重组人胰岛素样生长因子Ⅰ对大鼠成骨细胞增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白合成的影响

目的 观察胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白合成的影响，探讨IGF-Ⅰ对骨代谢影响的可能机制。方法 不同浓度rhIGF-Ⅰ刺激体外培养的大鼠成骨细胞，采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖能力；肿瘤坏死因子α（TNF-α单独或与rhIGF-Ⅰ共同刺激成骨细胞，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率；rhIGF-Ⅰ刺激成骨细胞，免疫细胞化学结合计算机图像分析系统检测Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果 一定浓度IGF-Ⅰ能明显增加成骨细胞数量（P〈0．05），在0．1～100ng／ml这种作用与IGF-Ⅰ的浓度呈正相关；TNF-α在0．1～100ng/ml浓度范围内呈剂量依赖性地促进成骨细胞凋亡（P〈0．05），并使S期细胞减少（P〈0．05），而IGF-Ⅰ能抑制，TNF-α对成骨细胞的促凋亡作用（P〈0．05）；经IGF-Ⅰ的刺激，成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达明显高于对照组（P〈0．05）。结论 IGF-Ⅰ对大鼠成骨细胞有明显的促增殖作用，在0．1～100ng/ml之间呈浓度依赖性，IGF-Ⅰ能抑制，TNF-α诱导的大鼠成骨细胞凋亡，IGF-Ⅰ能促进大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成。     

脱氢表雄酮在体外对成骨细胞代谢和IL-1β的影响

目的探讨脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）对离体大鼠成骨细胞和IL-1β的影响。方法体外分离培养大鼠成骨细胞,取传一代细胞,分别给予10^-5mmoL／L、10^-7mmoL／L、10^-9mmol／LDHEA培养72h,以10^-8mmoL／L雌二醇（estradiol,E2）为阳性对照,另设空白对照组。碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色鉴定成骨细胞,MTT法检测成骨细胞的增殖能力,PNPP法测定ALP活性。ELISA法测定不同浓度DHEA培养液中IL-1β的水平。结果不同浓度DHEA组成骨细胞增殖能力和ALP的活性均有上升,其中以10^-7mmoL／LDHEA组最显著（P〈0．01）,其作用和E2相似（P〉0．05）;10^-9mmoL／LDHEA组单位细胞数的ALP活性高于空白对照组（P〈0．05）。不同浓度的DHEA组IL-1β呈下降趋势,成骨细胞增殖能力及ALP活性和IL-1β成负相关。结论DHEA在体外促进大鼠成骨细胞生长和增殖,提高ALP活性,其作用可能和抑制IL-1β有关。     

氟比洛芬酯对大肠癌患者术后血清IL-2、IL-6的影响

为探讨氟比洛芬酯静脉注射对大肠癌患者术后血清白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）的影响,将120例ASAⅠ-Ⅱ级拟行直肠癌根治术的患者随机分为3组,氟比洛芬酯组（F组）、吗啡组（M组）和曲马多组（T组）各40例。3组均以咪达唑仑0．06mg／kg、芬太尼5μg／kg、丙泊酚1.0mg／kg、罗库溴铵1．5mg／kg麻醉诱导后行气管插管,以七氟烷吸入维持麻醉深度（MAC值2．1左右）,术中间断静脉注射顺苯磺酸阿曲库铵维持肌松。于麻醉诱导前10minM组静脉注射吗啡0．1mg／kg,T组静脉注射曲马多1．5mg／kg,F组静脉注射氟比洛芬酯1．5mg／kg。3组分别于术前（T0）、手术结束后3h（T1）、术后1d（T2）和术后3d（T3）取外周静脉血以酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中IL-2、IL-6的浓度。记录患者术后不良反应,包括恶心、呕吐、皮肤瘙痒等。结果显示,M组IL-2水平在术后3h开始下降（P〈0．05）,术后1d时下降到更低的水平（P〈0．01）,术后3d时略有回升,但仍然低于麻醉前的水平（P〈0．05）;T组IL-2水平在术后3h与麻醉前比较无差异,术后1d后逐渐升高（P〈0．05）,在术后3d恢复到术前水平（P〉0．05）;F组IL-2水平术后3h明显升高,持续至术后1d,与麻醉前比较差异有显著性（P〈0．01）,术后3d后略有下降,但仍高于术前水平（P〈0．05）。3组IL-6血清浓度术后3h全部升高,术后1d达顶峰。T组与F组术后1d血清IL-6浓度与M组相比有统计学差异（P〈0．05）,而F组升高的幅度较T组小（P〈0．01）。术后3d F组与M组血清IL-6浓度相比,仍有显著性差异（P〈0．05）。M组不良反应的发生率显著高于其他两组（P〈0．05）。F组恶心、呕吐的发生率与M组相比有显著性差异（P〈0．05）。结果表明,与吗啡和曲马多相比,氟比洛芬酯可更好地促进IL-2的分泌,抑制IL-6的升高,且术后不良反应发生率更低,围手术期镇痛更为安全有效。     

血清胰岛素样生长因子-1对癌性恶病质小鼠营养状况的影响

目的探讨血清中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平与癌性恶病质机体营养状况的关系。方法用小鼠结肠腺癌CT-26细胞接种于肝特异性IGF-1基因缺失（LID）鼠及对照组小鼠皮下建立癌性恶病质模型，LID鼠和对照鼠各30只。肿瘤种植后，监测2组小鼠体重、肿瘤重量及去瘤体重，并监测肿瘤种植后第14、18及22d血清IGF-1、TNF-α、IL-6、血糖、甘油三酯和白蛋白水平。结果肿瘤种植后，各时间点LID组IGF-1水平均显著低于对照组（P〈0．05）。随时间延长，2组荷瘤鼠TNF-α、IL-6、血糖及甘油三酯水平均逐渐升高（P〈0．05），去瘤体重和白蛋白水平均逐渐下降（P〈0．05）。在3个实验观察时点，与对照组荷瘤鼠相比，LID组荷瘤鼠血清TNF-α、IL-6、甘油三酯及血糖水平均较高（P〈0．05）。在第18及22d，LID组荷瘤鼠去瘤体重较对照组荷瘤鼠轻（P〈0．05），摄食量低于对照组荷瘤鼠（P〈0．05）。结论在癌性恶病质机体中，相对于低水平IGF-1而言，正常水平血清IGF-1对应着较低水平的恶病质相关细胞因子和较好的机体营养状态，这为癌性恶病质的治疗提供了新的思路。     

异烟肼对大鼠成骨细胞影响的观察

目的：研究异烟肼（isoniazid，INH）对大鼠成骨细胞（osteoblasts，OB）增殖、碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）活性和Ⅰ型胶原合成的影响。方法：分离、培养新生SD大鼠头盖骨OB，分别加入不同浓度的INH（1、10、20、40、60、100、1000μg／ml）共同培养96h，对照组不加INH，分别采用四唑盐（MTT）比色实验、ALP活性测定法和^3H—Proline（^3氢-脯氨酸）法测定OB增殖、ALP活性和Ⅰ型胶原合成的情况。结果：与对照组比较，INH在60μg／ml即可抑制大鼠OB增殖（P〈0．05），40μg／ml时大鼠成骨细胞ALP活性明显下降（P〈0．05）．20μg/ml时大鼠成骨细胞Ⅰ型胶原合成（P〈0．05）明品减少，且都随浓度增加抑制作用加强。结论：INH存较低浓度时对OB增殖、ALP活性和Ⅰ型胶原合成即有抑制作用，故在骨结核治疗中应该严格控制药物剂量．特别是在局部用药时。     

骨相关生长因子对兔骨髓基质干细胞生长及分化的量效作用

目的研究地塞米松、重组人成纤维细胞生长因子（recombinant human fibroblast growth factor，rhFGF）及重组人骨形成蛋白2（recombinant human bone morphogenetic protein 2，rhBMP-2）对兔骨髓基质干细胞（marrow slromal stem cells，MSCs）生长及分化的量效作用，为其在骨组织上程中的应用提供实验基础。方法体外分离培养免MSCs，分为1个空白对照组及9个实验组。实验组分别与终浓度为10^-8、10^-7、10^-6mol／L地塞米松；终浓度为50、200、500ngng/ml FGF；终浓度为50、500、1000ng／ml rhBMP-2培养。于4、7d终止培养并测定细胞总蛋白及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase。ALP）活性。结果与空白对照组比较，10mol／L地塞米松显著抑制细胞蛋白合成（P〈0．05），而10^-8、10^-7mol／L地塞米松对细胞蛋白合成无明显影响；10^-6,10^-7mol／L地塞米松刺激MSCs高度表达ALP（P〈0．05）。rhFGF各浓度组显著促进细胞蛋白合成量差异有统计学意义（P〈0．05），表现ALP活性抑制。rhBMP-2符浓度组对细胞蛋白合成九明显影响；50ng／ml rhBMP2不影响MSCs的ALP活性；当浓度增至500ng／ml与1000ng／ml时，ALP活性显苦增加（P〈0．05）。结论10^-7mol／L地塞米松及500、1000ng／ml rhBMP-2在不影响MSCs增殖的前提下，适当浓度能显著促进MSCs向成骨细胞转化，在骨组织工程的研究中有重要的应用价值。     

胰岛素样生长因子-I与老年女性糖尿病患者骨密度关系的研究

目的 探讨老年女性糖尿病患者骨密度及血清胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）的变化及其相互关系。方法 用双能X线骨密度仪分别测定老年女性糖尿病患者骨密度值；用酶联免疫的方法测定受试者血清IGF-Ⅰ的水平，并与正常对照组比较。结果 老年女性2型糖尿病组骨质疏松（OP）发病率高于对照组（P〈0．05）；血清IGF-Ⅰ水平低于对照组（P〈0．05）；糖尿病伴OP组血清IGF-Ⅰ低于无OP组（P〈0．05）；糖尿病患者骨密度值与血清IGF-Ⅰ水平显著正相关（P〈0，05）。结论 老年女性2型糖尿病组OP发病率增高，与IGF-Ⅰ水平降低导致骨形成减少有关。     

失血性低血容量休克多器官功能障碍综合征的机制探讨

目的探讨失血性低血容量休克病人血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1（IL-1）水平与预后的关系。方法应用ELISA法检测29例失血性低血容量休克病人（休克组）血清TNF-α和IL-1浓度，与20例择期手术病人（对照组）进行比较，观察TNF-α和IL-1水平与多器官功能障碍综合征（MODS）的关系。结果休克组全身炎症反应综合征（SIRS）、MODS和感染的发病率明显高于对照组（P〈0．05）；休克组血清TNF-α和IL-1浓度明显高于对照组（P〈0．05）；MODS组血清TNF-α浓度较非MODS组明显升高（P〈0．05），血清IL-1浓度差异无显著性（P〉0．05）；休克组中死亡病人血清TNF-α浓度较存活病人明显增高（P〈0．05），血清IL-1浓度差异无显著性（P〉0．05）。结论失血性低血容量性休克发生SIRS是较为常见的，并且是导致MODS的重要原因之一；血清TNF-α浓度的高低与预后密切相关。     

胰岛素样生长因子1对缺氧复氧诱导的HK-2细胞损伤作用

目的探讨胰岛素样生长因子1（IGF-1）对缺氧复氧损伤人肾近曲小管上皮细胞株HK-2的凋亡影响及其作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞分为正常对照组（A组）、缺氧复氧损伤模型组（B组）、提前IGF-1干预组（C组）、即时IGF-1干预组（D组）、迟后IGF-1干预组（E组）5组。3个IGF-1干预组在不同时间给予IGF-1干预,复氧培养24h后,MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞仪分析细胞凋亡,细胞免疫组织化学法检测Bcl—2阳性表达变化,Real-time PCR检测Bcl-2 mRNA表达水平变化。结果与A组相比,B组细胞增殖活性明显降低（P〈0．05）,细胞凋亡率明显升高（P〈0．05）,Bcl-2蛋白与Bcl-2 mRNA表达明显降低（P〈0．05）;与B组比较,IGF-1干预后,细胞增殖活性有所升高,以C组升高最明显（P〈0．01）,细胞凋亡率显著下降（P〈0．05）,又以C组下降最明显（P〈0.01）;Eel-2mRNA和其蛋白表达量均增高（P〈0．05）,以C组表达量增高最明显（P〈0.01）。结论IGF-1能够抑制缺氧复氧损伤HK-2细胞凋亡,可能与其上调Bcl—2蛋白表达有关。     

不同剂量舒芬太尼对麻醉诱导时病人异丙酚效应室靶浓度及气管插管反应的影响

目的 观察在脑电双频谱指数（BIS）监测下不同剂量舒芬太尼对麻醉诱导时病人异丙酚效应室靶浓度（Ce）及气管插管反应的影响，以探讨舒芬太尼复合异丙酚麻醉诱导的合适用量。方法 择期全麻手术病人60例，ASAⅠ级或Ⅱ级，年龄20-60岁，体重45-80 kg，随机分为3组（n= 20），均静脉注射咪达唑仑0．05 mg／kg后开始靶控输注异丙酚（初始靶浓度为2μg／ml），同时分别静脉注射芬太尼3μg／kg（F组）、舒芬太尼0．3μg／kg（S1组）、舒芬太尼0．45μg／kg（S2组）。待病人意识消失后或BIS降至75以下时静脉注射维库溴铵0．12 mg／kg，BIS降至55以下时进行气管插管，机械通气。调整异丙酚靶浓度维持BIS 40-60。记录入室时（基础值）、气管插管前即刻、插管后即刻、插管后3、5、10、15 min时BP、MAP、HR、BIS及Ce。结果 与F组和S1组比较，S2组插管后即刻和插管后3、5、10、15min时Ce降低（P〈0．05），但F组和S1组各时点比较差异无统计学意义（P〉0．05）。与基础值比较，F组和S1组插管后即刻和插管后3 min时BP、MAP和HR增加（P〈0.05）。与S2组比较，F组和S1组插管后即刻和插管后3 min时BP、MAP和HR增加（P〈0．05）。F组和S1组各时点BP、MAP和HR比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 病人在靶控输注异丙酚麻醉诱导时，舒芬太尼抑制气管插管心血管反应的效价是芬太尼的7倍。     

破骨细胞对IGF-1诱导成骨细胞骨同化的促进作用

目的 探讨破骨细胞(osteoclast, OC)存在时IGF-1对成骨细胞(osteoblast, OB)活性的影响。方法 体外培养MC3T3小鼠成骨细胞及RANKL诱导分化成熟的破骨细胞。以10ng/ mL的rhIGF-1直接干预单独或与破骨细胞共育的成骨细胞, 并设空白对照组,培养12h,检测成骨细胞的增殖、凋亡及碱性磷酸酶活性;培养8d后Von kossa钙化染色法观察矿化结节的形成。结果 成骨细胞、破骨细胞共培养时,rhIGF-1作用12h能够明显促进成骨细胞增殖(P<0.05),抑制成骨细胞的凋亡(P<0.05),使细胞内ALP活性升高(P<0.05),8d时钙化结节的个数及面积百分比升高(P<0.05);与单独培养的成骨细胞组有显著性差异。结论 破骨细胞可明显促进IGF-1所诱导的成骨细胞骨同化作用。     

成骨细胞与血管内皮细胞联合培养的生物学特性

目的探讨成骨细胞与血管内皮细胞联合培养的生物学特性. 方法取2周龄乳兔颅盖骨及肾脏皮质传代培养制备成骨细胞(A组)、血管内皮细胞(B组)及成骨细胞与血管内皮细胞联合培养(C组),用Ⅰ型胶原和血管Ⅷ因子免疫细胞化学染色鉴定成骨细胞和血管内皮细胞,倒置相差显微镜和组织学染色观察细胞的生长特性和细胞相容性,检测碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,ALP)活性,观察血管内皮细胞对成骨细胞产生的ALP活性有无影响,MTT法检测细胞活力,分析细胞生长和增殖情况. 结果免疫细胞化学染色证实,培养的细胞为成骨细胞和血管内皮细胞.倒置相差显微镜、HE和Masson染色均显示两种细胞混合生长良好.ALP检测结果:C组ALP活性明显高于A组和B组(P＜0.01),A组高于B组(P＜0.05).MTT检测结果表明:C组细胞早期增殖较慢,而后期增殖较快. 结论成骨细胞与血管内皮细胞具有良好的相容性,血管内皮细胞能够增强成骨细胞的ALP活性,提高成骨细胞的增殖能力.联合培养细胞具有很强的增殖潜能.     

核心结合因子α1促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

目的观察核心结合因子α1(core binding factor α1,Cbfα1)对兔骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)的促成骨效应.方法体外分离培养日本大白兔MSCs,按培养方法的不同分为3组.对照组:常规培养;单纯诱导组:以条件培养液(低糖DMEM 10%胎牛血清 10 mmol/L地塞米松 50 mg/L维生素C 10 mmol/L β-甘油磷酸钠)培养;实验组:以AdEasy1/Cbfα1转染MSCs,加入条件培养液培养.在诱导3 d,1、2、3和4周时,行组织学观察和免疫组织化学等方法检测成骨标志碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素的表达.结果体外培养兔MSCs生长良好,实验组AdEasy1/Cbfα1转染后90%以上MSCs表达绿色荧光蛋白.实验组及单纯诱导组ALP染色呈棕黑色阳性,随培养时间延长逐渐加深,对照组仅少量散在细胞ALP呈弱阳性;第1、2、3和4周实验组ALP浓度与单纯诱导组及对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组及单纯诱导组从2周开始有红色的阳性染色矿化结节出现,对照组为阴性,结节数目随时间推移而增多.实验组及单纯诱导组1周时有少量骨钙素染色阳性,2、3及4周时大量出现,对照组为阴性.结论应用Cbfα1可促进兔MSCs向成骨细胞分化,其分子机制仍需进一步深入研究.     

低频振动对人成骨细胞生物学特性影响的研究

目的:研究低频振动对人成骨细胞增殖分化及基质分泌的影响。方法:取成人的髂骨松质骨,获得人成骨细胞。并在培养48h后,施加0.1、0.2、0.5、2和5Hz的低频微振动,通过流式细胞仪检测成骨细胞增殖状况:化学比色法和放射免疫法检测碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素含量。结果:加载0.2和0.5Hz可使成骨细胞的ALP活性明显增高(P<0.01);0.1和2Hz振动后其ALP活性与对照组无明显差异;5Hz振动则明显降低ALP活性(P<0.01)。加载0.2和0.5Hz振动的成骨细胞,S期细胞从10.4％增加至12.45％和16.12％,增殖指数从20.14％增加到26.21％和28.75％。0.1和2Hz低频振动则显示出对细胞增殖指数无明显影响(P>0.05)。而5Hz使细胞增殖指数明显降低至13.22％(P<0.05)。同时,加载0.2和0.5Hz振动可明显增加成骨细胞骨钙素分泌量至1.87和2.47ng/ml(P<0.05),而加载0.1Hz对骨钙素分泌量无明显影响(P>0.05),加载2和5Hz相应降低了骨钙素分泌量(P<0.05)。结论:0.2～0.5Hz的低频振动能促进成骨细胞增殖分化和成骨活性物质分泌,对低频振动应用于骨折治疗有指导作用。     

二苯乙烯苷调控miR-34a/SIRT1对骨质疏松大鼠的作用及机制研究

目的 探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glycoside,TSG)调控微小RNA-34a(miR-34a)/沉默信息调节因子1(SIRT1)对骨质疏松症(osteoporosis,OP)大鼠的作用及机制.方法 将60只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、TSG组(80 mg/kg)、miR...     

成骨细胞与诱导剂对骨髓基质干细胞的增殖与成骨分化的影响

目的探索一种新的骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells,MSCs)增殖与成骨分化的体外诱导培养体系. 方法乳大鼠颅骨来源的第3代成骨细胞与诱导剂(1 nmol/L地塞米松、10 mmol/L β-甘油磷酸钠、50μg/ml抗坏血酸)对大鼠股骨、胫骨来源的MSCs生长的影响.于8块24孔板上培养MSCs,每孔接种5×104个第3代MSCs.按培养成分不同分为4组,每组2块.DMEM培养为对照组;诱导剂培养为诱导剂组;成骨细胞培养为成骨细胞组;联合使用成骨细胞与诱导剂培养为联合诱导组.计数诱导1～8 d各组MSCs的数量并绘制细胞生长曲线,检测诱导10 d的MSCs的碱性磷酸酶活性,采用RT PCR检测诱导2周时MSCs骨钙素mRNA的表达水平.结果原代及传代MSCs形态正常.细胞生长曲线示MSCs数量均随时间延长增加.成骨细胞组增殖最快,诱导剂组增殖最慢,5～8 d成骨细胞组及诱导剂组细胞数量与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).联合诱导组碱性磷酸酶活性为2.01±0.56 U与对照组0.68±0.14 U、诱导剂组1.27±0.43 U及成骨细胞组0.77±0.19 U比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组不表达骨钙素mRNA,诱导剂组为0.783±0.094、联合诱导组为0.814±0.071与成骨细胞组0.302±0.026比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论联合使用成骨细胞和诱导剂诱导MSCs,不影响MSCs的正常增殖而促进MSCs的成骨分化,诱导效果较好,可望成为一种新的骨组织工程种子细胞的体外培养体系.     

负载BMP-2掺锶磷酸钙复合材料对成骨细胞增殖及功能的影响

目的探索负载BMP-2掺锶磷酸钙复合材料对成骨细胞增殖及功能的影响。方法获取SD大鼠成骨细胞,随机分为空白对照组(Con组)、磷酸钙组(CPC组)和复合材料组(BSCPC组);培养基中分别添加安慰剂、磷酸钙和负载BMP-2掺锶磷酸钙共培养一段时间,通过CCK-8法检测成骨细胞的增殖情况,碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)及茜素红染色观察细胞的功能状态,蛋白电泳观察骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-KB,RANK)及核因子κB受体活化因子配体(ligand of receptor activator of nuclear factor-κB,RANKL)蛋白的表达情况。结果共培养1、3、5和7 d,和Con组比较,CPC组和BSCPC组的成骨细胞数目明显增加(P0.05),且以BSCPC组成骨细胞数目最多(P0.05);共培养14 d及21 d,和Con组比较,CPC组和BSCPC组的成骨细胞的矿化能力及ALP活性明显增加(P0.05),且以BSCPC组细胞钙化能力最强及ALP活性最高(P0.05);共培养7 d,和Con组比较,CPC组和BSCPC组的成骨细胞的OPG表达明显增加,而RANK及RANKL蛋白表达明显降低(P0.05),且以BSCPC组的成骨细胞蛋白OPG、RANK及RANKL蛋白表达量改善最为显著(P0.05)。结论负载BMP-2掺锶磷酸钙复合材料促进成骨细胞增殖分化和改善细胞活性和功能。     

三仙汤对去卵巢大鼠骨密度和钙磷代谢的影响

目的　通过测定去卵巢大鼠骨质疏松症模型骨密度 (BMD)、血清中钙、磷、碱性磷酸酶 (ALP)及尿钙、尿磷 ,了解三仙汤是否能改善去卵巢大鼠骨质疏松症 ,并进一步探讨其起效的具体机制。方法3月龄雌性SD大鼠 5 9只 ,随机分为 6组 :假手术组 (Sham)、模型组 (OVX)、尼尔雌醇组 (Nil)、三仙汤小、中、大剂量组。Sham组、OVX组用生理盐水灌胃。Nil组以 0 15mg/ 10 0g大鼠体重给药 ,三仙汤小、中、大组给药量分别为 5 98g/kg、11 96g/kg及 2 3 92g/kg。除Nil组每周灌胃一次外 ,其他组均每周给药 6次。持续 3月后处死大鼠 ,测定其股骨BMD及血清中钙、磷、ALP及尿钙、磷。结果　OVX组大鼠BMD较Sham组显著降低 (P <0 . 0 1) ,三仙汤各组及Nil组与OVX组比较均明显上升 (P <0 . 0 1) ;OVX组血钙、血磷浓度与Sham组比较有显著下降 (P <0 . 0 1或P <0 . 0 5 ) ,三仙汤各剂量组、Nil组与OVX比较则均显著上升 (P <0 . 0 1或P <0 . 0 5 ) ;OVX组血清ALP浓度较Sham升高 (P >0 . 0 5 ) ,三仙汤各组ALP含量与OVX组比较明显上升 (P <0 .0 5 ) ,而Nil组反而明显降低 (P <0. 0 5 )。OVX的尿钙、尿磷均较Sham组明显升高 (P <0 . 0 5 ) ,三仙汤各组尿钙与OVX组比较有下降趋势 (P >0 . 0 5 ) ,尿磷则明显下降 (P <0 . 0 1或P <     

类金刚石镀膜形状记忆合金与成骨细胞生物相容性的研究

目的研究类金刚石(diamond-like carbon, DLC)镀膜形状记忆合金对体外培养的成骨细胞生物学行为的影响. 方法选择规格相同的DLC镀膜镍钛(NiTi)记忆合金(镀膜组)、非镀膜记忆合金(非镀膜组)各30片与体外培养的成骨细胞混合培养,并设立空白对照组(不加材料的单纯细胞培养组),观察细胞的增殖情况.收集第1～5 天的细胞培养液,测定其中的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ni2 含量及成骨细胞计数. 结果镀膜组和对照组细胞计数及ALP浓度均高于非镀膜组;细胞计数,第3、4及5天,镀膜组及对照组与非镀膜组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ALP浓度,镀膜组第2、3及5天,对照组第3、4及5天,与非镀膜组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).Ni2 含量低于非镀膜组,第3、4及5天与非镀膜组比较,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 DLC镀膜形状记忆合金的组织相容性明显优于非镀膜组.     

甲状旁腺激素对大鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的 探讨甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)对大鼠成骨细胞增殖及相关细胞因子的调节作用.方法 将传代的成骨细胞分为对照组、PTH持续给药组、PTH间歇给药组.持续给药组48 h中持续给药;PTH间歇给药组前6 h给予PTH,后42 h撤除;对照组予溶媒液.每48 h为一循环,持续作用8个循环,每个循环结束时,MTT法测定细胞增殖,检测碱性磷酸酶(ALP)活性,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)测定胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的表达水平.结果 间歇给药组细胞增殖在第7、8个循环时明显增加;而持续给药组在第5个循环时达到峰值,随后逐渐低于其他两组,在第7、8个循环时抑制作用明显.1～4个循环时3组间ALP活性差异无统计学意义,第5～8个循环ALP活性显著增加;持续给药组第6～8个循环对ALP活性有明显抑制作用.间歇给药组细胞IGF-1 mRNA的表达在第6个循环时达到高峰后有所下降,但始终明显高于其他两组;持续给药组前期IGF-1 mRNA表达水平较高,而后期则明显低于对照组.间歇给药组BMP-2 mRNA表达水平持续升高;持续给药组前3个循环表达水平较高,随给药时间的增长呈下降趋势.结论 间歇给予一定浓度的PTH可刺激成骨细胞的增殖与分化,后期作用大于前期.给药前期的ALP水平主要与IGF-1 mRNA表达水平相关,而后期则可能是通过BMP-2 mRNA表达的升高使ALP活性增强.