神经甾体化合物对PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究神经甾体化合物(CPU 03-03)对H2O2和Aβ25～35所诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法 用H2O2和Aβ25～35造成PC12细胞损伤模型,采用MTT比色法检测细胞存活率,同时检测乳酸脱氢酶(LDH)活力和丙二醛(MDA).结果 CPU 03-03能显著减少细胞死亡,降低LDH漏出量及MDA生成.结论 CPU 03-03对PC12细胞损伤具有保护作用.     

丹参酮ⅡA对大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤的保护作用

目的:探究丹参酮ⅡA对大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤的保护作用。方法:建立H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤模型。将体外培养的H9C2细胞随机分为空白对照组、DMSO溶剂对照组、H2O2模型组、丹参酮ⅡA高、中、低剂量组。用MTT法测定心肌细胞存活率,并检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)的水平。结果:与空白对照组相比,H2O2模型组细胞存活率显著降低,LDH、MDA水平升高,SOD水平降低;与H2O2模型组相比,丹参酮ⅡA高剂量组心肌细胞存活率显著增高,LDH和MDA水平降低,SOD水平升高(P0.01)。结论:丹参酮ⅡA能够减轻心肌细胞氧化损伤。     

Carnosine对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤的神经保护作用

目的　研究 Carnosine对 β淀粉样蛋白片段 (Aβ2 5- 3 5)诱发 PC1 2细胞损伤的神经保护作用。方法　将培养的 PC1 2细胞分为三组 :正常对照组、损伤组和保护组。损伤组用 Aβ2 5- 3 5处理细胞 ,保护组在用 Aβ2 5- 3 5处理前 30 min加入 Carnosine。使用细胞形态学方法、LDH法、MTT法观察 Carnosine的神经保护作用。结果　通过形态学方法 ,保护组细胞数显著比损伤组多 ,受损变圆的细胞数较少。保护组 LDH活性显著少于损伤组(P<0 .0 1 ) ;MTT显著高于损伤组 (P<0 .0 1 )。结论　 Carnosine对 Aβ2 5- 3 5诱发 PC1 2细胞损伤有显著的保护作用。     

鹿角多肽对H_2O_2诱导MG63氧化损伤的保护作用

目的探讨鹿角多肽(AP)对人成骨肉瘤细胞MG63氧化损伤的保护作用。方法采用体外培养细胞MG63,H2O2氧化损伤4 h前,用不同浓度(0.1、0.15、0.1、0.05、0.01 mg/ml)AP与MG63置于37℃,5%CO2饱和湿度培养箱中共同孵育48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测AP对H2O2损伤的细胞活性的影响,苏木素-伊红(HE)染色观察细胞受损情况,免疫组化测定骨形成蛋白(BMP)-2表达,检测MG63细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果 MTT法显示AP具有明显促进H2O2损伤组MG63细胞存活力(P<0.01),最佳给药浓度为0.05 mg/ml;HE染色,H2O2损伤模型组细胞部分皱缩,细胞核暗淡,伪足消失,AP组细胞损伤程度减轻,细胞核折光性较H2O2损伤组好,伪足略变细;免疫组织化学染色,AP组细胞中的BMP-2的表达量明显高于模型组;AP组LDH、MDA含量低于模型组(P<0.05,P<0.01),SOD含量明显增高(P<0.01)。结论 AP对H2O2损伤的MG63具有保护作用,能够有效提高氧化损伤MG63细胞的生存率,其机制可能与促进BMP-2表达,降低MDA、LDH的含量,增加SOD的活性有关。     

甘草苷对一氧化氮诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的应用NO诱导PC12细胞制作细胞损伤模型,探讨甘草苷对PC12细胞损伤的保护作用。方法甘草苷各剂量的PC12细胞用SNAP诱导48 h后,采用MTT法测定细胞活力,LDH法测定细胞膜通透性,化学比色法测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Annexin V-FITC/PI检测PC12细胞凋亡率。结果与模型组相比,甘草苷可以使PC12细胞存活率显著增加,细胞培养上清中LDH含量显著减少,SOD活性显著升高,MDA含量显著下降,并明显降低PC12细胞凋亡率。结论甘草苷对NO诱导的PC12细胞凋亡有明显保护作用。     

万拉法辛对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤及Bcl-2表达下降作用的研究

目的 研究抗抑郁药万拉法辛对β淀粉样蛋白片段(Aβ25-35)诱发 PC12细胞损伤的作用.方法 将培养的PC12细胞分为三组:正常对照组、Aβ损伤组和药物保护组.Aβ损伤组用Aβ25-35处理细胞,药物保护组在用Aβ25-35处理前2 h加入万拉法辛.采用细胞形态学方法、LDH法、MTT法、免疫组化法及Western印迹法观察万拉法辛的保护作用.结果 药物保护组与Aβ损伤组相比细胞数显著增多,受损变圆的细胞数较少;LDH释放量较少(P＜0.01);OD490值显著升高(P＜0.01).Aβ损伤组中Bcl-2的表达比正常对照组低,药物保护组Bcl-2的表达比Aβ25-35损伤组升高;药物保护组、Aβ损伤组与对照组相比细胞内Bax蛋白表达均无明显变化.结论 万拉法辛对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤有保护作用,其机制可能和万拉法辛升高Bcl-2蛋白水平有关.     

亚硒酸钠预处理对Aβ损伤PC12细胞的保护性作用

目的研究β淀粉样蛋白(Aβ)对PC12细胞的氧化损伤以及亚硒酸钠的保护作用。方法将PC12细胞分为正常对照组、亚硒酸钠预处理组、亚硒酸钠预处理后损伤组、损伤组,观察细胞形态、用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡,测定各组乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果 Aβ抑制PC12细胞的分裂增殖,经过Aβ作用24 h的PC12细胞,其GSH-Px活性下降,MDA含量升高;一定浓度亚硒酸钠预处理可有效地减轻Aβ引起的PC12细胞损伤,与Aβ损伤组相比亚硒酸钠预处理后Aβ损伤组的细胞存活率增加、凋亡下降、GSH-Px活性增高、LDH漏出率、MDA含量下降。结论亚硒酸钠对Aβ引起的PC12细胞氧化损伤具有明显的保护作用。     

神经甾体化合物CPU 03-03对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的 研究神经甾体化合物CPU 03-03(以下简称CPU)对谷氨酸诱导的嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的保护作用.方法 用谷氨酸制作PC12细胞损伤模型.检测不同浓度CPU作用后PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及细胞内钙([Ca2+]i)变化.结果 CPU作用后,PC12损伤细胞LDH和MDA水平降低,[Ca2+]i降低,并呈一定的剂量依赖性.结论 CPU对谷氨酸所致的PC12细胞损伤有保护作用;其机理可能为降低LDH、MDA及受体依赖型钙通道.     

去天冬氨酸血管紧张素－1（DAA-1）对人脐静脉内皮细胞保护作用的实验研究

目的:观察去天冬氨酸血管紧张素－1（DAA-1）对过氧化氢(H2O2) 致人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 损伤的保护作用。方法:实验分正常对照组, H2O2模型组, H2O2+ DAng-1组(低剂量、中剂量、高剂量组)。倒置显微镜下观察细胞形态、密度。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶( SOD)活性、丙二醛(MDA)及乳酸脱氢酶（LDH）含量。免疫细胞化学方法测定组织纤维蛋白溶酶原激活物（tPA）,Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子（PAI-1）含量。RT-PCR方法测定细胞内皮素1（ET-1）,血栓调节蛋白（TM）mRNA的表达。结果：DAA-1能明显抑制过氧化氢所致的细胞活力的降低,减少细胞内LDH释放,提高SOD活力,并呈剂量依赖性作用。能明显减少内皮细胞在氧化过程中MDA的生成,增加tPA蛋白表达,减少PAI-1蛋白表达;并能明显抑制ET-1mRNA的表达和提高TM mRNA的表达。结论　DAA-1对过氧化氢所致HUVECs损伤具有明显的保护作用。     

去天冬氨酸血管紧张素－1（DAA-1）对人脐静脉内皮细胞保护作用的实验研究

目的:观察去天冬氨酸血管紧张素－1（DAA-1）对过氧化氢(H2O2) 致人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 损伤的保护作用。方法:实验分正常对照组, H2O2模型组, H2O2+ DAng-1组(低剂量、中剂量、高剂量组)。倒置显微镜下观察细胞形态、密度。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶( SOD)活性、丙二醛(MDA)及乳酸脱氢酶（LDH）含量。免疫细胞化学方法测定组织纤维蛋白溶酶原激活物（tPA），Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子（PAI-1）含量。RT-PCR方法测定细胞内皮素1（ET-1），血栓调节蛋白（TM）mRNA的表达。结果：DAA-1能明显抑制过氧化氢所致的细胞活力的降低,减少细胞内LDH释放，提高SOD活力，并呈剂量依赖性作用。能明显减少内皮细胞在氧化过程中MDA的生成，增加tPA蛋白表达，减少PAI-1蛋白表达；并能明显抑制ET-1mRNA的表达和提高TM mRNA的表达。结论　DAA-1对过氧化氢所致HUVECs损伤具有明显的保护作用。     

刺五加皂苷对Aβ_(25~35)诱发PC12细胞毒性及细胞凋亡的保护作用

目的研究刺五加皂苷对Aβ25³5处理PC12细胞毒性及细胞凋亡的保护作用。方法将神经细胞生长因子(NGF)诱导的PC12细胞用10 mol/L Aβ2535处理PC12细胞毒性及细胞凋亡的保护作用。方法将神经细胞生长因子(NGF)诱导的PC12细胞用10 mol/L Aβ25³5处理,建立体外老年性痴呆模型。采用线粒体琥珀酸脱氢酶活性测定、乳酸脱氢酶(LDH)测定法、丙二醛(MDA)含量检测法、流式细胞仪检测法、Western印迹方法检测活化的Caspase-3蛋白水平。结果 Aβ2535处理,建立体外老年性痴呆模型。采用线粒体琥珀酸脱氢酶活性测定、乳酸脱氢酶(LDH)测定法、丙二醛(MDA)含量检测法、流式细胞仪检测法、Western印迹方法检测活化的Caspase-3蛋白水平。结果 Aβ25³5损伤组与对照组比较噻唑蓝(MTT)代谢率下降,LDH释放量增多(P<0.05或P<0.01),MDA含量增高,细胞凋亡率明显增高,活化的Caspase-3蛋白水平明显增高;刺五加皂苷组可不同程度地保护Aβ2535损伤组与对照组比较噻唑蓝(MTT)代谢率下降,LDH释放量增多(P<0.05或P<0.01),MDA含量增高,细胞凋亡率明显增高,活化的Caspase-3蛋白水平明显增高;刺五加皂苷组可不同程度地保护Aβ25³5的细胞毒性及细胞凋亡。结论刺五加皂苷对Aβ2535的细胞毒性及细胞凋亡。结论刺五加皂苷对Aβ25³5处理PC12细胞毒性及细胞凋亡有较好的保护作用。     

二苯乙烯苷对H2O2诱导PC12细胞损伤的抗氧化作用

目的 探讨2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(TSG)对H2O2诱导PC12细胞损伤的抗氧化作用.方法 本实验分为正常对照组、H2O2处理组和TSG(0.1、1、10和50 μmol/L)预处理组.采用MTT比色法检测细胞活性,活性氧探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,用超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)试剂盒测定细胞的氧化应激变化.结果 与正常对照组相比,细胞经H2O2诱导处理后,细胞存活率降低,胞内ROS水平增高,抗氧化酶活力降低,脂质过氧化产物MDA含量增加.不同浓度的TSG预处理后能减轻H2O2所致的细胞损伤,减少胞内ROS累积,增加细胞的抗氧化酶活力,减轻脂质过氧化反应.结论 TSG可抑制H2O2诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与其抑制氧化应激有关.     

褪黑素对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤的保护作用

目的研究褪黑素（MT）对β淀粉样蛋白片段（AB25书）诱发PC12细胞损伤的神经保护作用。方法将培养的PC12细胞分为三组：正常对照组，Aβ损伤组和MT保护组。Aβ损伤组用Aβ25-35处理细胞，MT保护组在用AB25-35处理前2h加入褪黑素。使用细胞形态学方法、LDH法、MTT法及Western印迹法观察MT的神经保护作用。结果形态学观察发现MT保护组细胞数显著比Aβ损伤组多，受损变圆的细胞数较少。MT保护组LDH活性显著低于损伤组（P〈0．01）；OD值显著高于损伤组（P〈0．01）。Western印迹结果表明Aβ25-35损伤组中Bcl-2的表达比正常对照组低；MT保护组Bcl-2的表达比Aβ25-35损伤组升高。结论褪黑素对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤有保护作用。     

褪黑素对心肌细胞氧化损伤保护作用的实验研究

目的　探讨氧化损伤时褪黑素 (MT)对心肌细胞形态学变化、细胞存活率、自身一氧化氮 (NO)生成的影响 ,以及NO水平与其它氧化指标的关系。方法　分离培养原代心肌细胞 ,分为对照组、H2 O2 处理组、MT组、MT干预组和N 硝基 L 精氨酸 (L NAME)干预组五组进行对照。用外源性H2 O2 造成氧化损伤 ,用生化法检测培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)浓度 ,台盼蓝排斥试验检测细胞存活率 ,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛 (MDA)含量 ,用试剂盒检测细胞培养液中NO含量。结果　H2 O2 处理组和L NAME干预组中的细胞存活率、NO含量、LDH含量和MDA含量与对照组比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ,H2 O2 处理组四项均比对照组明显增高 ,而L NAME干预组中NO含量比对照组明显低。MT干预组与L NAME干预组比较LDH含量和MDA含量明显低 (P <0 .0 1) ,与H2 O2 组加入MT干预后 ,培养液中NO和LDH及MDA含量明显降低 (P <0 .0 1)。结论　心肌细胞在受到H2 O2 损伤时 ,心肌细胞自身产生的NO增加 ,并且在一定程度上参与了对心肌细胞的氧化损伤 ;MT不仅能抑制LDH和MDA的升高 ,还能抑制NO的产生。     

环维黄杨星D对PC12谷氨酸损伤的保护作用的实验研究

目的:探讨环维黄杨星D(CBV-D)对PC12细胞谷氨酸(Glu)损伤模型的影响.方法:用Glu复制PC12细胞兴奋性氨基酸损伤模型,通过MTT染色和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定来研究CBV-D对PC12细胞的保护作用.结果:CBV-D抑制Glu造成的损伤,降低LDH的漏出.结论:CBV-D对兴奋性氨基酸引起PC12细胞损伤具有保护作用.     

琐琐葡萄齐墩果酸对Aβ_(25~35)诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的研究琐琐葡萄提取物齐墩果酸(OA)对β淀粉样蛋白25³5(Aβ2535(Aβ25³5)所致PC12细胞损伤的神经保护作用。方法体外培养PC12细胞,20μmol/L Aβ2535)所致PC12细胞损伤的神经保护作用。方法体外培养PC12细胞,20μmol/L Aβ25³5作用24 h建立阿尔茨海默病(AD)体外模型,设对照组、模型组和OA(20、40、80μg/ml)保护组,CCK-8法检测细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因NF-κB p65表达。结果 20、40、80μg/ml OA可提高PC12细胞存活率,减少LDH渗漏,增加SOD活力,减少MDA含量,降低细胞凋亡率,下调NF-κB p65 mRNA表达,与模型组有显著差异(P<0.05)。结论 OA对Aβ2535作用24 h建立阿尔茨海默病(AD)体外模型,设对照组、模型组和OA(20、40、80μg/ml)保护组,CCK-8法检测细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因NF-κB p65表达。结果 20、40、80μg/ml OA可提高PC12细胞存活率,减少LDH渗漏,增加SOD活力,减少MDA含量,降低细胞凋亡率,下调NF-κB p65 mRNA表达,与模型组有显著差异(P<0.05)。结论 OA对Aβ25³5诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤具有明显的保护作用。     

低浓度过氧化氢对内皮前体细胞的损伤效应及复方丹参注射液的保护作用

目的观察低浓度过氧化氢（H2O2）对内皮前体细胞（EPC）的损伤效应及复方丹参注射液（ISM）的保护作用。方法建立猪EPC体外培养模型,在培养液中加入低浓度H2O2（100、200、300、400μmol/L）及5 mg/L ISM,测定细胞增殖活力（MTT法）、乳酸脱氢酶（LDH）活性、丙二醛（MDA）含量及细胞凋亡率。结果H2O2使细胞增殖活力下降,使LDH、MDA含量增加,细胞凋亡率上升,并呈浓度依赖性,ISM可减轻上述变化。结论ISM对低浓度H2O2造成的EPC损伤具保护作用。     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的保护作用

目的探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的影响.方法采用血清药理学方法,体外培养PC12细胞,用Na2,S2O4产生缺氧损伤,观察PC12细胞形态学、m法细胞活力、乳酸脱氢酶LDH活性的变化.结果醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用,可增强细胞活力,降低LDH活性.结论醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的缺氧损伤,并呈现一定的剂量依赖关系.     

苯那普利对乳鼠心肌细胞缺氧复氧自由基损伤的保护作用

目的观察苯那普利对乳鼠心肌细胞缺氧复氧自由基损伤的保护作用和作用途径.方法采用纯化的乳鼠心肌细胞复制缺血再灌注模型.实验分为6组:正常对照组、单纯缺氧复氧组、缺氧复氧 苯那普利低剂量组(1×107 mol/L)、缺氧复氧 苯那普利组中剂量组(1×106 mol/L)、缺氧复氧 苯那普利高剂量组(1×105 mol/L)、缺氧复氧 中剂量苯那普利 缓激肽B2受体拮抗剂(HOE140)组(1×106 mol/L).细胞缺氧1 h复氧2 h后取培养液测定乳酸脱氢酶(LDH)的活性,取细胞测定MTT代谢率、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA).结果细胞缺氧复氧时LDH及MDA含量较对照组明显增高(P＜0.01),SOD活性及MTT代谢率较对照组明显降低(P＜0.01);不同剂量的苯那普利组降低LDH和MDA含量,提高SOD活性和MTT代谢率,与缺氧复氧组比较(P＜0.01),并呈剂量依赖性改变;苯那普利与HOE140合用时,与中剂量苯那普利组比较上述指标呈反向变化,差异有统计学意义(P＜0.01).结论苯那普利通过抗自由基达到对缺氧复氧损伤心肌的保护作用,其作用可能与激活激肽-缓激肽释放系统,促进缓激肽的合成有关.     

右美托咪定对过氧化氢引起的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨右美托咪定对过氧化氢(H_2O_2)引起的PC12细胞损伤的保护作用。方法 PC12细胞随机分为正常对照组,H_2O_2组(200μmol/L H_2O_2),右美托咪定低、中、高浓度组(50、100、200μmol/L右美托咪定+200μmol/L H_2O_2),培养48 h,分别检测细胞活力、凋亡情况、天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、Caspase9活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放量,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2磷酸化水平。结果与H_2O_2组比较,右美托咪定低、中、高浓度组细胞活力显著提高,细胞早期及晚期凋亡率显著降低,LDH释放量显著减少,MDA含量显著降低,SOD、CAT及GSH-Px活性显著升高,Caspase3、9活性显著降低,Bcl-2及p-ERK1/2表达量显著上调,Bax表达量显著下调(均P<0.01)。结论右美托咪定能通过抗氧化及抗细胞凋亡进而抑制H_2O_2引起的PC12细胞损伤。