食管鳞状细胞癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白和mRNA的表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与食管鳞状细胞癌侵袭、转移的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测50例食管鳞状细胞癌及50例正常食管组织中KISS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与食管鳞状细胞癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性.结果:食管鳞状细胞癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率(61.0%)低于正常食管组织(82.0%)(χ2=5.877,P<0.05),并且其低表达与淋巴结转移密切相关(χ2=4.340,P<0.05).食管鳞状细胞癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率(72.0%)高于正常食管组织(52.0%)(χ2=4.244,P<0.05),并且其高表达与肿瘤的浸润、淋巴结转移及分化程度均相关(P均<0.05).食管鳞状细胞癌组织中KISS-1 mRNA的阳性表达率(56.0%)及表达水平(0.992±0.090)均低于正常食管组织(88.0%,1.075±0.181)(P<0.05),并且其低表达也与淋巴结转移密切相关(P<0.05).食管鳞状细胞癌组织中MMP-9 mRNA的阳性表达率(72.0%)及表达水平(1.030±0.153)均高于正常食管组织(44.0%,0.943±0.085)(P<0.05),并且其高表达与肿瘤的深层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05).KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关(P<0.05).结论:KISS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与食管鳞状细胞癌的浸润、转移有关.二者有望成为判定食管鳞状细胞癌侵袭和转移能力的指标.     

Rab3D对食管鳞状细胞癌细胞系增殖及细胞周期素D1表达的影响

目的探讨Rab3D对人食管鳞状细胞癌细胞系增殖及细胞周期素D1(Cyclin D1)表达的影响。方法采用Western blot法从8株人食管鳞状细胞癌细胞系KYSE410、KYSE450、TE-1、TE-7、KYSE510、KYSE150、EC9706、EC109中筛选出Rab3D表达较低的2株食管鳞状细胞癌细胞株KYSE410、KYSE450及Rab3D表达较高的2株食管鳞状细胞癌细胞株EC109、EC9706,将KYSE410、KYSE450细胞株分别分为转染Rab3D质粒的Rab3D组和转染空载体的对照组,将EC109、EC9706细胞株分别分为转染Rab3D小干扰RNA(siRNA)的Rab3D siRNA组和转染阴性对照的阴性对照组,MTT法检测Rab3D对食管鳞状细胞癌细胞的增殖及Cyclin D1表达的影响,Western blot检测Cyclin D1蛋白的表达。结果 KYSE410、KYSE450食管鳞状细胞癌细胞株转染Rab3D组细胞的吸光度与本细胞株对照组比较,在转染后12 h差异无统计学意义(P>0.05),转染后24、48、72 h均高于本细胞株对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。EC109、EC9706食管鳞状细胞癌细胞株转染siRNA组细胞的吸光度在转染后12、24 h与本细胞株阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),转染后48、72 h均低于本细胞株阴性对照组(P<0.05)。KYSE410、KYSE450细胞转染Rab3D组Cyclin D1蛋白表达水平较本细胞株对照组增高(P<0.05);EC109、EC9706细胞转染siRNA组的Cyclin D1蛋白表达水平较本细胞株阴性对照组降低(P<0.05)。结论 Rab3D促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖,机制可能与促进Cyclin D1的表达有关。     

MMP-2和MMP-9在食管鳞状细胞癌患者癌组织中的表达及其意义

目的: 探讨食管鳞状细胞癌患者癌组织中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达,分析二者的关联性。方法: 选取食管鳞状细胞癌手术离体标本100例,取癌组织和对应的癌旁正常组织,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测MMP-2和MMP-9 mRNA表达,采用Western blotting法检测MMP-2和MMP-9蛋白表达;采用Pearson相关分析法分析癌组织中MMP-2和MMP-9 mRNA表达的相关性。结果: 食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常组织中MMP-2 mRNA阳性表达率分别为89.0%(89/100)和76.0%(76/100),两者比较差异有统计学意义(χ²=5.853,P=0.016);食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常组织中MMP-9 mRNA阳性表达率分别为48.0%(48/100)和16.0%(16/100),两者比较差异有统计学意义(χ²=23.529,P=0.000)。MMP-2 mRNA阳性表达率与食管鳞状细胞癌的浸润深度有关联(χ²=4.971,P=0.026),与淋巴结转移无关联(χ²=2.127,P=0.145);MMP-9 mRNA阳性表达率与食管鳞状细胞癌的浸润深度有关联(χ²＝4.421,P=0.035),与淋巴结转移无关联(χ²=0.617,P=0.432)。MMP-2 mRNA与MMP-9 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率呈正相关关系(r=0.274,P=0.006)。结论: MMP-2和MMP-9可能参与了食管鳞状细胞癌的发生发展,但在食管鳞状细胞癌淋巴结转移方面可能不发挥关键作用。     

MMP-9mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达

目的探讨MMP-9mRNA在食管鳞状细胞癌及癌旁正常组织中的表达是否存在差异。方法应用RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应法)检测MMP-9mRNA在100例食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中的表达。结果 MMP-9mRNA在癌组织中的表达率为48.0%(48/100),MMP-9mRNA在癌旁组织中的表达率为16.0%(16/100),统计学分析差异有统计学意义(χ2=23.529,P=0.000);MMP-9mRNA的表达与肿瘤浸润深度有关(χ2=4.488,P=0.034),与肿瘤淋巴结转移无关(χ2=0.617,P=0.432),与患者性别无关(χ2=2.519,P=0.113),与患者年龄无关(χ2=3.107,P=0.078),与肿瘤分化程度无关(χ2=2.091,P=0.148)。结论 MMP-9可能在食管鳞状细胞癌的肿瘤产生及肿瘤进展方面起了促进作用,但在食管鳞状细胞癌淋巴结转移转移方面可能不发挥关键作用。     

MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义 

目的：探讨MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌和对应癌旁组织中的表达差异
及其相关性。方法：选取新鲜手术切除的食管癌标本98例,每例分别取癌组织和对应的癌旁组
织各1份,采用RT-PCR法检测MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织和对应癌旁组织中的表达,分析食管癌组织中M
MP-9和TIMP-1 mRNA表达与临床病理特征的关系;采用Pearson相关分析法分析
MMP-9与TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中表达率的相关性。结果：食管癌
组织中MMP-9 mRNA阳性表达率高于癌旁组织,阳性表达率比较差异有统计学意义（χ2=22.873,P=0.000）;食管癌组织中TIMP-1 mRNA阳性表达
率高于癌旁组织,阳性表达率比较差异有统计学意义（χ2=7.864,P=0.005）。
MMP-9 mRNA表达率与食管鳞状细胞癌浸润深度有关联（χ2=5.022,P=0.025）,与食管
鳞状细胞癌淋巴结转移无关联（χ2=0.617,P=0.432）。TIMP-1 mRNA的表达与食管鳞状细胞
癌浸润深度有关联（χ2=4.982,P=0.026）,与食管鳞状细胞癌淋巴结转移无关联（χ2=0.527,P=0.468）。MMP-9 mRNA与TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中
的表达率呈正相关关系（r=2.237,P=0.028）。结论：MMP-9和TIMP-1 mRNA表达可能参与
了食管鳞状细胞癌的发生发展,但在食管鳞状细胞癌淋巴结转移方面可能不发挥关键作用。
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食管鳞状细胞癌组织中Ca125、Ca15-3、Ca19-9和Ca72-4的表达

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中Ca125、Ca15-3、Ca19-9和Ca72-4蛋白的表达.方法:采用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测59例食管鳞状细胞癌及相应癌旁黏膜组织中Ca125、Ca15-3、Ca19-9和Ca72-4蛋白的表达情况.结果:食管鳞状细胞癌组织中Ca125、Ca15-3的阳性表达率分别为20.7%和44.8%,高于癌旁黏膜组织(2.2%和12.8%.P均<0.05);食管鳞状细胞癌组织中Ca72-4的阳性表达率为22.0%,低于癌旁黏膜组织(61.4%.P<0.05).不同性别的食管癌患者癌组织中Ca15-3和Ca72-4的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05).结论:食管鳞状细胞癌的发生可能与Ca125、Ca15-3表达上调及Ca72-4表达下调有关;Ca15-3蛋白和Ca724蛋白的表达与性别有关.     

WHAMM在食管鳞状细胞癌组织中的表达及对EC109和KYSE510细胞生物学行为的影响

目的:探讨WHAMM在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及对ESCC细胞生物学行为的影响。方法:收集22例ESCC患者手术切除的癌组织和癌旁正常食管黏膜组织标本,采用qRT-PCR检测WHAMM mRNA的表达。分别比较GSE67269(n=73)、GSE161533(n=28)数据集和本研究收集标本中ESCC组织和癌旁正常食管黏膜组织WHAMM mRNA的表达情况。Kaplan-Meier法绘制TCGA数据集中84例ESCC患者的生存曲线,采用Log-rank检验分析WHAMM的表达与患者预后的关系。取EC109和KYSE510细胞分为两组：过表达组细胞感染携带WHAMM过表达载体的慢病毒,阴性对照组感染携带空载体的对照病毒。采用CCK-8和Transwell法检测细胞的增殖、迁移和侵袭情况。结果:GSE67269、GSE161533数据集和本研究ESCC组织中WHAMM mRNA的表达均高于癌旁正常食管黏膜组织(P<0.05)。WHAMM低表达组生存状况好于高表达组(P=0.023)。与阴性对照组比较,过表达组EC109和KYSE510细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(P&...     

雷帕霉素抑制mTOR信号通路对EC9706细胞生长及凋亡的影响

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的活性及雷帕霉素(rapa)对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706细胞生长及凋亡的影响.方法:采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织及15例正常食管组织中mTOR蛋白的表达.分别用不同浓度(20、50和100 nmol/L)的rapa处理食管鳞状细胞癌EC9706细胞系,以未处理组作为阴性对照,采用流式细胞术测定细胞周期和凋亡率.结果:食管鳞状细胞癌组织中mTOR蛋白的阳性表达率为64.0%(32/50),高于正常组织的13.3%(2/15)(χ2=11.873,P=0.001).与对照组比较,rapa可使细胞停滞于G0/G1期(F=102.609,P=0.001),且明显促进细胞凋亡(F=916.882,P=0.001).结论:mTOR信号通路在食管鳞状细胞癌中被显著激活,rapa能抑制食管鳞状细胞癌细胞生长并诱导细胞凋亡.     

TFPI-2和MMP-9在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与血管生成拟态的关系

目的：探讨组织因子途径抑制剂2（TFPI-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在食管鳞状细胞癌中的表达及其与血管生成拟态（VM）的关系。方法：收集手术切除的162例食管鳞状细胞癌标本，采用过碘雪夫酸(PAS)和CD34双重染色法观察VM在食管鳞状细胞癌组织中的分布特征。采用免疫组织化学SP法检测TFPI-2和MMP-9在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况。分析VM与食管鳞状细胞癌临床病理参数以及TFPI-2和MMP-9表达的关系。结果：食管鳞状细胞癌组织中VM阳性率为20.37%。低分化组VM阳性率（40.38%）高于中分化组(11.76%）和高分化组(7.14%)，3组间比较差异有统计学意义（χ2=20.915，P<0.01）。TNM Ⅰ-Ⅱ期组VM阳性率(11.59%)低于Ⅲ期组（26.88%)(χ2=5.707，P=0.017）。在低分化组中，TFPI-2在VM(+)组的表达率［33.34%（7/21）］高于VM（-）组［6.45%（2/31）］（χ2=4.582，P=0.032）；MMP-9在VM(+)组的表达率［78.79%（26/33）］高于VM（-）组［44.96%（58/129）］（χ2=12.05，P=0.001）；低分化组TFPI-2的表达水平与VM呈正相关关系（r=0.166，P=0.032）,MMP-9的表达水平与VM呈正相关关系（r=0.183，P=0.018），VM（－）组5年生存率高于VM(+)组（χ2=22.84，P<0.001)。结论：低分化及晚期食管鳞状细胞癌易形成VM，VM与食管鳞状细胞癌的不良预后有关，且TFPI-2和MMP-9对VM的形成有促进作用。     

Slug及MMP-9在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的观察Slug及MMP-9在食管鳞状细胞癌中的表达情况及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测70例食管鳞状细胞癌组织、20例癌旁异型增生及20例正常对照组织中Slug、MMP-9的表达情况。结果 (1)Slug、MMP-9在食管鳞状细胞癌中表达显著高于正常对照组(P0.05);(2)食管癌组织中Slug表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和pTNM分期密切相关(P0.05)。MMP-9表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关(P0.05),而与pTNM分期无关(P0.05);(3)食管癌组织中Slug与MMP-9表达呈正相关(P0.05)。结论 Slug、MMP-9在食管癌的发生发展,以及癌细胞的浸润和转移中发挥重要作用,可能成为食管癌治疗的靶点及评价预后的指标。     

AJUBA在食管鳞状细胞癌KYSE150细胞中的功能

目的 研究AJUBA对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移与增殖的作用.方法 用慢病毒转染AJUBA的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)至KYSE150细胞系,实验分为对照组与敲降组,其中对照组包括KYSE150组(未转染的KYSE150细胞)和KYSE150shnon组(转染随机序列),敲降...     

CAPN4与食管鳞形细胞癌增殖和迁移关系的体外研究

 目的 探讨钙蛋白酶小亚基1(calpain small subunit 1,CAPN4)在食管鳞形细胞癌细胞系中的表达水平,分析其与食管鳞形细胞癌细胞增殖和迁移能力的相关性。 方法 挑选人正常食管上皮细胞系HEEC及食管鳞形细胞癌细胞系EC109与KYSE510,应用Western blot检测细胞系中CAPN4蛋白质水平,应用RNA干扰下调EC109与KYSE510中CAPN4的表达水平,通过CCK-8与Transwell实验分别检测细胞增殖与迁移能力的变化。同时用Western blot检测细胞系中增殖和迁移相关蛋白质水平。结果 CAPN4在EC109与KYSE510中的蛋白质水平显著高于HEEC,下调EC109与KYSE510中CAPN4蛋白质水平后,细胞增殖与迁移能力均显著降低(P<0.05),MMP-2蛋白质水平下调。 结论 CAPN4在食管鳞形细胞癌中高表达,促进食管癌增殖和迁移,并与下游分子MMP-2的表达水平密切相关。     

食管鳞状细胞癌组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系

目的:探讨食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系。方法:制备组织芯片,应用免疫组化SP法检测63例食管鳞癌及其癌旁正常食管黏膜组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达,分析2种蛋白的表达与临床病理指标和预后的关系。结果:食管鳞癌组织中Galectin-9蛋白的阳性表达率为62.5%,低于癌旁正常食管黏膜组织的89.3%(χ2=11.529,P<0.001),其表达与肿瘤的分化程度有关(P=0.001),且阳性表达者生存期更长(P=0.013)。食管鳞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率为67.9%,高于癌旁正常食管黏膜组织的35.7%(χ2=9.633,P=0.001),其表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),且阳性表达者生存期较短(P=0.036)。结论:食管鳞癌组织中Galectin-9低表达,MMP-2高表达;检测二者可用于判断食管鳞癌预后。     

食管鳞状细胞癌组织中线粒体DNA含量及拷贝数量的变化

目的:比较食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)含量及拷贝数量的差异,探讨mtDNA与食管鳞状细胞癌发生、发展的关系.方法:应用半定量PCR法分别扩增62例食管鳞状细胞癌组织及其相应的癌旁组织和正常食管组织中的mtDNA编码区,琼脂糖凝胶电泳比较3种组织中mtDNA含量的差异;利用荧光定量PCR技术定量检测上述3组样品中的mtDNA拷贝数,并采用琼脂糖凝胶电泳对mtDNA含量进行定性检测.结果:食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织及正常食管组织中mtDNA的检出率均为100%(62/62),但食管鳞状细胞癌组织中mtDNA相对含量高于癌旁组织及正常食管组织(P＜0.05).食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中mtDNA的平均拷贝数分别为(26.79±0.92)×106、(26.43±0.96)×106和(25.42±0.85)×106,3组间比较差异有统计学意义(F=37.532,P＜0.05).2种PCR结果一致.结论:mtDNA拷贝数量的增加与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关.     

食管鳞状细胞癌组织ERK2蛋白的表达及意义

目的:研究细胞外信号调节激酶2(extracellular regulated kinase 2,ERK2)在食管鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其在食管鳞状细胞癌发生、发展过程中的作用机制。方法:采用免疫组化(SP)法,检测ERK2蛋白在40例食管鳞状细胞癌组织及其配对癌周正常食管黏膜组织中的表达。结果:食管鳞状细胞癌组织中ERK2蛋白阳性表达率高于癌周正常食管黏膜组织(P<0.05)。ERK2蛋白的表达与年龄、性别、分期、癌组织的分化程度及淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论:ERK2在食管鳞状细胞癌组织中呈高表达,提示它可能参与了食管鳞癌的恶性进展。     

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在鼻咽鳞状细胞癌中的表达和临床意义

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和血管内皮生长因子 (VEGF)在鼻咽癌中的表达及与肿瘤浸润、转移的关系。方法　运用免疫组化SP法 ,对 5 0例鼻咽鳞状细胞癌 ,10例鼻咽部慢性粘膜炎 ,10例正常粘膜组织的石腊包埋标本中MMP 9和VEGF表达进行联合检测。结果　MMP 9和VEGF在鼻咽鳞状细胞癌中的表达与肿瘤浸润、转移有关。结论　MMP 9和VEGF在鼻咽鳞状细胞癌中有差异性表达 ;肿瘤细胞浸润与MMP 9表达关系最密切 (P<0 .0 1) ,颈淋巴结转移与否同VEGF表达水平高低密切相关 (P <0 .0 1) ,MMP 9和VEGF可作为临床评估鼻咽鳞状细胞癌浸润、转移潜能的生物学指标。     

沉默环状RNA hsa＿circ＿0076535表达对食管鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的探究circRNA hsa_circ_0076535在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的作用。方法选取ESCC患者肿瘤组织及相匹配的癌旁组织、ESCC细胞(Het-1A、Eca109、KYSE170)进行研究。实时荧光定量聚合酶链反应检测hsa_circ_0076535在ESCC组织及细胞内的表达水平;利用siRNA技术下调ESCC细胞内hsa_circ_0076535的表达水平,随后通过CCK-8法及克隆形成实验检测KYSE170细胞的增殖能力;划痕实验检测KYSE170细胞迁移能力;Transwell实验检测KYSE170细胞侵袭能力。结果实验结果表明,hsa_circ_0076535在ESCC组织及细胞中高表达(P0.05),且下调KYSE170细胞内hsa_circ_0076535的表达水平后,细胞增殖、迁移及侵袭能力均显著下降(P0.05)。结论下调hsa_circ_0076535的表达水平能够抑制ESCC细胞增殖、迁移及侵袭的能力,这提示hsa_circ_0076535可能作为诊断和治疗ESCC的潜在作用靶点。     

舌鳞状细胞癌中PCDGF和MMP-9蛋白的表达及临床意义

目的:探讨畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在舌鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测45例舌鳞状细胞癌和12例正常舌组织中PCD...     

食管鳞状细胞癌组织中FAK、Paxillin和MMP-9蛋白的表达及临床意义

目的 探讨FAK、Paxillin和MMP-9蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组化SP法检测59例ESCC组织、27例癌旁不典型增生组织及36例健康食管黏膜组织中FAK、Paxillin及MMP-9蛋白的表达,并分析3种蛋白与临床病理学参数之间的关系.结果 FAK、Paxillin及MMP-9蛋白在ESCC组织中的表达均明显高于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织,差异均有统计学意义(P<0.05).FAK和Paxillin蛋白表达与ESCC的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05),MMP-9蛋白表达与癌的组织学分级及淋巴结转移密切相关(P<0.05);进一步相关性分析表明,MMP-9与FAK、Paxillin蛋白表达呈正相关关系(r值分别为0.299和0.464,P值分别为0.022和0.000).结论 FAK、Paxillin及MMP-9的高表达可能在食管鳞癌的浸润转移中发挥重要作用.