核转录因子-κB与炎性疼痛

本文介绍核转录因子-kB的构成、活化及生物学效应,探索它在炎性疼痛的发生、发展以及疼痛抑制中的作用和 地位。力图建立核转录因子-kB与炎性疼痛之间的回路关系。     

核转录因子κB与前列腺癌

核转录因子κB(nuclearfactorofkappaB ,NF κB)是一种多极性核转录因子 ,参与调控多种与免疫反应、凋亡、炎症、肿瘤形成和转移有关的基因表达。近年来 ,NF κB在肿瘤发生、耐药、转移中的作用及其机制逐渐成为医学研究的热点。本文主要综述了NF κB的结构、生物学功能及其抗凋亡诱发肿瘤的机制 ,NF κB调控的前列腺癌相关基因的表达和调控 ,NF κB参与前列腺癌浸润与转移的机制及其在前列腺癌基因治疗中的可能策略等。     

核转录因子-κB在血管病变中的作用

核转录因子-κB(NF-κB)是研究最为广泛的转录因子之一,在机体的免疫应答、炎症反应和细胞的生长、发育等方面发挥重要作用。血管病变广义上可认为是一种炎症反应,涉及血管内皮损伤、内膜增生及由此引起的血管狭窄、新生血管的生成等,我们认为NF-κB在以上各血管病变中均通过不同机制,直接或间接发挥着重要的作用。同时,以NF-κB作为靶点治疗各种疾病,日益受到学者们的关注。     

Celecoxib可通过抑制核转录因子-κB活性诱导SGC7901/ADR细胞的凋亡

目的 观察环氧合酶-2(COX-2)特异性抑制剂Celecoxib对胃癌SGC7901/ADR细胞多药耐药1(mdr1)基因表达、核转录因子(NF)-κB激活水平及细胞凋亡的作用.方法 实验分为4组:SGC7901组、SGC7901+Celecoxib组、SGC7901/ADR组和SGC7901/ADR+Celecoxib组.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术检测mdr1基因的表达,电泳迁移率实验(EMSA)测定NF-κB激活水平,流式细胞术检测细胞内Rh123聚集及细胞凋亡.结果 SGC7901/ADR细胞中mdr1基因表达和NF-κB活性分别为SGC7901组的2.4倍和3.2倍(P＜0.01),Celecoxib可显著抑制SGC7901和SGC7901/ADR细胞mdr1基因的表达及NF-κB活性,使SGC7901和SGC7901/ADR细胞内Rh123的聚集分别增加1.2倍和1.9倍,可使ADR诱导的SGC7901和SGC7901/ADR细胞的凋亡率分别提高1.65倍和2.98倍.结论 Celecoxib可能通过抑制NF-κB活性而抑制mdr1基因的表达,进而增加SGC7901/ADR细胞内药物聚集并促进细胞凋亡.     

核因子-κB与急性肺损伤

核因子-κB是一种对许多参与免疫与炎症反应等有关基因的表达具有调控作用的转录因子。其在急性肺损伤发 病机制及诊疗中的作用已日益引起人们关注。本文就核因子-κB构成、活化、生物学效应及其在急性肺损伤中的作用作一综 述。     

重楼对膜性肾病大鼠肾脏核转录因子-κB活化及Ⅳ型胶原表达的影响

目的：探讨重楼对膜性肾病（membranous nephropathy,MN）大鼠肾脏核转录因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）活性及Ⅳ型胶原表达的影响。方法：采用阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）复制大鼠MN模型。随机分为模型对照组、重楼治疗组、雷公藤多苷治疗组（阳性对照组）及正常对照组。应用免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织内NF-κBp65及Ⅳ型胶原（ColⅣ）的表达水平;应用RT-PCR法检测各组大鼠肾组织NF-κB mRNA水平。结果：与模型组相比,重楼能明显抑制肾小球NF-κB活化（P〈0.05）及ColⅣ分泌（P〈0.01）;两治疗组的NF-κB的mRNA表达明显低于模型组（P〈0.05）。以上指标两治疗组间无统计学差异。结论：NF-κB的活化参与了MN的肾小球的病理损害过程,重楼对MN大鼠肾脏的保护作用可能与其抑制NF-κB活化有关。     

烧伤血清对内皮细胞核因子-κB核移位的影响

目的　了解烧伤血清对内皮细胞核因子 κB (NF κB)异二聚体 p5 0 /p6 5核移位 ,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响 ,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用。方法　采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4 ,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐 (PDTC)刺激内皮细胞 ,并以正常培养的内皮细胞为对照。应用激光共聚焦显微镜观察刺激 30、6 0、12 0、4 80min后内皮细胞 p5 0 /p6 5核移位情况 ,采用Western印迹法检测刺激 30、6 0、90、12 0min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况。　结果　与对照组比较 ,烧伤血清刺激内皮细胞 30min后 ,p5 0、p6 5即发生核移位 ,30～ 6 0min达高峰 ,2h后恢复至刺激前状态 ;而烧伤血清刺激 30min后 ,IκBα发生降解 (P <0 .0 1) ,刺激 4 5～ 6 0min后最为明显 ,2h后表达逐渐恢复。PDTC能有效抑制烧伤血清作用 30、6 0min后 ,p5 0、p6 5的核移位和IκBα降解。 　结论　烧伤血清可导致内皮细胞NF κBp5 0、p6 5发生核移位 ,并使IκBα降解 ,进而活化NF κB ,诱导内皮细胞分泌细胞因子。PDTC对这一系列变化可能有抑制作用     

转染核因子κB decoy寡核苷酸在肝癌耐药细胞株的定位及对其活性的影响

本研究我们通过阿霉素逐步诱导肝癌HepG2细胞，建立稳定表达MDR1的肝癌耐药细胞株HepG2／ADM，转染核因子(NF-κB)decoy寡核苷酸，观察NF-κB在肝癌耐药细胞株转染前后的动态变化。     

核因子-κB在肾脏疾病中的研究进展

核因子 kappB(NF κB)是一种重要的核转录因子。它调控多种基因的表达 ,与炎症性细胞因子和趋化因子的产生、成纤维细胞的增生分化、细胞外基质 (ECM)交联及细胞凋亡等有关。已知NF κB参与了许多肾脏疾病的发生发展过程 ,与肾小球肾炎、肾小管及间质损伤性疾病、糖尿病肾病及肾细胞癌等密切相关     

抑制核转录因子-κB对移植静脉内膜增生的影响

目的　研究核转录因子 κB(NF κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯 (PDTC)对移植静脉内膜增生的影响。方法　Wistar大鼠 64只 ,建立自体静脉移植模型 ,随机分为 4组 :对照组、阴性对照组、PDTC 5 0mg/kg组、PDTC 2 0 0mg/kg组。实验组腹腔注射不同剂量的PDTC连续 3d ,对照组给以生理盐水或不予处理 ;分别在术后 1、2周取材 ,比较内膜增生程度 ;逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)检测NF κBp65mRNA及细胞间粘附分子 (ICAM) 1mRNA的表达 ,原位杂交定位ICAM 1的mRNA表达 ,Westernblot和免疫组织化学方法检测 p65、ICAM 1蛋白产物表达。结果PDTC明显抑制内膜增生 (P <0 .0 5 ) ,2 0 0mg/kg组受抑制程度明显 ,与 5 0mg/kg组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,抑制率 3 1%～ 5 4%。PDTC能够抑制 p65及ICAM 1的mRNA表达 (P <0 .0 1) ,p65和ICAM 1蛋白表达也显著低于各对照组 (P <0 .0 1) ,抑制率 44 %～ 68%。 结论　PDTC可显著抑制移植静脉内膜增生 ,其作用机制可能是通过抑制核转录因子 κB激活、减少黏附分子基因及蛋白产物表达而实现的。     

核转录因子-κB对肝癌细胞Hep3B COX-2表达的调节

目的 探讨核转录因子(NF)-κB对肝细胞癌细胞Hep3B中COX-2表达的调控作用。方法 以体外合成的NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)处理Hep3B细胞72h，利用Western blot方法检测ASODN处理的Hep3B细胞p50和COX-2蛋白表达水平。利用电泳凝胶迁移法测定经ASODN处理的Hep3B细胞核内NF-κB水平。对照组为p50正义寡聚脱氧核苷酸(SODN)和未经处理的Hep3细胞。结果(1)Western blot分析显示，与以SODN处理和对照组的Hep3B细胞相比，以AS ODN处理的Hep3B细胞其NF-κB亚单位p50蛋白的水平明显降低，Hep3B细胞核抽提物NF-κB水平也相应减低。(2)以ASODN处理的Hep3B细胞其COX-2蛋白水平低于以SODN处理的Hep3B细胞和对照组细胞。结论 在肝细胞癌细胞Hep3B中，NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)可抑制NF-κB活性，导致COX-2的表达下调。由此反过来推测．活化的NF-κB对COX-2具有激活和诱导作用，提示COX-2在肝细胞中作用与NF-κB通道有关．在肝细胞癌的形成和以NSAIDs预防性或治疗性用于肝细胞癌时，NF-κB有了新的作用。     

重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7转染犬髓核细胞及其对髓核细胞表型的影响

目的:观察重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7(recombinant adeno-associated virus-2expressinghuman bone morphogenetic protein-7,rAAV2-hBMP7)转染犬髓核细胞情况及其对细胞表型的影响。方法:用1岁龄Beagle犬L4/5椎间盘髓核进行髓核细胞体外培养,取第2代髓核细胞进行实验,实验组以rAAV2-hBMP7(1×105v.g/细胞)转染髓核细胞,对照组以重组2型腺相关病毒-增强型绿色荧光蛋白(recombinantadeno-associated virus-2expressing enhanced green fluorescent protein,rAAV2-EGFP)转染髓核细胞。在转染后4d、7d和14d以PCR检测髓核细胞中hBMP7的mRNA表达,在转染后7d和14d以Western blot法检测髓核细胞中hBMP7蛋白表达。在转染后4d、7d和14d采用RT-PCR法检测蛋白多糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的mRNA含量,采用二甲基蓝及ELISA法分别检测蛋白多糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的蛋白含量。结果:实验组髓核细胞表达hBMP7 mRNA及蛋白,并于转染后7d时表达量最高,而对照组无表达。实验组髓核细胞蛋白多糖mRNA及蛋白含量在转染后7d和14d时较4d时明显增高,14d时较7d时亦明显升高(P0.05),对照组各时间点无统计学差异(P0.05);4d时实验组与对照组比较无明显差异,7d和14d时较对照组明显增加(P0.05)。同组各时间点Ⅰ型胶原mRNA及蛋白含量均无统计学差异,两组各时间点间比较无统计学差异(P0.05)。实验组髓核细胞Ⅱ型胶原mRNA及蛋白含量在转染后7d和14d时较4d时明显增高,14d时较7d亦明显升高(P0.05),对照组各时间点无统计学差异(P0.05);实验组4d时与对照组比较无明显差异,7d和14d时较对照组明显增加(P0.05)。结论:rAAV2-hBMP7转染犬髓核细胞后能表达hBMP7蛋白,并能提高其蛋白多糖及Ⅱ型胶原含量。     

可分泌表达人降钙素基因相关肽重组腺相关病毒体外转染培养的血管内皮细胞及其表达

目的观察可分泌表达人降钙素基因相关肽(humancalcitoningene-relatedpeptide,hCGRP)重组腺相关病毒(rAAV)体外转染培养的血管内皮细胞(endothelialcellsofvessel,ECV)及其作用,探讨其应用于血管性勃起功能障碍基因治疗的可行性。方法分别以可分泌表达hCGRP的重组腺相关病毒VssHGCMV-hCGRP、表达报告基因GFP中的重组腺相关病毒VssCMV-GFP和空病毒pssHGCMV体外转染培养的ECV细胞,采用斑点印迹试验检测培养基中的hCGRP,以放射免疫法检测转染细胞中的cAMP和cGMP水平,观察GFP和hCGRP的表达及其对ECV细胞的影响。结果腺相关病毒载体能有效地将外源基因hCGRP导入血管内皮细胞并稳定表达,VssHGCMV-hCGRP病毒组细胞中cAMP水平(45.74±3.45)nmol/L较pssHGCMV空病毒组(14.84±0.65)nmol/L和对照组(12.74±0.65)nmol/L明显高(P<0.01),并可在实验组24h细胞培养液中检测到免疫反应性hCGRP。结论可分泌表达生物活性肽重组腺相关病毒基因转移系统可有效进行多肽类在血管内皮细胞过表达,并可选择性刺激该细胞中cAMP水平升高,提示hCGRP可作为血管性勃起功能障碍基因治疗的有效候选基因。     

胃癌组织中核转录因子-κB表达与意义

核转录因子-κB（NF-κB）是一种转录因子、调节许多基因的表达。我们通过免疫组织化学检测了53例胃癌及18例正常胃组织中NF-κB的表达及分析其与胃癌生物学行为的关系。     

核转录因子-κB-圈套抑制血管内皮细胞核转录因子-κB激活机制的探讨

目的:观察核转录因子(NF)-κB圈套(decoy)对脂多糖(LPS)刺激后人脐静脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用,并就其作用机制进行探讨。方法:获取和培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),平均分成4组。NF-κB-圈套组和错配-圈套组分别预先以NF-κB-圈套-Lipofectamine2000复合物和错配-圈套-Lipofectamine2000复合物(对照组)处理,LPS组和对照组分别加入同体积的培养液,观察荧光标记DNA转染细胞情况。用10μg/mlLPS刺激2h激活NF-κB,收集细胞,分别提取细胞核蛋白,检测不同组NF-κB活性以及P65和P50亚基蛋白质含量。结果:转染5h后大于90%细胞核内可观察到绿色荧光。NF-κB-圈套组NF-κBP65亚基活性显著低于错配-圈套组和LPS组,但P65和P50亚基蛋白质含量两组之间无显著差异。结论:NF-κB-圈套能抑制细胞核内NF-κB的DNA结合活性,这一作用可能是NF-κB-圈套转入细胞核后占据转录因子核定位区的结果。     

核转录因子κB激活对雌激素受体阴性乳腺癌细胞增殖的影响

目的研究雌激素受体（ER）阴性乳腺癌细胞株中核转录因子κB的激活途径及其促进肿瘤细胞增殖的机制。方法以蛋白印迹法和流式细胞技术研究不同受体类型乳腺癌细胞株IκB激酶α表达、不同处理因素对雌激素受体阴性细胞株MDA-MB-435S细胞周期的影响,以及抑制核转录因子κB对细胞增殖的影响。结果雌激素受体阴性细胞株中的IκB激酶α表达高于受体阳性细胞株,而在MDA-MB-435S中促进细胞增殖因素的研究中,表皮生长因子作用最显著,它能提高细胞周期蛋白D1表达,较对照组增加83％,促细胞增殖指数由0．22提高至0．31（P〈0．01）,而应用蛋白激酶C抑制剂C06976抑制核转录因子κB激活,可显著抑制表皮生长因子的促细胞增殖作用。结论表皮生长因子的促雌激素受体阴性乳腺癌细胞增殖信号可通过激活核转录因子κB提高细胞周期蛋白D1表达,促进了肿瘤细胞增殖。核转录因子κB起了增殖信号递呈作用,针对核转录因子κB激活的治疗可提供乳腺癌全新的治疗靶点。     

核因子-κB与乳腺癌的发生、发展和转移

核因子-κB（NF-κB）是参与一系列基因表达调控的关键性核转录因子,其与肿瘤关系密切,近年备受关注.本文主要讨论NF-κB在乳腺癌发生、发展、转移中的作用.