蛇葡萄素的血管生成抑制作用

目的:探讨蛇葡萄素对内皮细胞及肿瘤细胞的生长及其血管生成的影响。方法:体外用MTT法对牛主动脉内皮细胞进行增殖抑制实验;用ELISA法、免疫组化染色法以及流式细胞仪观察蛇葡萄素对人肝癌细胞Bel-7402分泌VEGF、bFGF的抑制作用;体内观察蛇葡萄素对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制作用。结果:蛇葡萄素对牛主动脉内皮细胞的增殖在6.4~51.2μg/m l呈现浓度依赖性抑制作用,IC50=22.0±4.0μg/m l。ELISA法测定结果显示,12.8μg/m l、25.6μg/m l、38.4μg/m l蛇葡萄素对肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF的抑制率分别为14.2%、40.0%及49.6%。免疫组化染色结果显示,12.8μg/m l以上的蛇葡萄素能使细胞体积缩小,分泌VEGF、bFGF明显减少。流式细胞仪检测VEGF、bFGF结果,25.6μg/m l及38.4μg/m l蛇葡萄素对VGEF的抑制率分别为32.2%及57.4%,对bFGF的抑制率分别为54.9%及62.6%。蛇葡萄素浓度为100、150、200 mg/kg时对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制率分别可达24.3%、41.4%及45.7%。结论:蛇葡萄素在体外能有效抑制内皮细胞增殖及人肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF和bFGF,具有抑制血管生成的作用;体内能有效抑制人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的生长,提示蛇葡萄素也许可作为一个肿瘤血管生成抑制剂用于肿瘤防治。     

鱼腥草、田基黄和板蓝根对机体中性粒细胞、单核细胞化学趋化和超氧化物的调整作用

目的:为探讨鱼腥草、田基黄和板蓝根对机体中性粒细胞和单核细胞化学趋化和超氧化物的调整作用。方法:应用化学趋化试验和超氧化物产物测定方法。结果:鱼腥草、田基黄和板蓝根能显著增加两种细胞的超氧化物产物,预先与以上三种药物培养的中性粒细胞的化学趋化被明显抑制(化学趋化剂为甲酰肽和酵母多糖),但单核细胞的化学趋化无明显变化。结论:鱼腥草等中草药参与中性粒细胞的氧化反应(呼吸爆发),参与调节中性粒细胞的趋化作用、抗炎效应和杀菌功能。     

疏血通对高糖环境中肾小管上皮细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的:探讨疏血通注射液对高糖环境中人肾小管上皮细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法:采用对照组(NG)、高糖组(HG)及HG+不同浓度疏血通组培养人肾小管上皮细胞,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中的MCP-1含量。结果:①高糖组细胞上清液中MCP-1较对照组增加(P<0.01);②疏血通5μl/mL和10μl/mL浓度组能下调MCP-1的分泌,并呈剂量依赖性。结论:高糖环境可导致肾小管上皮细胞MCP-1水平显著增加,而疏血通注射液可有效干预此效应,减少炎症对肾脏的损伤。     

RP-HPLC法测定霉茶中蛇葡萄素的含量

目的:测定霉茶中蛇葡萄素的含量。方法:采用RP-HPLC法测定,色谱柱为ZorbaxSB-C18不锈钢柱(250mm×4.6mm,5μm)。流动相为甲醇-水-磷酸(35∶65∶0.2),检测波长为292nm。结果:蛇葡萄素在0.104~0.936μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率100.5%。结论:本方法准确可靠,适合于霉茶中蛇葡萄素的含量测定。     

养心颗粒对易损斑块Rho/Rho激酶信号通路血清IL-1、MCP-1和AngⅡ表达的影响

目的观察养心颗粒对易损斑块Rho/Rho激酶信号通路血清白细胞介素-1(IL-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量的影响。方法随机将雄性家兔分为模型对照组、养心颗粒组和法舒地尔组,每组8只,并给予高脂饮食喂养8周,空白对照组则选用同系家兔8只,予普通喂养。2周药物治疗后通过ELISA法测定IL-1、MCP-1及AngⅡ的浓度,并测定斑块面积(PA)与管腔面积(LA)之比。结果与空白组比较,模型组颈总动脉PA/LA比值升高(P 0.05),IL-1、MCP-1、AngⅡ浓度均显著升高(P 0.05);与模型组比较,养心颗粒组和法舒地尔组颈总动脉PA/LA比值降低(P 0.05),IL-1、MCP-1、AngⅡ浓度明显降低(P 0.05)。经相关性分析,IL-1、MCP-1、AngⅡ表达水平两两呈正相关(P 0.05),相关系数(r)分别为0.549、0.493和0.747。结论养心颗粒可通过调控Rho/Rho激酶信号通路降低血清IL-1、MCP-1及AngⅡ的表达水平,这可能是其抑制炎症反应而实现稳定易损斑块的作用机制。     

木犀草素体外对H_1N_1感染A549作用的研究

目的:观察木犀草素体外对感染甲型流感病毒(H_1N_1)的人肺癌细胞株(A549细胞株)的效果,探讨木犀草素在体外环境中对H_1N_1感染A549细胞的作用。方法:采用细胞病变效应(CPE)预估木犀草素抗病毒活性指数,计算出最大无毒浓度(TC0)、半数毒性浓度(TC50);检测不同时间和作用方式时木犀草素的吸光度,找出木犀草素抗病毒最佳作用方式,并计算出半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI)。结果:木犀草素的半数中毒浓度为39.81μg·m L~(-1),最大无毒浓度为25.00μg·m L~(-1);浓度在12.50~25.00μg·m L~(-1),木犀草素作用48~60 h,对H_1N_1所致的细胞病变作用有明显的抑制作用。病毒感染后2 h加入25.00μg·m L~(-1)浓度的木犀草素,抗病毒有效率最高为(87.00±1.71)%。计算该条件下木犀草素半数抑制浓度为11.282μg·m L~(-1),治疗指数为3.528。结论:木犀草素在一定条件下具有抗H_1N_1的作用。     

不同中医证型维吾尔族溃疡性结肠炎患者血清趋化因子水平的研究

目的：探讨不同中医证型维吾尔族溃疡性结肠炎患者血清趋化因子白介素一8（IL一8）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平的变化与结肠组织过氧化物酶（MPO）的相关性,以及其临床意义,为临床辨证提供客观化指标。方法：采用ELISA法检测70例不同中医证型维吾尔族溃疡性结肠炎患者血清白介素-8（IL-8）及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平;结肠组织MPO含量采用生化方法检测,同时观察IL一8及MCP-水平与结肠组织MPO含量的关系。结果：不同中医证型维吾尔族溃疡性结肠炎患者IL-8及MCP-1水平,结肠组织MPO含量均高于正常对照（P〈O．05）;血清IL-8、MCP-1水平与患者MPO含量呈正相关（r=0．7535、0．8266、0．7638;P〈0．05）。结论：维吾尔族UC患者中趋化因子IL-8及MCP-1可能参与了溃疡性结肠炎炎症损伤过程,血清IL-87LMCP-1水平增高可以做为湿热内蕴证和气滞血瘀证的客观化指标。     

蛇葡萄素钠协同卡铂体外抑制人肺腺癌GLC-82细胞增值的作用

目的:考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞增值的抑制作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT法考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Caspase-3的表达。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠在浓度为12.5²00μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13200μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13¹00μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5100μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5⁵0μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞12 h后,Caspase-3表达上调,且有浓度依赖性。结论:蛇葡萄素钠单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠诱导细胞凋亡的机制之一可能是通过激活细胞内的Caspase-3,从而促进凋亡的发生。     

蛇葡萄素钠体外协同卡铂抗小鼠肺癌Lewis细胞的作用

目的:研究蛇葡萄素钠单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞的体外抗肿瘤作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT比色法测定蛇葡萄素钠单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪检测蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用诱导细胞凋亡作用。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠单用在12.5、25、50、100μg/ml浓度范围内对小鼠肺癌Lewis细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用;6.25~50μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂3.12~25μg/ml联合用药对卡铂抑制Lewis细胞的增殖作用具有协同效应;流式细胞仪结果表明,蛇葡萄素钠25、50、100μg/ml与卡铂25μg/ml联合应用时,凋亡率显著增高。结论:蛇葡萄素钠单用在一定的浓度范围内对Lewis细胞增殖具有浓度依赖性抑制作用,蛇葡萄素钠与卡铂合用可以增强卡铂的活性,有协同抑制作用,蛇葡萄素钠可能是通过诱导凋亡而发挥其抗肿瘤作用。     

短葶山麦冬多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的观察短葶山麦冬多糖(LMP)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响。方法分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞用不同质量浓度LMP(62.5、125、250、500μg/m L)共同培养,检测巨噬细胞吞噬中性红试验,趋化作用和分泌TNF-α、IL-6的功能。结果不同质量浓度的LMP能显著增强巨噬细胞吞噬能力和趋化作用,促进TNF-α、IL-6释放。结论 LMP能增强小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能。     

蛇葡萄素体内外对小鼠B16黑色素瘤侵袭和转移的抑制作用

目的 :研究蛇葡萄素对B16小鼠黑色素瘤体内外抗侵袭和转移的作用。方法 :B16细胞由尾静脉注入C5 7BL/ 6小鼠体内建立实验性肺转移模型 ,蛇葡萄素以 3个剂量从接种瘤细胞前一天腹腔给药 ,连续 18d ,于停药后第 2天观察肺转移瘤灶数。B16细胞经蛇葡萄素处理 3d ,用具有聚碳酸酯和重建基底膜 (Matrigel)的Tran swell小室侵袭模型 ,研究药物处理后细胞侵袭、趋化运动、粘附能力的改变。结果 :剂量为 15 0 ,200 ,250mg·kg^-1的蛇葡萄素可抑制小鼠肺转移瘤灶形成 ,与溶剂对照组比 ,抑制率分别为 30.97% ,40.58% ,61.16% (P<0.0 5)。经 20,40,80μmol·L^-1各浓度蛇葡萄素处理后 ,对B16细胞侵袭人工基底膜的抑制率分别为 36.06% ,59.58% ,79.09% (P<0 .01) ;对细胞的趋化运动抑制率分别为 51.59% ,56.51% ,66.75% (P<0.01) ;显著降低B16细胞与基质成分层粘连蛋白、纤维粘连蛋白及Matrigel的粘附作用。 结论 :蛇葡萄素具有抑制黑色素瘤的侵袭和转移的作用。     

RP-HPLC 法测定不同药用部位不同采收期藤茶中蛇葡萄素的含量

目的:运用RP-HPLC法测定不同采收期藤茶根、茎和叶中蛇葡萄素的含量。方法:使用ODS色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇-水-磷酸(25:75:0.1),流速1.0ml/min,检测波长289 nm。结果:藤茶叶中蛇葡萄素含量最高,茎次之,根中最低;4月至5月间采集的藤茶中蛇葡萄素含量最高。     

蛇葡萄素对人肺癌GLC-82裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:为了进一步研究蛇葡萄素体内抗肿瘤作用,我们进行了人肺癌GLC-82裸小鼠移植瘤的抑瘤实验研究.方法:人肺癌GLC-82 细胞接种于裸鼠腋窝建立移植模型.荷瘤BALB/C裸鼠随机分成6组,蛇葡萄素以3个剂量腹腔给药.观察肿瘤体积、相对肿瘤体积、瘤重、相对肿瘤增殖率以及肿瘤生长曲线,以此评价蛇葡萄素的抗瘤作用.结果:250mg/kg蛇葡萄素对裸鼠移植瘤的抑制率,二次实验结果分别为35.5%(P＜0.01)和37.1%(P＜0.01),相对肿瘤增殖率则分别为55.24%(P＜0.01)和57.71%(P＜0.05).结论:蛇葡萄素对人肺癌GLC-82裸鼠移植瘤具有显著的抑制作用.     

血清药理学方法研究蛇葡萄素抗B16黑色素瘤的作用

目的：研究蛇葡萄素对黑色素瘤的抑制作用。方法：以血清药理学方法考察不同剂量的蛇葡萄素含药血清对B16黑色素瘤细胞的抑制作用，分别用MTT法及流式细胞术进行评价。结果：0．420mmol／kg、0．560mmol／kg剂量组的C57BL／6小鼠含药血清能有效抑制黑色素瘤B16细胞，与空白血清中加入浓度相当的蛇葡萄素的抑制率相同；两个剂量组的含药血清使肿瘤细胞的分裂增殖指数分别降低了19．1％、21．7％。结论：蛇葡萄素在血药浓度达峰期对小鼠黑色素瘤B16细胞的抑制可能以原型物形式起作用，抑制细胞的DNA合成。     

In vitro effect of Derris scandens on normal lymphocyte proliferation and its activities on natural killer cells in normals and HIV-1 infected patients

We investigated the effect of Derris scandens hydroalcoholic extract on lymphocyte proliferation, natural killer (NK) cell activity and secretion of IL-2 and IL-4. Lymphocyte proliferative response of normal individuals was significantly increased at concentrations of 10 ng/ml, 100 ng/ml, 1 microg/ml and 5 microg/ml, whereas the response was significantly decreased at 100 microg/ml. D. scandens at the concentrations of 10 ng/ml, 100 ng/ml, 1 microg/ml and 10 microg/ml significantly enhanced the function of NK cells of normal individuals. The NK cell activity of HIV-infected individuals was significantly increased at a concentration of 10 microg/ml. Furthermore, the extract was shown to induce the IL-2 secretion from normal peripheral blood mononuclear cells (PBMC), whereas the IL-4 was not induced in the presence of the D. scandens extract. Our data suggested that the hydroalcoholic extract of D. scandens possesses in vitro immunostimulating activity on human immunocompetent and immunocompromised PBMC.     

Ampelopsin inhibits H₂O₂-induced apoptosis by ERK and Akt signaling pathways and up-regulation of heme oxygenase-1

Oxidative stress plays an important role in neurodegenerative disorders. Ampelopsin, a flavonoid abundant in Rattan tea (Ampelopsis grossedentata), is a potent antioxidant and its neuroprotective effect against H₂O₂‐induced apoptosis in PC12 cells is investigated here for the first time. It was found that treatment of cells with ampelopsin for 1 h significantly reduced the loss of vitality, LDH release and apoptosis and inhibited the formation of reactive oxygen species (ROS). Ampelopsin was able to prevent the activation of p38 induced by H₂O₂. In addition, up‐regulation of heme oxygenase‐1 (HO‐1) expression by ampelopsin was shown to be both dose‐ and time‐dependent. Mechanically, HO‐1 expression induced by ampelopsin was found to be due to activation of the ERK and Akt signaling pathways, because it was almost completely blocked by the specific inhibitors of ERK and Akt. These results suggest that ampelopsin increases cellular antioxidant defense through activation of the ERK and Akt signaling pathways, which induces HO‐1 expression and thereby protects PC12 cells from H₂O₂‐induced apoptosis. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

Herbal formula FBD extracts prevented brain injury and inflammation induced by cerebral ischemia-reperfusion

The aim of this work was to verify neuroprotective and anti-inflammatory properties of FBD, a herbal formula composed of Poria cocos, Atractylodes macrocephala and Angelica sinensis, in ICR mice subjected to repetitive 10 min of common carotid arteries occlusion followed 24 h reperfusion. Intragastrical pretreatment with supercritical carbon dioxide extract (FBD-CO(2), 37.5 mg/kg) twice daily for 3.5 d, significantly reduced Evans Blue influx, neuron specific enolase (NSE) efflux, brain infarction (all p<0.05), also inhibited polymorphonuclear leukocytes (PMNs) infiltration (p<0.001), suppressed secretion of tumor necrosis factor (TNF)-alpha in blood (p<0.05), interleukin (IL)-1beta and IL-8 in brain (both p<0.01), and down-regulated cerebral expression of phosphor-IkappaB-alpha and phosphor-nuclear factor kappa-B (NF-kappaB), whether coupled with aqueous extract (FBD-H(2)O, 150 mg/kg) or not. Moreover, FBD-CO(2) (0.1-10 microg/ml) inhibited 0.1 microM phorbol myristate acetate-evoked oxidative burst in rat PMNs, 20 ng/ml TNF-alpha-triggered PMNs adhesion to ECV304 endothelial cells, and PMNs neurotoxicity to PC12 neuron-like cells as well as NSE release (IC(50) 1.30, 0.98, 0.24 and 0.82 microg/ml, respectively). Our study demonstrated that FBD-CO(2) prevented brain ischemia/reperfusion injury, at least in part, by limiting PMNs infiltration and neurotoxicity mediated by TNF-alpha, IL-1beta and IL-8, via inhibition on NF-kappaB activation.     

Enhanced antifungal activity of ketoconazole by Euphorbia characias latex against Candida albicans

The in vitro suseptibility of Candida albicans to ketoconazole and Euphorbia characias latex alone or in combination was tested using the macrobroth dilution method. The MIC 80% of crude latex and ketoconazole are respectively 159 microg protein/ml and 0.3901 microg/ml. This method permits us to determine an affinity constant K(aff) for crude latex (0.015 microg(-1) protein ml) and ketoconazole (23.828 microg(-1) ml). The utilization of a mixture of latex at several concentrations (7.8-15.62-31.25-62.5 and 125 microg protein/ml) and ketoconazole indicates a synergistic effect between latex and ketoconazole. For latex concentrations of 31.25 and 62.5 microg protein/ml the MIC 80% of ketoconazole were inferior (0.194 and 0.183 microg/ml respectively) to that obtained with ketoconazole alone (0.390 microg/ml). A synergistic effect is therefore obtained between ketoconazole on the one hand and two concentrations of Euphorbia characias latex.