非小细胞肺癌hTERT与p16基因甲基化的表达

目的 探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)和p16基因甲基化在非小细胞肺癌(NSCLC)发病中的作用.方法 应用实时荧光定量RT-PCR法和甲基化特异性PCR法检测45例NSCLC组织、21例肺正常组织hTERT和p16基因甲基化的表达.结果 NSCLC、正常肺组织hTERT mRNA的表达分别为2.854±0.728、2.042±0.378,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);NSCLC组织、肺正常组织p16基因甲基化阳性率分别为57.8%、14.3%(P<0.01).hTERT mRNA与NSCLC病理类型相关,p16基因甲基化与NSCLC细胞分化程度及淋巴结转移相关(P均<0. 05).结论 hTERT与p16基因甲基化存在相关性,hTERT和p16基因甲基化的表达与NSCLC的发生、发展有关.     

传导信号胞质蛋白4在非小细胞肺癌患者中表达及与临床生物学行为关系

目的研究传导信号胞质蛋白(SMAD)4在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨其与NSCLC临床生物学关系。方法采用逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)、荧光定量(FQ)-PCR和蛋白质印迹法(Western印迹)检测54例NSCLC组织及相应癌旁组织和57例非肿瘤性肺组织中SMAD4 mRNA和蛋白的表达,分析其与NSCLC临床生物行为关系。结果 RT-PCR和FQ-PCR结果显示肺癌组织SMAD4 mRNA表达量均显著低于癌旁组织及对照组(1.28±0.25比3.94±0.13比5.47±1.29,0.41±0.05比1.04±0.10比2.59±0.35,均P<0.01);Western印迹结果显示肺癌组织SMAD4蛋白表达显著低于癌旁组织及对照组(0.61±0.10比2.18±0.61比4.51±0.98,P<0.01)。RT-PCR和Western印迹结果提示肺癌组织SMAD4 mRNA和蛋白阳性表达率(13/54和12/54)显著低于癌旁组织(32/54和34/54)及对照组(48/54和47/54)(均P<0.01)。肺癌SMAD4表达下调或缺失与肿瘤类型、病理分化程度、淋巴结转移和临床TNM分期有关(P<0.05)。结论 SMAD4的低表达或缺失与NSCLC的发生、发展及转移密切相关。     

锌指蛋白3在非小细胞肺癌中的表达

目的探讨锌指蛋白(ZBED)3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理资料的相关性。方法 50对原发性肺癌及癌旁组织行免疫组化、荧光定量PCR检测ZBED 3蛋白、mRNA的表达;12对新鲜肺癌及癌旁组织行Western印迹检测ZBED 3蛋白的表达;统计学软件分析不同临床病理指标与ZBED 3表达的相关性。结果免疫组化实验显示ZBED 3表达定位于细胞质及少数细胞核,癌细胞中ZBED 3表达的阳性率显著高于癌旁组织(P0.05);Western印迹试验证实ZBED 3在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P0.05);实时荧光定量PCR检测肺癌组织mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P0.05);ZBED 3在NSCLC中的表达与患者年龄、性别、肿瘤分化及组织学类型等无显著相关性(P0.05),但与淋巴结转移及TNM分期相关(P0.05)。结论 ZBED 3在NSCLC中过度表达,并与肿瘤的淋巴结转移、TNM分期相关。     

实时荧光定量PCR检测TMPRSS4 mRNA在41例肺腺癌中的表达及临床意义

目的探讨通过实时荧光定量PCR法检测临床切除的肺腺癌、癌旁组织及正常肺组织中的Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(TMPRSS4)mRNA的表达与非小细胞肺腺癌患者关系。方法采用RQT-PCR法检测41例非小细胞肺腺癌及其配对癌旁组织和12例良性疾病肺组织中TMPRSS4 mRNA表达情况。结果非小细胞肺腺癌组织TMPRSS4 mRNA表达明显高于配对癌旁组织(P0.01),TMPRSS4 mRNA在配对癌旁组织的相对表达量显著高于正常肺组织(P0.01)。TMPRSS4 mRNA表达与非小细胞肺腺癌淋巴结转移、临床分期相关(P0.05);与患者年龄、性别及病理分化程度无关。结论 TMPRSS4在非小细胞肺腺癌中的表达与肿瘤发生、转移密切相关,高表达的TMPRSS4 mRNA提示肺腺癌有转移风险更高及预后更差的可能,检测TMPRSS4 mRNA有助于提高非小细胞肺腺癌恶性程度的判断。     

非小细胞肺癌组织中miR-130a、GOLPH3表达变化及意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中微小RNA(miR)-130a、高尔基磷蛋白3(GOLPH3)表达及临床意义.方法 选取87例NSCLC患者为研究对象,应用荧光定量PCR检测NSCLC癌和癌旁组织中miR-130a、GOLPH3 mRNA表达;采用免疫组化法检测癌和癌旁组织中GOLPH3蛋白表达.采用Pea...     

非小细胞肺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin的表达及意义

目的 研究肺癌相关Livin基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及与p53基因的关系.方法 采用RT-PCR方法检测48例NSCLC组织Livinα mRNA的表达,用免疫组化SABC法检测livin和p53蛋白在48例NSCLC患者肺癌组织切片中的表达.结果 48例NSCLC中15例检测到Livinα mRNA表达,其阳性表达率为31.3%,而正常肺组织和癌旁及良性疾病肺组织均未检测到Livinα mRNA表达.Livin蛋白在腺癌、低分化癌、有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于鳞癌和大细胞癌、高中分化癌和无淋巴结转移者(P＜0.01),而癌旁组织和良性疾病肺组织未检出阳性表达.Livinα mRNA表达与p53呈正相关(r=0.457,P＜0.01);livin蛋白表达与p53呈正相关(r=0.563,P＜0.01).结论 Livin在NSCLC组织中高表达,可能成为肺癌诱导凋亡治疗的新靶点.     

实时RT-PCR法检测非小细胞肺癌淋巴微转移

目的以Lunx和血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体为靶基因,实时PT-PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌旁组织、手术切除区域淋巴结微转移,探讨人肺特异性X蛋白(humanlung-specificXprotein,Lunx)、VEGF-C、VEGF受体3(VEGFR-3)的敏感性和特异性。方法以肺部良性病变切除的20枚淋巴结为对照,采用SYBRGreenⅠ嵌合荧光实时RT-PCR检测NSCLC手术切除区域淋巴结60枚LunxmRNA表达并与常规病理比较;以肺部良性病变切除的组织20例为对照,检测VEGF-C、VEGFR-3在30例癌旁组织中的表达。结果30例NSCLC患者癌旁组织VEGFCR-3、VEGF-C阳性率分别为60%(18/30)、77%(23/30),分别与病理阳性率37%(11/30)比较,均有显著差异(χ2=4,P<0.05;χ2=6.72,P<0.01);60枚NSCLC患者手术切除区域淋巴结Lunx阳性率78.3%(47/60),与病理阳性率55%(33/60)比较有显著差异(χ2=7.68,P<0.01)。结论VEGFCR-3、VEGF-C、Lunx均可作为NSCLC淋巴微转移的分子标志物,与病理比较有较高的敏感性;实验采用一种新颖的荧光实时RT-PCR相对定量方法分析结果,有助于早期肺癌转移的检测。     

荧光定量PCR检测非小细胞肺癌中MTA1和E-cadherin的表达及意义

目的探讨肿瘤转移相关蛋白家族1(MTA1)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)联合检测40例NSCLC组织、12例癌旁组织、12例良性病变肺组织中MTA1和E-cadherin mRNA表达的相对水平,分析他们的表达与临床组织病理学特征的关系。结果MTA1 mRNA在NSCLC中平均表达水平高于癌旁和良性疾病组织(P<0.05);E-cadherin mRNA在NSCLC中平均表达水平低于癌旁和良性疾病组织(P<0.05);在NSCLC中MTA1和E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.561,P<0.05);在癌旁组织和良性疾病组织中MTA1和E-cadherin的表达无统计学差异(P>0.05);MTA1和E-cadherinmRNA表达水平与淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05)。结论 MTA1过度表达及E-cadherin表达的下调或缺失与NSCLC浸润和转移呈正相关,联合检测NSCLC中MTA1和E-cadherin的表达,可用于预后评估。     

干细胞Nanog蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的 探讨食管癌组织中干细胞Nanog蛋白表达,分析其与食管癌临床病理特征的关系.方法 收集87例食管癌患者的癌组织及癌旁正常组织标本,采用免疫组化法检测癌组织及癌旁正常组织中的Nanog蛋白表达,同时用免疫荧光技术检测食管癌细胞系TE-1、Eca-109中的Nanog蛋白表达.结果 Nanog蛋白在食管癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织(P＜0.05),Nanog蛋白在食管癌组织中的表达与其病理分期、分化程度和淋巴结转移有关(P均＜0.05).食管癌细胞系TE-1、Eca-109中的Nanog阳性蛋白呈高表达,且表达存在异质性;多数细胞以细胞质表达为主,少数以细胞核表达为主,细胞核表达阳性率为10％.结论 Nanog蛋白在食管癌组织中的表达与食管癌的发生、发展及转移密切相关.     

NF-κBp65/IκBα在非小细胞肺癌组织中的表达

目的从蛋白和RNA水平研究NF-κBp65、IκBα在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达特点,探讨其在肺癌发生中的作用。方法免疫组化、Western blot方法检测NSCLC和癌旁肺组织中NF-κBp65和IκBα蛋白的表达,实时定量-PCR方法检测NF-κBp65和IκBα基因表达。结果共检测NSCLC组织62例(腺癌33例,鳞癌29例),癌旁肺组织27例。免疫组化显示NSCLC组织中NF-κBp65阳性表达率分别为58.6%和60.9%,显著高于癌旁肺组织(P均0.0001),而IκBα阳性表达率分别为12.3%和1.4%,显著低于癌旁肺组织(P均0.0001)。Western blot进一步证实:NF-κBp65蛋白在NSCLC组织中表达升高,IκBα蛋白表达降低。实时定量-PCR结果显示,NSCLC组织中NF-κBp65基因表达分别是癌旁肺组织的2.73±0.33倍和2.58±0.27倍(P=0.0046),而IκBα基因表达分别是癌旁肺组织的0.63±0.086倍和0.87±0.075倍(P=0.0208)。结论 NF-κBp65高表达和IκBα低表达可能在NSCLC发生过程中发挥重要作用。     

结直肠癌组织中RhoC mRNA的表达及意义

目的 观察RhoC mRNA在结直肠癌组织中的表达变化,探讨RhoC mRNA的表达在结直肠癌发生、发展和侵袭转移中的作用.方法 实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测RhoC mRNA在结直肠癌、癌旁组织及大肠正常黏膜中的表达及其与结直肠癌临床病理学指标的关系.结果 RhoC mRNA在结直肠癌组织中的表达较癌旁组织及正常黏膜组织明显增高(P<0.05).RhoC mRNA的表达与结直肠癌的淋巴结转移、肝转移及肠壁浸润深度有关(P<0.05).结论 RhoC mRNA表达与结直肠癌的发生、发展和侵袭转移密切相关.     

食管癌组织中Cyr61的表达及临床意义

目的 探讨人食管癌组织中cyr61 mRNA、蛋白表达及其与临床参数的关系.方法 采用实时荧光定量PCR和免疫组化染色法对186例食管癌患者的食管癌组织和癌旁正常食管组织中Cyx61 mRNA 蛋白表达水平进行测定.结果 食管癌组织中cyr61 mRNA、蛋白表达水平均显著高于配对的癌旁正常食管组织(P均=0.000).Cyr61 mBNA表达水平与食管癌患者淋巴结转移、浸润深度、肿瘤大小、病理分级有关(P<0.01),Cyr61蛋白表达水平与患者吸烟及肿瘤淋巴转移、家族史、浸润深度、肿瘤大小和病理分级有关(P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,淋巴结转移、肿瘤大小、浸润深度均是Cyr61 mRNA和蛋白表达的危险因素(P<0.05).结论 Cyr61 mRNA在食管癌发展过程中起重要作用,其表达的蛋白产物可能作为临床评估治疗的重要靶蛋白.     

FHIT基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展中的作用及机制.方法 采用免疫组化Envision法检测FHIT蛋白在50份NSCLC组织及21份癌旁正常肺组织中的表达,并分析其与NSCLC临床病理特征的关系 .结果 NSCLC组织中FHIT蛋白表达阳性率明显低于正常肺组织(P< 0.05),且其表达与NSCLC组织类型、淋巴结转移、TNM临床分期、5 a生存率有关(P均<0.05).结论 FHIT基因表达下调与NSCLC的发生、浸润、转移及预后有关.     

Wnt信号通路靶基因GS mRNA及蛋白在胃癌中的表达

目的: 探讨Wnt信号通路的靶基因GS mRNA及蛋白在胃癌中的表达及其临床意义.方法: 荧光实时定量PCR(FQ-PCR)检测52例胃癌组织及癌旁正常组织GS mRNA表达;免疫组织化学技术(SP法)检测97例胃癌组织、30例癌旁正常组织及10例肠化生组织中GS蛋白表达水平差异.结果: 癌组织和癌旁正常组织GS mRNA表达有显著差异(25.508±5.090 vs 13.001±2.040,P<0.05). 癌组织GS蛋白表达与组织学类型、Lauren分型及淋巴结转移密切相关(χ2= 26.994,54.929,5.173,均P<0.05),与肿瘤大小、TNM分期、远处转移及患者的性别和年龄等无明显相关.结论: GS mRNA和蛋白高表达同胃癌生物学行为密切相关,可能与胃癌的发生、发展及预后有关.     

凋亡相关基因Survivin在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的研究Survivin在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床生物学意义。方法采用免疫组化S-P法检测Survivin在NSCLC及癌旁正常肺组织中的表达情况。采用TUNEL法检测凋亡细胞,计算凋亡指数(AI)。结果 60例NSCLC组织中Survivin的阳性表达率为46.7%,20例正常肺组织的阳性表达率为10.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。Survivin的阳性表达与有无淋巴结转移、肿瘤的分化程度及TNM分期有关(P<0.05),与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤直径、病理分型、是否吸烟及有无胸膜转移无关(P>0.05)。结论 Survivin基因的异常表达可能在NSCLC的发生、发展中起到一定作用。检测Survivin可能有助于临床TNM分期和有无淋巴结转移的判断。     

TCF21与Caspase-3在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨TCF21与Caspase-3在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及意义。方法收集广西宾阳县人民医院2013-01~2015-01外科手术切除的NSCLC标本共44例(含癌及癌旁组织)。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测TCF21与Caspase-3在肺癌组织及正常组织中的表达,分析NSCLC组织中TCF21与Caspase-3的表达及与临床分期的关系。结果 TCF21和Caspase-3在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常肺组织[(0.36±0.70)vs(1.00±0.00)、(0.62±0.56)vs(1.00±0.00),P0.01],且二者在肺癌TNMⅢ期中的表达较Ⅰ+Ⅱ期的表达量明显降低[(0.05±0.06)vs(0.48±0.79)、(0.17±0.20)vs(0.78±0.56),P0.01]。TCF21和Caspase-3在NSCLC组织中的表达呈正相关。结论 TCF21和Caspase-3低表达可能促进了肿瘤的恶性增殖及转移,联合检测TCF21和Caspase-3对判断NSCLC恶性程度、转移潜能及预后有重要的临床意义。     

β-arrestin1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系和组织中β-arrestin1的表达及β-arrestin1对肺癌细胞增殖能力的影响。方法收集该院经手术治疗的30例NSCLC患者的癌组织标本(NSCLC组)和肺良性病变边缘正常肺组织标本(对照组),培养NSCLC细胞系(SPC-A-1、H460、H520、H1975)和人正常肺上皮细胞系16HBE,分别提取NSCLC组、对照组及细胞系总RNA,逆转录后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用于检测β-arrestin1 mRNA的表达,蛋白印迹法(Western印迹)和免疫组化(IHC)分别检测细胞系和组织中的β-arrestin1蛋白的表达水平。MTT实验检测分别转染sh-β-arrestin1质粒和对照质粒sh-control到SPC-A-1细胞后对NSCLC细胞SPC-A-1增殖能力的影响。结果β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平在NSCLC组织和细胞系中分别高于对照组和16HBE细胞(P<0.05)。转染sh-β-arrestin1质粒后,β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平均显著下调,且在MTT实验中可显著抑制ASPC-A-1的增殖能力(P<0.05)。结论β-arrestin1在NSCLC组织和细胞系中呈高表达,且可以抑制肺癌细胞的增殖。     

非小细胞肺癌细胞凋亡与增殖的关系及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞凋亡与增殖的关系及其临床病理意义。方法 采用SABC免疫组化法检测43例NSCLC及20例癌旁正常肺组织石蜡包埋标本增殖细胞核抗原(PCNA)表达；以PCNA标记增殖指数，检测其增殖活性；用TUNEL法检测细胞凋亡的情况，并分别定义凋亡指数(AI)和增殖指数(MI)。结果 ①NSCLC组织细胞AI、MI均明显高于癌旁正常肺组织；②癌旁正常肺组织、NSCLC组织增殖／凋亡比值分别为11．97和10．956，二者无显著差异。③细胞凋亡与肺癌的组织类型、临床分期及淋巴结转移无关，而与患者的预后及组织分化程度相关；细胞增殖与肺癌的组织类型、组织分化程度及淋巴结转移无关，而与患者的预后、临床分期密切相关。结论 NSCLC患者的AI、MI明显增高，可以作为肺癌预后及早期诊断的参考指标。     

INPP4B基因在胃癌组织中的表达及意义

目的:本研究通过检测人类胃癌组织及相应的癌旁组织中Ⅱ型多磷酸肌醇4-磷酸酶(inositol polyphosphate-4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)的mRNA及蛋白表达情况,分析其与胃癌临床病理特征的关系,探讨其在胃癌发生发展中的意义.方法:采用实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及免疫组织化学SP法检测50例胃癌患者的癌组织及相应的癌旁组织(距癌组织边缘5 cm)中INPP4B mRNA及蛋白表达情况.并分析INPP4B表达与胃癌临床病理特征的关系.结果:q RT-PCR结果显示,胃癌组织中INPP4B mRNA表达均明显低于相应的癌旁组织(P0.01).免疫组织化学结果显示胃癌组织中INPP4B蛋白的表达阳性率明显低于相应癌旁组织的阳性率(28.0%vs 82.0%,P0.01).INPP4B mRNA及蛋白表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P0.01),而与患者的性别、年龄、肿瘤直径无关(P0.05).结论:INPP4B mRNA及蛋白均在胃癌组织中表达下调,与胃癌的分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关;INPP4B可能在胃癌中起着抑癌基因的作用,其研究可能为胃癌的治疗提供新的方向.     

甲基转移酶3B基因在胰腺癌中的表达

目的 检测胰腺癌组织中甲基转移酶3B(DNMT3B)基因表达,分析其与胰腺癌临床病理参数的关系.方法 应用实时定量PCR和免疫组织化学方法检测42例胰腺癌组织及相应癌旁组织、10例正常胰腺组织中DNMT3B mRNA和蛋白表达.结果 胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织DNM33B mRNA表达量分别为9.4±5.9、1.02±0.71和0,相差非常显著(P<0.05);DNMT3B蛋白表达阳性率分别为83.3%、14.3%和10.0%,相差也非常显著(P<0.01).DNMT3B mRNA表达与I临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关(P<0.05或P<0.01);DNMT3B蛋白表达与肿瘤的部位、淋巴结转移有关(P<0.01或P<0.05);DNMT3B mRNA和蛋白表达均与年龄、性别、神经浸润、肿瘤大小、血CEA和CA19-9浓度无关.结论 胰腺癌DNMT3B mRNA和蛋白高表达提示胰腺癌已发生淋巴结转移,预后较差.