ICU和非ICU患者感染肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶和碳青霉烯酶检测

目的比较分析医院ICU和非ICU患者分离的肺炎克雷伯菌的耐药性、以及产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和碳青霉烯酶的情况。方法收集2016年1-12月医院ICU和非ICU患者感染的肺炎克雷伯菌50株,其中来自ICU患者20株,非ICU患者30株,经VITEK-2Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定;应用K-B纸片扩散法对抗菌药物进行敏感性测定;表型确证试验筛选ESBL;改良Hodge试验(MHT)检测碳青霉烯酶活性;聚合酶链反应(PCR)实验进一步确证KPC型碳青霉烯酶。结果 ICU患者和非ICU患者分离的肺炎克雷伯菌对三代头孢菌素耐药率均在90.00%以上,对亚胺培南和美罗培南耐药的肺炎克雷伯菌仅来自于ICU患者;分离菌株中共有39株为ESBL表型确证实验阳性,其中来自ICU患者的有15株(75.00%),来自非ICU患者的有24株(80.00%),两组肺炎克雷伯菌在产ESBL方面差异无统计学意义,分离菌株中共有6株为MHT试验阳性,均来自ICU患者,其中有一株同时产ESBL和碳青霉烯酶,ICU患者和非ICU患者中分离的肺炎克雷伯菌在产碳青霉烯酶方面差异有统计学意义(P0.05),6株MHT试验阳性菌株中,仅有3株为KPC型碳青霉烯酶,检出率为50.00%。结论 ICU患者分离的肺炎克雷伯菌对头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉素和环丙沙星的耐药率要高于非ICU患者,ESBL依然是临床分离肺炎克雷伯菌产生高耐药率的主要原因之一,耐碳青霉烯类抗菌药物肺炎克雷伯菌仅出现于ICU患者,KPC型碳青霉烯酶是原因之一。     

ICU患者感染CRKP与CSKP的耐药基因和毒力基因

目的 分析重症监护病房(ICU)患者感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)与碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的耐药基因及毒力基因。方法 选择2015年11月-2019年11月浙江大学附属第一医院ICU收治的感染肺炎克雷伯菌患者297例,根据其感染菌株是否耐碳青霉烯类分为CRKP组86例和CSKP组211例,采用全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,采用多位点序列分型(MLST)分析CRKP与CSKP菌株基因分型和同源性,采用黏液丝试验检测毒力表型,采用聚合酶链式反应(PCR)检测荚膜血清型及毒力基因。结果297株肺炎克雷伯菌共检出CRKP菌株86株和CSKP菌株211株,CRKP菌株对常用抗菌药物的耐药率高于CSKP菌株(P<0.05);86株CRKP菌株共检测到6个ST型,以ST11型(59.30%)为主,211株CSKP菌株共检测到12个ST型,以ST405型(21.33%)为主;86株CRKP菌株检出K5型4株(4.66%),K1型3株(3.49%),211株CSKP菌株共检出74株(35.07%)高毒力荚膜血清型;CSKP组magA、ybt、kfu基因阳性率高...     

2014-2017年某院肺炎克雷伯菌分布及耐药性分析

目的了解中国科学技术大学附属第一医院2014年1月-2017年12月临床分离的肺炎克雷伯菌分布及耐药性分析,指导临床合理用药。方法采用WalkAway40SI细菌分析仪进行细菌鉴定及药敏试验,PCR扩增碳青霉烯酶基因,如KPC-2、NDM-1、OXA-48、IMP、GES、VIM和SME,使用Whonet 5.5软件及SPSS 18.0进行统计数据分析。结果四年共分离1 099株肺炎克雷伯菌,主要来自痰液(65.52%),尿液(15.83%),血液(5.92%)和脓性分泌物(4.55%)标本,在ICU、神经外科、康复科和神经内科检出率分别占25.57%、22.02%、11.83%和10.28%。2014-2017年超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株检出率分别为34.81%、38.53%、45.22%和52.33%;耐碳青霉烯类菌株检出率分别为11.60%、13.76%、14.65%和16.06%。肺炎克雷伯菌对厄他培南、亚胺培南、美罗培南和阿米卡星敏感率分别为77.07%、78.53%、76.07%和73.79%,有较高的敏感率。2017年62株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中42株为KPC-2型,以ICU和神经外科为主;7株为NDM-1型;未检出SME、IMP、OXA-48、VIM、GES阳性菌株。结论肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率逐年递增,耐碳青霉烯类菌株在ICU和神经外科居多,应合理使用抗菌药物,及时耐药监测,防止耐药菌株传播。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性分析及blaKPC-2基因的检测

目的对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行同源性分析及blaKPC-2基因检测。方法采用最低抑菌浓度琼脂稀释法检测30株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对17种抗菌药物的敏感性,以WHONET 5.4软件分析细菌耐药表型,以脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌株的基因型,以聚合酶链反应检测blaKPC-2基因、并进行基因测序。结果 30株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药表型模式有6种,其中泛耐药及仅对妥布霉素敏感的菌株共22株,占73.3%;PFGE图谱分析有5种类型,其中Ⅰ型菌株流行为主,占80.0%;从7号试验菌株检测出blaKPC-2基因,其他试验菌株均未检测出blaKPC-2基因。结论 30株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌存在高度同源性的菌株流行,并有一株细菌检测出blaKPC-2基因,临床科室及医院感染部门应采取措施控制这些菌株在医院内的传播。     

2013-2017年某三甲医院产KPC肺炎克雷伯菌流行特征研究

目的分析近五年医院产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌的分布、耐药性变迁及流行特征,揭示产KPC肺炎克雷伯菌(KPCKpn)在医院近年来的流行规律,为临床防治KPCKpn感染提供参考。方法收集2013年1月-2017年6月医院临床标本分离的肺炎克雷伯菌非重复菌株,采用法国梅里埃VITEK MS质谱仪或VITEK-2Compact全自动细菌鉴定药敏仪进行细菌鉴定和药敏实验。使用特异引物序列对CRKpn菌株的DNA模板进行多重PCR扩增,确定其是否携带目前已知的常见碳青霉烯耐药基因。随机选取各病区来源的KPCKpn菌株100株,采用脉冲场电泳(PFGE),使用XbaI内切酶对待测菌株基因组进行酶切和电泳分析,使用BioNumerics 3.0软件对电泳图进行同源性分析。结果近五年,医院共分离肺炎克雷伯菌4 946株,其中碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKpn)710株占14.4%,而82.8%的CRKpn为KPCKpn;CRKpn的比例近五年上升明显;KPCKpn菌株主要来自呼吸病区占20.4%、急诊ICU病区占17.0%;KPCKpn菌株主要分离自痰标本占48.3%、引流液占23.0%。结论 CRKpn的比例呈现逐年增加的趋势,KPCKpn菌株数量的增加是导致CRKpn概率增加的主要原因;KPCKpn菌株数量增加的主要原因是其在院内的克隆传播;创伤性操作等医疗行为对于耐药菌感染的发生发展过程有很大程度的影响。     

肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制的研究

摘要:目的　研究肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药物耐药机制,为临床治疗耐碳青霉烯类抗菌药物肺炎克雷伯菌感染及院内感染控制提供分子生物学依据。方法　采用西门子Microscan Walkaway 40 plus全自动微生物鉴定及药敏分析仪对肺炎克雷伯菌进行鉴定及药敏试验。采用PCR及琼脂糖凝胶电泳对耐药基因进行初筛及确证,将PCR扩增产物进行测序并使用Basic Local Alignment Search Tool（BLAST）分析,判断细菌耐药基因是否发生变异。结果　分离到的2株肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物敏感性较差。PCR结果显示碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌耐药基因新德里金属β-内酰胺酶1（New Delhi Metallo-β-lactamase 1,NDM-1）均为阳性,测序未发现NDM-1耐药基因发生突变。BLAST比对显示本次试验中检出的NDM-1耐药基因与Genebank公布的NDM-1耐药基因NC_023914.1同源性为100%。结论　分离到的2株碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌均为产NDM-1病原菌,NDM-1基因序列测序未发现突变位点。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药基因检测

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药基因携带,以减少耐药菌的产生。方法对2009年1月-2012年2月耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株进行筛选,鉴定和药敏采用VITEK-2Compact系统进行,引物特异性PCR法分别检测分离株的碳青霉烯酶耐药基因、ESBLs基因和AmpC等相关耐药基因的存在。结果共分离出6株碳青霉烯耐药或中介的肺炎克雷伯菌,其对青霉素类、青霉素/青霉素酶抑制剂、氨曲南、头孢菌素类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类和碳青霉烯等抗菌药物表现为较高程度的耐药,但对替加环素有较高的敏感性;每一株菌均携带超广谱β-内酰胺酶基因,可检测到3⁵个耐药基因;其中,1株菌经测序证实为携带blaIMP-4,并同时携带blaSHV、blaTEM和blaCTXG9基因;5株菌扩增到Ⅰ类整合子(intⅠ);blaNDM及其他碳青霉烯类耐药基因筛查均为阴性。结论临床分离的碳青霉烯耐药或中介肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型基本相符,因而推测广泛耐药的肺炎克雷伯菌的主要类耐药机制与菌株同时携带产ESBLs、AmpC酶、碳青霉烯酶和Ⅰ类整合子(intⅠ)有关。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制研究

目的研究临床分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌的分子流行病学及耐药机制,为制定预防控制该类细菌传播提供系统的试验数据和参考依据。方法收集并鉴定碳青霉烯类抗菌药物耐药肺炎克雷伯菌40株,肠杆菌基因间重复性一致性序列-PCR(ERIC-PCR)分析菌株的分子流行病学;药敏试验采用琼脂稀释法,改良Hodge方法检测碳青霉烯酶,EDTA-Na2双纸片协同法检测金属β-内酰胺酶,PCR及耐药基因克隆测序方法研究细菌的耐药机制,质粒结合试验确定耐药基因的转移性。结果 40株肺炎克雷伯菌仅对多黏菌素和替加环素显示了较好的敏感性;改良Hodge试验阳性30株,金属酶检测试验结果均为阴性;ERIC-PCR将40株肺炎克雷伯菌分为4型,以Ⅰ型为主;PCR结果显示,KPC-2型32株、CTX-M-9型27株、SHV型22株、TEM型19株,其中有25株同时携带≥3种的耐药基因;质粒接合试验显示,3株分离菌株成功传递了对碳青霉烯类的耐药性。结论医院存在质粒介导的碳青霉烯类耐药性的水平传播;耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药机制主要是产KPC-2碳青霉烯酶,CTX-M-9、SHV和TEM型β-内酰胺酶同时参与其多药耐药机制。     

儿童感染ST2735型产NDM-5碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学和耐药机制

目的 探讨儿童感染ST2735型产NDM-5碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)流行病学特征及耐药机制。方法 收集徐州医科大学附属医院2018年3月-2022年3月临床首次分离的儿童感染的亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌24株，改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)检测碳青霉烯酶，聚合酶链式反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因，多位点序列分型(MLST)技术和脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法检测其同源性。结果 2018年3月-2022年3月分离出24株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌，其中发现NDM-5型CRKP 15株，检出率62.50%,这15株CRKP感染患儿均有基础疾病和抗菌药物使用史；15株NDM-5型CRKP菌株对头孢菌素类、碳青霉烯类和头孢他啶/阿维巴坦均耐药。MLST分型以ST2735型(25.00%)为主，PFGE分析显示6株ST2735型CRKP具有高度同源性，且均来自于新生儿重症监护室(NICU)。结论 医院NICU存在ST2735型产NDM-5 CRKP的克隆流行，应当加强院感监测及预防，防止其产生新的流行危害。     

2018-2020年江西省高毒力耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学特征

目的 分析江西地区高毒力耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR-hvKP)的流行病学和分子生物学特征。方法收集2018-2020年江西省11个地级市医院分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)菌株，对其进行药物敏感试验、耐药基因、荚膜血清型、毒力基因及多位点序列分型(MLST)分析。结果 共检出CRKP 749株，其中CR-hvKP 126株(16.82%);126株CR-hvKP主要分离于痰液(n=60,47.62%)和血液(n=41,32.54%);主要来自于重症监护室(ICU)(n=81,64.29%);药敏结果显示除阿米卡星和替加环素外，菌株对其他抗菌药物耐药率均较高；耐药基因检测结果显示，肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(bla_KPC)基因携带率最高(n=102,80.95%);荚膜血清型和毒力基因检测显示，K64型CR-hvKP检出最多(n=111,88.10%);ST分型提示，所检测引起脓肿的CR-hvKP均为产KPC酶的ST11菌株。结论 江西省CR-hvKP检出率较高，对绝大多数抗菌药物耐药，提示临床需合理使用抗菌药物。耐药基因和毒性基因携带率均较高，应进...     

某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌检出与耐药表型分布

目的了解临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药表型及临床分布特征,为临床合理用药和医院感染防控提供依据。方法收集2013—2015年某医院住院患者临床分离的CRKP,分析标本来源分布及病原菌药敏同源性。结果949株非重复分离的肺炎克雷伯菌中,检出CRKP 75株(7.90%)。2013—2015年CRKP的检出率分别为1.35%、7.77%、17.04%,呈逐年上升趋势,差异有统计学意义(P0.01)。CRKP感染部位主要为呼吸道和泌尿道,主要分布于重症监护病房(ICU)、老年病科和急诊科。CRKP对阿米卡星和复方磺胺甲口恶唑的敏感率稍高,分别为57.33%、48.00%。CRKP社区获得性感染者22例,占29.33%;医院获得性感染者53例,占70.67%。75例CRKP感染患者死亡18例(24.00%)。耐药表型分析有同源性的CRKP分为5种克隆,主要在ICU、急诊病房和老年病科等科室传播流行。结论CRKP感染的比例有逐年升高的趋势,临床应加强CRKP的监测,采取强化的感染控制措施,预防和控制CRKP的播散和流行。     

患者及相关环境分离CRKP的耐药谱与同源性

目的了解某医疗机构耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者临床分离株与环境分离株的同源性。方法收集该院1例患者分离的CRKP与该患者周围环境中检出的4例肺炎克雷伯菌,测定5株菌对临床上常用抗菌药物的敏感性,利用改良Hodge试验和CIM(Carbapenem Inactivation Method)试验检测5株菌产碳青霉烯酶情况,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行同源性分析。结果药敏试验结果显示,5株肺炎克雷伯菌(1株来自患者,4株来自于患者所在的病房环境,分离自护工手、溶液瓶口、升降扶手、床栏杆)除对头霉素类、氨基糖苷类抗生素的药敏结果不一致外,对其他各类抗菌药物均表现为耐药。改良Hodge试验和CIM试验证实5株菌均产碳青霉烯酶;PFGE结果显示,病房溶液瓶口、床栏杆、病床升降扶手同患者标本分离的CRKP电泳图谱一致,为同一菌株,而护工手同患者标本分离的CRKP电泳图谱有2条条带的差异,其菌株间有相近的关系。结论患者及其周围环境检出同一种CRKP,应严格执行医院感染控制制度,隔离感染患者,加强环境的清洁与消毒,避免医院感染暴发。     

2010—2016年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌临床分布及其耐药特征

目的了解临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）及耐碳青霉烯类大肠埃希菌（CREC）的临床分布状况及耐药特征。方法回顾性分析某院2010年1月-2016年12月临床标本分离的肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌,统计分析CRKP及CREC分离情况。结果2010-2016年7年共收集临床分离耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）310株（CRKP 268株,CREC 42株）,CRKP检出率由2010年的1.33%上升到2016年的12.70%,呈逐年上升趋势（χ2=123.73,P＜0.01）;CREC检出率则处于相对稳定状态,2010-2016年均约为1.00%;标本来源和病区分布最多者分别为呼吸道标本（45.49％）和重症监护病房（31.93％）。药敏试验结果显示,CRKP和CREC除对阿米卡星耐药率稍低（分别为 80.60%、 38.10%）外,对大多数临床常用抗菌药物如第三代头孢菌素类、第四代头孢菌素类、β 内酰胺类/酶抑制剂类、喹诺酮类等耐药率CRKP均＞90%、CREC均在80%左右,而非CRE菌株的耐药率低于CRE菌株（P<0.01）。结论7年间临床分离的CRKP的检出率呈现快速增加的趋势,几乎对常用抗菌药物均耐药,应予以高度关注。     

重症监护病房耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学研究

 目的 分析重症监护病房(ICU)临床来源耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的分子特征及流行情况,为感染控制及药物治疗提供实验室数据。方法 收集2018年7月-2020年7月某院ICU分离的51株CRKP,采用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度,多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳分析菌株同源性,检测菌株耐药和毒力基因,接合试验验证质粒的转移性。结果 药敏试验显示,CRKP对头孢他啶/阿维巴坦全部敏感,对替加环素耐药率最低(3.9%),其次是阿米卡星(49.0%)、多粘菌素(64.7%),对亚胺培南(96.1%)、美罗培南(98.0%)、左氧氟沙星(98.0%)和头孢他啶(100.0%)均高度耐药。51株CRKP中,mCIM试验阳性菌株49株(96.1%),eCIM试验阳性菌株1株(2.0%)。碳青霉烯酶基因bla_KPC-2阳性菌株占96.1%。所有分离株中,高黏液表型阳性4株(7.8%),毒力基因阳性情况分别为:uge 100.0%,mrkD 94.1%,kpn 94.1%,fim-H 72.5%,aero 2.0%,rmpA 2.0%。ST11 CRKP在ICU中占98.0%(50/51),ST1373占2.0%(1/50)。检出1株ST1373的高毒力肺炎克雷伯菌。携带bla_KPC-2基因菌株的接合试验成功率为12.2%。结论 ICU存在产KPC-2的ST11 CRKP单克隆传播,同时携带一定的毒力基因。携带bla_KPC-2基因的质粒可通过接合水平传播。头孢他啶/阿维巴坦对CRKP有较高的敏感性,可供临床治疗选择使用。     

CRKP碳青霉烯酶基因检测及同源性分析

目的 了解某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）碳青霉烯酶基因携带状况,以及菌株间的同源性,为预防和控制CRKP的克隆传播提供实验室依据。方法 收集2017年1-12月该院分离自临床各科室的CRKP 22株（K1~K22）,用药敏纸片扩散法和微量肉汤稀释法对药敏结果进行复核,采用改良Hodge试验和Carba NP试验检测菌株是否产碳青霉烯酶,应用PCR技术扩增产酶菌株常见的碳青霉烯酶基因并测序,运用多位点序列分型（MLST）和肠杆菌科基因间一致重复序列PCR（ERIC-PCR）进行同源性分析。结果 22株CRKP对厄他培南、亚胺培南、美罗培南的耐药率均为100%,对临床其他常见抗菌药物也高度耐药;13株改良Hodge试验阳性,14株Carba NP试验阳性。14株产酶菌株均携带KPC-2基因,K12菌株同时携带NDM-1基因。按MLST法可分为ST11（14株）、ST875（6株）、ST1964和ST571（各1株）,按ERIC-PCR法分型可分为A型（15株）、B型（6株）及C型（1株）。分型结果相同的菌株中K1~K6同属ICU,K7~K10同属脑血管外科,K15~K21同属新生儿科,对应患者有共同住院时间,且患者存在转科情况（K2、K8患者均由脑血管外科转入ICU,K13、K14分别从ICU转入血液内科、肾内科）。结论 该院2017年存在ST11型和ST875型CRKP的克隆流行,需加强医院感染预防与控制措施。     

MTS法与仪器MIC法检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对替加环素敏感性的差异

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床分布特点,分析菌株产酶情况及验证替加环素的体外抗菌活性。方法分析某院2015年1—12月临床患者送检标本中分离的53株CRKP的药敏结果,对目标菌株进行改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,同时采用EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶,使用MIC测试条(MTS)确认仪器MIC法中替加环素药敏结果。结果 53株CRKP科室分布主要为重症监护病房(ICU)14株,占26.42%,烧伤科13株(24.53%);标本来源主要为痰23株(43.40%),创面分泌物15株(28.30%);年龄分布主要为≥60岁患者,检出35株(66.04%)。CRKP对替加环素的敏感率最高(96.2%)。经改良Hodge试验确认有48株产碳青霉烯酶,阳性率90.6%,同时15株产金属β-内酰胺酶。仪器MIC法判读为替加环素耐药的菌株经MTS法验证后均应判读为敏感。结论该院CRKP主要产碳青霉烯酶,其中部分菌株可产2类不同的β-内酰胺酶;替加环素在药敏试验中对CRKP具有良好的抗菌活性,经仪器MIC法检测为替加环素耐药的菌株须进行MTS法确认。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制与分子流行病学特征

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点,为医院感染控制和临床治疗提供实验室依据。方法收集山东省泰安市中心医院2014年1—11月临床分离的CRKP 13株,采用Walk Away 96 PLUS型全自动细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验及EDTA协同试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用多聚酶链反应(PCR)方法扩增相关碳青霉烯类耐药基因(bla KPC、bla IMP、bla VIM、bla GIM及bla NDM-1)并测序;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)调查菌株的克隆相关性并进行流行病学比较。结果 13株CRKP主要来源于痰(7株,53.85%)及尿(4株,30.77%),对复方磺胺甲口恶唑、四环素的耐药率较低(均40%),对其他抗菌药物(除阿米卡星)的耐药率均70%,对碳青霉烯类药物的耐药率均为100%;13株细菌改良Hodge试验均为阳性,5株细菌EDTA协同试验阳性;经PCR测序确认,碳青霉烯酶基因中,bla KPC基因最常见(13/13),其次为bla NDM-1基因(5/13),未发现其基因bla IMP、bla VIM和bla GIM;PFGE聚类结果显示,13株肺炎克雷伯菌被分为5型,主要为C型(9/13),且均属于ST11,其他分别为ST37、ST626、ST628和ST668型。结论碳青霉烯酶基因bla KPC与bla NDM-1是引起该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11是主要的克隆类型,医院需尽快强化医院感染预防控制措施。     

携带blaNDM-1耐药基因肺炎克雷伯菌的耐药性及分子流行特征研究

目的 了解耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（Carbapenem Resistant Klebsiella Pneum-oniae,CRKP）blaNDM基因的携带率、常用抗生素的耐药情况及分子流行特征,为临床CRKP感染治疗及防控提供理论依据。方法 收集2016年1月至2018年9月四川省中医院临床分离的74株CRKP,采用Vitek 2 Compact仪器进行细菌鉴定及药敏试验,mCIM试验和eCIM试验进行B类金属酶表型确证;PCR扩增blaNDM基因并对阳性产物进行测序以确定基因型别;采用多位点序列分型技术（MLST）对产NDM酶菌株进行同源性分析。结果 PCR扩增及测序结果显示,74株CRKP中有8株携带blaNDM-1;携带blaNDM-1基因菌株药敏结果显示对试验的所有头孢菌素类、喹诺酮类抗生素为全耐药,仅对阿米卡星和替加环素敏感。74株CRKP的mCIM试验和eCIM试验的阳性率分别为98.65%和10.81%,8株产NDM酶菌株eCIM试验均阳性。MLST结果显示8株产NDM酶菌株均为ST307型。结论 CRKP菌株blaNDM-1携带率较高,耐药程度严重;ST307型CRKP可能更易捕获携带blaNDM-1的耐药质粒,医院应加强防控该类细菌的播散。     

血流感染肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药机制研究

目的了解临床血流感染肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制,为其治疗提供实验依据。方法收集浙江省人民医院2016年1月-12月门诊及住院患者血流感染肺炎克雷伯菌72株,应用法国梅里埃VITEK 2 Compact检测肺炎克雷伯菌药物敏感性;应用PCR法检测相关碳青霉烯酶耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaIMI、blaIMP和blaOXA-48),应用MLST方法检测菌株克隆型别。结果 2016年1月-12月门诊及住院患者血流感染肺炎克雷伯菌72株,其中碳青霉烯敏感肺炎克雷伯菌(CSKP) 48株,占66.7%,碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP) 24株,占33.3%;肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物敏感性均较低,特别是β-内酰胺类抗菌药物。替加环素体外显示出极高敏感性,仅4.2%菌株耐药;24株菌株全部检出blaKPC-2基因,其他耐药基因未检出。结论本院血流感染肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制主要是产KPC-2酶。碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌在本院呈克隆播散趋势,应引起临床高度重视。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因检测及同源性

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因型及同源性。方法收集某院2015年9月—2016年2月临床标本分离的38株CRKP,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测耐药基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 38株CRKP主要来源于重症监护病房(ICU)及外科重症监护病房(SICU),分别占39.48%、34.21%。38株CRKP均检出blaKPC和blaSHV耐药基因,6株检出blaCTX耐药基因。PFGE显示共分成A、B、C、D4个谱型,其中以C型为主(65.78%,25/38)。A型菌株中菌株14、15、16携带blaKPC-2型、blaSHV型、blaCTX-M-15耐药基因,此3株细菌均是SICU患者分离的,菌株14和15分离自同一天,菌株16分离时间延后一周;C型菌株中,菌株10、18、25、28的同源性为100%,菌株10、18分离自ICU患者,菌株25、28分离自神经内一科患者(均从ICU转出),均是在ICU住院期间检出,且分离时间相差1 d。结论该院CRKP耐药基因型以blaKPC及blaSHV为主,存在克隆株医院内流行。