双向电泳-质谱法探索实验性重症肌无力大鼠疾病相关蛋白

目的：分离和鉴定实验性自身免疫性重症肌无力大鼠血清差异表达蛋白，寻找并比较疾病相关蛋白，以进一步阐明重症肌无力的发病机制。方法：采用二维蛋白电泳技术分离正常组和模型组大鼠血清差异表达蛋白，凝胶经银染显色后，Bio—Rad凝胶扫描仪扫描，Imagemaster图像软件分析，差异蛋白点用基质辅助激光解析电离-两级飞行时间串联质谱法进行鉴定。结果：通过双向电泳，建立血清蛋白质双向电泳图谱，重症肌无力组血清双向电泳图谱可见678个蛋白点，而正常对照组可见702个蛋白点。选取9个具有明显差异的蛋白点进行质谱鉴定，共鉴定出5种蛋白质。结论：正常组和模型组大鼠间存在一定的差异表达蛋白。该类蛋白为一些与机体免疫应答、信息调控相关的蛋白质。     

健肌宁对实验性重症肌无力大鼠胸腺差异表达蛋白谱的影响

目的:观察中药复方健肌宁对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠胸腺差异蛋白表达的调控作用。方法:制备实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型,随机分为正常组、模型组、中药复方健肌宁组;采用双向电泳—串联质谱法分离和鉴定实验性重症肌无力大鼠模型组和正常组间差异表达蛋白,并观察应用中药复方健肌宁连续干预4周后,差异蛋白表达水平的变化。结果:在已鉴定的3个疾病相关蛋白中,健肌宁对于细胞凋亡双向调节因子、醛还原酶1、真核生物翻译起始因子4B表达水平的有调控作用(P<0.05),这些蛋白与细胞凋亡、蛋白质翻译密切相关。结论:实验性自身免疫性重症肌无力大鼠与正常大鼠间有差异表达的蛋白,中药复方健肌宁可以调节差异蛋白的表达水平。     

健肌宁对实验性重症肌无力大鼠胸腺差异表达蛋白谱的影响

目的：观察中药复方健肌宁对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠胸腺差异蛋白表达的调控作用。方法：制备实验性自身免疫性重症肌无力大鼠模型，随机分为正常组、模型组、中药复方健肌宁组；采用双向电泳—串联质谱法分离和鉴定实验性重症肌无力大鼠模型组和正常组间差异表达蛋白，并观察应用中药复方健肌宁连续干预4周后，差异蛋白表达水平的变化。结果：在已鉴定的3个疾病相关蛋白中，健肌宁对于细胞凋亡双向调节因子、醛还原酶1、真核生物翻译起始因子4B表达水平的有调控作用（P〈0．05），这些蛋白与细胞凋亡、蛋白质翻译密切相关。结论：实验性自身免疫性重症肌无力大鼠与正常大鼠间有差异表达的蛋白，中药复方健肌宁可以调节差异蛋白的表达水平。     

脾气虚证大鼠回肠组织蛋白质差异性表达的实验研究

目的采用蛋白质组学技术研究脾气虚证大鼠回肠组织蛋白的差异性表达。方法 37只大鼠随机分成3组,即正常对照组、脾气虚证模型组和利血平组。分别采用劳倦过度结合饮食不节和利血平注射液(1mg/mL)腹腔注射的方法建立脾气虚证动物模型,通过模糊数学方法鉴定后分离回肠组织,后采用双向电泳法分离差异表达的蛋白,凝胶银染后经选点、酶切和质谱分析,用MASCOT软件在蛋白质数据库中搜索肽质量指纹谱数据并确定蛋白质。结果脾气虚证模型组回肠组织蛋白质图谱中有3个蛋白点表达异常(P<0.05),利血平组回肠组织蛋白质图谱中有9个蛋白点表达异常(P<0.05)。结论脾气虚证的发生与白蛋白表达下调、胰蛋白酶和葡萄糖调节蛋白78表达上调有密切关系。     

半夏白术天麻汤对痰湿壅盛型高血压模型大鼠下丘脑蛋白质组学的影响

目的探讨半夏白术天麻汤治疗痰湿壅盛型高血压病的可能分子机制。方法大鼠高脂饮食24周建立痰湿壅盛型高血压模型,16只造模成功大鼠随机分为模型组和半夏白术天麻汤组,每组各8只,并以普通饲料喂养大鼠8只设为正常组。半夏白术天麻汤组给予半夏白术天麻汤13.8 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均灌胃12周。记录大鼠体重、血压,计算Lee's指数,检测大鼠血清葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇水平;双向电泳分离样品并且进行硝酸银染色,筛选下丘脑差异蛋白质点提交质谱鉴定,采用MALDI-TOF-TOF质谱仪进行质谱分析、肽指纹图谱进行蛋白质鉴定,选取部分蛋白质点验证蛋白质组学结果。结果半夏白术天麻汤组大鼠体重、血压、Lee's指数、血清总胆固醇均较模型组下降(P0.05)。正常组、模型组、半夏白术天麻汤组分别分离出3342、3844、3828个蛋白点,其中半夏白术天麻汤组同模型组比较,100个蛋白质表达降低,72个蛋白质表达增加。在质谱仪进一步鉴定的19种蛋白中,模型组与正常组相比有差异而半夏白术天麻汤可使差异趋势逆转的蛋白点为11个,其中5个表达上调,6个表达下调。结论半夏白术天麻汤治疗痰湿壅盛型高血压病的分子机制可能与改善细胞骨架和形态、内质网应激、能量代谢、神经元结构等有关。     

光剥舌苔的差异蛋白质组学研究

目的 利用蛋白质组学方法,识别剥苔差异表达的蛋白质,为进一步探讨病理舌苔产生机制奠定基础.方法 运用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离正常组和剥苔组舌苔组织的总蛋白质、银染显色、凝胶扫描入计算机,ImageMaster 2D Platinum软件分析比较电泳图谱.应用图象分析软件比较分析,识别差异表达的蛋白质:应用质谱仪(mass spectrometry)得到相应的肽质指纹图谱(peptide mass finger print,PMF),搜索数据库鉴定差异蛋白质.结果 建立正常舌苔和剥苔双向凝胶电泳图谱;对四组舌苔组织的蛋白质组进行分离分析,发现凝胶中可检测的蛋白质斑点数分别为1082±105个和1143±140个:较正常组8个蛋白质点表达上调、7个表达下调,鉴定出9种差异表达蛋白质.结论 建立了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱;可识别和鉴定出一些与剥苔相关的差异表达蚩白质.     

血府逐瘀汤对气滞血瘀证大鼠血清蛋白质组表达的影响

目的观察血府逐瘀汤对气滞血瘀证模型大鼠血清蛋白质组表达的影响,初步探讨血府逐瘀汤在分子水平的作用机理.方法复合因素制作大鼠气滞血瘀证模型,采集正常大鼠、气滞血瘀证大鼠及血府逐瘀汤治疗组大鼠的血清,应用一种简单的方法去除血清中的白蛋白,利用双向凝胶电泳分离血清总蛋白,通过Image Master 2D Elite 6.01凝胶图像分析软件分析2-DE图谱,比较各组问蛋白表达谱的改变情况.结果正常组大鼠血清蛋白质点为(354±20),模型组大鼠血清的蛋白质点为(347±37),治疗组大鼠的蛋白质点数为(360±35),软件分析确定的差异蛋白点有7个,其中模型组大鼠血清与正常组相比有1个蛋白质下调,5个蛋白质上调,1个蛋白表达缺失,而给予血府逐瘀汤后可改善这些改变及缺失的蛋白质的表达水平.结论血府逐瘀汤治疗气滞血瘀证的作用机制可能与这些差异表达的蛋白有关,这为血府逐瘀汤作用的分子机理研究提供了新的思路.     

局灶性脑缺血大鼠海马蛋白质组差异表达图谱的构建及针刺影响

[目的]构建局灶性脑缺血早期大鼠海马蛋白质组差异表达图谱,寻找与脑缺血相关蛋白质,探讨脑缺血的病理机制及针刺影响.[方法]Wistar大鼠随机分为正常组、假手术6 h、模型6h、醒脑开窍针刺6h(简称醒针6h)和传统对照6h组(简称对照6h),采用改进的线栓法制备动物模型.在规定时间快速断头取脑,剥离缺血侧海马,提取脑组织总蛋白进行双向电泳,以Image Master 2D V3.01 Elite软件进行图像分析.选取差异蛋白质点进行胶内酶解,以(MALDI-TOF-MS)测肽质量指纹图,检索Swiss-Port数据库,对蛋白质进行鉴定.[结果]正常组与假手术组比较无差异蛋白表达;模型组与正常组比较鉴定出差异蛋白质点29个,其中在模型6h组新出现1个,在模型6h表达上调的11个,表达下调的17个;醒脑开窍针刺组与模型组比较鉴定出差异蛋白质点21个,其中在醒脑开窍针刺组上调有16个,下调的有5个;对照组与模型组比较鉴定出差异蛋白质点20个,下调的有8个,上调的有12个.[结论]以双向电泳联合质谱技术,初步发现与脑缺血相关的部分蛋白质,有助于深入研究脑缺血性损伤病理机制,并发现针刺治疗脑缺血的部分靶蛋白质,及"醒脑开窍"针刺法与传统对照针刺治疗脑缺血性损伤作用机制的异同.     

红芪多糖3促进小鼠脾淋巴细胞增殖的差异蛋白质点分析

目的:分析红芪多糖3(HPS-3)作用于小鼠脾淋巴细胞后的差异蛋白质点,探讨红芪多糖3调节免疫的分子生物学机制。方法:提取正常小鼠脾淋巴细胞进行体外培养,用MTT法检测红芪多糖对小鼠脾淋巴细胞的刺激增殖作用,ELISA试剂盒测定培养上清中的IL-2含量,并运用双向电泳技术对脾淋巴细胞总蛋白进行分离,银染显色,PDQuest软件对凝胶图谱进行差异点分析,找出差异明显的蛋白质点。结果:HPS-3能够提高T淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌,实验所得2-DE凝胶图谱经PDQuest软件分析得出以下结果:HPS-3组中共有16个蛋白点发生明显改变,其中11个蛋白质点高表达,4个蛋白质点消失,1个蛋白质点低表达。结论:HPS-3能促进脾淋巴细胞增殖,显著影响小鼠脾淋巴细胞蛋白质表达。     

红芪多糖对老年性痴呆细胞模型损伤保护作用的差异蛋白质研究

目的:研究红芪多糖对Aβ1-42诱导的AD细胞模型保护作用及差异蛋白质的影响。方法:采用Aβ1-42建立AD细胞模型,HRP作用48h后,收集细胞,提取细胞总蛋白。采用双向电泳方法建立SH-SY5Y细胞的蛋白表达谱,银染后扫描凝胶获得蛋白图谱。使用PD Quest软件分析找出模型组和HRP处理组间的差异蛋白点,计算差异蛋白的等电点和理论分子量,对差异明显的蛋白点进行质谱鉴定。采用生物信息学方法对鉴定成功的蛋白质进行蛋白-蛋白相互作用网络分析。结果:建立了SH-SY5Y神经细胞的双向电泳蛋白表达谱。差异分析结果显示,模型组与HRP处理组间有22个差异蛋白点。应用质谱方法成功鉴定了4个差异蛋白质,分别为胆碱激酶a、Rag调节蛋白复合体LAMTOR1、转录因子蛋白AP-2-δ和铁蛋白,且Rag调节蛋白复合体LAMTOR1与铁蛋白存在相互作用关系。结论:红芪多糖对AD细胞模型的保护作用与其能够调节胆碱激酶a、Rag调节蛋白复合体LAMTOR1、转录因子蛋白AP-2-delta和铁蛋白的表达密切相关。     

由约至博由博返约

在我国医学史上,出现许多知识面广,学业精专的大医,他们无不由约至博,再由博返约,形成中医学上优良的治学风气.现代的中医人士应该继承和发扬刻苦治学传统,加强文言基础,钻研前代医家理论和医案,掌握医学动态,成为既有广博知识,又有精湛医技的医生.     

越怕越爱

恐惧与爱情是如此相似 两者都会提高身体反应，以作为紧急事故的准备 除此之外，它们也会让心跳加快，仿佛心脏要跳出业一样[编者按]     

金家虹从工到艺的跨越

金绣，层次分明，交相辉映；银线绣古朴文雅，素而不俗；彩线绣细密艳丽，形象活泼；杭绣，充分地体现了富贵、精美的宫廷审美艺术。     

疯着疯着便狂了

都说“演戏的疯子看戏的傻子”,看完宁浩的电影,不小心哼哼上琼瑶阿姨的老情歌：“你是疯（儿）我是傻,缠缠绵绵绕天涯”——从石头到赛车,从山城到滨海,剧中人呜呜跑,观众哗哗地追,笑声一泻千里。     

从生活通向生命

从睁开双眼到酣然入睡，抑或被闹铃从美梦中惊醒到辗转反侧茫然入梦。其间无数景象充斥双眼和七情六欲驱动浮想联翩的过程，基本上就是人们说的生活。     

从肝论治阳痿

阳痿属男性性功能障碍疾病。古今医学对阳痿的治疗 ,常从肾立论较为多见 ,而于肝一层 ,多有忽略。然本病病理变化复杂 ,累及脏腑恒多 ,治疗颇为棘手。笔者体会 :本病基本病理为“情志内伤 ,肝气受损”,而致变端丛生 ,临床上从肝论治确能收效 ,现将管见所及 ,胪列于次。1　阳痿形成 ,重责于肝本病形成与肝的关系十分密切。肝藏血 ,主宗筋 ,喜条达而恶抑郁。其病的发生 ,多因长期精神悒怏 ,或因遭受突然的精神刺激 ,使肝失其疏泄所致。肝气亏虚 ,疏泄不及 ,不能调节血量 ,宗筋就会松弛 ,血行不畅 ,瘀阻不通则阴器局部不能充盈而致痿 ;肝气横逆…     

辨证分型从肝论治眩晕

"诸风掉眩,皆属于肝",眩晕皆于肝有关,故宜辨证分型从肝论治。肝阳上亢,平肝潜阳,清火熄风,天麻钩藤饮;肝风夹痰,化痰熄风,健脾祛湿,半夏白术天麻汤;肝气郁结,疏肝解郁,清利头目,逍遥汤;肝火上炎,清肝泻火,养阴疏肝,龙胆泻肝汤;肝血亏虚,补血养肝,柔肝止眩,四物汤合归脾汤;肝阳虚馁,温阳暖肝,降逆和胃,吴茱萸汤。认识眩晕各证之间转化和兼夹证,以发展变化的动态思维具体分析,以便确定正确的治疗方法,切合病机,方可取得较好疗效。     

三代人的传承

玉，沉静了他浮躁的心。从玉那里，他不但找到了生活工作的方向，还学会了坦然承受生命里的成就和挫折，简单并快乐地生活。     

从肾论治痤疮

面部痤疮好发于青春期,严重影响美观。发病机制复杂,主要与肾脏密切相关,肾主藏精,主水,主纳气,病变机制与现代医学肾与下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统相似,从肾论治,补肾阴,清虚热,辨证加减用药,标本兼治,使阴平阳秘,以期取得更好的临床效果。     

从DNA看哮喘——访美国医学遗传学会资历认证临床分子遗传学家周慧君博士

普文养生:是什么样的理念让您提倡安全用药?周博士:据联合国世界卫生组织统计,全球死亡患者中,三分之一是死于不合理用药而非死于自然疾病本身。在我国,每年的住院病人约有5000多万,其中至少250万与药物不良反应有关,有约20万人因此而死亡。据粗略估计,对于一种特定的药物而言,只有三分之一的医生处方真正是对症下药,剩余的三