lncRNA ADPGK-AS1通过调控miR-217表达对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究lncRNA ADPGK-AS1和miR-217在非小细胞肺癌中的表达及其对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法以癌旁组织为对照,qRT-PCR检测lncRNA ADPGK-AS1和miR-217在116例非小细胞肺癌组织中的表达水平,双荧光素酶报告系统验证ADPGK-AS1和miR-217的调控关系,在A549细胞中转染si-ADPGK-AS1和miR-217以抑制lncRNA ADPGK-AS1和过表达miR-217,MTT法和流式细胞术检测A549细胞增殖和凋亡,Western blot检测细胞中CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。结果与癌旁组织相比,在116例非小细胞肺癌组织中lncRNA ADPGK-AS1的含量显著升高(P0.05),miR-217的含量则显著下降(P0.05);lncRNA ADPGK-AS1靶向负调控miR-217的表达;抑制ADPGK-AS1表达和过表达miR-217均可抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖并促进细胞凋亡,使细胞中CyclinD1和Bcl-2含量降低(P0.05),p21和Bax含量升高(P0.05);干扰miR-217表达逆转了抑制ADPGK-AS1表达对A549细胞增殖、凋亡的作用。结论 LncRNA ADPGK-AS1可能通过靶向miR-217促进非小细胞肺癌A549细胞增殖,抑制细胞凋亡。LncRNA ADPGK-AS1可能是非小细胞肺癌的潜在分子靶点。     

β-arrestin1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系和组织中β-arrestin1的表达及β-arrestin1对肺癌细胞增殖能力的影响。方法收集该院经手术治疗的30例NSCLC患者的癌组织标本(NSCLC组)和肺良性病变边缘正常肺组织标本(对照组),培养NSCLC细胞系(SPC-A-1、H460、H520、H1975)和人正常肺上皮细胞系16HBE,分别提取NSCLC组、对照组及细胞系总RNA,逆转录后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用于检测β-arrestin1 mRNA的表达,蛋白印迹法(Western印迹)和免疫组化(IHC)分别检测细胞系和组织中的β-arrestin1蛋白的表达水平。MTT实验检测分别转染sh-β-arrestin1质粒和对照质粒sh-control到SPC-A-1细胞后对NSCLC细胞SPC-A-1增殖能力的影响。结果β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平在NSCLC组织和细胞系中分别高于对照组和16HBE细胞(P<0.05)。转染sh-β-arrestin1质粒后,β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平均显著下调,且在MTT实验中可显著抑制ASPC-A-1的增殖能力(P<0.05)。结论β-arrestin1在NSCLC组织和细胞系中呈高表达,且可以抑制肺癌细胞的增殖。     

长链非编码RNA ZNF667-AS1在非小细胞肺癌组织中表达上调

目的:探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中长链非编码RNA（lncRNA） 锌指蛋白667反义RNA1（ZNF667-AS1）的表达水平。方法： 97例NSCLC患者被纳入本研究，术中留取新鲜的癌组织及对应癌旁组织，采用实时定量聚合酶链式反应（PCR）法检测lncRNA ZNF667-AS1和血管内皮生长因子（VEGF）的表达，分析lncRNA ZNF667-AS1的表达与NSCLC患者临床病理特征的关系，绘制受试者工作特征（ROC）曲线，评估lncRNA ZNF667-AS1用于诊断NSCLC的价值，分析癌组织中VEGF的表达与lncRNA ZNF667-AS1表达的相关性。结果：PCR检测结果显示，97例NSCLC患者癌组织中lncRNA ZNF667-AS1的平均相对表达量明显高于癌旁组织（P<0.05）。不同性别、年龄、肿瘤直径及病理组织类型的NSCLC患者癌组织中lncRNA ZNF667-AS1相对表达量比较，差异无统计学意义（P均＞0.05），但不同组织分化程度、临床分期、浸润程度及有无淋巴结转移的患者癌组织中lncRNA ZNF667-AS1相对表达量比较，差异有统计学意义（P均<0.05）。实时荧光定量PCR检测结果显示，NSCLC癌组织中VEGF的相对表达量明显高于癌旁组织（P<0.01），NSCLC癌组织中lncRNA ZNF667-AS1的相对表达量与VEGF的表达呈正相关（P<0.05）。由ROC曲线可知，lncRNA ZNF667-AS1诊断NSCLC的AUC为0.792（95%CI：0.683-0.911，P﹤0.05），特异性为81.23%，敏感度为86.12%。结论： lncRNA ZNF667-AS1在NSCLC组织中表达上调，其可能作为一种促癌因子参与NSCLC的发生发展过程。     

PAK1在非小细胞肺癌的表达及对细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨P21蛋白激活激酶1(P-21 activated kinase 1,PAK1)在非小细胞肺癌的表达,以及下调PAK1基因对细胞增殖和侵袭的影响。方法选取非小细胞肺癌患者97例,实时荧光定量PCR检测非小细胞肺癌和癌旁组织中PAK1基因表达,培养非小细胞肺癌A549细胞株,分为PAK1干扰组、阴性对照组和空白组,实时荧光定量PCR检测细胞中PAK1基因表达,MTT法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测细胞中PAK1、β-catenin、磷酸化β-catenin和MMP-9蛋白表达。结果非小细胞肺癌组织中PAK1 mRNA相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=52. 063,P=0. 000);非小细胞肺癌组织中PAK1 mRNA相对表达量与TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P 0. 05); PAK1干扰组细胞中PAK1 mRNA相对表达量低于阴性对照组和空白组(P 0. 05); PAK1干扰组细胞48h、72h和96h吸光度A值低于阴性对照组和空白组(P 0. 05); PAK1干扰组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白组(P 0. 05); PAK1干扰组PAK1、磷酸化β-catenin和MMP-9蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白组,而β-catenin蛋白相对表达量高于阴性对照组和空白组(P 0. 05)。结论 PAK1在非小细胞肺癌组织中呈高表达,下调PAK1基因表达可抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭,其机制可能与β-catenin信号通路有关。     

P-gp和LRP在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)和肺耐药蛋白(LRP)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP技术监测56例NSCLC患者癌组织中P-gp和LRP的表达阳性率。结果 56例NSCLC患者的癌组织中P-gy、LRP表达的阳性率为51.7%,60.7%,且两者在癌组织中的表达呈正相关;两者表达阳性率在腺癌组高于鳞癌组(P<0.05),中高分化组高于低分化组(P<0.05);与TNM分期无相关性。结论P-gy、LRP在NSCLC的多药耐药(MDR)中可能起重要作用。且在形成MDR的过程中有某种程度的关联。     

WDHD1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨WDHD1蛋白在非小细胞肺癌发生,发展,浸润和转移中的作用。方法用免疫组化MaxVision法检测WDHD1蛋白在肺鳞癌,腺癌和正常肺组织中的表达。结果 WDHD1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于周围正常肺组织(P0.05),其表达与非小细胞肺癌临床分期(P0.05)、浸润范围(P0.05)、淋巴结转移(P0.05)和组织分化程度(P0.05)有关。结论 WDHD1蛋白在非小细胞肺癌中高表达,与非小细胞肺癌分化差、恶性程度、临床分期、淋巴结转移密切相关,在非小细胞肺癌的发生发展过程中可能起重要作用.     

非小细胞肺癌组织miR-34a的表达及其对H1299细胞增殖的影响

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中miR-34a的表达情况及其对NSCLC细胞系H1299增殖的影响。方法 RT-PCR方法检测miR-34a在NSCLC组织和NSCLC细胞系H1299中的表达情况。克隆形成实验及MTT增殖实验检测miR-34a对NSCLC细胞系H1299增殖能力的影响;生物信息学方法预测miR-34a可能的功能性靶基因,并采用荧光素酶报告基因实验验证预测的功能性靶基因。Western印迹检测miR-34a对预测靶基因表达的影响。结果相比正常组织而言,NSCLC组织和细胞系H1299中miR-34a表达均显著下降(P0.05);转染miR-34a可显著抑制NSCLC细胞系H1299的增殖能力(P0.05),而转染miR-34a抑制剂可增加NSCLC细胞系H1299的增殖能力(P0.05)。生物信息学预测显示Notch1是miR-34a可能的功能性靶基因,且得到荧光素报告实验结果证实。Western印迹结果显示转染miR-34a可显著抑制NSCLC细胞系H1299中Notch1的表达。结论 miR-34a可通过调节Notch1的表达,进而抑制NSCLC细胞的增殖。     

Survivin蛋白在非小细胞肺癌中表达的研究

目的探讨Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其三者之间的关系。方法用链霉菌生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学法(SP法)检测71例手术切除的非小细胞肺癌(NSCLC)组织和30例正常肺组织中Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白的表达;用原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡指数(AI)。结果在NSCLC组织中Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白的表达率分别为61.97%、52.52%、22.54%;30例正常肺组织中无Survivin、突变型P53蛋白表达(P<0.001),Bcl-2蛋白表达率为3.33%(P<0.005);肺癌Survivin阳性、阴性表达组织、正常肺组织的平均凋亡指数分别为11.86±4.67‰、18.67±7.93‰、23.32±6.98‰,肺癌Survivin阳性表达组织与正常肺组织的平均AI相比(P<0.001),肺癌Survivin阴性表达组织与正常肺组织的平均AI相比(P<0.05),差异有显著的统计学意义。结论Survivin蛋白在肺癌组织中的表达,提示该凋亡抑制蛋白在肺癌的发生发展中起抑制癌细胞凋亡的重要作用,AI显示出了Survivin蛋白的抗凋亡作用,Survivin基因有望成为基因治疗的新靶点。     

MCM5和PCNA在非小细胞肺癌肿瘤组织中的表达及意义

采用免疫组化EnVision二步法检测MCM5和PCNA在50份NSCLC癌组织、19份肺良性病变、5份不典型增生组织标本中的表达水平.结果NSCLC中MCM5和PCNA的表达均高于非肺癌良性组织和不典型组织,且MCM5表达水平明显高于PCNA, 二者表达呈正相关.MCM5的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床病理分期和核分裂指数呈显著相关,与患者年龄及组织学类型无相关性.提示MCM5在NSCLC发生、发展中具有重要作用,其作为NSCLC病理诊断的参考指标较PCNA有更强的敏感性(r=0.958),且能评估预后.     

非小细胞肺癌间质纤维母细胞增殖活性及其意义

本研究采用免疫组织化学方法观察非小细胞肺癌间质纤维母细胞的增殖活性 ,探讨纤维母细胞增殖活性与肺癌生物学行为的关系。材料与方法　 (1)材料 :来自手术切除标本 ,鳞癌 5 8例 ,腺癌 36例 ,年龄 34～ 78岁 ,平均 5 6 .8岁。取材时 ,将肺癌作最大切面剖开后 ,沿着瘤体外缘大致画出一个圆形或椭圆形 ,圆形者在其中心再画一个小圆形 ,其直径是大圆形的一半 ,为中心区 ;椭圆形者在其中心再画一个小椭圆形 ,其长径和横径分别是大椭圆形的一半 ,为中心区。肿瘤其余的区域为周围区。另外 ,收集距离肿瘤 >2ｃｍ的癌旁正常肺组织2 2例。取材后用 1…     

microRNA-21在非小细胞肺癌患者体内外周血和癌组织中的表达水平及其通过调节PTEN蛋白参与抑癌的机制

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血清和癌组织中microRNA-21表达水平及其对肺癌细胞的侵袭和增殖影响。方法 32例NSCLC患者为研究组,30例同期肺部良性病变患者为对照组,采用Real-time RCR检测研究组肿瘤组织、癌旁组织及两组血清中microRNA-21的表达水平;此外,对肺癌细胞株A549转染microRNA-21的抑制物(inhibitor)或模拟物(mimics)后,采用transwell及CCK-8法观察microRNA-21对肺癌细胞株的侵袭及增殖的变化,并采用Western印迹检测A549中张力蛋白同源基因(PTEN)蛋白水平。结果研究组血清及肿瘤组织中microRNA-21的表达水平显著高于对照组及癌旁组织(均P<0.05);A549转染microRNA-21 mimics后细胞的侵袭和增殖能力显著增加(P<0.05),转染microRNA-21 inhibitor后,细胞的侵袭和增殖能力显著降低(P<0.05),而PTEN蛋白转染后,表达水平与上述结果相反。结论 NSCLC患者肿瘤组织和血清中高表达的microRNA-21可能通过抑制PTEN蛋白参与癌细胞侵袭和增殖能力的调节。     

肺癌耐药蛋白在非小细胞肺癌中的表达与临床相关性研究

目的：探讨肺癌耐药蛋白（LRP）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达与临床相关性。方法：通过纤维支气管镜活检、经皮肺穿刺活检或手术切除而药取肺癌组织标本69例,其中男52例,女17例。I、Ⅱ期28例,Ⅲ、Ⅳ期41例。采用免疫组织化学法进行检测,胞浆呈棕黄色着染为LRP阳性。结果：LRP主要表达于胞浆,69例肺癌组织中,LRP表达阳性39例,男性56％（29／52）,女性59％（10／17）,总检出率57％（39／69）,各年龄段间差异无显著性。肺腺癌中检出率67％（18／27）,肺鳞癌中检出率55％（17／31）;T1－2中检出率52％（23／44）,T3－4中检出率64％（16／25）;N3中检出率83％（5／6）;在M0中检出率57％（36／63）,M1中检出率50%(3/6)。LRP表达与NSCLC中组织类型无相关性（P＞0．05）,与原发灶的侵犯范围（T）及转移情况（N、M）无关。LRP阳性组化疗有效率低于LRP阴性组（P＜0．05）。随访中LRP阳性组死亡7例,LRP阴性组死亡3例。结论：在肺腺癌与鳞癌中由LRP引起的耐药发生机率相等;TNM指标只代表肿瘤进展而不代表耐药性差异;LRP在NSCLC中的表达与化疗的有效率及预后有一定的相关性,LRP表达阳性者预后差。有研究报道LRP的表达与多药耐药有关,LRP的检测能指导化疗方案的选择,提高化疗疗效,因此,值得进一步深入研究。     

凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者血清中的表达

Objective To investigate the clinical significance of Livin in the diagnosis of non-small cell lung cancer (NSCLC) through testing the content of inhibitor of apoptosis protein Livin in the serum of NSCLC patients, pneumonia patients and healthy persons. Methods Livin levels in the serum of 85 NSCLC patients, 20 pneumonia patients and 20 healthy persons were detected by enzyme linked immunosorbent assay. Results Livin level in the serum of NSCLC patients was significantly higher than that in pneumonia patients and healthy persons. The serum Livin level was increased following with tumor progress. Livin level in NSCLC patients with stage Ⅲ-Ⅳ was higher than that in NSCLC patients with stage Ⅰ - Ⅱ ( P ＜0.05) . Conclusions As an inhibitor of apoptosis protein,Livin has certain clinical value on the diagnosis and prognosis judgement of NSCLC patients.     

MiR-32对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的探讨miR-32靶向CCNE2调控非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测30例NSCLC患者癌组织及其匹配癌旁组织和支气管上皮细胞株16-HBE及NSCLC细胞株A549、H460和H1299中miR-32 mRNA表达水平;选择A549和H1299细胞为研究对象,将细胞随机分8组:NC组(转染miR-NC)、miR-32组(转染miR-32 mimics)、NC inhibitor组(转染miR-32-NC)、miR-32 inhibitor组(转染miR-32 inhibitor)、si-NC组(转染对照干扰RNA)、si-CCNE2组(转染CCNE2干扰RNA)、miR-32+vector(共转染miR-32 mimics和pcDNA3.1)、miR-32+CCNE2组(共转染miR-32 mimics和pcDNA3.1-CCNE2),转染按照Lipofectamine^TM2000试剂进行。qRT-PCR检测转染效果,qRT-PCR和Western印迹分别检测CCNE2 mRNA和蛋白...     

锌指蛋白3在非小细胞肺癌中的表达

目的探讨锌指蛋白(ZBED)3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理资料的相关性。方法 50对原发性肺癌及癌旁组织行免疫组化、荧光定量PCR检测ZBED 3蛋白、mRNA的表达;12对新鲜肺癌及癌旁组织行Western印迹检测ZBED 3蛋白的表达;统计学软件分析不同临床病理指标与ZBED 3表达的相关性。结果免疫组化实验显示ZBED 3表达定位于细胞质及少数细胞核,癌细胞中ZBED 3表达的阳性率显著高于癌旁组织(P0.05);Western印迹试验证实ZBED 3在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P0.05);实时荧光定量PCR检测肺癌组织mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P0.05);ZBED 3在NSCLC中的表达与患者年龄、性别、肿瘤分化及组织学类型等无显著相关性(P0.05),但与淋巴结转移及TNM分期相关(P0.05)。结论 ZBED 3在NSCLC中过度表达,并与肿瘤的淋巴结转移、TNM分期相关。     

非小细胞肺癌组织中miR-217、E2F3的表达变化及其与预后的关系

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中微小RNA(miRNA)-217、E2F转录因子3(E2F3)的表达变化及其与预后的关系.方法 选取104例接受姑息或根治性切除的NSCLC患者,采用实时荧光定量PCR检测癌组织和癌旁组织中的miR-217、E2F3 mRNA.分析miR-217、E2F3表达与NSCLC患者临...     

凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者血清中的表达

目的 通过检测凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌患者、肺炎患者及健康者血清中的含量,探讨Livin对于诊断非小细胞肺癌的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验对85例非小细胞肺癌患者、20例肺炎患者、20名正常健康人血清Livin水平进行检测.结果 非小细胞肺癌组血清Livin水平表达最高,肺炎组次之,健康对照组最低.三组间具有显著差异(P＜0.001).血清Livin浓度随着肿瘤分期的升高而升高.Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者血清Livin水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P＜0.05).结论 Livin作为一种凋亡抑制蛋白对非小细胞肺癌的诊断及判断患者预后具有一定的临床价值.     

ZEB1在非小细胞肺癌的表达及其临床意义

目的探讨ZEB1在非小细胞肺癌的表达及其临床意义。方法分析ZEB1蛋白在102例非小细胞肺癌组织及60例癌旁组织的表达,同时分析ZEB1表达与患者病理特征及预后的关系。结果免疫组化研究结果显示ZEB1蛋白的表达与患者的性别、年龄和病理类型无明显相关性,但ZEB1蛋白的表达水平与肿瘤的大小、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、临床分期和Ki-67的表达密切相关,高表达ZEB1蛋白患者五年生存率明显低于低表达患者(P=0.002)。多因素分析显示,ZEB1的表达是影响患者预后的独立危险因素。结论 ZEB1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达与肿瘤的大小、肿瘤的分化程度、淋巴结转移、肿瘤的分期和预后均密切相关。     

EGFR在非小细胞肺癌组织中的表达及其初步临床意义

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）在非小细胞肺癌组织和癌旁正常肺组织中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学SP三步法检测100例非小细胞肺癌（NSCLC）及与其相对应的100例癌旁正常肺组织中EGFR的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 EGFR在肺癌组织中明显高于在癌旁正常肺组织中的表达,且差异具有统计学意义（P〈0.05）。EGFR的表达与肺癌组织的分化程度、有/无淋巴结转移及组织类型无关。结论 EGFR的高表达与NSCLC的发生发展有着密切的关系,EGFR的表达与NSCLC患者临床病理特征无关。