人类8型疱疹病毒与胃肠型HIV卡波西肉瘤组织ORF42、mTORC1表达相关性研究

目的 探究胃肠型HIV卡波西肉瘤组织中人类8型疱疹病毒(HHV8)感染与ORF42、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)表达的关系.方法 选取2015年9月至2019年9月新疆维吾尔自治区人民医院收治的艾滋病合并胃肠型卡波西肉瘤患者36例作为研究对象.留取入组患者卡波西肉瘤组织及瘤旁组织,采用免疫组织化学染色...     

MicroRNAs、uPA及MMP-3在骨关节炎患者滑膜组织中的表达及相关性

目的比较MicroRNAs、uPA及MMP-3在骨关节炎(OA)患者与正常关节滑膜中的表达差异,了解其在OA滑膜病变中的作用。方法采用实时定量PCR技术检测miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3在33例OA患者与28例正常关节滑膜中的表达水平,并分析其相关关系。结果 OA组miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3相对表达量分别为(1.63±0.93)、(0.94±0.60)、(3.52±1.79)和(4.91±1.86),非OA组miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3相对表达量分别为(3.34±1.68)、(2.55±1.12)、(1.16±0.65)和(0.84±0.57),组间比较显示miR-27a、miR-140的表达OA组显著低于对照组(P<0.01),而uPA和MMP-3表达OA组明显高于对照组(P<0.01);OA组内各因子之间相关分析显示,miR-27a和uPA呈显著相关关系,相关系数为r=-0.699(P<0.01),miR-140和MMP-3呈显著相关关系,相关系数为r=-0.598(P<0.01);uPA和MMP-3之间也呈相关关系,相关系数为r=0.444(P<0.05)。结论 miRNA-27a、miRNA-140在OA患者滑膜中低表达,二者与在滑膜中呈现高表达的uPA和MMP-3分别呈现显著负相关关系,共同作用于OA滑膜和软骨退变过程。     

透明质酸钠对兔骨关节炎软骨和滑膜中MMP-1-3及其组织抑制物mRNA表达的影响

目的观察透明质酸钠(HA)关节腔注射对骨关节炎(OA)模型关节软骨及滑膜中的基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3及其组织抑制物(TIMP)-1mRNA表达水平的影响。方法16只大耳白兔行单侧前交叉韧带切断术,术后5周将动物随机分为实验组和对照组,实验组关节腔注射1%HA0.3ml,每周1次,连续5周,对照组则注射等量生理盐水。术后10周观察两组动物股骨内髁关节软骨光镜下的病理改变,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测关节软骨及滑膜中MMP-1、MMP-3及TIMP-1mRNA的表达。结果实验组软骨退变程度较对照组明显减轻,实验组滑膜中MMP-3的mRNA表达水平显著低于对照组(0.40±0.10vs0.62±0.13),而软骨中的MMP-3的表达较对照组差异无显著性,MMP-1和TIMP-1在实验组和对照组软骨及滑膜中的mRNA表达差异无显著性。结论HA能有效地减轻早期OA关节软骨的退变,其对早期OA的治疗作用的机制之一可能是抑制滑膜MMP-3的表达。     

氨基酸代谢与2型糖尿病

氨基酸作为底物参与糖异生,促进内源性葡萄糖生成,某些氨基酸可促进胰岛素分泌.近来发现,一些氨基酸还可激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白-S6激酶l(mTOR-S6K1)途径,一方面调控并维护胰岛β细胞功能;另一方面抑制胰岛素靶细胞信号转导,促进胰岛素抵抗.     

西罗莫司对肝癌HepG2细胞的增殖及mTOR、HIF-1α的抑制作用

目的:观察西罗莫司对体外培养的肝癌HepG2细胞增殖及mTOR、HIF-1α基因的抑制作用,探讨以mTOR为靶点治疗肝癌可能的细胞内信号转导机制.方法:缺氧培养HepG2细胞,外源性给予不同浓度的西罗莫司(0.1-1000 nmol/L)刺激细胞24h, MTT法检测不同浓度药物对肝癌细胞增殖的影响.Western blot法检测药物刺激后HepG2细胞内mTOR和HIF-1α蛋白的表达.结果:西罗莫司可显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖,其抑制率随药物浓度的增加而上升(均P<0.05).在西罗莫司的干预下,HepG2细胞中mTOR和HIF-1α蛋白的表达水平显著下降,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在缺氧条件下,西罗莫司可通过mTOR信号转导途径下调肝癌HepG2细胞内HIF-1α蛋白表达,诱导细胞凋亡,这可能是西罗莫司发挥抗肿瘤效应的机制之一.     

肾癌组织中mTOR、P70S6K蛋白的表达变化及意义

目的：观察肾癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ mTOR）及其底物激酶核糖体蛋白S6激酶（ P70S6K）的蛋白表达水平,并探讨其意义。方法采用免疫组化（ S-P法）及Western blotting法检测肾癌组织、正常肾脏组织中mTOR及P70S6K蛋白表达,并观察两者表达与肾癌临床病理参数的关系。结果 mTOR蛋白在肾癌、正常肾组织中的表达水平分别为1．223±0．125、0．667±0．106,两者比较,P＜0．01;P70S6K在肾癌、正常肾组织的表达水平分别为1．108±0．258、0．489±0．21,两者比较,P＜0．01。 mTOR、P70S6K蛋白阳性表达与肾癌的组织分化程度、淋巴结转移和临床分期有关（P均＜0．05）。肾癌组织中mTOR与P70S6K蛋白表达呈正相关（r＝0．478,P＝0．002）。结论肾癌组织中mTOR、P70S6K蛋白表达升高,mTOR/P70S6K信号通路可能在肾癌的发生、发展中起重要作用。     

胆管细胞癌组织JAG1基因及其蛋白表达水平与患者预后的关系

目的探讨JAG1蛋白表达水平对胆管细胞癌患者肿瘤切除术后预后的判断价值。方法2010年1月~2014年12月我院诊治的胆管细胞癌患者60例和良性胆道疾病患者60例。检测胆管细胞癌组织、癌旁组织和肝组织JAG1 mRNA及其蛋白表达,测定胆管癌患者术后血清JAG1水平。应用单因素和多因素非条件Logistic回归分析胆管癌患者手术后预后的危险因素。结果癌旁组织、肝组织、胆管癌组织JAG1蛋白阳性率分别为45.0%（27/60）、56.7%（34/60）和81.7%（49/60）,组间差异有统计学意义（P<0.05）;三种组织JAG1 mRNA水平和蛋白相对表达量分别为（0.91±0.34）和（0.57±0.15）、（1.15±0.48）和（0.84±0.47）、（1.96±0.58）和（1.64±0.58）,组间差异有统计学意义（P<0.05）;胆管癌患者血清JAG1水平为（205.35±22.51）pg/ml,显著高于良性胆道疾病患者【（102.56±16.52）pg/ml,P<0.05】;肝内胆管癌患者血清JAG1水平与CA125（r=0.41,P<0.05）、CEA（r=0.0.27,P<0.05）、CRP（r=0.17,P<0.05）、肿瘤浸润深度（r=0.13,P<0.05）、淋巴结转移（r=0.08,P<0.05）、TNM分期（r=0.14,P<0.05）、肿瘤分化程度（r=0.15,P<0.05）呈正相关;多因素Cox 比例风险回归模型分析显示,肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、分化程度、血清JAG1高水平是影响胆管癌患者无复发生存时间的危险因素（P<0.05）,肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、血清JAG1高水平是影响胆管癌患者总生存时间的危险因素（P<0.05）。结论JAG1蛋白可以作为胆管细胞癌患者肿瘤切除术后的预后指标,血清JAG1水平高患者术后预后差。     

circCSPP1在胃癌组织中的表达水平及其对胃癌患者的预后价值

目的 分析circCSPP1在胃癌及癌旁组织中的表达水平,并探讨其与胃癌临床病理特征和患者预后的关系。方法 收集2018年1月至2020年1月在我院接受根治性切除术治疗的胃癌患者118例,检测癌组织及癌旁组织circCSPP1表达水平,评价circCSPP1表达水平与胃癌患者临床病理资料相关性,Kaplan-Meier曲线分析circCSPP1表达水平与患者生存率关系;Cox回归分析评价影响胃癌患者预后的因素。结果 circCSPP1在TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期胃癌组织及癌旁组织中相对表达水平分别为2.08±0.17、3.29±0.27、1.01±0.12,即在胃癌组织中表达显著上调(F=4.292,P=0.005)。circCSPP1在胃癌组织中表达水平与肿瘤直径、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移和其他器官转移有关(P<0.05)。circCSPP1低表达组患者生存率显著高于circCSPP1高表达组患者(χ²=5.332,P<0.05)。单因素Cox回归分析表明,胃癌组织中肿瘤直径≥5 cm、浸润深度T₃～T_4<...     

肝细胞癌组织中PREX2的表达及其与患者预后的关系

目的探究肝细胞癌(HCC)组织中磷脂酰肌醇-3, 4, 5-三磷酸依赖性Rac交换子2(PREX2)的表达水平与患者预后的关系。方法前瞻性选取2012年2月至2015年5月在中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院就诊的104例HCC患者作为研究对象。根据HCC患者的预后生存情况将其分为死亡组(n=42)和生存组(n=62)。采用蛋白质印迹法检测HCC组织中PREX2蛋白的表达水平,并分析其与患者预后的关系。结果死亡组PREX2的表达水平高于生存组,两组差异有统计学意义(P0.05)。PREX2预测HCC患者预后的ROC曲线下面积、敏感度和特异度分别为0.915、80.95%和91.94%。与高表达PREX2组比较,低表达PREX2组的中位生存时间较长,两组差异有统计学意义(P0.05)。Cox比例风险回归模型分析结果显示,年龄、Child-Pugh分级、肿瘤分期和PREX2均是HCC患者预后生存的独立危险因素(P0.05)。限制性立方样条拟合Cox比例风险回归模型分析结果显示,PREX2与HCC患者的预后生存有关(P0.05),且呈非线性关系(P0.05)。结论 HCC组织中PREX2的表达水平与患者的预后有关,其表达水平越高提示患者的生存率越低。     

结直肠癌患者癌组织中PTEN、mTOR的表达及意义

目的寻找结直肠癌病情及预后判断的新指标。方法采用免疫组化法检测120例术前均未行放疗或化疗的Dukes分期不同时期的结直肠癌手术患者癌组织中第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因（PTEN）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达,并分析其与Dukes分期的关系。结果120例患者随着Dukes分期由A期到D期变化,PTEN蛋白表达减弱而mTOR蛋白表达增强,不同分期患者比较P均〈0．05。结论结直肠癌组织PTEN和mTOR的表达与Dukes分期有关;二者可作为结直肠癌病情及预后判断的指标。     

Polyamine levels in synovial tissues and synovial fluids of patients with rheumatoid arthritis.

We determined the polyamine contents of the synovial tissues from 11 patients with rheumatoid arthritis (RA), and the free putrescine levels in the synovial fluids (SF) from 10 patients with RA, 7 with osteoarthritis (OA), 5 with posttraumatic arthritis, and 3 with infectious arthritis. Putrescine levels in the synovial tissues correlated with serum C reactive protein concentration in patients with RA. Free putrescine levels in SF were significantly elevated in patients with infectious arthritis, compared with those found in RA, OA, and posttraumatic arthritis. Free putrescine levels in SF from patients with RA were significantly higher than in those with OA. Our findings suggest that polyamines may play an important role in RA.     

α1抗胰蛋白酶在强直性脊柱炎患者滑膜组织中表达的研究

目的 观察α1抗胰蛋白酶(ATA1)在强直性脊柱炎(AS)滑膜组织中的表达分布,并探讨编码该蛋白的基因对AS的遗传效应.方法 选用8例AS,9例类风湿关节炎(RA)和9例骨关节炎患者关节滑膜样本,用蛋白免疫印迹定量分析ATA1的表达水平,用免疫组织化学法定位ATA1在滑膜组织中表达分布.分别选用32例AS、RA、骨关节炎滑液样本分析ATAl在滑液中的表达水平.选用56例AS血液样本,260例RA和160名健康者样本作对照,用水解探针法对标签单核苷酸多态性位点(SNP)(rs2753934,rs2749531和rs6575424)进行基因分型.采用单因素方差分析、LSD检验和x2检验进行统计分析.结果 与RA、骨关节炎滑膜比较,ATA1在AS滑膜中呈高表达,表达率为100％.同样,ATA1在AS滑液中表达量(1.6±0.6)也高于RA(1.4±0.5)和骨关节炎(1.2±0.5)的表达量(P＜0.05).基因分型发现ATAl SNP与AS和RA无明显关联(P＞0.05).单体型分析没有检测到与AS相关的或与RA相关的单体型.结论 ATA1在AS滑膜组织中高表达,提示ATA1及关节滑膜在AS发病过程中起重要作用.     

Distribution of protein nitrotyrosine in synovial tissues of patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis

OBJECTIVE: Because nitric oxide related species have been found in the inflamed joints of patients with arthritis, we investigated whether protein nitrotyrosine (a marker of tissue exposure to peroxynitrite) is present in their synovial tissues. METHODS: Protein nitrotyrosine was detected immunohistochemically and by Western blot analysis. Synovial tissues removed surgically from 12 patients with rheumatoid arthritis (RA) (mean age 63.7 yrs) and 20 with osteoarthritis (OA) (mean age 66.6 yrs) were studied. RESULTS: Nitrated proteins were detected immunohistochemically in all of 18 tissues examined. Diffuse staining of the stroma was seen in all patients, with more extensive staining in RA than OA (p = 0.008). Intense staining was detected in some lymphocytes, but not in others, even within a single lymphoid aggregate. Neutrophils did not stain for nitrotyrosine. Vascular endothelial cells stained for nitrotyrosine but adjoining smooth muscle cells did not. Both cytoplasmic and nuclear staining was seen in macrophages, endothelial cells, and lymphocytes. Numerous bands of nitrated proteins were detected by Western blot analysis of 15 synovial tissue extracts. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) was detected immunohistochemically in endothelial cells, macrophages, vascular smooth muscle cells, and synoviocytes. CONCLUSION: Nitrotyrosine-containing proteins were found in essentially all synovia from RA and OA patients. The most prominent site of nitration in all cases was the stroma. iNOS, the likely source of the nitrating species, was found in a variety of cell types.     

Lower expression of histamine H4 receptor in synovial tissues from patients with rheumatoid arthritis compared to those with osteoarthritis

The aim of this study is to compare the expression level of histamine H(4) receptor (H(4)R) mRNA in synovial tissues of rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA) patients, and to study correlation of results with clinical characteristics of patients with RA. Synovial tissues were obtained from 7 RA and 7 OA patients undergoing artificial arthroplasty. Serum levels of erythrocyte sedimentation rate, C-reactive protein, matrix metalloproteinase-3 (MMP-3), rheumatoid factors, and cyclic citrullinated peptide antibodies were determined. The expression of H(4)R mRNA in synovial tissues was determined by real-time polymerase chain reaction. Expression of H(1)R and H(4)R mRNA were significantly lower in RA compared with OA patients (P < 0.005), while expression of H(2)R mRNA was comparable in both. While a significant negative correlation was found between H(4)R expression and serum MMP-3 concentration (r = -0.70, P < 0.05), no correlation was found between MMP-3 and H(1)R (r = -0.52) or H(2)R (r = 0.23). This study supports the supposition that H(4)R in synovial tissue may play a role in cartilage and bone destruction by influencing the secretion of MMP-3 in patients with RA.     

Cytokine expression in synovial membranes of patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis.

OBJECTIVES--To compare, by immunohistochemistry, the cellular and cytokine profile in rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA) synovial membranes (SMs). Synovium was obtained at knee arthroplasty from 10 patients with RA and 10 with OA. METHODS--Synovial membranes were stained with a panel of monoclonal antibodies (MAb) to assess cytokine expression (IL-1 alpha, IL-1 beta, IL-6, GM-CSF, TNF-alpha and EGF) and the intensity of the mononuclear cellular infiltrate (MNC). RESULTS--Significantly greater percentages of IL-1 alpha, IL-1 beta, IL-6, TNF-alpha, GM-CSF and EGF cells were detected in all areas of the rheumatoid SMs when compared with osteoarthritic SMs. Five RA but only one OA SM demonstrated focal lymphoid aggregates. Lining layer thickening was noted in RA SMs only. The intensity of the MNC and number of blood vessels were greater in the RA group. CONCLUSION--The results suggest that the differences in cytokine production by RA and OA SMs are quantitative but that the greater thickness of the synovial lining layer and higher vascularity may be specific to RA.     

肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其临床意义

目的 研究肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其与临床病理参数的关系.方法 用PCR技术和免疫组化技术检测60例肺癌患者癌组织和癌旁正常肺组织的Atrogin-1基因mRNA及其蛋白表达.结果 肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及Atrogin-1蛋白表达观显高于癌旁正常肺组织(P均<0.01).临床病理参数分析显示,Atrogin-1基因mRNA表达与结核病史、淋巴结转移、肿瘤体积、肿瘤分期、体质量下降和血清白蛋白有关(P均<0.05);Atrogin-1蛋白表达与淋巴结转移、家族史、肿瘤体积、肿瘤分期、体质量下降和血清白蛋白有关(P均<0.05).结论 Atrogin-1基因在肺癌发生发展中起重要作用,其对监测患者病情进展、转移潜能及估计预后有临床价值.     

血管内皮细胞生长因子在骨关节炎患者膝关节滑膜和滑液中的表达及其意义

目的 检测不同阶段的骨关节炎患者膝关节滑膜组织和滑液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况,评价VEGF作为进展期骨关节炎的标志的可行性。方法 临床收集膝关节镜或关节置换手术患者的滑液和滑膜组织,根据X线平片的K-L分级进行分组。以Kellegren-Lawrence (K-L)分级均为0级的单纯膝关节半月板损伤的患者作为对照组。酶联免疫吸附测定( ELISA)法检测各组滑液中VEGF的含量,免疫组织化学染色方法检测VEGF在滑膜组织中的原位表达。统计学方法采用方差分析。结果 骨关节炎滑膜组织普遍存在不同程度的炎症,滑膜色泽变暗红,组织增生,甚至呈绒毛样改变。免疫组织化学染色显示,VEGF在滑膜衬里层及血管平滑肌细胞表达。2～4组的滑液中VEGF水平逐级增高,从(1181±116)、(1632±140)到(2252±216) pg/ml,明显高于对照组(648±129) pg/ml,差异均有统计学意义（P＜0.01）;免疫组织化学阳性细胞分数对照组和第2～4组分别为(5±4)％和(9±4)％、(16±6)％、(21±6)％,差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 关节滑膜产生的VEGF参与了骨关节炎软骨损害的病理过程,滑液中VEGF水平的持续升高可作为判断骨关节炎病情活动的一个指标。     

胆管细胞癌组织S100A6 mRNA及其蛋白表达变化*

目的 检测胆管癌组织S100A6 mRNA及其蛋白表达的变化。方法 在40例胆管癌患者和40例胆道良性疾病,分别取胆管癌组织、癌旁组织和肝组织,检测S100A6 mRNA及其蛋白表达变化,采用ELISA法测定血清S100A6水平。应用单因素和多因素非条件Logistic回归分析造成胆管癌患者血清S100A6高水平的危险因素。结果 在40例癌旁组织和肝组织中,S100A6蛋白分别阳性8例（20%）和12例（30%）,显著低于肝内胆管癌组织的26例（65%,P<0.05）;癌旁组织和肝组织S100A6 mRNA相对水平分别为（0.92±0.33）和（1.12±0.46）,显著低于肝内胆管癌组织的【（1.93±0.57）,P<0.05】;癌旁组织和肝组织S100A6蛋白相对表达量分别为（0.56±0.16）和（0.85±0.46）,显著低于肝内胆管癌组织的【（1.63±0.51）,P<0.05】;肝内胆管癌患者血清S100A6水平为（2456.85±128.31）pg/ml,显著高于对照组的（2234.26±116.35）pg/ml（P<0.05）;S100A6与CEA、CRP、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度呈正相关（P<0.05）;多因素Logistic回归分析显示,肿瘤浸润深、淋巴结转移、TNM分期和细胞分化差是造成肿瘤患者血清S100A6高水平的危险因素（P<0.05）。结论 血清S100A6高水平的意义还有待于进一步研究。