趋化因子受体CXCR4与配体CXCL12在肝癌细胞迁移中的作用

目的 观察趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌组织、肝癌MHCC97细胞中的表达,同时检测肝癌患者血清中CXCR4的配体CXCL12的含量.方法 利用半定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹方法检测MHCC97细胞、21例不同时期的肝细胞癌组织及17例正常肝组织中CXCR4的表达水平,同时用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测18例肝癌患者血清中CXCL12的含量.以48孔微趋化板检测重组人CXCL12、肝细胞癌患者腹水对肝细胞癌细胞MHCC97的趋化影响.结果 在肝细胞癌组织、肝癌细胞株中,CXCR4在mRNA及蛋白水平的相对表达量分别为2.21±1.09、2.14±1.15及1.51±0.12、1.76±0.25,正常肝脏组织在mRNA及蛋白水平均未检测到CXCR4的表达.肝细胞癌患者腹水定量检查结果显示,CXCL12含量为783～8364 ng/L(中位数为6871 ng/L).重组人CXCL12可诱导MHCC97细胞的迁移,其趋化指数为3.9±1.2,与其对照1.0±0.4比较差异有统计学意义(P<0.05);肝细胞癌患者腹水可诱导MHCC97细胞的迁移,其趋化指数为1.9±0.8,与对照组(趋化指数为1.0±0.4)比较有统计学意义(P<0.05).结论 肝细胞癌组织和细胞中存在着CXCR4的高表达,但与肝癌临床分期明显相关(r=0.1,P>0.05),同时肝癌患者血清中存在CXCL12的含量升高,这些提示CXCR4可能在肝癌的转移中发挥重要的作用.     

CXC趋化因子受体2在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在肝细胞癌中的表达及与肝细胞癌发生、发展的关系.方法 采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测42例肝细胞癌组织及相应癌旁组织和23例正常肝组织中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平,分析表达水平与肝细胞癌生物学特征的关系.结果 肝细胞癌组织、癌旁组织和正常肝组织中CXCB2 mRNA和蛋白表达分别为(1.18±0.32、0.83±0.23和0.72±0.23)和(1.78±0.20、0.98±0.13和0.90±0.18),同癌旁组织和正常肝组织比较,肝细胞癌组织中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05).肝内转移、门静脉癌栓和低分化组中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平分别为(1.37±0.26、1.45±0.34、1.31±0.28)和(1.87±0.20、1.93±0.13、1.86±0.18),无肝内转移、无门静脉癌栓和高分化组CXCR2 mRNA和蛋白表达水平分别为(1.08±0.33、1.08±0.27、1.06±0.33)和(1.73±0.18、1.73±0.20、1.71±0.19),差异有统计学意义(P<0.05).CXCR2蛋白表达与TNM分期相关,Ⅲ-Ⅳ期和Ⅰ-Ⅱ期表达水平分别为1.86±0.20和1.72±0.19,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CXCR2在肝细胞癌组织中高表达,其高表达可能与肝细胞癌发生、侵袭和转移相关.     

CCR1趋化因子受体在人肝癌组织中表达及其临床意义

目的了解CCRl趋化因子受体在人肝癌组织中表达分布情况，探讨其表达水平与临床病理特性的关系。方法采用RT-PCR、免疫组化、Western blot技术检测45例肝癌组织及相应癌旁肝组织CCRl趋化因子受体表达及分布情况，并分析其表达水平与临床病理特性的关系。结果RT-PCR、Western blot在肝癌组织及相应癌旁肝组织中均可以检测到CCR1趋化因子受体mRNA及蛋白，肝癌组织表达水平高于癌旁肝组织。免疫组化显示CCR1趋化因子受体主要表达于肝癌细胞膜。CCR1mRNA表达水平与病人性别、年龄、血清AFP水平、肿瘤大小、分期无明显相关性，而与肿瘤是否有包膜（t=2．305，P〈0．05）、门静脉浸润显著相关（t=3．004，P〈0．01）。无门静脉浸润的肝癌组织中，47．4％免疫组化染色强度为＋＋～＋＋＋，而有门静脉浸润的肝癌组织中，80．8％染色强度为＋＋～＋＋＋，两者比较差异具有显著意义（X^2=5．511，P〈0．05）。结论肝癌细胞表达CCR1趋化因子受体，其表达水平与肝癌侵袭性尤其是门静脉浸润相关，有望成为判断肝癌侵袭性及预后的指标。     

趋化因子VCC-1在肝细胞癌中的表达及其意义

目的 研究趋化因子VCC-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用RT-PCR法检测8种肝细胞癌细胞株、10例正常肝脏组织标本、42例肝癌组织及癌旁组织中的VCC-1的mRNA表达情况,并结合临床资料探讨VCC-1的临床意义.结果 肝细胞癌细胞株中,SUN398的VCC-1表达量最高,Hep3B和Huh7几乎不表达,SUN387、SUN449、SUN423、HepG2、PLC5的表达介于两者之间.42例肝癌患者标本中,癌组织及癌旁组织同时存在表达,癌组织高于癌旁组织26例(61％,14.9±7.6倍),癌旁组织高于癌组织16例(39％,6.9±5.4倍).癌组织表达上调(P＜0.01).VCC-1的表达水平与肿瘤分化程度、直径有关(P＜0.05).在10例正常肝脏标本中,8例无表达,2例微表达,其表达水平低于癌细胞株、肝癌组织及癌旁组织(P＜0.01),而复发的3例标本均有癌组织高表达(20.1±2.3倍).有癌栓的8例标本中,5例出现癌组织VCC-1高表达(17.3±4.5倍),3例低表达.结论 VCC-1表达升高可能与肝细胞癌的发生发展有关,并有可能成为肝细胞癌的治疗靶点.     

磷酸化雌激素受体alpha在肝癌组织中的表达

目的：研究磷酸化雌激素受体α（p-ERα）在肝癌组织中的表达,探讨其与肝癌生物学特征及患者预后的关系。方法：采用免疫组织化学法检测77例肝癌组织中p-ERα中的表达,采用Westernblot和RT-PCR检测肝癌组织、癌旁组织以及正常肝组织中p-ERα的蛋白表达及ERαmRNA表达情况。结果：肝癌组织中p-ERα的表达阳性率为48%（37/77）。p-ERα在肝癌组织中的表达低于癌旁组织及正常肝组织。p-ERα的表达与肝癌包膜（χ2=13.487,P〈0.01）、镜下癌栓（χ2=5.751,P〈0.05）有关。Kaplan-Meier生存分析显示,p-ERα阳性与p-ERα阴性患者的总体生存率（51.4%vs 37.5%,χ2=1.491,P=0.22）与无瘤生存率（56.8%vs 60%,χ2=0.300,P=0.58）差异无统计学意义。结论：p-ERα对肝癌的预后可能没有影响,但对肝癌患者的生物学特性有一定的影响。     

胃泌素受体在肝细胞肝癌中的表达

目的 探讨人肝细胞性肝癌(HCC)细胞株和组织中胃泌素受体(GR)的表达和临床病理学意义.方法 免疫组织化学染色方法 检测四种人HCC细胞株和25例人HCC组织中GR的表达.结果 显示在较高一抗浓度下,三种人HCC细胞株可见GR阳性表达,表达强弱为SMMC一7721>HepG2>QGY-7701,在人HCC组织中GR的阳性表达率为56%(14/25).但GR的表达与病人性别、年龄、临床分期、有否乙肝后肝硬化、肿瘤大小均无明显相关性.有脉管癌栓组与无脉管癌栓组显示出GR表达差异有统计学意义.结论 在肝细胞肝癌中存有胃泌素受体表达.是否具有内分泌治疗意义尚须进一步研究.     

趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌表达及肺转移中作用的研究

目的 以人肝细胞癌高、低肺转移潜能细胞株MHCC97-H、MHCC97-L为研究对象,研究趋化因子受体CXCR4在肝细胞癌肺转移过程中的作用和意义.方法 RT-PCR和Western blotting比较MHCC97-H、MHCC97-L细胞株CXCR4 mRNA及蛋白质水平的表达.CXCR4配体SDF-1α及肺提取物趋化实验和抗体抑制实验观察SDF-1α和裸鼠肺组织匀浆液对MHCC97-H的趋化迁移作用.结果 趋化因子受体CXCR4在MHCC97-H细胞株表达低于低肺转移潜能细胞株MHCC97-L,蛋白质水平与mRNA水平一致.SDF-1α对MHCC97-H趋化实验表明在1～100 ng/ml浓度范围内均有趋化作用,在浓度为50 ng/L时趋化作用最显著(P＜0.05).肺提取物亦发现对MHCC97-H有趋化作用,作用强于MHCC97-L及DMEM组(P＜0.05).但加入CXCR4抗体后其趋化作用并未明显下调.结论 CXCR4在肝癌组织及细胞表达并可能参与肝癌肺转移,但并非肝癌细胞趋化转移的主要受体分子.     

趋化因子CXC受体4在前列腺癌细胞中的表达

目的:对趋化因子CXC受体4(CXCR4)在前列腺癌(PCa)组织以及PCa细胞系PC-3M中的表达进行研究。方法:提取正常前列腺组织、PCa组织和PC-3M细胞的总RNA,采用RT-PCR方法,于mRNA水平检测其CXCR4的表达情况;制备PC-3M细胞爬片和MCF-7细胞爬片(人乳腺癌细胞系,作为阳性对照),采用SABC免疫组织化学方法,于蛋白水平测定CXCR4在PC-3M细胞中的表达。结果:RT-PCR方法显示PC-3M细胞和PCa组织CXCR4 mRNA有较高水平的表达,正常前列腺组织未见CXCR4 mRNA的表达;SABC显示PC-3M细胞CXCR4蛋白呈强表达。结论:CXCR4在PCa组织和PC-3M细胞中有明显表达,在正常前列腺组织中无明显表达,CXCR4可能在PCa的发生发展中发挥重要作用。     

趋化因子CXCL5在肝癌中的表达及其临床意义

目的：探讨趋化因子配体5（CXCL5）在原发性肝细胞肝癌（HCC）中的表达,分析其在肝癌发生、发展、侵袭及转移中的作用。 方法：收集218例HCC组织标本及其临床病理资料,采用免疫组化（IHC）Elvision检测肝癌组织、癌旁组织、周围正常组织中CXCL5的表达,染色后阅片、评分、对比其在各组之间的表达差异;采用相关分析、非参数检验、Log-Rank、Cox回归分析和Logistic回归分析进行统计学分析,P 〈 0.05认为有统计学意义。 结果：IHC结果显示CXCL5在癌组织中的阳性率高于癌旁组织（P 〈 0.01）和周围正常组织（P 〈 0.01）;癌组织CXCL5中高表达与门静脉癌栓形成、BCLC分期、TNM分期、肝癌并静脉侵犯正相关,与病理分级负相关;CXCL5是肝癌患者的独立预后因素之一（HR 1.734;P = 0.001）。 结论：CXCL5在HCC中表达增高,与肝癌的病理分级、恶性程度、门静脉癌栓、临床分期呈正相关,其高表达是HCC的独立预后危险因子之一。     

KLF8在不同肝癌细胞株及肝癌组织中的表达及其意义

目的 观察不同肝癌细胞株及肝癌组织中Krappel样因子8(KLF8)的表达,并探讨其意义.方法 用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、免疫化学方法分别检测不同肝癌细胞株及肝(癌)组织中KLF8的mRNA和蛋白质水平.结果 KLF8的mRNA及蛋白质水平随肝癌细胞株侵袭转移潜能的增强而明显升高(P<0.05);正常肝组织(6例)、无转移肝癌组织(17例)、有转移肝癌组织(6例)中KLF8 mRNA的相对表达量分别为0.2377±0.0658、0.4683±0.2073、0.6669±0.0239(P<0.05);在正常肝组织和肝硬化组织中KLF8蛋白表达的阳性率分别为16.7%(1/6)和33.3%(2/6),均为弱阳性,在肝癌组织中强阳性率为81.8%(27/33),肝癌转移灶中强阳性率为83.3%(5/6)(P<0.01).结论 KLF8可能参与肝癌的发生和侵袭转移.     

趋化因子受体CCR7在胃癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的探讨趋化因子受体CCR7的表达对预测胃癌淋巴结转移的临床价值。方法对132例行胃癌根治术和30例内镜活检的胃癌组织标本采用免疫组化法检测CCR7的表达。结果CCR7在56.8%的病例中呈阳性表达。CCR7在伴有淋巴结转移病例中的表达显著高于无淋巴结转移者(P<0.001);其与肿瘤大小(P<0.01)、浸润深度(P<0.001)、淋巴管浸润(P<0.001)和TNM分期(P<0.001)相关,并与多层螺旋CT(MSCT)和病理检查判断的淋巴结转移密切相关(P<0.05,P<0.01);但与年龄、性别、肿瘤位置、Lauren分类和血管浸润无关。在回顾性研究中,CCR7表达对胃癌淋巴结转移判断的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)和准确率分别为83.1%、73.8%、78.7%、78.9%和78.8%;在前瞻性研究中,CCR7表达对胃癌淋巴结转移判断的敏感性、特异性、PPV、NPV和准确率分别达85.0%、60.0%、80.9%、66.7%和76.7%。结论CCR7表达与胃癌淋巴结转移密切相关,对内镜活检组织检测CCR7的表达有助于预测胃癌淋巴结转移及决定淋巴结清扫的手术范围。CCR7可能成为胃癌治疗的新靶点。     

CC趋化因子受体-2在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义

目的 研究CC趋化因子受体-2(CC chemokine receptor 2,CCR-2)在肝细胞癌组织中的表达及其与肝癌临床病理特征、预后的关系.方法 用免疫组织化学法(SP法)检测76例肝癌组织及其癌旁组织中CCR-2的表达情况,分析CCR-2表达与肝癌各项临床病理特征以及患者预后的关系.CCR-2染色结果与各项临床指标的关系采用x2检验或Fisher确切概率法检验.采用KaplanMeier法绘制生存曲线.生存情况分析采用log-rank检验.结果 14(18.4％)例癌旁组织CCR-2染色结果显示为弱阳性表达,其余均为阴性.在肝癌组织中,CCR-2表达明显高于癌旁组织:15(19.7％)例阴性表达,29(38.2％)例弱阳性表达,12(15.8％)例中等阳性表达,20(26.3％)例强阳性表达.肝癌组织中CCR-2阳性表达与肿瘤直径(X2=12.41,P＜0.01)、门静脉癌栓(x2=7.476,P=0.006)、转移(X2=7.227,P=0.007)、AJCC分期(X2=20.711,P＜0.01)明显相关.CCR-2高表达组患者术后五年生存率(6.3％)明显低于低表达组(38.6％),差异具有统计学意义(X2 =27.133,P＜0.01).经单因素及多因素分析显示,肝癌组织CCR-2高表达是影响肝癌患者总体生存的独立危险因素(P＜0.05).结论 CCR-2在肝癌组织中表达明显升高,可能参与了肝癌的发生发展过程,检测CCR-2表达水平对判断肝癌的预后具有一定的参考价值.     

结直肠癌细胞株趋化因子受体的表达及其趋化实验

目的 观察结直肠癌细胞株趋化因子受体CXCR4的表达及其趋化实验,探讨CXCR4在结直肠癌转移中的作用.方法 培养结直肠癌细胞株HT-29、SW480,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学染色、Western blot检测结直肠癌细胞株的趋化因子受体CXCR4表达.采用SDF-1诱导的趋化实验模型检测两种结直肠癌细胞株的趋化活动.结果 免疫组织化学检测每100个HT-29或SW480细胞表达CXCR4蛋白的阳性率分别为48.7%和52.6%,RT-PCR和Western blot检测显示CXCR4呈阳性表达;趋化实验表明区化因子SDF-1处理组的细胞移动计数(HT-29:27.6±3.9;SW480:25.3±4.4)显著高于空白对照组(HT-29:9.6±2.5;SW480:9.8±2.1)和抗体处理组(HT-29:9.1±3.1;SW480:9.3±2.0).结论 结直肠癌细胞株可表达CXCR4,趋化因子SDF-1可以趋化结直肠癌细胞.     

雌激素-雌激素受体信号通路对趋化因子的调控作用研究进展

雌激素参与机体多项生理、病理调节机制,在机体稳态中发挥不可或缺的作用。趋化因子作为低分子量趋化性细胞因子超家族的一员,活跃于机体各个系统的调节,并且其自身的表达也受到了全身各系统的调控,如内分泌系统的性甾体类固醇激素等。本文对雌激素-雌激素受体信号通路对趋化因子的调控及其机制作一综述。     

凋亡抑制蛋白FLIP在肝癌组织中的表达和意义

目的检测凋亡抑制蛋白FLIP在人肝癌不同分化组织中的表达并揭示其在肝癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学技术，分析86例肝癌标本（采用经典的Edmondson四级分级法，Ⅰ级18例，Ⅱ级25例，Ⅲ级21例，Ⅳ级22例），肝癌Hepg2细胞系1株细胞爬片的10样本中FLIP蛋白的表达并进行统计学分析比较。结果凋亡抑制蛋白FLIP在86例肝癌标本中有72例阳性表达（83．72％），Ⅰ级13／18（72．22％），Ⅱ级20／25（80．00％），Ⅲ级18／21（85．71％），Ⅳ级21／22（95．45％）（P〈0．05）；在肝癌Hepg2细胞系细胞爬片10个样本中全部阳性表达（100％），（P〈0．01）。结论凋亡抑制蛋白FLIP在肝癌组织中呈阳性表达；不同分化的肝癌组织其表达阳性率不同，分化越差其阳性表达率越高；这可能为揭示肝脏恶性肿瘤的发生、发展提供新的理论依据，并为肝癌的有效治疗提供新的思路。     

CCR7在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

目的：检测趋化因子受体CCR7在甲状腺乳头状癌组织中的表达,探讨CCR7表达与淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组织化学法检测30例乳头状癌标本中CCR7的表达。结果：CCR7在30例乳头状癌组织中阳性表达率为56.7%（17/30）,其中淋巴结转移组的阳性表达率为92.3%（12/13）,而无淋巴结转移组的阳性表达率为29.4%（5/17）,差异有统计学意义（P〈0.01）;CCR7的表达与患者性别、年龄及肿瘤大小无关（P〉0.05）。结论：甲状腺乳头状癌组织中CCR7的表达与淋巴结转移关系密切,对甲状腺乳头状癌手术方案的选择及药物靶向治疗具有重要意义。     

乳腺癌组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7的表达及临床意义

目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:应用qRT-PCR方法检测35例新鲜乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7的mRNA表达,采用免疫组化检测120例乳腺癌细胞组织石蜡标本中CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7的蛋白表达,并分析三者的表达与患者临床特征的关系。结果:qRT-PCR结果显示,CXCL12、CXCR4、CXCR7的mRNA在乳腺癌组织中表达量均明显高于癌旁正常乳腺组织(均P0.05)。免疫组化结果显示,CXCL12、CXCR4、CXCR7蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率分别为70.8%(85/120)、65.8%(79/120)和63.3%(76/120),三者在均在伴有淋巴结转移及TNM分期较高的患者乳腺癌组织中表达明显升高(均P0.05)。结论:趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7的高表达可能与乳腺癌淋巴转移及恶性进展密切相关。