人重组白细胞介绍—8对正常BALB／c小鼠骨髓细胞的影响

目的 研究rhIL-8对正常小骨髓细胞的体内效应。方法 通过细胞培养及流式细胞术（FCM）研究rhIL-8对正常小鼠骨髓细胞是否具有集落刺激效应。结果 体内实验表明,rhIL-8并不能改变骨髓细胞的CFU-GM计数及细胞周期的分布。结论 rhIL-8对正常小鼠骨髓细胞不具有集落刺激效应。     

神经生长因子对正常和放化疗复合损伤小鼠粒-巨噬系血发生的影响

目的 探讨神经生长因子(NGF)对小鼠粒-巨噬系血细胞发生的影响.方法 采用流式细胞术、祖细胞集落分析、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测注射NGF对正常和经60Coγ射线照射 腹腔注射环磷酰胺(放化疗复合损伤)小鼠骨髓细胞(BMC)增殖周期、粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)产率、外周白细胞总数、骨髓细胞粒-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)mRNA的表达及血清中GM-CSF和IL-3浓度的影响.并观察在体外培养体系中加入不同浓度的NGF时CFU-GM集落产率的变化及与GM-CSF的关系.结果 在体外CFU-GM培养中,加入重组小鼠GM-CSF (rmGM-CSF)时,NGF剂量依赖性地提高集落产率.注射NGF[7.5 μg/(kg·d)或10 μg/(kg·d)]持续7 d,正常和放化疗复合损伤小鼠外周血白细胞总数、小鼠骨髓细胞中S G2/M期细胞比例、CFU-GM集落产率显著高于注射生理盐水的对照组;放化疗复合伤小鼠血清中的GM-CSF和IL-3也显著升高.结论 NGF可与体外培养体系中的造血刺激因子协同作用,促进正常和放化疗复合损伤小鼠CFU-GM的形成.NGF在体内可促进正常和放化复合损伤小鼠骨髓细胞进入有丝分裂,促进造血干细胞向粒-巨噬系方向分化,促进CFU-GM的形成,提高外周血白细胞数;NGF还可刺激放化疗复合损伤小鼠体内GM-CSF和IL-3的分泌,这可能是NGF促进放化疗复合损伤后粒-巨噬系造血恢复的途径之一.     

芦荟提取物C诱生小鼠多重集落刺激因子的作用

目的:研究芦荟提取物C(aloe extract C,AE—C)在BALB/C鼠体内诱生多重集落刺激因子的作用。方法:经腹腔连续5 d给BALB/C鼠注射AE-C,第6 d取骨髓细胞,在半固体甲基纤维素培养基中培养观察集落形成数量和AE-C在小鼠体内的持续作用时间及AE—C注射剂量与集落形成的关系。结果:AE-C能诱生BALB/C鼠骨髓细胞形成集落,且与对照组比较有明显差异(P<0.01)。集落形成高峰为停药后前6 d,第8 d呈下降趋势。而注射AE-C剂量与集落形成数量在25-100μg/只范围内有剂量依赖关系。结论:AE-C有诱生BALB/C鼠多重集落刺激因子的作用。     

rhIL—3对人骨髓粒单祖细胞集落的影响

应用骨髓细胞体外培养技术，观察了国产重组人白细胞介素３对人骨髓粒单祖细胞集落的影响。结果显示，ｒｈＩＬ－３能刺激正常骨髓细胞形成由粒细胞或单核细胞构成的细胞集落，这种效应在一定范围内与ｒｈＩＬ－３剂量呈依赖关系。     

豚鼠骨髓滋养层对CFU-F的影响及其最佳作用时间的研究

本文研究了受60Gy照射的豚鼠骨髓细胞作滋养层对正常小鼠骨髓细胞造血基质祖细胞(CFU-F)体外培养成集落的影响,优选了滋养层与骨髓细胞的最佳作用时间。种植骨髓细胞当天或次日添加滋养层细胞后继续培养7～10天则CFU-F数最多;种植骨髓细胞当天加滋养层而次日通过换液去掉未贴壁细胞则CFU-F数最低;骨髓细胞培养4天后再加滋养细胞则不起成集落刺激作用;不论在集落数及集落所含细胞数上,加滋养层者都比不加者为多。     

rhIL－3对人骨髓粒单祖细胞集落的影响

应用骨髓细胞体外培养技术，观察了国产重组人白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）对人骨髓粒单祖细胞集落的影响。结果显示，ｒｈＩＬ－３能刺激正常骨髓细胞形成由粒细胞或（和）单核细胞构成的细胞集落，这种效应在一定范围内与ｒｈＩＬ－３剂量呈依赖关系。     

两种常见小鼠肌浸液中粒—单系集落刺激因子活性的比较

粒 单系集落刺激因子 (ＧＭ ＣＳＦ)是培养粒 单系祖细胞 (ＣＦＵ ＧＭ )不可缺少的刺激因子 ,无ＣＳＦ则不能形成集落 ,而集落形成的大小和多少则说明ＣＳＦ活性的高低 ,目前所用的ＣＳＦ多来源于肌浸液 ,现有资料表明各实验室用于小鼠骨髓细胞培养的肌浸液不尽相同 ,ＧＭ ＣＳＦ的活性以及形成集落的大小、多少有较大差异。本实验通过对两种常见纯系小鼠骨髓细胞的培养 ,选择出活性较高、稳定性较强的集落刺激因子作为本实验室的常规对照。1　材料与方法1 1　材料动物为 8 12周ＢＡＬＢ/Ｃ、Ｃ57ＢＪ/ 6Ｊ小鼠 ,体重 18 2 5克。药品为Ｒ…     

转LacZ基因骨髓间充质干细胞体内造血分化的初步研究

目的 初步探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体内向造血细胞分化的潜能。方法 利用转LacZ基因小鼠MSCs输注X射线亚致死量照射的BALB／C小鼠，2个月后取骨髓细胞作体外甲基纤维素培养和X-Gal染色，取肝脏X-Gal染色。结果 MSCs输注组和对照组骨髓细胞体外集落培养均能形成鹅卵石样造血细胞集落，经X-gal组化染色后，输注组部分造血集落产生蓝绿色，对照组没有颜色变化。肝脏X-Gal染色输注组部分产生蓝色，对照组没有颜色变化。结论 小鼠MSCs具有向造血细胞分化的潜能。     

集落刺激因子对3H—TdR掺入骨髓细胞的刺激作用

应用３Ｈ—ＴｄＲ掺入试验，证明集落刺激因子（ＣＳＦ）具有刺激骨髓细胞增殖分化的能力，ＣＳＦ在２～１０ｍｇ／Ｌ之间，随浓度的增高，人胚骨髓细胞的放射性计数亦增高，并呈良好的线性关系。小鼠骨髓细胞的３Ｈ—ＴｄＲ掺入计数值，明显低于人骨髓细胞，表明ＣＳＦ具有种属差异性。     

免疫RNA诱生多能集落刺激因子的研究

以小鼠骨髓细胞在半固体培养基形成集落和细胞形态学为指标,检测白细胞介素-3(IL-3)活性,并对抗菌i-RNA诱生IL-3的作用进行了初步探索。结果表明:抗菌i-RNA致敏鼠骨髓细胞在半固体培养基上能形成集落,其骨髓相呈增加活跃,粒细胞单核细胞明显增加。粗提IL-3致敏骨髓细胞与抗菌i-RNA致敏骨髓细胞相似。正常RNA致敏鼠骨髓细胞与正常骨髓细胞相似。     

抗T细胞受体αβ单抗和抗CD80单抗联合供体骨髓移植诱导小鼠皮肤移植耐受

目的:探讨抗T细胞受体(T cell receptor, TCR)αβ单抗和抗CD80单抗联合供体骨髓细胞输注方法在同种异基因小鼠皮肤移植耐受诱导中的作用.方法:第0天,向C57BL/6小鼠(受体)尾静脉输注2×10⁸个BALB/c小鼠(供体)来源的骨髓细胞,同时腹腔注射抗TCRαβ单抗500 μg;第2天,向C57BL/6小鼠腹腔注射抗CD80单抗500 μg.第6天进行皮肤移植.在不同的时间对C57BL/6小鼠进行迟发型超敏反应测定和混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction, MLR)分析,并进行MLR的白细胞介素-2(interleukin-2, IL-2)逆转实验、过继转移实验和嵌合体检查,探讨耐受形成的机制.结果:接受了抗TCRαβ单抗和抗CD80单抗联合供体骨髓移植的C57BL/6小鼠,供体皮肤移植物平均存活70 d;在迟发型超敏反应和混合淋巴细胞反应中均表现出显著的低反应性.IL-2逆转实验结果表明克隆不应答可能参与了移植耐受的形成.体内、体外过继转移实验均显示耐受C57BL/6小鼠脾细胞中存在抑制细胞的活性.嵌合体检查结果表明在耐受C57BL/6小鼠的胸腺和脾中均形成了混合嵌合体,嵌合体水平随时间下降.结论:抗TCRαβ单抗和抗CD80单抗联合大剂量供体骨髓细胞输注可以在组织相容性抗原完全不相同的成年小鼠间成功诱导出皮肤移植物的长期耐受.     

荷瘤小鼠脾细胞NK活性及rhIL-2和rhIFN-α2a对其活性的影响

观察文氏腹水瘤荷病不同时期小鼠阵细胞NK活性的变化，并在体外检测重组人白细胞介素-2（rhIL－2）、重组人干扰素-a2a（rhIFN－a2a）对荷瘤八天小鼠脾细胞NK活性的影响。结果显示，荷病小鼠牌细胞NK活性在荷瘤第四天已明显降低（与对照组相比P＜0．001），第八天、第十二天NK活性继续降低，但荷瘤第八天和第十二天相比，血活性无显著性差异（P＞0．05）；rhIL－2和rhIFN－a2a对荷瘤八天小鼠NK活性均有明显的增强作用；但rhIL－2对荷瘤小鼠脾细胞NK活性的增强作用明显高于rhIFN－a2a（P＜0．001）。说明荷瘤小鼠脾细胞NK活性受到明显抑制，NK活性降低可用rhIL－2或rhIFN－a2a改善，但rhIL-2明显优于rhIFN－a2a。     

白介素-8对SKOV3细胞系卵巢癌干样细胞特性的影响

目的:研究白介素-8(IL-8)能否促成人卵巢癌SKOV3细胞系细胞肿瘤干细胞样细胞特性.方法:用添加或未添加重组人IL-8(rhIL-8:10.0 ng/mL)的干细胞条件培养基处理SKOV3细胞.肿瘤球形成和琼脂集落形成试验测定球形成率和集落形成率.蛋白质印迹分析肿瘤干细胞标志蛋白CD133和CD44表达水平.结果:rhIL-8(10.0 ng/mL)显著地增高SKOV3细胞肿瘤球形成率和琼脂集落形成率.此外,rhIL-8(10.0 ng/mL)上调SKOV3细胞CD133和CD44蛋白表达.结论:rhIL-8具有促进SKOV3细胞肿瘤干细胞样细胞特性作用.     

外源性IL-6 通过STAT3 通路促进卵巢癌细胞对顺铂 耐药

目的:探讨外源性白细胞介素-6（IL-6）诱导卵巢癌（OvCa）对顺铂（Cisplatin）耐药的作用。方法:6孔板接种A2780 细胞, 分为对照（Control）组、AG490 组、重组人IL-6（rhIL-6）组和rhIL-6+AG490 组,应用Western 印迹检测rhIL-6 对A2780（顺铂敏 感OvCa 细胞株）的磷酸化信号转导与转录激活因子3（p-STAT3）蛋白表达的影响。96 孔板接种A2780 细胞,分为Control 组、 AG490 组、顺铂（Cisplatin）组、AG490+Cisplatin 组、rhIL-6 组、rhIL-6+AG490 组、rhIL-6+Cisplatin 组和rhIL-6+AG490+Cisplatin 组,CCK8 实验检测rhIL-6 对A2780 细胞增殖的影响。12 孔板接种A2780 细胞, 分为Control 组、AG490 组、Cisplatin 组、 AG490+Cisplatin 组、rhIL-6 组、rhIL-6+AG490 组、rhIL-6+Cisplatin 组和rhIL-6+AG490+Cisplatin 组, 细胞凋亡实验检测rhIL-6 对A2780细胞顺铂耐药的影响。以36 只雌性裸鼠为研究对象,随机分为Control 组、rhIL-6 组、Cisplatin 组、AG490 组、rhIL-6+ Cisplatin 组和rhIL-6+AG490+Cisplatin组, 每组6只。腹腔注射A2780细胞, 给药4 周后颈椎脱臼处死小鼠, 检测rhIL-6 对 OvCa 腹腔种植瘤耐药的影响。结果:Western 印迹结果显示,与Control 组相比,rhIL-6 组p-STAT3 蛋白表达显著增加（t=6.55, P<0.01）;CCK8 实验结果显示,与Control 组相比,rhIL-6 组细胞增殖增加（t=4.148,P<0.05）;细胞凋亡实验发现,与Cisplatin 组 相比,rhIL-6+Cisplatin 组细胞凋亡显著降低（t=20.03,P<0.001）,与rhIL-6+Cisplatin 组相比,rhIL-6+Cisplatin+AG490 组细胞凋 亡显著增加（t=22.16,P<0.001）;小鼠体内实验结果发现,与Cisplatin 组相比,rhIL-6+Cisplatin 组瘤结节数量和重量显著增加（t= 2.783,P<0.05）,与rhIL-6+Cisplatin组相比,rhIL-6+Cisplatin+AG490 组瘤结节数量和重量显著降低（t=3.306,P<0.05）。结论:外 源性IL-6通过STAT3通路诱导OvCa 对顺铂耐药。     

全不相合与全相合骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入

【目的】 探讨全不相合与全相合供者骨髓细胞在致敏模型的归巢与植入情况。【方法】 以异基因脾细胞输注致敏的BALB/c小鼠作为移植受者,致敏模型经8 Gy 60Co照射后分别经尾静脉移植1 × 107 C57BL/6或BALB/c供者的骨髓细胞。予CFSE标记供者骨髓细胞,并分别在移植后不同时间点(2、12及48 h),通过病理切片及组织细胞悬液动态示踪供者细胞在致敏受者各组织的分布。移植后记录各组的生存情况,每周监测造血重建与骨髓恢复情况。【结果】 归巢实验表明C57BL/6骨髓细胞在致敏受者股骨的分布随时间推移先增加而后减少,在脾脏的分布随时间推移呈进行性减少。BALB/c骨髓细胞在致敏模型股骨及脾脏的分布均随时间推移而增加。接受C57BL/6骨髓细胞的致敏模型于移植第12 ~ 15天内全部死亡,血象及骨髓象呈进行性下降;而接受BALB/c骨髓细胞的能长期存活,血象及骨髓象能迅速恢复。【结论】 全不相合的供者骨髓细胞在致敏模型中完全被排斥,而全相合供者的骨髓细胞能在致敏模型中能进行有效的归巢与植入。     

右归丸对骨髓抑制小鼠造血功能的影响

目的：观察右归丸对骨髓抑制小鼠外周血、造血干细胞增殖能力、骨髓细胞周期和凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法：小鼠48只,随机分为正常组、模型组,右归丸低、中、高剂量组和阳性对照组,每组8只。除正常组外,余五组均予造模,连续3天给予腹腔注射环磷酰胺制备骨髓抑制模型。造模后各组应用相应药物治疗7天。用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法、造血祖细胞培养和流式细胞术（FCM）分别检测右归丸对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、体外培养各系造血祖细胞的集落数以及骨髓细胞周期和凋亡的影响。结果：右归丸中、高剂量均能明显升高外周血红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、骨髓有核细胞（BMC）数,高剂量对血小板（PET）和白细胞（WBC）有明显升高作用。右归丸能明显提高体外培养各系造血祖细胞的集落数,以中、高剂量效果显著。右归丸低、高剂量均能促进骨髓G0／G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2／M期细胞的转化,提高G2／M期细胞比例,增殖指数（PI）明显升高。右归丸中、低剂量组的骨髓细胞凋亡比例显著下降。结论：右归丸可能通过促进G0期造血干细胞进入细胞周期,进行增殖;加速骨髓细胞修复受损的DNA,通过GI／S和S期监测点;抑制造血细胞的凋亡;调节造血细胞增殖与凋亡之间的平衡等机制,从而促进损伤骨髓造血功能恢复。     

L_(801)急性粒系白血病小鼠发病的某些动力学特征

L_(801)急性粒系白血病小鼠传代,稳定后,取小鼠在发病过程中第1、3、5、7天的骨髓细胞,观察某些动力学特征。结果显示,第3天开始,骨髓细胞的粒一单核祖细胞产率显著减少,第5天开始,电泳率显著增高,并有染色体核型改变。文中讨论了这些变化的意义。     

红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响

目的 观察红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响,并探讨其造血调控作用机制。方法 用全自动血细胞分析仪、白细胞计数法和流式细胞术（FCM）分别检测红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠外周血、骨髓有核细胞以及骨髓细胞周期的影响,同时用免疫组织化学方法检测各组骨髓细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果 低剂量和高剂量红景天苷能明显升高外周血白细胞（WBC）和骨髓有核细胞（BMC）数,低剂量红景天苷能明显升高外周血血小板（PLT）数,促进骨髓G0／G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2／M期细胞的转化,而高剂量红景天苷具有明显促进S期细胞向G2／M期细胞转化的能力,从而导致高、低剂量组G2／M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。另外,高、低剂量红景天苷都能促进骨髓细胞中Bcl-2的表达。其中低剂量红景天苷的促进作用更为明显。同时,高、低剂量红景天苷也都能明显降低骨髓细胞中Bax的表达。结论 红景天苷可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞解除G0／G1期阻滞,加速骨髓G0／G1期细胞向S期细胞、S期细胞向G2／M期细胞的转化以及升高骨髓细胞Bcl-2的表达、降低Bax的表达来抑制骨髓细胞凋亡,促进骨髓造血功能的恢复。     

Stimulating effect of catechin, an active component of Spatholobus suberectus Dunn, on bioactivity of hematopoietic growth factor

Background Hematopoietic growth factor （HGF） is indispensable to hematopoiesis in the body. The proliferation and differentiation of hematopoietic cells must rely on the existence and stimulation of HGF. This study investigated the effect of catechin, an active component extracted from Spatholobus suberectus Dunn （SSD）, on bioactivity of granulocyte-macrophage colony-stimulating activity （GM-CSA）, burst-promoting activity （BPA） and megakaryocyte colony-stimulating activity （MK-CSA） in spleen condition medium （SPCM） of mice to clarify the hematopoietic mechanism of catechin and SSD.
Methods Spleen cells of mice were separated and spleen condition medium （SPCM） was prepared from spleen cell culture. Bone marrow cells of mice were separated and cultured in a culture system including 10% （v/v） SPCM （induced by catechin in vivo or ex vivo） for 6 days. Granulocyte-macrophage colony forming units （CFU-GM）, erythrocyte burst-colony-forming units （BFU-E） and megakaryocyte colony-forming units （CFU-Meg） formation were employed to assay the effects of different treatment on the bioactivity of GM-CSA, BPA and MK-CSA in SPCM.
Results SPCM induced by 100 mg/L catechin ex vivo could promote the growth of CFU-GM, BFU-E and CFU-Meg, which indicated that catechin could stimulate the production of GM-CSA, BPA and MK-CSA in SPCM. SPCM prepared at the fourth day of spleen cell culture showed the best stimulating activity. The bioactivity of GM-CSA, BPA and MK-CSA in the SPCM prepared after intraperitoneally injecting catechin into mice was also increased. The number of CFU-GM, BFU-E and CFU-Meg gradually increased as the dose of catechin increased and the time of administration prolonged. CFU-GM, BFU-E and CFU-Meg of the high-dose catechin group were significantly higher than those of the control group （P〈0.01） and reached the maximum at the seventh day after administration.
Conclusions This study suggests that catechin extracted from the active acetic ether part of Spatholo     

三七总皂苷对再生障碍性贫血小鼠T淋巴细胞亚群的影响及其促造血作用

目的：探讨三七总皂苷（PNS）对再生障碍性贫血模型小鼠T淋巴细胞亚群和造血功能的影响,阐明PNS对再生障碍性贫血小鼠的治疗机制。方法：50只小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量PNS组、中剂量PNS组和高剂量PNS组,低、中和高剂量PNS组小鼠分别腹腔注射100、200和400 mg·kg^-1PNS,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水,连续给药14 d。测量小鼠体质量并计算脾脏及胸腺指数,采用流式细胞术检测小鼠外周血CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞百分率并计算CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞的比值,ELISA法测定小鼠血清γ干扰素（INF-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,采用血细胞分析仪检测小鼠红细胞（RBC）、骨髓单个核细胞（BMCs）、白细胞（WBC）、血小板（Plt）数量及血红蛋白（Hb）水平。结果：与对照组比较,模型组小鼠体质量、脾脏指数和胸腺指数、外周血CD4⁺T淋巴细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值明显降低（P<0.05）,外周血RBC、BMCs、WBC、Plt数量和Hb水平明显降低（P<0.05）,外周血CD8⁺T淋巴细胞百分率和血清中INF-γ、TNF-α水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较,低、中和高剂量PNS组小鼠体质量、脾脏指数和胸腺指数、CD4⁺T淋巴细胞百分率和CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值明显升高（P<0.05）,外周血RBC、BMCs、WBC、Plt数量和Hb水平明显升高（P<0.05）,CD8⁺T淋巴细胞百分率和血清中INF-γ、TNF-α水平明显降低（P<0.05）。结论：PNS呈剂量依赖性调节T淋巴细胞亚群的平衡,抑制INF-γ和TNF-α释放,提高造血相关因子水平,从而改善再生障碍性贫血小鼠的造血功能。