缬沙坦对压力超负荷下兔左室心肌TNF-α表达及胶原重构的影响

目的 :观察缬沙坦 （Valsartan）对慢性压力超负荷下左室心肌 TNF-α表达、胶原重构及心功能的影响。方法 :家兔 3 0只随机分为假手术组、腹主动脉次全结扎组 （简称结扎组 ）、缬沙坦干预结扎组 （简称干预组 ） ,每组 10只。术后 12周进行血流动力学检查并取左室心肌行 VG染色及免疫组化染色分别观察胶原容积百分比 （CVF）及TNF-α表达情况。结果 :结扎组与假手术组比较 ,TNF-α表达显著增强 （P<0 .0 1） ,左室质量 /体质量 （L VW/BW）、左室舒张末压 （L VEDP）、含小血管视野的 CVF（CVF-V）及不含小血管视野的 CVF（CVF-NV）均显著升高 （均 P<0 .0 1） ;缬沙坦干预组与结扎组比较 ,TNF-α表达显著减弱 （P<0 .0 1） ,L VW/BW、L VEDP、CVF-V,CVF-NV显著降低 （均 P<0 .0 1）。结论 :缬沙坦可抑制压力负荷下心室肌 TNF-α的过度表达并减轻心室肌的胶原增生、心室重构及心功能的损害     

白细胞介素-10对急性心肌梗死后细胞外基质重构影响的实验研究

目的 观察白细胞介素-10(IL-10)对大鼠急性心肌梗死后心肌基质金属蛋白酶(MMP)-2、9,金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1表达及胶原代谢的作用,探讨其对急性心肌梗死后心肌基质重构的影响.方法 18只大鼠随机分为假手术组、MI/AAV2转染组作为对照和MI/AAV2-IL-10转染组,每组6只.结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死动物模型,同时应用基因重组2型腺相关病毒(AAV-2)携带IL-10基因转染心肌组织.RT-PCR和ELISA观察心肌IL-10 mRNA和蛋白的表达.逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法、明胶酶谱、免疫组化检测转染后心肌组织表达MMP-2、9,TIMP-1,Ⅰ、Ⅲ型胶原水平的变化.结果 心肌梗死5 d后,MI/AAV2-IL-10组检测到IL-10 mRNA和蛋白的表达;MI/AAV2组较假手术组心肌MMP-2、9,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达明显升高;而MI/AAV2-IL-10组较MI/AAV2组梗死心肌各部位MMP-2、9表达减少,TIMP-1表达升高,其中,梗死边缘区的MMP-2表达降低14.6%(P＜0.01),MMP-9降低24.7%(P＜0.01),TIMP-1升高73.1%(P＜0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原表达分别下降了47.6%(P＜0.01)、23.6%(P＜0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原比值下降.结论 IL-10通过对MMP/TIMP的作用,改善大鼠急性心肌梗死后心肌胶原沉积和组织重构.     

骨髓干细胞移植通过基质金属蛋白酶及其抑制剂降低大鼠缺血性心力衰竭心室重构

目的探讨骨髓干细胞通过调节基质金属蛋白酶2/基质金属蛋白酶抑制剂1(MMP2/TIMP1)系统改善急性心肌梗死后心力衰竭心室重构。方法结扎雌性 SD 大鼠左冠状动脉制作急性心肌梗死模型。4周后随机分为2组:移植组大鼠7只,移植雄性 SD 大鼠来源的骨髓干细胞(5×10~6)到梗死后瘢痕区。对照组大鼠7只,移植等体积的 PBS 到瘢痕心肌。通过 HE 染色和 Masson 染色评价左室形态。免疫组织化学分析心肌 MMP2和 TIMP1和瘢痕区Ⅰ、Ⅲ型胶原表达情况。经Western 杂交检测 MMP2和 TIMP1蛋白变化。结果部分骨髓干细胞在移植后21天呈纤维母细胞样生长。移植后早期有炎症细胞聚集在瘢痕区,移植后7天炎症细胞减少。与对照组相比,移植组大鼠左室射血分数和左室短轴缩短率提高[(63.43±3.97)%与(36.20±3.99)%,(31.71±1.98)%与(18.00±2.07)%,P<0.05],左室压力下降最大值(dp/dt_(min))降低[(-4756.24±270.00)mm Hg/s(1 mm Hg=0.133 kPa)与(-2789.53±624.13)mm Hg/s,P<0.05],左室厚度率增加[(76.34±2.66)%与(64.37±2.36)%,P<0.05],梗死区面积缩小[(36.19±0.83)%与(42.12±1.88)%,P<0.05]。移植组大鼠瘢痕区Ⅰ型胶原表达升高,Ⅲ型胶原降低;心肌 MMP2蛋白水平降低而TIMP1水平升高。结论骨髓干细胞移植通过 MMP2/TIMP1导致胶原网络的动态变化,从而改善急性缺血后衰竭心脏的左室重构。     

基质金属蛋白酶在心肌肥厚大鼠中的作用及强力霉素的干预效果

目的:观察心肌肥厚大鼠模型中基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9及其抑制剂(TIMP-1)的表达及强力霉素干预后对其影响。方法:24只大鼠随机分为对照组(A组,只给予0.9%氯化钠溶液腹腔注射);造模组(B组)和药物干预组(C组)均用去甲肾上腺素1.06mg/kg腹腔注射,bid,注射15d,建立大鼠心肌肥厚模型,C组造模同时给予强力霉素10mg/kg腹腔注射,qd,给药15d。全部动物于给药后16d处死测定全心质量指数、左室质量指数、心肌胶原含量、心肌组织MMP-2,MMP-9,TIMP-1、心肌胶原容积分数(CVF)。结果:与A组比较,B组全心质量指数、左室质量指数、MMP-2、MMP-9阳性表达率、心肌胶原含量及CVF均明显增加(P<0.05),TIMP-1阳性表达率明显降低(P<0.05)。与B组比较,C组全心质量指数、左室质量指数、MMP-2、MMP-9阳性表达率、心肌胶原含量及CVF均明显降低(P<0.05),TIMP-1阳性表达率增加(P<0.05)。结论:去甲肾上腺素诱导的心肌肥厚大鼠MMPs/TIMPs系统平衡破坏,使基质胶原降解与合成平衡破坏,从而导致心室重构。强力霉素可通过抑制MMP来逆转心室重构。     

心肌梗死大鼠非梗死区间质纤维化及机制探讨

目的:探讨心肌梗死后不同阶段非梗死区心肌胶原的变化及其发生机制。方法:雌性Wistar大鼠,通过结扎左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型。分为心肌梗死组(最终存活32只)和假手术组(最终存活47只),于术后24h、1周、2周及4周随机从两组中各取10~12只大鼠,分别行病理组织学、心肌胶原容积密度分数(CVF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(ALd)水平的分析,以及Ⅰ型胶原(col-1)及Ⅲ型胶原(col-3)的信使核糖核酸(mRNA)检测。结果:大鼠梗死范围为24%~33%。心肌组织Messon染色显示,假手术组间质只可见散在亮绿色胶原;术后24h~1周,心肌梗死组间质亮绿色胶原与假手术组基本相似;术后2~4周最明显。肿瘤坏死因子-α的表达在梗死后1~4周显著增强。心肌血管紧张素Ⅱ水平术后1~4周,心肌梗死组均高于假手术组,有显著性差异(P<0.05~0.001)。心肌醛固酮含量术后2~4周,心肌梗死组也明显于高假手术组,有显著性差异(P<0.05~0.001)。Ⅰ型胶原mRNA水平术后2~4周心肌梗死组明显高于假手术组;Ⅲ型胶原mRNA水平术后1~4周心肌梗死组明显高于假手术组(P均<0.05)。基质金属蛋白酶-9表达无变化。结论:①大鼠心肌梗死2周后非梗死区出现明显间质纤维化。②非梗死区间质纤维化可能与局部肾素血管紧张素醛固酮系统激活后增加血管紧张素Ⅱ水平及肿瘤坏死因子-α上调有关。③大鼠心肌梗死后4周内非梗死区基质金属蛋白酶-9表达无明显变化。     

MMP-1、TIMP-1在病毒性心肌炎小鼠心肌胶原重构中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶鄄1(MMP鄄1)、金属蛋白酶组织抑制因子鄄1(TIMP鄄1)在心肌炎小鼠心肌胶原重构中的作用。方法用VG染色和图像分析、原位杂交方法观察病毒性心肌炎小鼠及同龄的对照小鼠各时期心肌组织胶原改变及MMP鄄1mRNA、TIMP鄄1mRNA的表达。结果与对照组比较,感染后第14天心肌组织胶原增加不明显,感染后第28天心肌组织血管周围胶原面积(PVCA)显著增加(P<0.001),感染后第56天PVCA及心肌胶原容积分数(CVF)均显著增加(P<0.001)。感染后第7天心肌MMP鄄1mRNA呈现一过性表达;感染后第7天可见TIMP鄄1mRNA表达,第14～21天最为明显,此后减弱,直到第56天。结论TIMP鄄1mRNA表达上调可能在病毒性心肌炎心肌胶原重构中起着重要作用。     

中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨中药通心络超微粉对糖尿病(DM)大鼠心肌纤维化的影响。方法制备大鼠DM模型并给予通心络灌胃,12 w后光镜观察病理变化检测心肌胶原容积分数(CVF),免疫组化、W estern印迹技术检测转化生长因子(TGF)-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1蛋白表达及含量。结果与正常对照(NC)组相比,DM组CVF值明显增大,TGF-β1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达及含量均明显升高,MMP-9/TIMP-1比值降低,TXL组上述异常均明显减轻。结论 TGF-β1、MMP-9及TIMP-1三者平衡失调可能是使DM心肌纤维化发生的机制之一,中药通心络可通过调节三者之间的平衡,有效改善DM心肌纤维化。     

N-乙酰半胱氨酸对高血压大鼠心脏重构的影响

目的探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对高血压大鼠心脏重构的影响及其作用机理。方法结扎SD大鼠腹主动脉造成高血压模型,以NAC(75mg/d)干预4周,测大鼠超声心动图、颈动脉血压、左室质量,观察心脏组织谷胱甘肽及基质金属蛋白酶2、9的分布,并观察心脏组织胶原含量的变化。结果与手术组相比,试验组大鼠收缩压明显降低[(161±6)vs(198±10)mmHg,P<0.05],左室收缩功能明显改善[EF(77.2±6.4)%vs(90.6±2.7)%,P<0.05],谷胱甘肽在心肌组织中的含量显著增加,而左室质量及基质金属蛋白酶在心肌组织中的分布均有显著降低,心肌胶原含量明显减少。结论NAC通过增加心肌组织还原型谷胱甘肽含量改善心肌组织氧化还原状态,从而减缓高血压大鼠心脏的进一步重构。     

基质金属蛋白酶及抑制剂在心肌梗死后心室重构中的作用

目的　研究大鼠心肌梗死后外源性基质金属蛋白酶抑制剂 (多西环素 ,Doxycycline)在心室重构中的作用。方法　 70只SD大鼠随机分为对照组 (10只 )、手术对照组 (9只 )、心肌梗死后 1天组 (10只 )、心肌梗死后 1周组 (10只 )、心肌梗死后 2周组 (8只 )、心肌梗死后 4周组 (7只 )、治疗 2周组 (8只 )和治疗 4周组 (8只 ) ,采用免疫组织化学、酶谱法、免疫印迹 (WesternBlotting)、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和AcusonSequoia 5 12超声心动图仪分别测定胶原含量 ,Ⅰ Ⅲ胶原比例、基质金属蛋白酶 2 ,9(MMP 2 ,9)蛋白和mRNA的变化规律及心功能。结果　多西环素治疗后 ,胶原含量明显减少 ,Ⅰ Ⅲ胶原比例下降得以改善 (P <0 .0 5 ) ,MMP 2 ,9蛋白和mRNA在心肌梗死后活性减少 ,基质金属蛋白酶组织抑制剂 1蛋白含量和mRNA转录无明显变化 ,治疗组心功能在术后 4周得以改善。结论　多西环素治疗后MMP 2 ,9的mRNA转录减少 ,MMP 2 ,9活性降低 ,胶原含量减少 ,Ⅰ Ⅲ胶原比例恢复 ,这些影响可能是其改善心肌梗死后心室重构的机制之一。     

前列地尔对慢性心衰大鼠心肌基质金属蛋白酶表达及纤维化的影响

目的探讨前列地尔对慢性心衰大鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及心肌纤维化的影响。方法 70只雄性SD大鼠随机分成假手术组和模型组。模型制备采用腹主动脉缩窄法,4周后模型组大鼠死亡7只。根据前列地尔给药浓度,将存活的51只模型大鼠随机分为未治疗组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,给药2周。Masson染色于光镜下观察心肌间质胶原纤维沉积情况,测定胶原容积分数(CVF)、羟脯氨酸(HYP)水平及胶原总含量。实时荧光定量PCR检测各组心肌组织MMP-2、MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱法检测其活性变化。结果低、中、高剂量组大鼠心肌CVF、HYP水平及胶原总含量明显低于未治疗组(P0.05或P0.01)。与未治疗组比较,低、中、高剂量组大鼠心肌MMP-2、MMP-9 mRNA表达和活性水平均下调(P0.05或P0.01),低、中剂量组间MMP-2、MMP-9 mRNA表达无统计学差异(P0.05),高剂量组MMP-2、MMP-9 mRNA表达明显低于低、中剂量组,差异有统计学意义(P0.05);随前列地尔剂量增加,低、中、高剂量组间MMP-2、MMP-9活性水平逐渐下降,三组间差异有统计学意义(P0.05)。前列地尔剂量与大鼠心肌CVF、HYP水平、胶原总含量、MMP-2和MMP-9 mRNA表达及活性水平均存在负相关(P0.05或P0.01)。结论前列地尔可能通过抑制基质金属蛋白酶的表达及活性而减轻心肌纤维化,限制慢性心衰大鼠心室重塑和心衰进展,改善慢性心衰的预后。     

Induction of matrix metalloproteinases (MMP3, MMP12 and MMP13) expression in the microglia by amyloid-beta stimulation via the PI3K/Akt pathway

Alzheimer's disease is characterized by the presence of senile plaques in the brain composed primarily of amyloid-beta peptide. Microglia have been reported to surround these Abeta plaques, which have opposite roles, provoking a microglia-mediated inflammatory response that contributes to neuronal cell loss or the removal of Abeta and damaged neurons. We herein analyzed the process of expression of Matrix metalloproteinases induced by Abeta stimulation. We found that Abeta1-42 induces a high level of MMP3, MMP12 and MMP13 in the microglia. The signal transduction pathway for the expression of these MMPs mRNA induced by Abeta1-42 depends on PI3K/Akt.     

MMP2和MMP9在非小细胞肺癌组织中的表达

目的研究肺癌和正常肺组织中基质金属蛋白酶MMP2和MMP9的表达.方法采用免疫组织化学方法检测31例非小细胞肺癌(NSCLC)组织标本和10例正常肺组织MMP2和MMP9的表达.结果 NSCLC者MMP2表达阳性19例(61.3%),MMP9表达阳性26例(83.9%).正常肺标本MMP2和MMP9表达均为阴性.NSCLC与正常肺标本比较差异均有显著意义(P《0.05).结论在NSCLC中,高表达的MMP2和MMP9均是良好的肿瘤标记物,MMP9阳性率比MMP2更高,因此MMP9的检测具有更大的临床意义.     

高糖对系膜细胞金属蛋白酶表达的影响及肝素的干预作用

目的:研究高糖对正常人类系膜细胞(NHMc)增殖及金属蛋白酶2(MMP2)和金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响及肝素对其的干预作用.方法:NHMC在含和(或)不含肝素的高糖培养基中培养,以正常糖培养基作对照.采用WST-1法测定NHMC增殖状况;用Western Blot技术分析MMP2、MMP9表达情况.结果:高糖组NHMC增殖明显高于对照组,二组间有显著性差异(P＜0.05).用肝素干预后,高糖组肝素浓度为50μg/ml时,NHMC增殖开始受到抑制,且随着肝素浓度递增,NHMC增殖抑制更明显(肝素50～400μg/ml浓度组与未加肝素组比较,均P＜0.05或P＜0.01).而对照组肝素浓度为200μg/ml时,NHMC增殖才出现抑制(肝素200～400μg/ml组与未加肝素组比较,均P＜0.05).另外,高糖与对照组NHMC均有一定量MMP2、MMP9表达,加入肝素后MMP2、MMP9出现高表达,特别是在高糖组尤为明显.结论:肝素能抑制高糖刺激下NHMC增殖并能使体外NHMC中的MMP2、MMP9出现高表达,推测MMPs可能参与了高糖状态下NHMC的细胞外基质的降解过程并且肝素有肾保护作用.     

MMP9 mRNA与MMP13 mRNA在小鼠长骨发育中的表达

目的测定MMP9 mRNA在小鼠胚胎和成年期长骨发育阶段的表达,并与MMP13 mRNA的表达相比较,探讨MMP9,MMP13在长骨发育中的作用。方法应用原位杂交技术,用同位素标记探针显示小鼠不同发育阶段长骨组织中MMP9 mRNA与MMP13 mRNA的表达。结果小鼠胚胎15.5d时在胫骨原发性骨化中心及软骨壳外侧有大量MMP9 mRNA表达,MMP13 mRNA的表达局限在原发性骨化中心及软骨的肥大软骨细胞末端。在1月龄小鼠胫骨切片中,MMP9 mRNA主要在骨与软骨交界处表达,MMP13 mRNA在骨与软骨交界处与干骺端小梁骨的表面均有表达。结论 MMP9在小鼠胚胎期长骨发育的基质降解和骨化过程中起重要作用,是软骨吸收和软骨内骨化的另一个标记物。1月龄小鼠MMP9 mRNA仅在骨与软骨交界表达处,不参与骨基质的降解和转换。     

Clinical characteristics of TIMP2, MMP2, and MMP9 gene polymorphisms in colorectal cancer

Background and Aim: Genetic variations and the expression profile of matrix metalloproteinases (MMP) and tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP) are involved in the invasion and metastasis of colorectal cancer. Methods: The gene profiles of TIMP2 and MMP were assayed from 333 colorectal cancer using polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism. Results: TIMP2‐418*G/*G, TIMP2 303*G/*G and MMP9‐1562*C/*C were more frequent in patients than in controls (P = 0.020, P < 0.0001 and P < 0.044, respectively). Frequency of TIMP2‐418*G/*G was higher in patients with metastasis than in those without metastasis, and that of TIMP2 303*G/*G was higher in patients with rectal cancer than in those with colon cancer (P = 0.008 and P = 0.022, respectively). TIMP2‐303*A/*A and MMP2‐1575*G/*G were less frequent in patients than in controls (P = 0.001 and P = 0.005, respectively). The TIMP2‐418*G303*G haplotype was more frequent (P < 0.0001) and MMP2‐1575*G‐735*C haplotype was less frequent in patients than in controls (P = 0.005). Conclusion: Specific single‐nucleotide polymorphism in TIMP2 and MMP appeared to be associated with tumorigenesis and biological behavior in colorectal cancer, which is expected be further verified in a larger cohort in the future.     

MMP Induction and Inhibition in Myocardial Infarction

Short-term survival following a myocardial infarction (MI) has greatly improved, due in part to therapeutic interventions that restore blood flow and limit infarct size. The increased incidence of infarct-stimulated left ventricular (LV) remodeling that advances to congestive heart failure (CHF), however, is a significant long-term complication and a leading cause of mortality. Changes to ECM structure and function are primary components of LV remodeling and are precipitated by the early increase in infarct area collagen levels that replace necrotic myocytes and form a scar. ECM turnover is coordinated through the synthesis and degradation of ECM and non-ECM components, particularly the matrix metalloproteinases (MMP), a family of proteolytic enzymes that cleave ECM. MMPs have multiple roles in remodeling events that lead to LV dilation. The inhibition or targeted deletion of specific MMPs attenuates LV remodeling events post-MI. MMP inhibitors have been used in animal models to delineate LV remodeling mechanisms and to evaluate the pharmacologic potential of targeting the ECM to modify LV remodeling post-MI. This review summarizes the current knowledge and limitations of MMP inhibition in the post-MI myocardium.     

钙粘素E和基质金属蛋白酶检测与肝癌预后关系研究

探讨钙粘素E（E-cadherin)，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs)MMP-2、MMP－9在肝癌侵袭转移中的作用；利用免疫组化学染色对68例肝癌手术切除石蜡包埋标本进行E-cadherin、MMP－2、MMP－9的检测，并结合临床病理指标（Edmondson分级、浸袭转移倾向）进行分析。E－cadherin、MMP－9在侵袭转移倾向高危组和低危组中有显著性差异；E－cadherin在不同恶性程度肝癌组织中有显著性差异。E－cadherin、MMP－9在异常表达与肝癌分期和侵袭转移有关。检测E－cadherin、MMP－9等可为临床预后提供有价值的参考指标。