miRNA-425-5P在胃癌中的表达及临床价值

目的 探讨miRNA-425-5P在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测90例胃癌组织及胃癌细胞(MGC-803、SGC-7901)中miRNA-425-5P的表达量,分析miRNA-425-5P与临床病理特征的关系.结果 miRNA-425-5P在胃癌组织及胃癌细...     

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力.结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01).孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05).迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01).结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展.     

LncRNA CASC15通过miR-153-3p/Nrf2反馈环调控胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化

目的:探讨LncRNA CASC15通过miR-153-3p/Nrf2反馈环对SGC-7901细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响.方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法分析胃癌组织、癌旁正常组织、SGC-7901细胞、GES-1细胞中LncRNA CASC15、miR-153-3p和Nrf2的表达量...     

O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在顺铂激活的胃癌细胞自噬中的作用

目的 探讨DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O-6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)在顺铂(cisplatin)激活的胃癌SGC-7901细胞自噬中的作用.方法 Western blot法检测自噬底物蛋白p62水平、自噬标志分子Ⅱ型和Ⅰ型微管相关蛋白轻链3(mircotuble-associated protein light chain 3,LC3)的比值变化、MGMT蛋白水平;GFP-LC3表达质粒转染胃癌SGC-7901细胞后用激光共聚焦显微镜观察顺铂对细胞自噬小体形成的影响.qRT-PCR法检测MGMT基因mRNA表达水平.结果 顺铂剂量依赖性激活胃癌SGC-7901细胞自噬水平,显著增加SGC-7901细胞中自噬小体数量;MGMT mRNA及蛋白水平随顺铂浓度的增加而降低(P＜0.05);过表达MGMT抑制胃癌SGC-7901细胞的基础自噬水平;过表达MGMT抑制顺铂激活的胃癌SGC-7901细胞自噬.结论 DNA修复酶O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶抑制顺铂激活的胃癌SGC-7901细胞自噬.     

miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其靶向调控CTDP1基因表达机制

目的：探讨miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的分子机制。方法：取经病理诊断确诊为胃癌的68例患者的胃癌组织及其癌旁组织。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胃癌组织、癌旁组织和人正常胃黏膜上皮GES-1细胞、人胃癌细胞（MKN-28、MGC-803、 MKN-45、 SGC-7901和HGC-27）中miR-431-3p及羧基末端结构域磷酸酶1 (CTDP1)mRNA表达水平,Western blotting法检测上述细胞中CTDP1蛋白和各组SGC-7901细胞中细胞色素C(Cyt C)、B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。采用Pearson相关分析法分析miR-431-3p与CTDP1 mRNA表达水平的相关性,双荧光素酶报告基因实验检测miR-431-3p和CTDP1的靶向关系。将miR-431-3p mimic和CTDP1过表达慢病毒分别或同时转染至SGC-7901细胞中,将细胞分为空白组、空载过表达（mimic NC）组、miR-431-3p过表达（miR-431-3p mimic）组、空载慢病毒（Ve...     

微RNA-340-5p靶向分化抑制因子3抑制人食管鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移及侵袭

目的 探索miRNA-340-5p对分化抑制因子3(ID3)的调控机制及对食管鳞状细胞癌细胞生物学功能的影响.方法 通过生物信息学分析、qRT-PCR及蛋白质印迹法初步验证人食管鳞状细胞癌Eca109细胞中miRNA-340-5p对ID3表达的影响,并检测12对食管鳞状细胞癌组织和癌旁正常组织中miRNA-340-5p和ID3的表达水平.采用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-340-5p对ID3的调控作用.采用CCK-8、平板克隆形成实验及Transwell实验考察miRNA-340-5p对Eca109细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.结果 通过生物信息学分析及实验验证筛选出11个最有可能与ID3基因结合的miRNA,其中miRNA-340-5p在转录和翻译水平对ID3表达的下调作用最显著.双荧光素酶报告实验结果证实miRNA-340-5p能与ID3基因直接结合.相比癌旁正常组织,miRNA-340-5p在食管鳞状细胞癌组织中低表达、ID3 mRNA高表达(P均<0.01),且在癌组织中miRNA-340-5p与ID3 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.71,P<0.01).细胞功能学实验表明,miRNA-340-5p能够抑制Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭(P均<0.01).结论 miRNA-340-5p靶向ID3基因抑制人食管鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移及侵袭.     

MiRNA-142-5p在大鼠角膜新生血管中的作用及机制研究

目的 观察microRNA-142-5p(miRNA-142-5p)对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CorNV)的作用及其与VEGF/PI3 K/AKT通路的关联情况.方法 角膜缝线法诱导SD大鼠右眼CorNV作为实验组,左眼作为对照组.取缝线后第7天的角膜进行实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测miRNA-142-5p以及VEGF mRNA的表达水平.将miRNA-142-5pmimic转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),RT-PCR检测miRNA-142-5p的表达量来验证转染是否成功.并通过RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HUVECs中VEGF及PI3 K/AKT mRNA和蛋白的表达量.分别用Transwell、CCK-8法及Matrigel胶管腔形成实验检测HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力.结果 成功建立CorNV模型.RT-PCR结果显示7d组miRNA-142-5p(6.799±1.683)和VEGF(3.297±0.334)的表达量较正常角膜组(normal)显著升高(P＜0.01).转染miRNA-142-5p mimic后的miRNA-142-5p的表达量显著高于空白对照及阴性对照组(P＜0.01).Transwell、CCK-8及Matrigel胶管腔形成实验结果示miRNA-142-5p提高了HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力(P＜0.01).转染miRNA-142-5p mimic后HUVECs中VEGF及PI3 K/AKT的mRNA及相应蛋白的表达均明显上升(P＜0.05).结论 CorNV中miRNA-142-5p及VEGF的表达明显上调,过表达miRNA-142-5p可以显著提高HUVECs中VEGF及PI3 K/AKT通路各主要成员mRNA和蛋白的表达水平,进而促进HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力.表明miRNA-142-5p可通过PI3K/AKT通路参与CorNV的调控.     

微RNA-455-3p在糖尿病肾病大鼠肾小球硬化过程中的作用及厄贝沙坦对其的影响

目的 探讨miRNA-455-3p在糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小球硬化过程中的作用,以及厄贝沙坦对这一过程的影响.方法 miRNA-455-3p激动剂干预实验:雄性SD大鼠18只,随机取其中6只作为对照组;其余12只大鼠采用高脂高糖饲料喂养及链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射制备DKD模型,造模成功后随机分为模型组(STZ组)和过表达miRNA-455-3p组(STZ+miRNA-455-3p组),每组6只,其中STZ+miRNA-455-3p组在STZ注射后第2周和第5周时以20 mg/kg的剂量腹腔注射miRNA-455-3p激动剂.厄贝沙坦干预实验:雄性SD大鼠18只随机分为对照组、模型组(STZ组)、厄贝沙坦干预组(STZ+厄贝沙坦组),每组6只,其中STZ+厄贝沙坦组予以50 mg/kg的厄贝沙坦悬浊液灌胃.所有大鼠均于12周后记录24 h尿量、24 h尿蛋白水平,采用qRT-PCR法检测各组大鼠血清及肾组织中miRNA-455-3p的表达水平,过碘酸希夫染色法观察大鼠肾组织病理改变,蛋白质印迹法检测肾组织中胶原蛋白Ⅰ和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平.结果 STZ+miRNA-455-3p组及STZ+厄贝沙坦组大鼠24 h尿量、24 h尿蛋白水平均较STZ组降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);STZ+miRNA-455-3p组及STZ+厄贝沙坦组大鼠血清及肾组织中miRNA-455-3p表达水平均较STZ组升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);STZ+miRNA-455-3p组及STZ+厄贝沙坦组大鼠肾组织中胶原蛋白Ⅰ、PCNA表达均较STZ组减少,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 miRNA-455-3p参与DKD进程,可能是DKD治疗的新靶点,而厄贝沙坦能够通过调控miRNA-455-3p表达延缓DKD肾小球硬化进程.     

老年类风湿关节炎患者血清中miRNA-126-3p、miRNA-221-3p的表达及其和关节症状的关联性研究

目的 通过检测老年类风湿关节炎(RA)患者血清中miRNA-126-3p和miRNA-221-3p的表达,探讨其在RA发病中的作用。方法 选择2018年6月—2021年6月本院收治的老年RA患者80例和同期健康者80名为研究对象,比较两组受试者关节特征(关节晨僵持续时间、关节压痛、关节肿胀、关节功能障碍、关节疼痛评分、28个关节疾病活动度)和相关生化指标(红细胞沉降率、类风湿因子、C反应蛋白),测定血清中的miRNA-126-3p和miRNA-221-3p水平,并分析miRNA水平与关节特征和相关生化指标的相关性。结果 老年RA患者关节特征、相关生化指标及血清miRNA-126-3p和miRNA-221-3p水平均升高(P<0.0001),且miRNA-126-3p和miRNA-221-3p与RA临床特征呈正相关关系(P<0.0001)。结论 老年RA患者血清中miRNA-126-3p和miRNA-221-3p表达升高且与RA关节症状等临床特征密切相关,可作为老年RA疾病诊断和活动度监测有希望的生物标志物。     

微RNA-139-5p对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨微RNA(miR)-139-5p对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能的作用机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测永生化胃黏膜上皮细胞GES1和胃癌细胞SGC-7901、AGS和BGC-823中miR-139-5 p的表达,Western blot法检测GES1、SGC-7901、AGS和BGC-8...     

miRNA-124-3p抑制剂通过Wnt/β-catenin信号通路调节缺氧缺糖心肌细胞凋亡的研究

目的 利用缺氧缺糖(OGD)诱导心肌细胞损伤的模型,探讨miRNA-124-3p抑制剂对Wnt/β-catenin信号通路及心肌细胞凋亡的影响.方法 利用低氧培养箱与低糖DMEM培养基建立OGD细胞模型,细胞分为正常对照组、OGD组、NC-siRNA组、miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组,利用Western blot检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1 siRNA对模型细胞中Wnt1及β-catenin表达的影响;利用CCK-8实验检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1 siRNA对心肌细胞活性的影响;利用Western blot检测miRNA-124-3p抑制剂与Wnt1 siRNA对凋亡相关的蛋白p53、Bcl-2、Bax及裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)的影响.利用ELISA检测各组细胞悬液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6与IL-1β的水平.结果 miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组心肌细胞Wnt1及β-catenin表达水平降低.CCK-8检测结果显示,与OGD组比较,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组心肌细胞活性增高,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05).Western blot结果显示,与OGD组比较,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组p53、Bcl-2表达水平升高,Bax及cleaved-caspase-3蛋白表达水平降低,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05).ELISA结果显示,miRNA-124-3p抑制剂组和Wnt1 siRNA组TNF-α、IL-6与IL-1β水平降低,而二者比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 miRNA-124-3p抑制剂通过调节Wnt1及β-catenin表达来调控Wnt/β-catenin信号通路,进而调控OGD条件下诱导的心肌细胞的凋亡,减轻细胞损伤,降低炎性因子的释放,发挥心肌保护作用.     

Src激酶和p38激酶在乙酰肝素酶促进人胃癌细胞迁移和侵袭中的作用及相互关系

目的 探讨Src激酶和p38激酶在乙酰肝素酶促进人胃癌细胞迁移和侵袭中的作用及相互关系.方法 实验设正常对照组(细胞未作其他处理)、人乙酰肝素酶重组蛋白处理组(5、10 μg/ml)以及提前3 h加入Src激酶特异性抑制剂pp2(5 μmol/L)或p38激酶特异性抑制剂SB 203580(1 μmol/L)再加入人乙酰肝素酶重组蛋白(10 μg/ml)作用24 h组.利用划痕损伤实验和Transwell小室基质侵袭实验分别检测各处理组对人胃癌MGC-803细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot法检测各处理组对人胃癌MGC-803细胞、高表达乙酰肝素酶的人胃癌SGC-7901细胞和乙酰肝素酶表达被下调的SGC-7901-Heparanasel(-)细胞中Src激酶、p38激酶、磷酸化Src激酶(p-Src)和磷酸化p38激酶(p-p38)蛋白表达的影响.结果 与正常对照组比较,5和10 μg/ml人乙酰肝素酶重组蛋白均能明显增强人胃癌MGC-803细胞迁移和侵袭能力(P<0.05);与未加抑制剂的人乙酰肝素酶重组蛋白比较,抑制剂pp2和SB 203580均能削弱人乙酰肝素酶重组蛋白增强的人胃癌MGC-803细胞的迁移和基质侵袭能力(P<0.05).10 μg/ml人乙酰肝素酶重组蛋白促进人胃癌MGC-803细胞Src激酶和p38激酶的磷酸化,而SGC-7901-Heparanasel(-)细胞中磷酸化的Src激酶和p38激酶表达水平较SGC-7901细胞明显下调(P<0.01);抑制剂pp2和SB 203580对人胃癌SGC-7901细胞中乙酰肝素酶蛋白表达无明显影响;在人胃癌SGC-7901细胞和MGC-803细胞中,Src激酶的抑制剂pp2抑制磷酸化p38蛋白的表达,而p38激酶的抑制剂SB 203580对磷酸化Src蛋白表达无明显影响.结论 乙酰肝素酶可能通过促进Src激酶磷酸化或p38激酶的磷酸化或先促进Src激酶磷酸化再促进p38激酶的磷酸化,从而促进人胃癌细胞迁移和侵袭能力.乙酰肝素酶-Src激酶磷酸化-p38激酶磷酸化可能是人胃癌细胞内存在的与细胞迁移和侵袭有关的信号转导通路.     

miRNA-21-5p通过pdcd4靶向调控胃癌细胞对顺铂敏感性的机制研究

目的:探究微小RNA-21-5p（miRNA-21-5p）通过下调pdcd4基因表达调控胃癌耐药细胞系SGC-7901/DDP对顺铂敏感性机制的研究。方法:采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度的顺铂（0、1、2、4、8、16、32 μmol/L）对胃癌细胞系SGC7901及胃癌耐药细胞系SGC7901/DDP增殖抑制的影响。通过实时荧光定量PCR检测SGC7901/DDP细胞中瞬时转染miRNA-21-5p inhibitors后miRNA-21-5p相对表达量的变化。采用Western blot及实时荧光定量PCR检测转染组、无关序列转染组（NC组）及空白转染组（CON组）分别转染miRNA-21-5p inhibitors及无关序列后对靶基因pdcd4蛋白及mRNA表达量的影响。结果:MTT实验结果显示耐药细胞SGC7901/DDP相对于亲本细胞SGC7901对顺铂不敏感（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果表明,转染组miRNA-21-5p表达量均明显低于NC组和CON组（P<0.01）,转染组pdcd4 mRNA表达量均明显高于NC组和CON组（P<0.01）。Western blot检测结果示,转染组pdcd4蛋白表达量均明显高于NC组和CON组（P<0.01）。结论:miRNA-21-5p表达水平的升高在一定程度上有利于胃癌细胞增殖,并通过下调pdcd4的表达,降低胃癌细胞对顺铂的敏感性。     

阿司匹林对胃癌细胞株SGC-7901增殖及核因子kB表达的影响

目的:探讨阿司匹林对胃癌细胞SGC-7901增殖及核因子KB p65(NF-kB p65)表达的影响.方法:培养胃癌细胞株SGC-7901,采用MTT法检测阿司匹林在不同浓度和不同作用时间下对胃癌细胞增殖的影响;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;蛋白质印迹法和免疫荧光法检测阿司匹林对胃癌细胞NF-kB p65表达的影响.结果:MTT结果显示,在0.1-10 mmol/L浓度区间内,随浓度增加和时间的延长,阿司匹林对SGC-7901细胞的抑制率逐渐增加.SGC-7901细胞经10 mmol/L阿司匹林作用6 h和12 h后,细胞发牛凋亡.随着阿司匹林作用浓度增加和作用时间延长,胃癌细胞NF-kB p65的表达逐渐降低.结论:阿司匹林对胃癌细胞SGC-7901的增殖具有抑制作用.且与阿司匹林的浓度和作用时间呈正相关,其作用机制可能与通过抑制胃癌细胞NF-kB p65的表达而使细胞发生凋亡有关.     

miRNA-767-3p在结直肠癌中的表达与患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨miRNA-767-3p在结直肠癌中的表达情况,并分析其与临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年1月至2015年12月于宝鸡市人民医院和渭南市中心医院诊治的82例结直肠癌患者和65例结直肠腺瘤患者作为研究对象,并分别命名为结直肠癌组和结直肠腺瘤组,同时选取同期50名健康体检者作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织、结直肠腺瘤组织、癌旁正常组织和三组血清miRNA-767-3p水平。对比miRNA-767-3p在不同组织和不同人群血清中的差异,分析组织与血清中miRNA-767-3p关系,并分析结直肠癌组织中miRNA-767-3p水平与临床病理特征及其预后的关系。结果 miRNA-767-3p的表达由高到低依次为结直肠癌组织、结直肠腺瘤组织和癌旁正常组织,差异有统计学意义(P0.05);血清miRNA-767-3p水平由高到低依次为结直肠癌组、结直肠腺瘤组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05);结直肠癌组织与血清中miRNA-767-3p水平呈正相关(r=0.943,P0.05)。miRNA-767-3p在结直肠癌不同浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期上表达差异有统计学意义(P0.05)。血清miRNA-767-3p高表达者总生存期(57.89%vs. 81.82%)和无进展生存期生存率(47.36%vs. 72.73%)均低于低表达者,差异有统计学意义(χ2=6.599,P=0.001;χ2=6.775,P=0.009)。结论 miRNA-767-3p在结直肠癌患者中高表达,与浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期密切相关,在一定程度上有预后价值。     

PUMA对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的研究外源性p53正向细胞凋亡调控因子(p53up-regulated modulator of apoptosis protein,PUMA)基因对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法制备PUMA基因并插入pcDNA 3.1(-)质粒,观察其转染胃癌SGC-7901细胞后PUMA蛋白的表达并用MTT法检测细胞的增殖力[实验设3组,分别为无转染空白胃癌细胞对照(SGC-7901)组,空载质粒转染胃癌细胞对照(SGC-7901-pcDNA3.1)组及重组PUMA质粒实验(SGC-7901-pcDNA3.1-PUMA)组]。结果 PUMA经限制性核酸内切酶切及测序分析,与预期结果吻合。转染质粒后,SGC-7901组与SGC-7901-pcDNA3.1组PUMA表达比较差异无统计学意义(P>0.05,相对表达量分别为0.24±0.01和0.23±0.01),SGC-7901-pcDNA3.1-PUMA组与另2组比较PUMA表达明显增高(P<0.05,相对表达量为0.39±0.01)。SGC-7901、SGC-7901-pcDNA3.1和SGC-7901-pcDNA3.1-PUMA组的A值分别为0.43±0.04、0.46±0.04和0.32±0.03,SGC-7901-pcDNA3.1-PUMA组与另2组比较明显下降(均P<0.01),SGC-7901组与SGC-7901-pcDNA3.1组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性人类PUMA基因对胃癌细胞增殖有抑制作用。     

结直肠癌患者血清miRNA-767-3p水平及其诊断意义

 目的   探讨微miRNA-767-3p水平对结直肠癌的诊断价值。方法   采用实时定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCT)技术,检测结直肠癌患者、结直肠腺瘤患者和健康对照者的血清miRNA-767-3p水平;采用化学发光免疫分析(chemiluminescent immunoassay,CLIA)方法,检测以上3组人群血清癌胚抗原(carcino embryonic antigen,CEA)浓度;构建受试者工作特征曲线(receiver operating curves,ROC),比较miRNA-767-3p及其联合使用CEA对结直肠癌的诊断效果。结果   miRNA-767-3p水平在结直肠癌组、结直肠腺瘤和健康对照组血清中呈依次递减趋势。ROC曲线显示miRNA-767-3p诊断结直肠癌的曲线下面积(area under ROC curve,AUC)达0.770 (95%CI:0.698～0.842),灵敏度为80%,特异度为68%;而miRNA-767-3p联合CEA的AUC可达0.862(95%CI:0.806～0.918),灵敏度为73%,特异度为84%。结论   miRNA-767-3p可成为结直肠癌的独立诊断标志物,miRNA-767-3p联合CEA有助于进一步提高结直肠癌的检出率。     

实时荧光定量PCR检测转基因阿尔茨海默病小鼠脑组织中miRNAs的差异表达

目的通过实时荧光定量PCR方法检测APPswe/PS△E9双转基因小鼠和对照小鼠脑组织中miRNA-135a-5p、miRNA-135a-2-3p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p的表达。方法选取6月龄大小的APPswe/PS△E9双转基因小鼠为实验组,同月龄同种系的野生型小鼠C57为对照组,分别提取其脑组织总miRNA,应用实时荧光定量PCR方法检测两组小鼠脑组织中miRNA-135a-5p、miRNA-135a-2-3p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p的表达。结果上述5种miRNAs在实验组与对照组小鼠中的相对表达量分别为0.73±0.27、1.08±0.58,2.47±6.15、1.65±0.67,0.72±0.14、1.31±0.73,0.57±0.34、1.06±0.35,0.63±0.26、1.02±0.18。其中有统计学意义的是miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p(P≤0.05)。结论 miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p在APPswe/PS△E9双转基因小鼠中有差异表达,可能在阿尔茨海默病的发病过程中起着重要作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制人胃癌细胞增殖和诱导凋亡作用的研究

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对体外培养人胃癌细胞系SGC-7901增殖抑制作用,并初步探讨其诱导SGC-7901细胞凋亡的分子机制.方法:采用平皿克隆形成实验法测定不同剂量EGCG对SGC-7901细胞锚定依赖性生长能力的影响;Wester Blot法检测不同剂量EGCG处理人胃癌细胞(SGC-7901)48 h前后NF-κB(p65)、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达变化情况.结果:平皿克隆形成实验法显示:EGCG可抑制人胃癌细胞SGC-7901生长,且呈剂量依赖性,其对SGC-7901细胞IC50值为63.5 μg/mL;Wester Blot显示随着药物浓度升高,EGCG可以逐渐下调NF-κB和Bcl-2的蛋白表达,上调Bax、Caspase-3蛋白表达.结论:EGCG具有诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用,其机制可能与抑制核转录因子NF-B活化,导致Bax/Bcl-2比值的上调,促进Caspase-3的活化有关.     

miRNA-21-3p对小鼠肝细胞系BNL CL.2体积和增殖的影响

目的观察miRNA-21-3p对小鼠肝细胞系（BNL CL.2）体积和增殖的影响。方法小鼠肝细胞系BNL CL.2转染miRNA-21-3p模拟物和抑制物。DiO染膜法和CCK-8法测定miRNA-21-3p对小鼠肝细胞系体积和增殖的影响;荧光定量PCR法检测miRNA-21-3p以及干预该miRNA后与细胞周期相关的基因的表达情况。结果在小鼠肝细胞系,转染miRNA-21-3p的模拟物可以显著增加miRNA-21-3p的表达,转染miRNA-21-3p抑制剂可以显著降低miRNA-21-3p的表达（P〈0.01）。干预miRNA-21-3p不影响细胞的体积。增加miRNA-21-3p的表达显著促进细胞增殖（P〈0.01）,而抑制miRNA-21-3p的表达可以显著降低细胞增殖（P〈0.01）。干预miRNA-21-3p,检测细胞周期相关的基因的表达,发现上调该miRNA可以下调Cyclin E（P〈0.05）,上调Ki67、p15、p16和p18（P〈0.05）,且对于CDKN3、Orc6、MCM4和p57没有影响（P〉0.05）。下调该miRNA对于以上基因均没有影响（P〉0.05）。结论 miRNA-21-3p对于小鼠肝细胞系体积没有影响,但是可以调控增殖,且它对于增殖的调控效应是部分通过影响周期相关的基因实现。