Curcumin induces apoptosis in breast cancer cells and inhibits tumor growth in vitro and in vivo

Curcumin has shown therapeutic and/or adjuvant therapeutic effects on the treatment of some patients with breast cancer. However, its mechanisms of action are largely unknown. This study was designed to investigate its antitumor effect and underlying mechanisms in human breast cancer MDA-MB-231 and MCF-7 cells. The MTT assay was used to evaluate cell viability, and flow cytometry, acridine orange staining and transmission electron microscopy were used to detect apoptosis for cultured cells. The protein expression in cells was evaluated by western blot analysis. Breast tumors were established by subcutaneous injection of MDA-MB-231 cells in nude BALB/c mice, and curcumin was administered to the mice. The size of tumors was monitored and the weight of tumors was examined. The exposure of breast cancer cells to curcumin resulted in growth inhibition and the induction of apoptosis in a dose-dependent manner. We also found that the expression of Bcl-2 protein decreased and the expression of Bax protein increased which lead to an increase of the Bax/Bcl-2 ratio. In mice bearing MDA-MB-231 xenograft tumors, administration of curcumin showed a significant decrease of tumor volumes and tumor weight compared with the control. Our results showed that curcumin exhibited antitumor effects in breast cancer cells with an induction of apoptosis.     

姜黄素对缺氧下大鼠星型胶质细胞的影响及机制研究

目的：探讨姜黄素对缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、细胞凋亡率及JAK2/STAT3信号通路的影响。方法：从大鼠大脑皮层分离培养星形胶质细胞,姜黄素干预缺氧条件星形胶质细胞,AG490作为JAK2/STAT3信号通路抑制剂,细胞缺氧处理24 h后,通过MTT法检测各组细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、JAK2/STAT3信号通路磷酸化的蛋白酪氨酸激酶2（p-JAK2）及磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)的蛋白表达。结果：与对照组比较,缺氧组细胞活力显著升高,凋亡率显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax、p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达显著升高（P<0.05）;与缺氧组比较,缺氧+姜黄素组胞活力显著降低,凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达显著降低（P<0.05）;与缺氧+姜黄素组比较,缺氧+姜黄素组+AG490组细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论：姜黄素可降低缺氧下大鼠星型胶质细胞活力,抑制细胞凋亡,其机制与JAK2/STAT3信号通路有关。     

StathminsiRNA抑制人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长并诱导细胞凋亡

目的: 探讨微管解聚蛋白stathmin对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长和细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法: 将0.1 mL SGC-7901细胞悬液(5×10¹⁰/L)接种于裸鼠背部一侧皮下,建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤模型,将其分为3组:PBS组(PBS治疗)、对照siRNA组(接种对照siRNA,终浓度为100 nmol/L)和stathmin siRNA组(接种stathmin siRNA,终浓度为100 nmol/L),治疗方式均为腹腔注射。连续2周观察荷瘤裸鼠的生长情况,免疫组织化学方法检测增殖抗原Ki-67的表达,采用TUNEL研究肿瘤组织中细胞的凋亡,Western blotting检测裸鼠肿瘤组织中stathmin、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果: Stathmin siRNA能明显抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长(P<0.05),stathmin siRNA组中裸鼠移植瘤的重量明显低于PBS组和对照siRNA组(P<0.05)。免疫组化结果表明,stathmin siRNA组中Ki-67的增殖指数明显低于PBS组和对照siRNA组(P<0.05)。TUNEL结果显示,stathmin siRNA组的凋亡细胞数显著高于PBS组和对照siRNA组(P<0.05)。Western blotting结果表明,与PBS组和对照siRNA组相比,stathmin siRNA组中stathmin和Bcl-2蛋白的表达显著下调,而Bax蛋白表达明显上升(均P<0.05)。结论: Stathmin在胃癌细胞增殖和细胞凋亡的调控中发挥重要作用,本研究有望为胃癌分子靶向治疗提供理论依据。     

姜黄素对大鼠胸主动脉瘤Bcl-2和Bax表达的影响

目的 探讨姜黄素对大鼠胸主动脉瘤形成过程中Bcl-2和Bax表达的影响。方法 将30只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组,即对照组、动脉瘤组和姜黄素治疗组。采用氯化钙（CaCl2）诱导法制备胸主动脉瘤模型,术后4周取材。HE染色及地衣红染色观察胸主动脉组织学改变;免疫组织化学和Western blotting方法检测动脉瘤壁Bcl-2和Bax的表达。结果 姜黄素可明显抑制胸主动脉的扩张。与对照组比较,动脉瘤组Bax表达水平明显升高,Bcl-2表达水平降低,姜黄素能有效降低动脉瘤中Bax的表达,升高Bcl-2表达水平。 结论 姜黄素可以促进胸主动脉瘤Bc1-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2的比值。     

Protective effect of Curcumin on chemotherapy-induced intestinal dysfunction

Objective: Chemotherapy is one of most important treatments for human cancers. However, side effects such as intestine dysfunction significantly impaired its clinical efficacy. This study aimed to investigate the protective effect of Curcumin on chemotherapy-induced intestinal dysfunction in rats. Methods: Sixty healthy Wistar rats were randomly divided into control group (normal saline), 5-FU group and 5-FU+Curcumin group. The weight, serum level of endotoxin, DAO and D-lactate were determined. The pathological change of intestinal mucosa structure was studied under light microscopy and electron microscopy. The expression of Bax, Bcl-2 and Caspase-3 were assessed by immunohistochemical staining. Results: The Curcumin intragastrically administrated obviously reduced 5-FU-induced weight-loss. 5-FU induced dramatic increase of serum endotoxin, D-lactate and D-Amino-Acid Oxidase (DAO) that were significantly reversed by Curcumin treatment. Meanwhile, 5-FU-induced-damage to intestinal mucosa structure was markedly recovered by Curcumin. The expression of Bax and Caspase-3 were dramatically increased after 5-FU treatment (p<0.01) and Curcumin treatment significantly reduced Bax expression (p<0.05) but had only a moderate effect on reducing caspase-3 expression (p>0.05). Interestingly, Bcl-2 expression was low in control group but increased after 5-FU treatment (p>0.05) and Curcumin treatment further stimulated Bcl-2 expression (p<0.05). Conclusions: Curcumin can significantly reverse chemotherapy-induced weight-loss, increase of serum endotoxin, D-lactate and DAO and damage to intestinal mucosa structure. Curcumin also reduced the expression of pro-apoptotic Bax but stimulated anti-apoptotic Bcl-2 to attenuate 5-FU-induced apoptosis of intestinal epithelial cells. The clinical administration of Curcumin may improve chemotherapy-induced intestinal dysfunction, thus increasing the clinical efficacy of chemotherapy.     

卡托普利对AGS胃癌裸鼠移植瘤模型的调控作用*

 目的： 观察血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对胃癌发生与发展的调控作用,探索其应用于胃癌临床治疗的可行性。方法: 制备AGS裸鼠移植瘤模型,随机分为3组：阳性对照（5-氟尿嘧啶,5-Fu）组、对照（生理盐水）组和实验（卡托普利）组。各组分别腹腔注射或灌胃后,观察肿瘤生长情况,组织取样,采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测Ki-67、STAT3、Bax和Bcl-2表达情况,TUNEL+DAPI染色法检测细胞凋亡。Western blotting 检测STAT3及p-STAT3表达。结果: 造模成功后,各组小鼠均出现差异不明显的肿瘤结块。14 d后,各组差异明显加大。对照组裸鼠肿瘤块生长最快,卡托普利组次之,阳性对照组最慢。实时荧光定量PCR与免疫组化检测结果显示,卡托普利组Bax较对照组表达升高,而STAT3、Ki-67以及Bcl-2的表达则降低（P<0.05）,卡托普利组上述因子表达趋势与5-Fu组表达趋势相一致,但2组间差异显著（P<0.05）;凋亡结果显示,相较于对照组,其它2组细胞凋亡率明显升高（P<0.05）; Western blotting结果也显示,5-Fu组及卡托普利组的p-STAT3与STAT3蛋白表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。结论: 血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对AGS裸鼠胃癌有较为明显的治疗效果,推测其可能具有较为可行的应用性。其分子机制可能是通过对STAT3转录活化因子以及Bax、Bcl-2、Ki-67等的调控,促使肿瘤细胞凋亡或抑制其生长。     

姜黄素通过下调nectin-4抑制肺癌PC-9细胞的迁移和侵袭

目的:探讨姜黄素对肺癌PC-9细胞迁移和侵袭的抑制作用及其与nectin-4表达的关系。方法:用MTT、划痕修复和Transwell小室实验检测姜黄素对肺癌PC-9细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;用Western blot技术检测姜黄素对nectin-4表达及AKT通路的影响;经siRNA干扰nectin-4后观察姜黄素对PC-9细胞活力、迁移、侵袭及AKT通路的影响。结果:姜黄素能抑制PC-9细胞活力,10、20μmol/L姜黄素组与对照组相比,划痕修复率降低,穿膜细胞数目显著下降。姜黄素作用肺癌PC-9细胞24 h后,nectin-4表达下调。转染siNectin-4 48 h和72 h后,siNectin-4组比对照组的细胞活力显著降低(P0.01),划痕修复率及穿膜细胞数目显著下降(P0.01)。姜黄素与siNectin-4均抑制了PC-9细胞AKT通路的激活。姜黄素与siNectin-4联用时细胞活力降低(P0.01),划痕修复率、细胞侵袭能力及AKT磷酸化水平下降。结论:在肺癌PC-9细胞中,姜黄素通过下调nectin-4表达、调控下游AKT通路来抑制细胞迁移和侵袭。     

白细胞介素-6对胰腺癌荷瘤小鼠移植瘤生长及Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的影响

目的 探讨白细胞介素（IL)-6促进胰腺癌MPC-83细胞荷瘤小鼠移植瘤生长的Caspase-3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路的作用机制。 方法 取40只小鼠,腋部皮下注射小鼠胰腺癌MPC-83细胞制作胰腺癌荷瘤动物模型,随机分为空白对照组（A组）,腹腔注射PBS 10 ml/kg;IL-6组（B组）,腹腔注射重组小鼠IL-6 200 μg/kg;IL-6受体阻断剂组（C组）,腹腔注射托珠单克隆抗体100 mg/kg;IL-6+IL-6受体阻断剂组（D组）,腹腔注射托珠单抗 100 mg/kg,30 min后再注射重组小鼠IL-6 200 μg/kg,每组10只。各组小鼠每3 d给药1次,持续至28 d。于实验开始后第0、7、14、21及28天,记录瘤体积变化;采用ELISA法检测瘤组织生存素（survivin）和细胞色素C（Cyt-C）含量;采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting法检测瘤组织Caspase-3、Bax及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结果 与A组比较,B组荷瘤小鼠瘤组织第7、14、21及28天生长较快,瘤组织生存素含量升高,细胞色素C含量下降,Caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调（P<0.05,P<0.01）;与B组比较,C组与D组荷瘤小鼠瘤组织第14、21及28天生长缓慢,瘤组织生存素含量降低,细胞色素C含量升高,Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达水平升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05,P<0.01）;C组与D组比较,各检测指标差异无显著性（P> 0.05）。结论 IL-6促进胰腺癌生长增殖的作用与其调控Caspase-3/Bax/Bcl-2细胞凋亡信号通路相关。     

姜黄素对裸鼠乳腺移植瘤p21及CD44V6表达的影响

目的: 研究姜黄素对裸鼠乳腺移植瘤p21及CD44V ₆表达的影响。方法: 选用人乳腺癌细胞株MCF-7对裸鼠进行异种移植,成瘤后随机分为2组：（1）阴性对照组；（2）姜黄素组。观测移植瘤的出瘤时间、成瘤率，测量瘤体大小并计算瘤表面积。同时应用RT-PCR，检测2组肿瘤组织中cyclin D1、p21及CD44V₆的表达。结果: 姜黄素组瘤表面积明显低于阴性对照组；姜黄素组p21表达量高于阴性对照组，CD44V₆表达量明显降低，2组的cyclin D1表达差异无显著。结论: 姜黄素抑制裸鼠MCF-7乳腺移植瘤CD44V₆的表达，增加p21的表达。     

外源性层黏连蛋白在姜黄素对人肝癌HepG-2细胞生长抑制作用中的影响

目的 探讨在外源性层黏连蛋白（LN）与其受体结合下,姜黄素对人肝癌HepG-2细胞生长、凋亡的影响。 方法 实验分为对照组、LN组（20μg/L LN）、姜黄素组（40μmol/L 姜黄素）、联合组（20μg/L LN+40μmol/L姜黄素）。采用酸性磷酸酶法(APA)、流式细胞术（FCM）和Western blotting 法等探讨在外源性LN与其受体结合下,姜黄素对人肝癌HepG-2细胞生长、细胞凋亡率、线粒体膜电位、细胞增殖相关蛋白α-蛋白激酶（α-PKC）及细胞凋亡相关蛋白人多聚ADP核糖聚合酶（PARP）、Caspase-3、Bcl-2和p53表达的影响。 结果 LN组与对照组相比,细胞存活率增加。姜黄素组与联合组能显著抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,并呈时间依赖性。姜黄素组与联合组作用48h时,倒置显微镜下,细胞数量明显减少,皱缩变圆,大部分细胞悬浮;中晚期凋亡和坏死细胞比率（%）分别为97.04±1.50,98.02±1.35;细胞内钙离子浓度升高;线粒体膜电位下降;增殖相关蛋白α-PKC含量减少;凋亡相关蛋白PARP出现剪切带,Caspase-3表达下调,p53表达上调,Bcl-2表达无明显变化。 结论 在外源性层黏连蛋白与其受体结合下,姜黄素与人肝癌HepG-2细胞作用后抑制生长并诱导细胞发生凋亡;显示出姜黄素抗肿瘤作用稳定,其机制可能与上调p53,下调α-PKC有关。     

北五味子总木脂素减轻内质网途径凋亡延缓小鼠脑衰老

 目的:利用D-半乳糖复制小鼠衰老模型,探讨北五味子总木脂素（SCL）抗小鼠脑衰老的作用及其作用机制。方法:实验分为空白对照组、模型组以及SCL低、中、高剂量组。小鼠跳台实验检测学习记忆能力,Western blotting方法检测泛素化蛋白（Ub）、葡萄糖调节蛋白78 （GRP78）、蛋白质二硫键异构酶（PDI）、C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达水平以及线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平。免疫组化法观察大脑皮质Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果:在学习测试中,模型组小鼠5 min 内错误次数较空白对照组增多（P<0.05）,SCL低、中、高剂量组小鼠5 min 内错误次数均较模型组减少（P<0.05）。在记忆测试中,模型组小鼠首次跳下平台的潜伏期较空白对照组缩短（P<0.05）,5 min内错误次数增多（P<0.05）;与模型组比较,SCL低、中、高剂量组小鼠首次跳下平台的潜伏期延长（P<0.05）,5 min 内错误次数减少（P<0.05）。与空白对照组比较,模型组的Ub、GRP78、PDI、CHOP和Bax蛋白表达水平均增加（P<0.05）,Bcl-2的蛋白表达水平降低（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值降低（P<0.05）。与模型组比较,北五味子总木脂素低、中、高剂量组脑组织的Ub、GRP78、PDI、CHOP和Bax蛋白表达水平均降低（P<0.05）,Bcl-2的蛋白表达水平升高（P<0.05）,Bcl-2/Bax比值升高（P<0.05）。空白对照组神经细胞形态正常,细胞浆的Bcl-2蛋白呈阳性表达,Bax蛋白呈阴性表达;模型组神经细胞变性,细胞浆的Bcl-2蛋白呈阴性表达,Bax呈阳性表达;SCL低、中、高剂量组变性细胞数量均明显减少,细胞浆内的Bcl-2蛋白呈阳性表达,Bax蛋白呈阴性表达。结论: 北五味子总木脂素具有抑制D-半乳糖诱导的小鼠脑组织衰老作用,其作用机制与减轻内质网应激途径凋亡有关。     

腺病毒介导的ING4对裸鼠人骨肉瘤移植瘤的生长抑制作用

目的:研究腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对MG-63人骨肉瘤细胞移植瘤的生长抑制作用及其机制.方法:将本室构建好的重组腺病毒表达载体Ad-ING4,经QBI-293A细胞感染多轮扩增后获得高效价重组病毒子以用于肿瘤基因治疗试验,首先建立MG-63人骨肉瘤细胞移植瘤裸鼠模型,然后将15只荷瘤裸鼠随机分为阴性对照组(PBS组)、空载体对照组(Ad-GFP组)、Ad-ING4实验组(Ad-ING4组),3组均使用瘤体内注射干预用药,隔日一次,共5次.分别于用药前和用药后测量皮下瘤的体积,治疗开始后的第15天将裸鼠脱颈处死,摘取瘤体称重,计算抑瘤率.HE染色观察移植瘤细胞形态,免疫组化法检测瘤体中Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF、CD34细胞因子的表达.结果:获得了高滴度(10~9pfu/ml)的重组腺病毒Ad-ING4;经瘤体基因治疗后,Ad-ING4组与PBS组及Ad-GFP组相比,可以明显抑制裸鼠MG-63人骨肉瘤细胞移植瘤生长,瘤重抑制率可达59.3%,移植瘤组织中可出现典型的细胞凋亡、坏死现象,其分子机制可能与Ad-ING4明显上调瘤体中促进凋亡的细胞因子Bax、Caspase-3的表达,下调抑制凋亡因子Bcl-2及血管形成细胞因子VEGF、CD34的表达有关.结论:Ad-ING4可以显著抑制MG-63人骨肉瘤细胞荷瘤生长,其机制可能通过激活细胞凋亡和抑制血管形成等途径来发挥抑瘤作用.     

Curcumin inhibits telomerase activity in human cancer cell lines

Curcumin, one of the major components of tumeric, the dried rhizome of Curcuma longa L, has been shown to have anti-proliferating and anti-carcinogenic properties. In this study, we examined the effects of curcumin on cell growth and telomerase activity in human cancer cell lines Bel7402, HL60 and SGC7901. Curcumin (1-32 microM) showed anti-proliferating effects on these cell lines in a dose-dependent manner in vitro, and anti-tumor effects when curcumin (50-200 mg/kg) was orally administered to nude mice transplanted with the cancer cells. When the cells were treated with 1 microM of curcumin for 120 h, apoptotic cells were observed by means of the adridine orange/ethidium bromide staining method, single cell microgel electrophoresis and flow cytometric analysis. On the other hand, suppression of telomerase activity in extracts of the cells treated with 1 microM of curcumin was observed by means of a telomeric repeat amplification protocol - silver staining assay. These results suggest that curcumin could suppress telomerase activity in the cancer cell lines and that the decrease of telomerase expression followed by induction of apoptosis might be involved in the anti-proliferating effect of curcumin.     

姜黄素对前列腺癌细胞LNCaP增殖的影响

目的:姜黄素对前列腺癌细胞株LNCap增殖和凋亡的影响。 方法:用不同剂量的姜黄素分别处理LNCap细胞，显微镜下观察细胞形态；MTT法检测细胞生长情况；流式细胞技术（FCM）检测细胞凋亡率；然后检测姜黄素处理LNCap细胞后培养液中总前列腺特异抗原（PSA）的变化，并用免疫印迹Western blotting技术检测雄激素受体（AR）的表达。 结果:姜黄素能够抑制前列腺癌细胞LNCap的增殖和生长，40 μmol/L作用24 h最强，细胞存活率为对照的40%；姜黄素诱导LNCap细胞凋亡，细胞形态呈凋亡特征，且40 μmol/L作用最强，凋亡率为9.23%；姜黄素抑制LNCap细胞PSA表达，且40 μmol/L姜黄素处理细胞24 h对PSA表达的抑制作用最强，PSA含量仅为对照的20%；Western blotting检测结果显示姜黄素抑制AR的表达，并且对AR表达的抑制程度依赖于姜黄素的浓度。 结论:姜黄素抑制LNCap细胞增殖，诱导细胞凋亡，且表现出时间和剂量依赖性。姜黄素抑制LNCap细胞PSA与AR 受体的表达。     

大豆异黄酮诱导裸鼠人胃癌移植瘤凋亡（英文）

目的：探讨大豆异黄酮诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的机制。方法： 建立人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤模型并测定移植瘤的生长曲线；25只BALB/C裸鼠接种胃癌原代细胞悬液生成移植瘤后，不同剂量的大豆异黄酮进行瘤旁注射，透射电镜和TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况，免疫组化法和RT-PCR法检测肿瘤组织的凋亡相关基因bcl-2和bax的表达情况。结果： 大豆异黄酮对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，在剂量为0.5 mg/kg、1 mg/kg、1.5 mg/kg时，其抑制率分别为10.6%、29.7%和39.1%；透射电镜发现大豆异黄酮导致移植瘤内大量细胞发生调亡；TUNEL染色法发现大豆异黄酮注射组瘤细胞的凋亡指数是随剂量递增（28.7%±1.1%、33.4%±1.4%和37.1%±1.0%）。免疫组织化学法发现大豆异黄酮注射组的Bcl-2蛋白阳性细胞率随剂量递减（11.8%±0.9%、5.7%±0.8%和4.0%±0.8%），而Bax蛋白阳性细胞率随剂量递增（20.0％±±1.2%、24.7％±0.9%和29.3%±1.6%）；RT-PCR法发现,大豆异黄酮注射组的〖STBX〗bcl-2〖STBZ〗 mRNA条带强度随剂量的增大而递减，并明显低于对照组P<0.05）；而bax mRNA条带强度递增，并明显低于对照组（P<0.05），而2对照组bcl-2，bax之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论： 大豆异黄酮对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导胃癌裸鼠移植瘤细胞发生凋亡，是其抗胃癌作用的机制之一。     

姜黄素对放线菌素D/TNF-α协同诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制研究

目的:观察中药单体姜黄素对ActD/TNF-α协同诱导PC12细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法确定实验药物的最佳浓度;Hoechst33258荧光染色法观察PC12细胞的凋亡;JC-1荧光分子探针检测线粒体膜电位;Real Time PCR检测凋亡基因Bcl-2/Bax的表达。结果:ActD/TNF-α协同作用可导致PC12细胞的活力降低(P<0.05);出现核固缩、核碎裂现象的细胞增多,细胞凋亡率增高(P<0.05);细胞线粒体膜电位下降;细胞内抗凋亡基因Bcl-2的表达降低(P<0.05)。经姜黄素(5μmol/L)处理后,PC12细胞的活力增强(P<0.05);细胞核固缩、核碎裂现象减少,细胞凋亡率下降(P<0.05);细胞线粒体膜电位上升;细胞内抗凋亡基因Bcl-2的表达增强(P<0.05)。结论:姜黄素可拮抗ActD/TNF-α引起的PC12细胞凋亡,可能与升高线粒体膜电位,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达有关。     

大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤时姜黄素后处理对肝细胞凋亡的影响

背景:姜黄素预处理可减轻肢体缺血再灌注对肝脏的损伤,但姜黄素后处理对肝脏冷缺血再灌注损伤是否有保护作用及其机制目前研究甚少。目的:探讨大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤时姜黄素后处理对肝细胞凋亡的影响。方法:选取成年雄性SD大鼠80只,采用随机数字表法将其分成4组(n=20):假手术组、冷缺血再灌注组、姜黄素后处理组、地塞米松组。使肝脏血流处于完全阻断状态,随后以脾静脉作为流入道和右肾上腺静脉作为流出道注入0℃复方乳酸林格液,冷灌注30min;停止冷灌注后,结扎近端脾静脉和右肾上腺静脉,切除脾脏,随即恢复肝脏血流,完成制作冷缺血再灌注模型。在大鼠冷缺血30min后,姜黄素后处理组经尾静脉注射姜黄素60 mg/kg,地塞米松组尾静脉注射地塞米松0.5 mg/kg,其他组以等量的生理盐水替代。再灌注6 h时经下腔静脉取血,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转移酶水平,随后处死大鼠,取肝组织检测丙二醛水平;采用苏木精-伊红染色观察肝脏病理变化;Hoechst33258染色法检测肝细胞凋亡指数;Westernblot检测肝组织Bcl-2和Bax蛋白表达;RT-PCR检测肝组织促细胞凋亡基因Caspase-9m RNA表达;ELISA检测肝组织肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平。结果与结论:①与假手术组比较,冷缺血再灌注组天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转移酶、丙二醛和凋亡指数明显升高(P<0.05);苏木精-伊红染色切片可见肝血窦内有大量炎性细胞浸润,肝细胞嗜酸性变,胞浆内疏松化,肝细胞呈气球样变,偶可见斑片状坏死,散在点状坏死灶;Bcl-2表达下降,Bax表达明显升高(P<0.05);Caspase-9 mRNA表达、肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平明显升高(P<0.05);②与冷缺血再灌注组比较,姜黄素后处理组天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸转移酶、丙二醛和凋亡指数明显下降(P<0.05);苏木精-伊红染色可见肝血窦内炎性浸润明显减轻,胞浆嗜酸性变和气球样变的肝细胞明显减少,但偶可见少量散在的点状坏死;Bcl-2表达升高,Bax表达明显下降(P<0.05);Caspase-9 mRNA表达、肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β水平明显下降(P<0.05);③姜黄素后处理组上述各指标与地塞米松组比较差异无显著性意义(P>0.05);④综上所述,姜黄素后处理可减轻大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤,其作用机制可能通过上调Bcl-2/Bax比值,抑制凋亡启动子Caspase-9mRNA的表达,减少炎性因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β的释放,发挥抗凋亡的肝保护作用。     

Curcumin inhibits the proliferation of human hepatocellular carcinoma J5 cells by inducing endoplasmic reticulum stress and mitochondrial dysfunction

Curcumin (diferuloylmethane), which is obtained from turmeric, the rhizome of Curcuma longa (L.), inhibits many human cancer cells. However, the molecular mechanisms responsible for curcumin-induced endoplasmic reticulum stress in human hepatic cellular carcinoma J5 cells, are not yet clearly understood. J5 cells were treated with various concentrations of curcumin for different durations. The cell viability was detected by MTT assay. The protein expressions of caspase-12, ATF6, GADD153, Calnexin, Calreticulin, PDI and Ero1-Lα, which are associated with endoplasmic reticulum stress and the unfolding protein response pathway, were examined by Western blot analysis. The cell cycle was analyzed by flow cytometry. The protein expressions of TCTP, Mcl-1, Bcl-2 and Bax, which are related to mitochondrial dysfunction, were detected by Western blot analysis. We also detected the ATF6 protein location by immunocytochemistry. The results showed that curcumin inhibits the proliferation of J5 cells in a time- and dose-dependent manner. Curcumin induced the unfolding protein response by down-regulating the protein expressions of Calnexin, PDI and Ero1-Lα and up-regulating the Calreticulin expression. Curcumin induces the GADD153 expression by cleaving caspase-12 and ATF6, and then by translocating ATF6 to the nucleus. Curcumin also down-regulates the protein expressions of TCTP, Mcl-1 and Bcl-2, in order to induce mitochondrial dysfunction. Curcumin induced cell cycle arrest at the G2/M phase by decreasing the Cdc2 expression. In conclusion, the present study showed that curcumin inhibits the proliferation of J5 cells by inducing endoplasmic reticulum stress and mitochondrial dysfunction.     

Curcumin inhibits NF-kB and Wnt/β-catenin pathways in cervical cancer cells

Curcumin is a natural non-toxic phenol which is isolated from Curcumin longa L. Mounting evidence has revealed the anticancer properties of curcumin in various tumors, but the underlying molecular mechanisms of this suppression in cervical cancer is still remained unclear. Here we assessed the antitumor effects of curcumin compared with 5-Fluorouracil in Hella cells in spheroids models and monolayer cell cultures.The anti-proliferative effects of curcumin and 5-Fluorouracil were as examined in spheroid and monolayer models. The expression levels of Wnt/β-catenin and NF-kB pathways as well as the influence of the cell cycle were evaluated. Curcumin inhibited cell growth in Hella cells through the regulation of NF-kB and Wnt pathways. Also, cells developed a G2/M cell cycle arrest followed by sub-G1 apoptosis with 5-Fluorouracil and curcumin. It was also shown that curcumin either considerably affects the Wnt/β-catenin and NF-kB pathways. We showed that curcumin inhibits invasion and proliferation of cervical cancer cells via impairment of NF-kB and Wnt/β-catenin pathways, proposing further studies on the potential impacts of this compound on cancer therapy.     

乳腺癌微环境成纤维细胞对乳腺癌细胞表达TIGAR 和Bcl-2 的影响

目的:探索乳腺癌微环境成纤维细胞对乳腺癌细胞表达TIGAR 和Bcl-2 的影响及对乳腺癌生长的作用。方法:体外实验,建立了人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 和人成纤维细胞株CCC-ESF-1 共培养模型,RT-qPCR 和Western blot 检测成纤维细胞对乳腺癌细胞表达TIGAR 和Bcl-2 的影响,Annexin V 流式细胞术和Caspase-3 活性荧光检测乳腺癌细胞的凋亡;体内实验,建立人乳腺癌荷瘤裸鼠模型,测量荷瘤裸鼠肿瘤体积,免疫组化检测移植瘤组织TIGAR 和Bcl-2 的表达。结果:体外实验研究结果显示,共培养的成纤维细胞可上调MDA-MB-231 细胞TIGAR 和Bcl-2 的表达并抑制MDA-MB-231 细胞的凋亡;体内实验研究结果显示,与乳腺癌细胞共植入的成纤维细胞能上调荷瘤裸鼠乳腺癌组织TIGAR 和Bcl-2 的表达,高表达的TIGAR 和Bcl-2 可加速荷瘤裸鼠乳腺癌组织生长。结论:乳腺癌微环境成纤维细胞可上调乳腺癌细胞TIGAR 和Bcl-2 的表达,高表达的TIGAR 和Bcl-2 抑制乳腺癌细胞的凋亡,促进了乳腺癌的生长。