SHP-1和JAKs基因在成人急性髓系白血病患者中的异常表达及其相关性

 目的 研究SHP-1基因和JAK家族基因在成人急性髓系白血病（AML）患者中的表达及相关性,以探讨两者在AML发病机制中的作用。 方法 急性髓系白血病患者63例及健康志愿者19名（健康对照）为研究对象,分别应用FQ-PCR和RT PCR方法检测骨髓单个核细胞中SHP-1、 JAKs mRNA表达情况;并分析两者的相关性及其与预后的关系。 结果 SHP-1在AML患者表达水平明显低于缓解组和健康对照组(P＜0.01),JAK2、JAK3和TYK2表达水平明显高于缓解组和健康对照组 (P＜0.05),JAK1在初治AML中表达也增高但与CR和NC组相比差异无统计学意义（P＞0.05）;SHP 1和JAK1、JAK3在mRNA水 平负相关（P＜0.05）。 结论 SHP-1可能是白血病潜在的抑癌基因,AML细胞中SHP-1与JAKs mRNA表达呈负相关;SHP-1对JAKs基因的负调控作用并非只是通过去除JAKs磷酸化而阻断JAK/STAT路径,还可能在转录水平进行调节。     

SHP-1与SOCS3基因在成人急性白血病中 的表达及其与预后的关系

 目的 了解SHP-1基因和SOCS3基因在白血病细胞中的表达及其对预后的影响,为进一步阐明SHP-1和SOCS3基因在白血病发病中的作用机制打下基础。方法 用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）和RT-PCR方法分别对AL患者和13例正常对照的骨髓进行SHP-1、SOCS3 mRNA水平监测。结果 ①正常人SHP-1 mRNA均呈阳性表达,其表达水平为3.413±2.018,ALL患者SHP-1均为阴性表达;初治、复发AL组SHP-1表达水平明显低于正常对照组(P＜0.01),缓解后SHP-1 mRNA水平上升但仍低于正常对照(P＜0.01)。② 初治和复发AL患者SOCS3 mRNA表达水平均明显高于缓解组和正常对照组(P＜0.05);缓解患者SOCS3 mRNA与正常对照相比无统计学意义(P＞0.05)。③ SHP-1表达阳性组缓解率（76.4%）明显高于表达阴性组（47.3％）(P＜0.01)。结论 SHP-1和SOCS3均参与白血病发病,但发病机制不同。SHP-1与白血病的疗效预后有关。     

儿童急性白血病生存素和细胞周期素B1基因的表达

目的：探讨生存素、细胞周期素B1的表达与儿童急性白血病（AL）的关系。方法：采用RT—PCR法对初治或复发AL患儿42例和完全缓解AL（ALCR）患儿13例及非恶性疾病患儿15例骨髓单个核细胞进行基因生存素、细胞周期素B1表达的检测。结果：初治和复发AL组生存素mRNA表达水平分别为0．472和0．810；细胞周期素B1mRNA为0．609和0．739，均高于ALCR组和对照组（均为0）（P〈0．01）；复发AL组生存素mRNA表达水平高于初治组，差异有统计学意义（P=0．025）。生存素基因的表达与白细胞总数及临床分型有关，而与性别、年龄、免疫分型无明显相关性；细胞周期素B1表达与性别、年龄、免疫分型、白细胞总数及临床分型无明显相关关系。儿童AL中生存素与细胞周期素B1的表达呈正相关。生存素mRNA表达水平高者缓解率低。结论：儿童AL中存在生存素、细胞周期素B1异常表达，两者表达存在相关性。生存素是AL复发的高危因素；AL生存素高表达者可以降低AL的化疗敏感性，生存素水平对AL有判断疗效和预后的价值。     

SHP-1与SOCS3基因在成人急性白血病中的表达及其与预后的关系

目的 了解SHP-1基因和SOCS3基因在白血病细胞中的表达及其对预后的影响,为进一步阐明SHP-1和SOCS3基因在白血病发病中的作用机制打下基础.方法 用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR方法分别对AL患者和13例正常对照的骨髓进行SHP-1、SOCS3 mRNA水平监测.结果 ①正常人SHP-1 mRNA均呈阳性表达,其表达水平为3.413±2.018,ALL患者SHP-1均为阴性表达;初治、复发AL组SHP-1表达水平明显低于正常对照组(P<0.01),缓解后SHP-1 mRNA水平上升但仍低于正常时照(P<0.01).②初治和复发AL患者SOCS3 mRNA表达水平均明显高于缓解组和正常对照组(P<0.05);缓解患者SOCS3 mRNA与正常对照相比无统计学意义(P>0.05).③SHP-1表达阳性组缓解率(76.4%)明显高于表达阴性组(47.3%)(P<0.01).结论 SHP-1和SOCS3均参与白血病发病,但发病机制不同.SHP-1与白血病的疗效预后有关.     

X染色体相关凋亡抑制蛋白在86例急性白血病中的表达

[目的]探讨急性白血病（AL）患者中X染色体相关凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的临床意义。[方法]86例AL患者,其巾初诊未治患者56例,包括44例AML和12例ALL,治疗后完全缓解期（CR）患者22例,缓解后复发患者8例,应用RT～PCR方法检测骨髓细胞中XIAP的mRNA表达。对照组为20名门诊正常人。[结果]比较20例对照组、56例AL初治组、22例AL缓解组和8例AL复发组的XIAPmRNA平均表达水平,差异具有显著性（F=58．77,P〈0．01）;对照组的XIAPmRNA平均表达水平为0．29±0．13,明显低于AL初治患者（0．98±0．30）（P〈0．01）和缓解组（0．45±0．17）（P〈0．05）;缓解组的平均表达水平明显低于初治组（P〈0．01）;复发组的XIAPmRNA平均表达水平最高（1.23±0.30）．不仅明显高于对照组和缓解组（P〈0．01）,也高于初治组（P〈0．05）;XIAP mRNA表达在初治AML和ALL组比较无显著性差异（P=0.21）。[结论]XIAP在急性白血病发病和病情进展中起重要作用,XIAP高表达可能是AL患者预后不良的高危因素之一．     

血清VEGF、bFGF与乳腺癌生物学行为的关系

目的：探讨VEGF、bFGF与乳腺癌的生物学行为的关系,复发转移患者血清VEGF、bFGF的表达水平与化疗疗效的关系。方法：应用ABC—ELISA方法检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达情况。结果：术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF表达水平明显高于健康体检者、乳腺腺瘤患者（P〈0．05）,也明显高于同组患者术后血清VEGF、bFGF表达水平（P〈0．05）。术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF的表达水平与原发肿瘤的大小、TNM分期、淋巴结转移有关。术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF与bFGF的表达水平呈正相关（r=0．210,P〈0．05）。乳腺癌复发转移组化疗前血清VEGF、bF—GF的表达水平比健康体检者及无病生存组明显增高（P〈0．05）。乳腺癌复发转移组化疗后CR＋PR组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前明显减低（P〈0．05）;化疗后NC＋PD组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前略高,但没有显著性差异（P〉0．05）。乳腺癌复发转移组化疗后CR＋PR组血清VEGF、bFGF表达水平比NC＋PD组明显降低（P〈0．05）。结论：乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平与乳腺癌生物学行为有关,而且与化疗疗效有关,提示通过检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平可能对乳腺癌的诊断、客观预测肿瘤的复发转移、选择合理有效的治疗方案有一定的参考价值。     

BRCA1基因在白血病中的表达及其临床意义

 【摘要】　目的　研究白血病患者的乳腺癌易感基因1（BRCA1）的表达水平及临床意义。方法　采用荧光定量反转录-聚合酶链（RT-PCR）方法检测急性淋巴细胞白血病（ALL-L2）患者18例（初治13例,复发5例）、慢性粒细胞白血病（CML）慢性期患者20例、健康对照15名中的BRCA1的表达。结果　初治ALL患者13例中,BRCA1 mRNA表达减低或缺失6例（46.1 %）,初治ALL组表达水平低于健康对照组（P＜0.05）;ALL完全缓解9例中,BRCA1 mRNA表达减低3例（33.3 %）,ALL完全缓解患者表达水平高于初治ALL组（P＜0.05）,与健康对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;ALL复发组5例,BRCA1 mRNA表达全部减低或缺失,ALL复发组表达水平低于健康对照组（P＜0.05）,与初治ALL组差异无统计学意义（P＞0.05）。CML患者BRCA1 mRNA表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论　BRCA1在不同类型白血病中的表达不同,提示其与白血病的预后密切相关,并可指导临床诊断和治疗。     

c-FLIP mRNA 在恶性血液病中的表达及其意义

目的：探讨C—FLIPmRNA在恶性血液病中的表达及其意义。方法：用采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测42例恶性血液病骨髓单个核细胞C—FLIPmRNA的表达。包括急性白血病（AL）27例，其中初治21例及复发和完全缓解（CR）后AL各3例、慢性粒细胞性白血病（CML）5例、慢性中性粒细胞性白血病（CNL）1例和慢性淋巴细胞性白血病（CLL）4例，多发性骨髓瘤（MM）3例，骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多2型（MDS—RAEB-2）2例。结果：在初治和复发AL、初治CML、CNL、CLL、MDS—RAEB-2、MM中C—FLIPmRNA均呈异常增高表达，初治AL中c—FLIPmRNA的表达与复发AL比较差异无统计学意义（P〉0．05），其FAB各亚型之间的表达差异亦无统计学意义（P〉0．05）。初治AL与CLLC—FLIPmRNA的表达显著高于初治CML（P〈0．001），但初治AL与初治CLLE魄磋淠呒统计学意义（P〉0．05）。MDS—RAEB-2、MMC—FLIPmRNA的表达与AL的cFLIPmRNA表达均无统计学差异（P〉0．05）。对照组和CR后AL均为阴性表达。C—FLIPmRNA的表达与初治AL患者年龄、性别、初诊白细胞数、LDH以及核型、免疫表型无关。初治未达CR的AL患者其c—FLIPmRNA表达高于CR者，但并无统计学意义（尸〉0．05）。结论：恶性血液病C—FLIPmRNA的表达异常增高。C—FLIPmRNA能反映恶性血液病骨髓细胞的凋亡抑制情况，并与恶性血液病的类型、疾病状态、临床疗效和预后密切相关。     

RUNX1 异构体在急性白血病中的表达及临床意义

［摘要］ 目的:探讨RUNX1 异构体的表达与临床疗效、疾病预后的关系,以期为急性白血病的个体化治疗、预后判断及微小残留病（minimal residual disease,MRD）的监测提供有价值的实验依据。方法: 选择2012 年4 月至2013 年4 月于广东医学院（现为广东医科大学）附属医院血液内科住院的急性白血病初治患者88 例、复发患者10 例为研究对象。采用qPCR法检测急性白血病初治、复发患者以及对照组患者（非恶性白血病）RUNX1 异构体RUNX1a 和RUNX1b/c mRNA的表达水平,并追踪检测同一患者化疗前后RUNX1a 和RUNX1b/c mRNA表达水平的变化。结果: (1)AML初治组、复发组以及ALL初治组RUNX1a mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),AML初治组RUNX1a mRNA的表达水平较ALL初治组升高(P<0.05)。(2)AML及ALL患者初治时RUNX1a 和RUNX1b/ c mRNA 的表达水平较化疗后完全缓解（complete remission,CR）时升高(P<0.05)。(3)比较初诊时的RUNX1a 和RUNX1b/c mRNA表达水平,半年内死亡与存活患者、首疗程化疗后CR组与NCR组、初诊时高白细胞组与非高白细胞组均无显著差异(P>0.05);AML-ETO 融合基因阳性患者RUNX1a 表达水平较阴性患者升高(P<0.05)。(4)急性白血病患者RUNX1a 和RUNX1b/c mRNA的表达水平随着化疗呈递减趋势,复发时又明显增高甚至超过初治状态。结论: RUNX1a 异构体参与了急性白血病的发病,并且与AML的复发相关;RUNX1a 和RUNX1b/c mRNA表达水平与临床疗效相关,与疾病预后无关,可作为疾病疗效判断的指标;动态监测RUNX1a 和RUNX1b/c 异构体的表达水平可以作为化疗后MRD监测的有效指标,用于评估疗效、早期识别复发风险。     

急性白血病患者bcl-x基因表达的初步探讨

 目的 探讨凋亡调控基因bcl-x在急性白血病（AL）患者中的表达状态及其临床意义。方法 应用半定量反转录聚合酶链反应技术检测bcl-x（bcl-xL、bcl-xs）在44例AL患者AL细胞中mRNA水平的表达。结果 抑凋亡基因bcl-xL在AL初治组中的表达比完全缓解和正常对照组明显增高（P＜0.01）,同时在复发患者中的平均表达水平是初治患者的1.96倍（P＜0.01）。促凋亡基因bcl-xs在各组间的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。bcl-xL基因高度表达（bcl-xL≥0.50）在复发组的发生率为66.7 %,比初治组（20.7 %）明显增高（P＜0.01）。bcl-xL基因高度表达患者临床治疗无效率为86.7 %,与非高度表达组（19.2 %）比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 bcl-xL的高度表达可作为AL患者不良预后的监测指标;bcl-xL的高表达可以降低AL的化疗敏感性而且是AL复发的高危因素,AL的发病可能与抑凋亡基因bcl-xL的高表达有关。     

急性白血病Survivin和B7-1基因的表达及临床意义

 目的　研究Survivin和B7-1基因在急性白血病（AL）患者中的表达及临床意义。方法　应用RT-PCR检测64例AL患者Survivin和B7-1 mRNA的表达水平，14例健康人为对照，K562、HL-60细胞株为阳性对照。结果　Survivin的阳性表达率高于健康对照，且在初治AL中的表达水平较健康对照组明显升高，治疗缓解后Survivin表达下降，复发时表达水平升高；同时患者B7-1基因的表达率于对照组没有差异，但半定量后的表达水平明显较正常低，且初发和缓解患者表达量差异无统计学意义；在初治AL患者中Survivin阳性患者缓解率低于表达阴性的患者。结论　Survivin和B7-1基因表达的紊乱可能在AL的发病中起着重要作用，并与AL复发和预后相关。     

急性白血病肿瘤抑制基因1表达及其临床意义

 【摘要】 目的 探讨人类急性白血病（AL）细胞中肿瘤抑制基因1TIG1的表达及与预后的关系。方法　应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-QT-PCR）的方法,检测75例AL者的TIG1表达情况,并进一步观察其与缓解率的关系。20名健康人作对照。结果　TIG1在健康对照组中的表达水平高（0.0609±0.0281）,而在初治AL中的表达水平明显减低（0.0057±0.0035）,两组比较差异有统计学意义（U＝-6.321,P＝0.000）;缓解组患者的表达水平（0.0409±0.0244）也较健康对照减低（U＝-2.582,P＝0.01）,且缓解组患者的表达水平也明显高于初治白血病组（U＝-6.366,P＝0.000）;TIG1高表达患者的缓解率（83.3 %）明显高于低表达的患者（56.3 %）（χ2＝4.563,P＝0.033）。结论　TIG1基因表达的减少与AL的发病有关,而且低表达患者的预后不佳。     

PI3K、Akt mRNA在白血病中的表达及其临床意义

 目的　分析成年人各型急性白血病（AL）和慢性粒细胞白血病（CML）中PI3K及其下游信号分子Akt mRNA的表达情况及其与白血病诊断、治疗及预后的关系。方法　研究对象分为AL初治组63例、缓解组10例、复发组7例,CML组14例,对照组11例。用半定量反转录聚合酶链反应技术检测各组PI3K、Akt的mRNA表达水平。结果　PI3K在AL初治组、复发组、CML组表达水平高于对照组,而且CML组高于AL缓解组;Akt在CML组表达高于AL缓解组、对照组,复发组高于对照组。AL初治组PI3K、Akt mRNA表达阳性者缓解率低,阴性者缓解率高。结论　PI3K／Akt信号转导通路在转录水平参与了白血病的发生、发展;该通路成分阳性表达的AL患者缓解率低。     

复发/难治急性髓系白血病患者P-糖蛋白的表达及功能分析

 目的 研究复发／难治急性髓性白血病（AML）患者P-糖蛋白表达及其功能。方法 用免疫组化方法检测CD34表达,RT-PCR方法检测P-gp的表达,用流式细胞术检测P-gp的功能。结果 CD34表达与P-gp表达、功能呈正相关（r =0.621,P＜0.001;r =0.496,P＜0.001）,P-gp表达与功能呈正相关（r = 0.574,P＜0.01）;复发／难治组CD34阳性率（66.7 %）高于初治组（32.6 %）（P＜0.05）;复发／难治组P-gp功能阳性率（66.7 %）高于初治组（25.6 %）（P＜0.01）。结论 CD34表达、P-gp表达和P-gp功能三者间呈正相关;复发／难治AL组 CD34阳性率、P-gp功能阳性率高于初治组;P-gp功能的检测更具有临床指导意义。     

活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶基因在白血病中的表达

目的：探讨活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶（AID）在急性白血病（AL）、慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）和急变期（CML-BC）患者及白血病细胞株中的表达特点。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测89例初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）患者、79例初诊急性髓系白血病（AML）患者、5例 CML-BC 患者、5例 CML-CP 患者和白血病细胞株 NB4、THP-1、KG-1、Raji、K562中 AID mRNA 的表达,以16名健康供者骨髓单个核细胞作为对照。结果89例 ALL 患者和79例 AML 患者 AID mRNA的中位表达水平分别为3.785（0.006～7463.175）、1.812（0.005～69.107）,健康对照组 AID mRNA 的表达水平为1.483（0.146～4.707）。 ALL、B-ALL、伯基特型白血病、Raji 细胞株和 M4的 AID mRNA 表达水平较健康对照组升高,差异均有统计学意义（均 P＜0.05）,而 M3、NB4和 KG-1细胞株的 AID mRNA 表达水平较健康对照组下降,差异均有统计学意义（均 P＜0.05）。 K562细胞株的 AID mRNA 表达水平较 CML-CP患者升高,差异有统计学意义（P＜0.001）。 CML-BC、CML 淋系急性变（CML-LBC）和 CML 髓系急性变（CML-MBC）患者的 AID mRNA 表达水平也高于 CML-CP 患者。结论 AID 在 B-ALL、伯基特型白血病、M4中呈高水平,在 M3和 KG-1细胞株中呈低表达,在 CML-BC 中出现表达水平的显著升高。     

ＧＦＩ１Ｂ在急性白血病细胞中的表达及临床意义

目的　观察急性白血病（ＡＬ）细胞的独立生长因子１Ｂ（ＧＦＩ１Ｂ）的表达水平及临床意义。方法　采用实时荧光定量ＰＣＲ（ＲＱ-ＰＣＲ）检测急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者４８例、急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者７例和正常对照１５例中ＧＦＩ１Ｂ的表达。结果　（１）在ＡＭＬ组,初治ＡＭＬ患者ＧＦＩ１Ｂ平均表达水平较正常对照组明显升高,差异有显著性（Ｐ＜０.０５）,经治疗获得完全缓解的患者ＧＦＩ１Ｂ平均表达水平较治疗前明显下降（Ｐ＜０.０５）,病情复发的患者ＧＦＩ１Ｂ平均表达水平再度升高;（２）在初治ＡＭＬ的Ｍ１～Ｍ７各亚型间ＧＦＩ１Ｂ平均表达水平有差别,Ｍ１～Ｍ５亚型ＧＦＩ１Ｂ表达水平略高于正常对照组,但差异均无显著性（Ｐ＞０.０５）,在Ｍ６和Ｍ７亚型ＧＦＩ１Ｂ平均表达水平均明显高于正常对照组,差异均有显著性（Ｐ＜０.０５）;（３）在ＡＬＬ组,初治ＡＬＬ患者、ＡＬＬ复发患者以及完全缓解的患者ＧＦＩ１Ｂ平均表达水平与正常对照组比较均无明显改变,差异均无显著性（Ｐ＞０.０５）。结论　ＧＦＩ１Ｂ在ＡＬ患者中有不同的表达,并提示其与ＡＭＬ,尤其是Ｍ６和Ｍ７亚型的发病及病情变化密切相关。     

急性白血病患者MUC1与WT1基因表达的临床意义

目的：探讨MUC1基因及WT1基因在急性白血病的表达及临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，检测54例初发或复发急性白血病（AL）患者MUC1基因以及WT1基因的表达．观察MUC1基因及WT1基因的表达与急性白血病患者疗效关系。结果：54例初治或复发AL中MUC1基因表达阳性率50.0％．WT1基因表达阳性率74．1％。MUC1基因阴性表达的初治非M3型AL 19例治疗完全缓解率达94．7％，MUC1阳性表达的初治非M3型AL 18例治疗完全缓解率55.6％；两组比较有显著性差异（P〈0.05）。WT1基因表达阳性与否与化疗疗效无关。结论：MUC1和WT1基因在急性白血病中有一定的表达，MUC1基因阳性表达可作为急性白血病患者预后不良的一项分子生物学指标。     

急性白血病患者多药耐药基因mdrl的表达及其临床意义

目的　探讨白血病细胞的抗药性与化疗效果及预后的关系。方法　采用逆转录 -聚合酶链反应 ( RT- PCR)的方法检测了 85例不同时期急性白血病 ( AL)患者多药耐药基因 mdrl m RNA的表达 ,同时检测了 2 0例正常人作为对照。结果　初治组 mdrl的阳性率为 4 4 .7% ,mdrl 与 mdrl-患者的完全缓解 ( CR)率分别为 2 3.9%和 88.5% ( P<0 .0 0 5) ,复发及难治组患者 mdrl的阳性率明显高于CR组 ( P<0 .0 0 1) ,复发及难治组 mdrl m RNA的表达水平也高于 CR组 ( P<0 .0 0 1)。CR患者 mdrlm RNA的表达水平逐渐升高可导致临床复发。正常人和长期生存患者 mdrl的阳性率很低。另外发现mdrl的表达与法、美、英协作组 ( FAB)分型有关。结论　mdrl的表达与 AL的化疗效果及预后密切相关 ,它是 AL患者一个重要的不利预后因素。