缺氧诱导因子-1α及其靶基因在人肝癌HepG2细胞中的表达和意义

缺氧诱导因子-1（HIF-1）存在于大多数实体肿瘤中，是肿瘤细胞维持氧平衡的重要的转录调节子。HIF-1包含α和β两个亚基（HIF-1α和HIF-1β），其中HIF-1α是主要的功能亚基，对HIF-1的转录活性起关键作用。缺氧条件下，HIF-1α被运输到核内，与HIF—1β形成二聚体，通过与靶基因上的缺氧反应元件（HRE）结合而促进靶基因转录，其蛋白质产物发挥多种生物学功能，如参与肿瘤血管的形成与发展，肿瘤细胞能量代谢，肿瘤细胞增殖与存活等。     

脑胶质瘤缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子的表达及意义

目的 探讨脑胶质瘤缺氧诱导因子-1a(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化及其与微血管密度(MVD)的关系,以及HIF-1α、VEGF与人脑胶质瘤病理分级、血管生成的关系.方法采用免疫组化SP法检测54例脑胶质瘤组织中HIF-1、VEGF的表达情况及MVD.结果 54例脑胶质瘤组织HIF-1α的表达阳性率为61.1%(33/54),VEGF为70.4%(38/54),其表达强度与脑胶质瘤的病理分级呈正相关(P<0.05).HIF-1α的表达与VEGF的表达及MVD均呈正相关(P均<0.05).结论 HIF-1α、VEGF与脑胶质瘤组织中血管生成与病理分级密切相关,可作为有意义的预后判断指标.     

妊娠期糖尿病胎盘组织缺氧诱导因子1α及血管内皮生长因子的表达与妊娠结局的关系

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在妊娠期糖尿病（GDM）胎盘组织中的表达及其与胎盘组织形态学异常和妊娠结局的关系。方法选取2010年10月至2011年10月在青岛大学医学院附属医院住院的GDM患者44例,按空腹血糖是否≥5．8mmol／L分为血糖控制欠佳组（A组）10例和良好组（B组）34例,以同期健康孕妇37名为对照组（C组）。采用苏木精伊红（HE）染色法检测胎盘病理形态学,免疫组化和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术测定HIF-1α和VEGFmRNA及蛋白在胎盘中的表达,并比较各组差别与妊娠结局关系。与胎盘组织HIF-1α、VEGF相关因素采用Pearson单因素相关分析,P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）A组出现妊娠期高血压、产后出血、羊水过多、早产儿、巨大儿、新生儿低血糖等例数明显高于其他两组;（2）GDM组（A＋B）患者绒毛成熟不良、干绒毛小动脉增厚和胎盘绒毛间质毛细血管充盈的发生比例[61．4％（27／44）、38．6％（17／44）、50．0％（22／44）]与C组[13．5％（5／37）、10．8％（4／37）、18．9％（7／37）]比较差异有统计学意义（X^2值分别为19．260、8．100、8．450,均P〈0．05）;（3）A、B、C3组患者胎盘HIF-1αmRNA表达水平分别为0．91±0．13、0．72±0．12、0．47±0．11;VEGF mRNA表达为0．96±0．23、0．75±0．27、0．43±0．14,差异有统计学意义（F=67．300、33．250,均P〈0．05）;（4）A、B、C3组患者胎盘HIF-1α蛋白阳性表达率分别为90．0％、82．4％、32．4％;VEGF蛋白阳性表达率分别为100％、88．2％、35．1％,差异有统计学意义（X^2=22．632、28．115,均P〈0．05）;（5）胎盘组织HIF-1α和VEGF蛋白与绒毛成熟不良（r=0．764、0．875）、干绒毛小动脉增厚（r=0．655、0．885）及毛细血管充盈（r=0．685、0．766）呈正相关（均P〈0．05）。结论GDM患者血糖控制状态与胎盘组织中HIF-1α和VEGFmRNA和蛋白高表达有关,可能导致胎盘组织病理形态学的异常,对妊娠结局产生不良影响。     

大肠癌组织转化生长因子-β1、缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的探究大肠癌组织中转化生长因子(TGF)-β1、缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义。方法随机选取2010年5月至2012年5月住院治疗的大肠癌患者的癌组织(大肠癌组)和癌旁组织(癌旁组)各102例,对比分析两组TGF-β1、HIF-1α和VEGF的表达情况及其与临床病理参数和预后的相关性。结果大肠癌组TGF-β1、HIF-1α和VEGF总表达阳性率均显著高于癌旁组(P0.05);不同TNM分期和浸润深度的TGF-β1表达阳性率差异显著(P0.05),不同TNM分期、分化程度、浸润深度、是否存在淋巴结转移和远处转移的HIF-1α和VEGF表达阳性率差异显著(P0.05);TGF-β1、HIF-1α均与VEGF表达呈正相关(r=0.231、0.462,P0.05);HIF-1α和VEGF表达与患者预后密切相关,且HIF-1α和VEGF阳性表达者的生存时间显著低于阴性者(P0.05)。结论大肠癌组织中TGF-β1、HIF-1α和VEGF的表达有所上升,且表达水平与肿瘤的临床病理参数以及后期预后密切相关,三者联合检测对判断肿瘤侵袭转移和预测预后有一定的临床指导意义。     

食管鳞癌发生过程中缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子的表达变化

为研究食管鳞癌发生过程中血管生成机制，我们应用免疫组化的方法，分别检测食管正常上皮、鳞状上皮不典型增生和鳞癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD)变化，并结合临床病理资料综合分析，报告如下。     

缺氧诱导因子-1及血管内皮生长因子在膀胱癌中的表达及临床意义

目的 检测缺氧诱导因子-1(HIF-1)及血管内皮生长因子(VEGF)在膀胱癌中的表达,探讨两者之间的关系以及在膀胱癌中表达的临床意义.方法 采用免疫组化法,检测50例膀胱癌组织和15例癌旁正常组织中HIF-1α和VEGF的表达.结果 50例膀胱癌组织中HIF-1α和VEGF的阳性表达率分别为72.0%和64.0%,而在正常对照组中的阳性表达率分别是13.3%和0,两种蛋白在不同组织间的表达率差异均有统计学意义(P＜0.01).并且与膀胱癌的病理分级和临床分期有密切关系.结论 HIF-1α通过调节其下游基因的表达在膀胱癌的发生发展中发挥着重要作用;VEGF的表达与膀胱癌的不良生物学行为相关.因此推测,针对HIF-1α和VEGF基因的双靶点设计膀胱癌的治疗方案可能更加确实有效.     

缺氧诱导因子1α调控血管内皮生长因子对大鼠缺氧性肺动脉高压的作用

目的　研究大鼠缺氧性肺动脉高压 (HPH)肺血管壁缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)和血管内皮生长因子 (VEGF)基因表达的动态变化。方法　 4 0只成年雄性Wistar大鼠随机分成对照组、缺氧 3、7、14和 2 1d组 ,每组 8只 ,测各组大鼠平均肺动脉压 (mPAP)、血管形态学指标、右室肥大指数(RVHI) ;原位杂交和免疫组化检测HIF 1α,VEGF基因表达。结果　缺氧 7d后 ,mPAP开始上升[(18 4 1± 0 37)mmHg],与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,缺氧 14d达高水平并维持于此水平。肺血管重塑 ,RVHI改变在缺氧 14d后出现。HIF 1α蛋白在对照组表达不明显 ,各缺氧组肺血管内膜均为阳性 ;在中膜 ,HIF 1α蛋白缺氧 3d始增高 (0 178± 0 0 17) ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,缺氧 7d达高峰 (0 2 2 1± 0 0 2 1,P <0 0 5 ) ,14d和 2 1d下降 ;HIF 1αmRNA对照组 ,缺氧 3d和 7d组均不明显 ,缺氧 14d增高 (0 2 0 3± 0 0 2 4 ,P <0 0 5 ) ,并维持于高水平。VEGF蛋白在缺氧 7d增高(0 0 74± 0 0 2 2 ,P <0 0 5 ) ,14d达高峰 (0 14 7± 0 0 17,P <0 0 5 )并持续于高水平 ;VEGFmRNA对照组和缺氧 3d组不明显 ,缺氧 7d增高达高峰 (0 138± 0 0 10 ,P <0 0 5 ) ,之后持续于高水平。VEGFmRNA于中膜和内膜、V     

吡格列酮下调糖尿病大鼠肾脏组织缺氧诱导因子1α及血管内皮生长因子的表达

观察吡格列酮对糖尿病大鼠肾小球缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.高糖高脂饲料喂养及腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型并予以吡格列酮治疗,经治疗的大鼠肾脏肥大指数、24 h尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均明显降低,高密度脂蛋白胆固醇明显升高,肾小球HIF-1α和VEGF表达降低(均P＜0.01).提示吡格列酮具有改善糖尿病大鼠糖脂代谢和肾功能的作用,机制可能与调控HIF-1/VEGF缺氧反应通路相关.     

子宫内膜癌中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子-D的表达及临床意义

目的检测子宫内膜癌组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)-D的表达,分析二者的关系及临床意义。方法63例确诊并行子宫内膜癌根治术的患者为观察组,19例子宫肌瘤行子宫全切的患者(留取子宫内膜)为对照组,均留取术后蜡块组织,应用免疫组化法检测HIF-1α和VEGF-D的表达。结果两组HIF-1α和VEGF-D表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。观察组HIF-1α和VEGF-D表达与肿瘤转移密切相关,HIF-1α表达与肿瘤浸润深度、肿瘤最大径、增殖指数密切相关。二者表达均与年龄无相关性。相关分析显示观察组HIF-1α和VEGF-D表达无相关性。结论子宫内膜癌中HIF-1α和VEGF-D表达升高可能与肿瘤淋巴结转移相关,HIF-1α表达与肿瘤侵袭性生长密切相关。     

缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响

目的探讨缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响。方法建立人胰腺癌SW1990细胞体外缺氧培养模型,随机分为缺氧培养8h、16h、24h组及常规培养组。采用RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果HIF-1α在常规培养细胞中的表达较弱,而在缺氧培养细胞中的表达水平明显增高。SW1990胰腺癌细胞株HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白在缺氧条件下的表达显著增强,并随缺氧时间的延长而升高。结论缺氧可诱导人胰腺癌SW1990细胞Glut1和VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF-1α途径介导的。     

缺氧诱导因子-1α血管内皮生长因子在胶原诱导性关节炎滑膜中的表达及其与血管生成的关系

目的 探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)在类风湿关节炎(RA)血管生成中的作用.方法 建立大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,采用苏木素-伊红(HE)染色评估滑膜病理血管生成、SP法免疫组织化学染色检测HIF-1α和VEGF的表达,动态观察HIF-1α表达与VEGF表达及血管生成之间的关系.结果 CIA大鼠滑膜HIF-1α及VEGF表达增加,且随发病时间的延长而逐渐增加,两者均与滑膜病理血管生成评分呈显著正相关,同时滑膜衬里层和衬里下层HIF-1α表达又与相应部位的VEGF表达呈显著正相关.结论 HIF-1α可能参与上调VEGF表达促进血管生成,从而在RA关节破坏中起一定作用.     

缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响

目的 探讨缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响.方法 建立人胰腺癌SW1990细胞体外缺氧培养模型,随机分为缺氧培养8 h、16 h、24 h组及常规培养组.采用RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白的表达.结果 HIF-1α在常规培养细胞中的表达较弱,而在缺氧培养细胞中的表达水平明显增高.SW1990胰腺癌细胞株HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白在缺氧条件下的表达显著增强,并随缺氧时间的延长而升高.结论 缺氧可诱导人胰腺癌SW1990细胞Glut1和VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF-1α途径介导的.     

缺氧诱导胃癌细胞SGC-7901中三叶因子3与血管内皮生长因子相互关系研究

目的 探讨在缺氧条件下胃癌细胞SGC-7901中三叶因子3(TFF3)与血管内皮生长因子(VEGF)及缺氧诱导因子(HIF-1α)的相互关系,了解TFF3在胃癌发生发展过程中的作用机制.方法 使用氯化钴( CoCl2)构建胃癌细胞株SGC-7901的缺氧模型.运用携带靶向干扰人类TFF3的pU6 siTFF3和pU6-mock分别转染胃癌细胞株SGC-7901.以嘌呤霉素为筛选药物,建立稳定特异性抑制TFF3的胃癌细胞株.在缺氧环境和常氧环境下培养胃癌细胞株SGC-7901和靶向干扰TFF3后的胃癌细胞株SGC-7901,运用定量PCR、ELISA和Western印迹分析等方法分别测定其TFF3、HIF-1α和VEGF的蛋白和mRNA表达情况.运用免疫荧光法观察在缺氧环境和常氧环境下胃癌细胞株SGC-7901中TFF3、HIF-1α的分布及表达量.结果 CoCl2缺氧处理能诱导胃癌细胞株SGC-7901中H1F-1α、TFF3和VEGF mRNA表达量上升(分别为33.4±1 8、14.8±1.1和15.1±1.2).稳定干扰TFF3的SGC-7901细胞在缺氧诱导下能下调VEGF和HIF-1蛋白的表达.结论 TFF3介导调节了缺氧条件下VEGF和HIF-1的表达,TFF3有可能是潜在的抗血管生成胃癌治疗靶点.     

肝癌组织缺氧诱导因子-1α的动态表达特征及其临床价值

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及转录异常对肝癌的临床价值.方法 以肝癌模型观察肝病理学、HIF-1α转录及表达水平的动态变化;以自身配对法收集手术切除的肝癌和癌周组织,抽提总RNA并扩增分析HIF-1α mRNA表达;以免疫组织化学和Western blot分析HIF-1α表达、胞内分布及临床病理学特征.根据不同资料采用方差分析、确切概率法、Pearson或Spearman等级相关分析进行统计学分析. 结果癌变过程中肝HIF-1α仅和HIF-1αmRNA均呈梯度表达.在对照组、变性组、癌前组和癌变组中,肝HIF-1α阳性率为0、77.8%、88.90/o和100%;HIF-1α/β-肌动蛋白比值为0.16±0.02、0.29±0.04、0.52±0.03和0.84±0.02,均显著高于对照组(P=0.000).人肝癌组织HIF-1α阳性率为80.0%(28/35),癌旁为100%(35/35),且与瘤体大小呈正相关,与分化程度呈负相关,与肿瘤数目及HBsAg阳性无关.结论 HIF-1表达与肝癌发生、发展相关,是肝癌治疗的分子靶目标.     

阻断缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子信号通路对膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨阻断缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对人膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建人膀胱癌小鼠原位移植瘤模型并注射基因制剂,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤微血管密度及凋亡的肿瘤细胞指数。结果肿瘤大小:治疗组为(19.80±3.47)mm2,对照组为(64.58±7.31)mm2,两组比较差异有统计意义(P<0.01);肿瘤微血管密度:治疗组为(2 537±309)个,对照组为(3 846±972)个,两组相比差异有统计学意义(P<0.05);凋亡指数:治疗组为21.84,对照组为13.52,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);制剂组无盆腔转移,对照组转移率为75.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论阻断HIF-1α/VEGF信号通路能够通过抑制肿瘤微血管形成并加速肿瘤细胞凋亡,遏制实验性人膀胱癌细胞的生长转移。     

血管紧张素Ⅱ在翻译后水平影响血管平滑肌细胞缺氧诱导因子1α表达的机制

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）以及脯氨酸羟化酶2（PHD2）、缺氧诱导因子1抑制因子（FIH-1）、p-ERK表达的影响,探讨PHD2、FIH-1、p-ERK在AngⅡ作用下对HIF-1α表达的影响机制。方法 HUASMC分为三组：（1）对照组：正常培养基培养细胞6 h;（2）AngⅡ组：含AngⅡ的培养基（终浓度为10^－6 mol/L）培养细胞6 h;（3）AngⅡ+PD98059组：含PD98059的培养基（终浓度为10^－5 mol/L）预处理细胞1 h后,加入含AngⅡ的培养基（终浓度为10^-6 mol/L）培养细胞6 h。RT-PCR检测细胞HIF-1α、VEGF、PHD2、FIH-1的基因表达;Western blot检测上述目的蛋白表达及p-ERK表达。结果 （1）与对照组比较,AngⅡ增加HUASMC中HIF-1α、VEGF 基因和蛋白表达（P＜0.05）,增加p-ERK蛋白表达（P＜0.05）,降低FIH-1 基因和蛋白表达（P＜0.05）,不影响PHD2 基因和蛋白表达;（2）与AngⅡ组比较,ERK抑制剂PD98059降低 HUASMC中HIF-1α、VEGF 基因和蛋白的表达（P＜0.05）以及p-ERK蛋白的表达（P＜0.05）,增加FIH-1的基因和蛋白表达（P＜0.05）。 结论 （1）AngⅡ增加HUASMC中HIF-1α、VEGF的表达,该作用通过激活ERK通路、抑制FIH-1表达,在翻译后水平减少HIF-1α的降解所致;（2）ERK抑制剂可削弱AngⅡ的促HIF-1α、VEGF表达作用。     

骨桥蛋白、血管内皮生长因子-A和乏氧诱导因子-1α在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨骨桥蛋白（OPN）、血管内皮生长因子-A（VEGF—A）和乏氧诱导因子（HIF）-1α在肝细胞癌（HCC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测肝癌组（90例）、癌旁肝硬化组（20例）及正常组（15例）中OPN、VEGF—A和HIF-1α的表达。结果OPN、VEGF—A和HIF-1α在HCC组呈明显高表达,阳性率分别为76．67％（69／90）、71．11％（64／90）和73．33％（66／90）。其中OPN、VEGF—A显著高于癌旁肝硬化组及正常组,HIF-1α在HCC组的表达与肝硬化组无差异,与正常组有显著差异。OPN、VEGF—A、HIF—1α的表达与肝癌的临床病理特征如癌栓形成、包膜完整性、肿瘤分化和分期、肿瘤转移等有相关性（P〈0．05）,三者之间表达呈正相关性（P〈0．05）。结论OPN、VEGF—A、HIF-1α在肝癌中高表达,联合检测有助于判断肝癌的生物学特征,为肝癌的分子靶向治疗提供重要的可能靶点。     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子在结直肠癌组织中的表达及意义

目的　检测缺氧诱导因子 - 1(HIF- 1)和血管内皮生长因子 (VEGF)与结直肠癌临床病理及预后的关系。方法　用免疫组化 SP法检测 6 1例结直肠癌组织中 HIF- 1α及 VEGF蛋白的表达。结果　结直肠癌组织中HIF- 1α蛋白呈高表达 ,阳性率为 6 5 .6 % ,癌旁及正常组织不表达 ,HIF- 1α与结直肠癌的浸润深度及淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 1) ,与 Dukes分期呈正相关 (P<0 .0 1) ;结直肠癌 VEGF阳性表达率为 4 9.2 % ,癌旁及正常黏膜几乎不表达 VEGF,癌间质血管内皮细胞不表达或弱表达 ,VEGF与结直肠癌的浸润深度及淋巴结转移相关(P<0 .0 5 ) ,与 Dukes分期呈正相关 (P<0 .0 2 ) ,且 VEGF阳性表达与 HIF- 1α阳性表达程度呈正相关 (P<0 .0 0 1)。结论　 HIF- 1α与 VEGF在结直肠癌浸润、转移过程中有协同作用 ,同时检测 HIF- 1α、VEGF蛋白的表达可作为判断结直肠癌浸润、转移和预后等生物学行为的重要参考指标     

肿瘤微血管密度、血管内皮生长因子与缺氧诱导因子-1α在脑胶质瘤中表达及其临床意义

目的 探讨肿瘤微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)与缺氧诱导因子(HIF)-1α 在脑胶质瘤中的表达及其临床意义.方法 人脑胶质瘤107例与正常脑组织20例,采用免疫组织化学法检测脑胶质瘤中的VEGF、HIF-1α 与MVD情况,并比较检测结果.结果 高级别脑胶质瘤组中VEGF的表达水平明显高于对照组和低...     

缺氧诱导因子1α在肝癌中的表达及意义

目的检测肝癌组织及培养的肝癌细胞株HepG2细胞中缺氧诱导因子1α（HIF1α）的表达及意义.方法用免疫组织化学、Western blot和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肝癌和正常肝组织及HepG2细胞中HIF1α蛋白质和mRNA的表达,并分析其与肝癌病理特点的关系.结果免疫组织化学显示HIF1α在肝癌组织中表达明显,阳性率达76.4%,显著高于正常肝组织;其表达与肿瘤的分化程度、有无癌栓有关（P＜0.05）,而与门静脉癌栓、乙型肝炎表面抗原及预后无关（P值均＞0.05）;Western blot 和RT-PCR检测结果与免疫组织化学结果一致.HIF1 α在HepG2细胞中表达的阳性率为93.6%.缺氧或加二氯化钴（150μmol/L）作用2 h后HIF1 α蛋白质及mRNA表达增加.结论HIF1α蛋白质在肝癌中表达明显,在癌组织中表达主要受氧的调节,与肿瘤分化程度及有无转移有关,而与有无门静脉癌栓、乙型肝炎表面抗原表达及预后无关.