)。汉黄芩素能够抑制皮肤鳞癌细胞的增殖和侵袭,且呈剂量依赖性,差异具有统计学意义(P 0. 05)。汉黄岑素能够抑制Notch1基因的表达,而应用Notch1激活剂多西环素处理后,明显减弱了汉黄芩素对细胞增殖与侵袭能力的抑制作用,差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论汉黄芩素能够抑制皮肤鳞癌细胞的增殖及侵袭进程,可能主要通过抑制Notch1基因来发挥作用。     

五味子乙素对肝癌细胞凋亡、侵袭及血管新生的调节作用

目的:本文旨在研究五味子乙素对肝癌细胞HCCLM3凋亡、侵袭及血管新生的影响。方法:MTT检测细胞存活力。流式细胞术分析细胞凋亡。Transwell检测细胞侵袭。蛋白印迹检测Bcl 2相关蛋白X(Bax)、B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、血管内皮细胞生长因子X(VEGF-A)、表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(b FGF)表达。结果:低浓度(20μmol/L)五味子乙素对HCCLM3细胞存活力无明显影响。高浓度(20μmol/L)五味子乙素会降低细胞存活力。与DMSO组相比,五味子乙素(10和20μmol/L)组细胞凋亡率明显升高,Bax表达增强,Bcl-2表达降低(P0. 05)。而且,五味子乙素(5、10、20μmol/L)组细胞侵袭及MMP-2和MMP-9表达明显低于DMSO组(P0. 05)。与DMSO组相比,五味子乙素(5、10、20μmol/L)组VEGF-A,EGF和b FGF表达明显下降(P0. 05)。结论:五味子乙素可诱导肝癌细胞HCCLM3凋亡,降低细胞侵袭及血管新生。     

虫草素通过ERK1/2、Ezrin和Akt信号通路抑制胆囊癌细胞SNU-308的增殖和迁移

目的:探讨虫草素对胆囊癌细胞SNU-308增殖和迁移的影响及其分子机制。方法:MTT法和平板集落形成实验检测不同浓度虫草素对胆囊癌SNU-308细胞活力和集落形成能力的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞凋亡和自噬相关蛋白以及Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平;免疫荧光染色法检测细胞内LC3的表达水平;划痕愈合实验和Transwell实验检测虫草素对胆囊癌细胞迁移能力的影响;划痕实验检测Akt抑制剂和ERK1/2抑制剂及Ezrin基因沉默对细胞迁移能力的影响。结果:虫草素可显著抑制胆囊癌细胞的活力和集落形成能力(P0.05)。流式细胞术结果显示,虫草素可诱导胆囊癌细胞凋亡(P0.05)。Western blot结果显示,虫草素处理后Bcl-2表达降低,Bax、细胞色素C(Cyto C)、Fas、Fas L和cleaved caspase-3蛋白水平升高,自噬标识蛋白LC3-II/I比例和beclin 1表达上调(P0.05)。免疫荧光染色结果显示,虫草素处理后SNU-308细胞胞浆中LC3荧光颗粒的数量明显增多。划痕实验和Transwell实验结果显示虫草素可抑制细胞迁移(P0.05)。虫草素明显抑制Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平(P0.05)。Ezrin基因沉默及Akti-1/2和GDC-0994均可抑制胆囊癌细胞的迁移作用(P0.05)。结论:虫草素通过诱导凋亡和自噬抑制胆囊癌细胞的增殖和迁移,其机制可能与调控ERK1/2,Ezrin和Akt信号通路有关。     

蛇床子素通过上调抑癌基因PTEN 抑制肝癌细胞HepG2 增殖并促进细胞凋亡

目的:探究蛇床子素对肝癌细胞Hep G2增殖及凋亡的作用及作用机制。方法:用不同浓度蛇床子素处理肝癌细胞,CCK8检测细胞活性,流式检测细胞凋亡,Western blot检测细胞增殖、凋亡标记蛋白及PTEN的表达;同时用PTEN抑制剂bp V(HOpic)处理细胞,CCK8和流式再次检测细胞增殖及凋亡情况。结果:100μmol/L蛇床子素作用4 d和5 d能明显降低细胞增殖倍数(P0. 05),150μmol/L蛇床子素作用3 d、4 d和5 d也可显著降低细胞增殖倍数(P0. 05,P0. 01),并且蛇床子素(100μmol/L,150μmol/L)还能显著抑制细胞增殖标记蛋白Ki67和PCNA的表达,并体现量效关系(P0. 05,P0. 01);同时,蛇床子素(100μmol/L,150μmol/L)能明显促进肝癌细胞凋亡及凋亡标记蛋白Bax表达,降低Bcl-2蛋白表达水平(P0. 05,P0. 01);此外,蛇床子素(100μmol/L,150μmol/L)还能显著促进抑癌基因PTEN的表达(P0. 05,P0. 01);bp V(HOpic)能明显减弱蛇床子素对肝癌细胞增殖的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P0. 05)。结论:蛇床子素能通过上调PTEN表达抑制肝癌细胞Hep G2增殖、促进肝癌细胞凋亡。     

miR-766-5p 过表达介导 MMP-7 对胶质瘤细胞增殖、 侵袭与 凋亡的影响及机制

目的 探讨 miR-766-5p 对胶质瘤细胞增殖、 侵袭与凋亡的影响。 方法 Targetscan 预测 miR-766- 5p 与基质金属蛋白酶-7 (MMP-7) 靶向关系并进行验证, 构建 miR-766-5p 过表达、 MMP-7 过表达和 miR766-5p + MMP-7 过表达胶质瘤 U87 细胞系, BrdU 染色、 流式细胞法、 Transwell 实验、 Western 印迹分别检 测细胞增殖、 凋亡、 侵袭及相关蛋白表达。 结果 miR-766-5p 可靶向抑制 MMP-7 表达, miR-766-5p 过表达 可抑制 Ki67、 增殖细胞核抗原 (PCNA)、 Wnt1、 β-链蛋白 (β-catenin) 蛋白表达以抑制 U87 细胞增殖和侵 袭, 可促进 Bcl 相关 X 蛋白 (Bax) / B 细胞淋巴瘤/ 白血病-2 (Bcl-2) 蛋白表达以促进细胞凋亡, MMP-7 过表达可以缓解 miR-766-5p 过表达所致 U87 细胞增殖、 侵袭抑制作用和凋亡促进作用。 结论 miR-766-5p 可靶向抑制 MMP-7 表达抑制 U87 细胞胞增殖、 侵袭和促细胞凋亡。     

黄芩素通过抑制ERK通路下调HeLa细胞中基质金属蛋白酶的表达

目的观察不同浓度黄芩素处理宫颈癌细胞后,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9 mRNA及蛋白水平表达的变化。方法体外培养HeLa细胞株,分为空白对照组、100μmol/L、200μmol/L黄芩素处理组,培养24 h。明胶酶谱法检测上清液中MMP-2、MMP-9的活性变化。反转录PCR法检测ERK1/2及MMP-2、MMP-9的mRNA水平的表达变化。Western blot法检测ERK1/2、p-ERK1/2及MMP-2、MMP-9的蛋白水平的表达变化。结果黄芩素处理24 h后,与空白对照组相比较,MMP-2、MMP-9的活性变化逐渐降低,且呈浓度依赖性(P0.05)。ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白表达随着黄芩素浓度的增强逐渐降低(P0.05)。结论黄芩素通过激活ERK1/2信号通路下调MMP-2、MMP-9的表达。     

蛇床子素调控PI3K/AKT通路对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移与凋亡的影响

目的 探讨蛇床子素调控PI3K/AKT/mTOR信号对膀胱癌T24细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响.方法 用不同浓度的蛇床子素处理人膀胱癌T24细胞,计算IC50浓度.采用CCK-8方法检测蛇床子素对T24细胞增殖的影响,采用Transwell实验检测蛇床子素对细胞迁移和侵袭的影响,采用流式细胞仪检测蛇床子素对T24细胞凋亡的影响,采用Western blot方法检测抗凋亡蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平.结果 蛇床子素抑制T24细胞增殖的IC50为42.4μmol/L.42.4μmol/L蛇床子素处理24、48、72h后,T24细胞增殖能力显著降低(P＜0.05).42.4μmol/L蛇床子素处理24h后,T24细胞的迁移能力和侵袭能力降低、细胞凋亡率升高(P＜0.05);T24细胞中p-AKT、p-mTOR、P70与Cyclind1蛋白表达水平降低(P＜0.05);抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax和Caspase-3蛋白表达升高(P＜0.05).结论 蛇床子素可通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡.     

虫草素增强顺铂诱导的食管癌细胞系Eca109凋亡

目的研究虫草素与顺铂联合用药对食管癌细胞Eca109凋亡的影响及其作用机制。方法将食管癌细胞Eca109分为对照组、不同浓度虫草素处理组、不同浓度顺铂处理组和虫草素(70μg/m L)与顺铂(0.8μg/m L)联合处理组。MTS法检测Eca109细胞增殖;Hoechst 33258染色法及流式细胞术检测Eca109细胞凋亡;Western blot法检测细胞核内NF-κB P65及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平;ELISA法检测细胞核内NF-κB P65与DNA的结合活性。结果虫草素与顺铂联合应用使顺铂对Eca109细胞的抑制率由29.30%增加至70.41%(P0.05),增强了顺铂对Eca109的敏感性;与顺铂单独用药相比,联合用药能够显著增加顺铂诱导的细胞凋亡(P0.05);与对照组相比顺铂能够增加细胞核内NF-κB P65的活性,而虫草素却能抑制NF-κB P65的活性,联合用药后NF-κB P65的活性下调;与虫草素和顺铂单独用药相比,联合用药组能够使抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著降低(P0.05),而促凋亡蛋白Bax表达则显著增高(P0.05)。结论虫草素可能通过抑制NF-κB途径,调节下游信号分子Bcl-2和Bax的表达,增强顺铂对Eca109的凋亡诱导效应。     

黄芩素对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用及机制

目的探讨黄芩素对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响及其相关机制。方法以骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,分别加入20μL的培养液(对照组)或(0、100、200)μmol/L黄芩素溶液处理细胞48h,应用MTT法分析细胞增殖情况,通过TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,荧光实时定量PCR测定ezrin mRNA表达,采用Western blot法检测ezrin蛋白及磷酸化ezrin(p-ezrin)蛋白表达,利用原位末端标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果 (100、200)μmol/L黄芩素组细胞增殖抑制率较0μmol/L黄芩素组升高,且200μmol/L黄芩素组细胞增殖抑制率明显高于100μmol/L黄芩素组。随着黄芩素浓度的增加,平均穿膜细胞数以及ezrin mRNA、ezrin蛋白、p-ezrin蛋白表达水平逐渐降低,而AI逐渐增加,与对照组和0μmol/L黄芩素组比较,差异均有显著降低,而0μmol/L黄芩素组与对照组相比无明显变化。结论黄芩素能够抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭,其机制可能与抑制ezrin蛋白表达和活性及促进肿瘤细胞凋亡有关。     

黄芩素通过抑制胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)促进HeLa细胞凋亡

目的探讨黄芩素和U0126对人宫颈癌He La细胞凋亡的影响及机制。方法 He La细胞先用(1、2、5、10、20、50、100、200、300)μmol/L黄芩素,(1、2、5、10、20、30)μmol/L U0126处理24 h后,CCK-8法筛选最佳的处理浓度。而后分别用200μmol/L黄芩素、10μmol/L U0126、200μmol/L黄芩素联合10μmol/L U0126处理He La细胞24 h,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡指数;实时定量PCR检测He La细胞胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、Bax和Bcl-2的mRNA水平、Western blot法检测ERK1/2、Bax和Bcl-2蛋白水平。结果 He La细胞经不同浓度的黄芩素或经不同浓度的U0126处理后,CCK-8法证明黄芩素最佳抑制浓度为200μmol/L,U0126最佳抑制浓度为10μmol/L;He La细胞经200μmol/L黄芩素处理24 h后,G0/G1期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显下降,采用200μmol/L黄芩素联合10μmol/L U0126处理He La细胞24 h,S期细胞比例显著降低;10μmol/L U0126和200μmol/L黄芩素单独处理He La细胞,引起明显细胞凋亡,二者联合处理凋亡更明显;He La细胞经200μmol/L黄芩素或10μmol/L U0126单独处理或联合处理24 h后,ERK1/2和Bcl-2的mRNA表达水平明显降低、而Bax的mRNA水平升高;蛋白水平上,ERK1/2的磷酸化水平明显降低,Bax蛋白水平增加,Bcl-2的蛋白水平降低。结论黄芩素和U0126均可抑制He La细胞增殖、诱导细胞凋亡,增加G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例,联合应用效果更明显。     

芒柄花黄素对体外卵巢癌细胞活力、迁移与侵袭的影响

目的:观察芒柄花黄素对卵巢癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并初步探讨其机制。方法:体外培养人卵巢浆液性囊腺癌SKOV-3细胞,采用不同浓度(0、25、50和100μmol/L)芒柄花黄素处理细胞48 h,用MTS法检测细胞活力,并筛选出半数抑制浓度。通过划痕迁移实验和Transwell侵袭实验检测芒柄花黄素对SKOV-3细胞迁移与侵袭能力的影响。RT-qPCR法和Western blot法检测细胞中的上皮钙黏素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA及蛋白表达的变化。结果:与对照组比较,SKOV-3细胞的活力随着芒柄花黄素浓度增加而下降(P<0.01)。50μmol/L芒柄花黄素组细胞迁移距离少于对照组(P<0.01)。50μmol/L芒柄花黄素组侵袭穿过Transwell小室底膜的细胞数量显著减少(P<0.01)。此外,50μmol/L芒柄花黄素组E-cadherin的mRNA及蛋白水平显著高于对照组(P<0.01),而MMP-9的mRNA及蛋白水平显著低于对照组(P<0.01)。结论:芒柄花黄素可能通过增加E-cadherin和降...     

毛萼乙素通过调节STAT3通路抑制宫颈癌细胞增殖与转移的研究

目的 探究毛萼乙素通过调节STAT3通路抑制宫颈癌细胞增殖与转移的效果。方法 5、10、20μmol/L毛萼乙素处理宫颈癌细胞系SiHa 48 h，通过CCK8检测细胞增殖，通过流式细胞术检测细胞周期分布，通过Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力，通过Western blot检测CDK2、Cyclin E、E-caderin、MMP9、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3表达。使用毛萼乙素（20μmol/L）单独或联合STAT3激动剂Colivelin(1μg/mL)处理SiHa细胞48 h，通过CCK8检测细胞增殖，通过Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力。结果 EriB以剂量依赖性的方式抑制细胞增殖速率，SiHa细胞系细胞周期出现明显停滞，同时EriB还能进一步抑制SiHa细胞系的迁移及侵袭能力；EriB处理后SiHa细胞系中CDK2、Cyclin E、E-caderin、MMP9、p-JAK2、p-STAT3表达下降（P<0.05）。联合给药STAT3激动剂Colivelin可抵消EriB对于SiHa细胞增殖、迁移与侵袭的影响（P<0.0...     

黄芪多糖抑制多发性骨髓瘤细胞系U266增殖、迁移和侵袭

目的探讨黄芪多糖(APS)对多发性骨髓瘤(MM)细胞系U266增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制。方法培养U266细胞,用不同浓度(6、 8和10 mg/mL)的APS作用U266细胞24、48和72 h,或8 mg/mL的APS作用于转染肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达质粒(pcDNA3.1-TRAF6)的U266细胞48 h,CCK-8法检测U266细胞增殖;流式细胞仪检测U266细胞凋亡;Transwell检测U266细胞迁移和侵袭;Western blot检测cyclin D1、p21、Bax、Bcl-2、E-cadherin、MMP-2和TRAF6蛋白表达。结果与对照组相比,APS组U266细胞抑制率、凋亡率、迁移和侵袭细胞数均显著升高(P0.05),cyclin D1、Bcl-2、MMP-2和TRAF6蛋白表达水平显著降低(P0.05), p21、Bax、和E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P0.05)。与APS+pcDNA3.1组比,APS+pcDNA3.1-TRAF6组U266细胞抑制率、凋亡率、迁移和侵袭细胞数均显著降低(P0.05),cyclin D1、Bcl-2、MMP-2和TRAF6蛋白表达水平显著升高(P0.05), p21、Bax、和E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论 APS可能通过下调TRAF6蛋白表达抑制U266细胞的增殖、迁移和侵袭,促进U266细胞凋亡。     

LINC00341通过靶向miR-187对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的 探讨LINC00341对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的靶向影响及机制。方法 将LINC00341过表达载体（pcDNA3.1-LINC00341）转染前列腺癌细胞DU145,检测细胞的增殖力、细胞凋亡及迁移和侵袭能力,蛋白质印记（Western blot）法检测Cyclin D1、P21、Bcl-2、Bax、MMP-2和E钙黏蛋白（E-cadherin）的表达。双荧光素酶报告实验联合RT-qPCR验证LINC00341对miR-187的靶向调控关系。将miR-187模拟物（miR-187 mimics）和pcDNA3.1-LINC00341共转染DU145细胞,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化。结果 过表达LINC00341抑制DU145细胞Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2的表达,促进P21、Bax和E-cadherin蛋白的表达水平,抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。miR-187是LINC00341的靶基因,LINC00341靶向负性调控miR-187表达。过表达miR-187可逆转LINC00341过表达对DU1...     

奥沙利铂调控PI3K/Akt信号通路抑制脑胶质瘤细胞株U87生长的作用研究

目的：研究奥沙利铂（Oxaliplatin,Ox）调控PI3K/Akt信号通路抑制脑胶质瘤细胞株U87生长的作用。方法：培养U87脑胶质瘤细胞,分别利用0、20、40、80 μg/ml的奥沙利铂处理U87细胞24、36、48、72 h,利用MTT检测各处理组细胞增殖情况;利用流式细胞仪检测40 μg/ml的奥沙利铂处理48 h对U87细胞周期及细胞凋亡的影响;Western blot检测40 μg/ml 的奥沙利铂处理48 h对U87细胞凋亡相关蛋白及PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响。结果：奥沙利铂处理抑制U87细胞增殖,与0 μmol/L处理相比,差异显著（P<0.01）,40 μg/ml的奥沙利铂处理48 h差异最显著。40 μg/ml的奥沙利铂处理48 h后,U87细胞周期被阻滞在S期,U87细胞凋亡显著增加（P<0.01）,抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达明显下降,促凋亡因子Bax、Cleaved-caspase3蛋白表达明显升高（P<0.01）,PI3K及p-Akt的表达量明显降低（P<0.01）,Akt表达量无明显差异（P>0.05）。结论：奥沙利铂可能通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制U87细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。