大鼠腰骶髓后连合核内P物质受体阳性神经元与GABA能轴突终末的突触联系

用包埋前免疫组织化学方法结合包埋后免疫金电镜技术，研究了大鼠腰骶髓后连合核内Ｐ物质受体（ＳＰＲ）免疫反应神经元与ＧＡＢＡ能终末的突触联系。ＳＰＲ免疫反应产物主要分布于神经元胞体和树突的胞膜下。双重标记电镜结果表明，约有４６％的ＳＰＲ阳性树突和胞体与ＧＡＢＡ能终末形成对称性突触。其中绝大部分为轴树突触，个别为轴体突触。本研究结果提示，大鼠腰骶髓后连合核ＳＰＲ阳性神经元可能接受ＧＡＢＡ能终末的调控。     

大鼠腰骶髓后连合核内P物质受体阳性神经元与GABA能轴突终末…

用包埋前免疫组织化学方法结合包埋后免疫金电镜技术，研究了大鼠腰骶后连合核内Ｐ物质受体（ＳＰＲ）免疫反应神经元与ＧＡＢＡ能科末的突触联系。ＳＰＲ免疫反应产物主要分布于神经元胞体和树突的细胞膜下，双重标记电镜结果表明，约有４６％的ＳＰＲ阳性树突和胞体与ＧＡＢＡ能终末形成对称性突触。其中绝大部分为轴树突触，个别为轴体突触。本研究结果提示，大鼠腰骶髓后连合核ＳＰＲ阳性神经元可能授ＧＡＢＡ有终末的调控。     

I─B4阳性纤维和终末及P物质受体在大鼠腰骶髓内的分布

为了探讨传递伤害性刺激信息的Ｃ纤维终末与ＳＰ受体（ＳＰＲ）阳性结构间的关系，用Ｉ－Ｂ４组织化学法和ＳＰＲ免疫组织化学法，光镜下观察了大鼠腰骶髓内Ｉ－Ｂ４阳性纤维及其终末和ＳＰＲ阳性胞体及其树突的分布。结果显示：被Ｉ－Ｂ４特异标记的阳性纤维及其终末主要分布于腰骶髓后角Ｉ、ＩＩ层以及内、外侧束。另外，在腰骶髓的后连合核区（ＤＣＮ）也有相当数量的Ｉ－Ｂ４阳性纤维及其终末分布。说明了伤害性刺激信息主要传递至腰骶髓内的后角Ｉ、ＩＩ层，同时也有相当一部分伤害性刺激信息传递至腰骶髓的ＤＣＮ区。传递至ＤＣＮ区的Ｉ－Ｂ４阳性纤维主要通过沿后角内侧缘走行的内侧束，从而为ＤＣＮ区参与内脏伤害性刺激信息传递及其调制机制提供了进一步的证据。ＳＰＲ阳性胞体和树突主要分布于腰骶髓的后角Ｉ层、Ｉ～Ⅳ层，后角侧缘的内、外侧束也有少量分布。此外，ＤＣＮ区也有大量的ＳＰＲ阳性树突和散在的阳性胞体。双重反应的结果显示两者在Ｉ、ＩＩ层及ＤＣＮ区的分布相互匹配，从而推测被Ｉ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末可能含有Ｐ物质     

大鼠脊髓P物质受体分布的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学技术对大鼠脊髓和脊神经节内Ｐ物质受体的定位分布进行了系统的研究。结果证明，Ｐ物质受体阳性胞体和树突主要密集地分布于脊髓全长的Ｉ层；此外，还发现Ⅱ层的外侧部出现少量阳性胞体和树突，来自Ⅱ层的阳性树突穿过Ⅱ层后进入Ⅰ层；Ⅲ￣Ⅴ和Ⅹ层也可见中等密度的阳性胞体和树突；Ⅵ层和Ⅶ层仅见少量阳性胞体和树突，但胸髓中间带外侧核、骶髓副交感运动核、骶髓后连合核内可见大量浓染的阳性胞体和树突；Ⅷ、Ⅸ层、     

I—B4阳性纤维和终末及P物质受体在大鼠腰骶髓内的分布

籽探讨传递伤害性刺激信息的Ｃ纤维张末与ＳＰ受体（ＳＰＲ）阳性结构间的关系，用Ｉ－Ｂ４组织化学法和ＳＰＲ免疫组织化学法，光镜下观察了大鼠腰骶髓内Ｉ－Ｂ４阳性纤维及其终末和ＳＰＲ阳性一胞体及其树突的分布、结果显示，被Ｉ－Ｂ４特异标记的阳性纤维及其终末主要分矶于腰骶后角Ⅰ、Ⅱ层以及内、外侧束。另餐；在腰骶髓的后连合核区（ＤＣＮ）也有相当数量的Ｉ－Ｂ４阳性纤维及其终末分布，说明了伤害性刺激信息主要传递至腰     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?     

大鼠脊髓P物质受体定位分布的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学技术对大鼠脊髓和脊神经节内Ｐ物质受体的定位分布进行了系统的研究。结果证明，Ｐ物质受体阳性胞体和树突主要密集地分布于脊髓全长的Ⅰ层，此外，还发现Ⅱ层的外侧部出现少量阳性胞体和树突，来自Ⅲ层的阳性树突穿过Ⅱ层后进入Ⅰ层；Ⅲ～Ⅳ和Ⅹ层也可见中等密度的阳性胞体和树突；Ⅵ层和Ⅶ层仅见少量阳性胞体和树突，但胸髓中间带外侧核、骶髓副交感运动核、骶髓后连合核内可见大量浓染的阳性胞体和树突；Ⅷ、Ⅸ层、Ｏｎｕｆ氏核、外侧颈核和外侧脊索核也有阳性胞体和树突．灰质内的阳性胞体的树突还伸向前索和外侧索，有时可达脊髓的边缘．此外，脊神经节内也可见少量散在且均匀分布的小型阳性胞体．     

大鼠弓状核内神经紧张素能和P物质能阳性结构的免疫电镜双标记研究

用包埋前免疫电镜双标记技术研究大鼠下丘脑内的神经紧张素(NT)和P物质(SP)分布的超微结构。证实在弓状核内存在NT样和SP样免疫反应阳性的胞体、树突和轴突。NT样和SP样免疫反应阳性的树突和轴突均可接受免疫反应阴性结构的非对称性传入突触。SP样免疫反应阳性轴突终末除可与免疫反应阴性的树突和胞体形成对称性传出突触外, 还可与NT样免疫反应阳性胞体形成对称性轴-体突触。本研究首次直接证实大鼠弓状核内的NT能神经元接受SP能神经的支配。     

大鼠脑干面口部运动神经元与5-HT样、SP样、L-ENK样、GABA样和Gly样阳性终末间的突触联系

为了观察５－羟色胺（５－ＨＴ）样、Ｐ物质（ＳＰ）样、亮氨酸－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）样、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）样和甘氨酸（Ｇｌｙ）样阳性终末与脑干面口部运动核（三叉神经运动核、面神经核和舌下神经核）间的突触联系，用ＨＲＰ逆行追踪与免疫组织化学染色相结合的双标技术，在电镜下对５－ＨＴ样、ＳＰ样、Ｌ－ＥＮＫ样、ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末与ＨＲＰ逆标面口部运动神经元间的突触联系进行了观察。５－ＨＴ样、ＳＰ样、Ｌ－ＥＮＫ样、ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末在脑干面口部运动核内呈均匀分布，没有区域特异性。将ＨＲＰ注入面口部肌肉或相应的周围神经后，ＨＲＰ逆标神经元见于脑干运动核不同部位内支配相应肌肉的运动神经元。５－ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样阳性终末主要与ＨＲＰ逆标运动神经元的树突形成非对称性的轴－树突触；ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末则主要与ＨＲＰ逆标运动神经元的树突形成对称性的轴－树突触；偶见上述阳性轴突终末与ＨＲＰ逆标运动神经元的胞体形成轴－体突触。结果提示：主要来自脑干运动前神经元的５－ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样阳性终末及ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末可能分别对脑干运动神经元发挥兴奋性或抑制性调控作用     

一氧化氮合酶阳性神经元及纤维在大鼠脊髓的分布及其来源

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)脱氢酶反应观察了大鼠脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元和纤维的分布。胞体浓染且突起显示良好的类似Golgi染色的阳性神经元分布于亘脊髓全长的中央管周围灰质(X层),胸腰髓(T1-L3)的中间带外侧核、中介核及腰骶髓(L6、S1)的骶髓副交感核和后连合核,少量弥散于后角Ⅳ～Ⅵ层。后角Ⅲ层内可见较多的胞体浓染或淡染但突起短或未见阳性突起的小型神经元。前角内无阳性神经元,但有较多串珠状阳性终末支,并在运动神经元胞体和树突上形成终扣。阳性纤维和终末在后角Ⅰ层和Ⅲ层密集,其它部位稀少。在胸腰段和腰骶段脊髓后角内、外侧缘有行向腹侧的内、外侧阳性纤维束,外侧束集中而粗大,阳性纤维束终止于中间带外侧核和后连合核。切断后根和半横断颈髓的实验表明,后角Ⅰ层的阳性纤维和终末主要来源于脊神经节内一氧化氮合酶阳性细胞的中枢突,而Ⅲ层内的阳性纤维和终末则为Ⅲ层和后角深层阳性细胞的突起。结合文献和本文结果可以推断,一氧化氮在躯体和内脏感觉的传入过程及内脏传出活动中是一种重要的活性物质。     

大鼠三叉神经感觉核簇内SP受体及三叉神经节内SP样阳性终末和SP受体分布的免疫组织化学研究

本文用免疫组织化学方法对三叉神经感觉核簇内的SP受体及三叉神经节内的SP样阳性终末和SP受体的分布状态进行了研究。三叉神经感觉主核内的SP受体样阳性胞体和树突主要见于其背侧部和腹侧部。三叉神经脊束核的各亚核内均可见到SP受体样阳性的结构:吻侧亚核的SP受体样阳性胞体和树突主要见于其中央部;极间亚核的周边部仅有少量SP受体样阳性的胞体和树突;尾侧亚核内SP受体样阳性的胞体和树突最密集,且主要位于Ⅰ、Ⅱ层。三叉神经节内可见SP样阳性终末呈丛状或环状包绕在阴性胞体周围,也可见到少量散在的SP受体样阳性的胞体。SP受体样免疫反应阳性产物位于阳性胞体和树突的膜上。     

正中隆起内NT能神经元的SP能神经支配的免疫电镜双标研究

应用包埋前免疫电镜PAP双标技术,对大鼠下丘脑正中隆起内的神经紧张素(neurotensin,NT)和P物质(substance P,SP)的分布进行了超微结构研究。先用DAB法显示SP免疫反应,然后用钼酸-TMB法显示NT免疫反应,再经DAB-氯化钴稳定后作免疫电镜包埋。电镜观察发现:在正中隆起内SP免疫反应呈电子密度高的颗粒状或絮状沉淀,广泛分布于轴突内的小清亮囊泡周围和基质内;NT免疫反应产物则为电子密度高的针状或块状,散在分布于胞体、树突和轴突内。含SP的轴突可接受免疫反应阴性轴突的传入性突触,也可与阴性树突形成传出性轴-树突触;含NT的树突和胞体均可接受阴性轴突的传入性突触。此外,SP阳性轴突末梢还可与NT阳性神经元的树突棘形成对称性轴-棘突触及与NT阳性轴突形成对称性轴-轴突触。实验结果表明:大鼠正中隆起内的NT能神经元接受SP能神经的支配,为下丘脑神经内分泌的突触调控提供了新的超微结构依据。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内向丘脑或臂旁核投射神经元与5-HT样和SP样终末间的联系:激光共聚焦显微镜研究(英文)

用免疫荧光组织化学三重染色技术观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc）浅层（Ⅰ层和Ⅱ层）内向丘脑或臂旁核投射的神经元与下行性5-HT样和初级传入的SP样终末之间的联系。将四甲基罗达明（TMR-DA）注入大鼠丘脑或臂旁核,在Vc的Ⅰ、Ⅱ层内可见TMR－DA逆标神经元,主要位于VcⅠ层。在Vc浅层内还可观察到大量的5－HT样和SP样免疫荧光组织化学染色阳性纤维和终未,5－HT样阳性纤维有较多的膨体。Vc内的这些向丘脑或臂旁核投射的TMR－DA逆标神经元与5－HT样和SP样阳性纤维和终末的分布区基本上重叠。在激光共聚焦显微镜下可以看到5－HT样和SP样阳性终末在Vc浅层内分别围绕TMR－DA逆标神经元的胞体和树突的周围并与之形成密切接触;并且观察到5－HT样和SP样阳性终末同时与TMR－DA逆标神经无形成直接的密切接触。提示Vc浅层向丘脑和臂旁核投射的神经元不仅接受外周初级传入的伤害性信息,还接受下行性5-HT能投射纤维的调控。     

小鼠中脑导水管周围灰质下行投射的SP能终末与中缝大核内SP受体阳性神经元的突触联系

P物质(SP)在中枢神经系统内具有镇痛作用,中脑导水管周围灰质(PAG)和中缝大核(NRM)是中枢内源性镇痛系统的关键结构。本研究采用顺行追踪与免疫组化双重染色相结合的三标方法,观察了起源于PAG的SP能阳性终末与NRM内SP受体(SPR)阳性神经元之间的突触联系。结果显示:将生物素化葡聚糖胺(BDA)注入小鼠PAG的腹外侧区后,BDA顺行标记终末可见于脑干的许多区域,但主要位于NRM。其中的部分BDA顺行标记终末呈SP阳性。NRM内可见到散在分布的SPR阳性神经元。在电镜下可见来自PAG的SP/BDA双标终末与NRM内的SPR阳性神经元的胞体和树突形成以非对称性为主的突触联系。本研究的结果提示起源于PAG的下行投射终末所释放的SP是激活中枢内源性镇痛系统并使之发挥镇痛作用的重要神经活性物质。     

Immunocytochemical study of GABAergic neurons containing the calcium-binding protein parvalbumin in the rat hippocampus

Summary The structural features of PV-immunoreactive (PV-I) neurons, a particular subpopulation of GABAergic neurons, in the hippocampus were studied by immunocytochemistry. The PV-I cell bodies were concentrated within the stratum pyramidale (SP) and stratum oriens (SO) in the hippocampus. PV-I puncta were frequent in SP, while they were rarely seen in other layers. The dendritic arborization of PV-I neurons resembled that of some of the nonpyramidal cells observed after Golgi-impregnation. The most commonly observed PV-I neurons had their perikarya located in SP with dendrites extending into SO and the stratum radiatum (SR). Most of the dendrites in SR had typical beaded or varicose segments. The dendrites extending into SO had few beaded parts. There were many bipolar and multipolar neurons with smooth dendrites in SO, but only a small number of such multipolar neurons in SR. An electron microscopic analysis revealed that PV-I products were located to perikarya, dendrites, myelinated axons and synaptic boutons. The perikarya of PV-I neurons exhibited several ultrastructural features of nonpyramidal cells, e.g., abundant cisternae of endoplasmic reticulum, mitochondria and other perikaryal organelles, an infolded nuclear envelope and intranuclear inclusions. They received many asymmetric synapses with round presynaptic vesicles. There were numerous PV-I boutons, presumably axonal endings, covering the pyramidal cell bodies. The PV-I boutons also contacted the axon initial segments and proximal dendrites of the pyramidal cells. In addition PV-I terminals were found on somata and dendrites of both PV-I or PV-negative nonpyramidal cells. The results suggest that PV-containing neurons include basket and axo-axonic cells.     

SP,CGRP,ENK样阳性纤维终末在猫骶髓后连合核内的分布特征及超微结构

本实验用免疫组化电镜技术对骶髓后连合核中SP祥、CGRP样、L-ENK样阳性终末进行了观察,结果表明:SP样阳性终末主要含圆形清亮小泡,间有少量颗粒囊泡,主要与中、小树突形成不对称型轴-树突触(93%);还可见到不对称型轴-体突触(5%);也可见到少量的轴-轴突触(2%),SP样阳性终末为突触后成分。CGRP样阳性终末以含圆形清亮小泡为主,有的终末内混有颗粒囊泡。大多数终末(89%)与树突构成轴-树突触,但以远侧树突为主;也有少数(6%)的CGRP样阳性终末与胞体形成轴-体突触;还观察到由阴性终末与CGRP样阳性终末构成的轴-轴突触。L-ENK样阳性终末以含圆形清亮小泡为主,有时可见散在的颗粒囊泡,多与中、小树突形成不对型轴-树突触(92%);也观察到轴-体突触(5%)和轴-轴突触(3%)。     

P物质与Griffonia simplicifolia I-B_4结合位点在大鼠初级传入神经元的共存

应用荧光双标组织化学技术观察到，在大鼠腰段脊神经节中，GriffoniasimplicifoliaI-B.（I-B4）结合反应物与P物质样免疫反应物均分布在小细胞中，且34％～43％的I-B4结合反应阳性细胞和87％～95％的P物质阳性细胞为I-B4与P物质双标细胞。切断单侧脊神经后根的大鼠，切断侧脊髓后角内I-B4结合反应在术后第3d即明显减弱，至第5d消失。向成年大鼠蛛网膜下腔注射辣椒素后，脊髓后角和Lissauer束内的I-B4结合反应于第3d已明显减弱，于第5d、第7d和第10d减弱更显著，但仍有部分残留。电镜下.脊髓后角I～III层有大量轴突终末被I-B4标记，其中许多标记终末参与构成突触小球。在包埋前免疫金-银-ABC法双标电镜标本上，脊髓后角内I-B4与SP双标轴突终末分别占I-B4阳性轴突终未总数和P物质阳性轴突终末总数的33％～36％和39％～53％。上述结果进一步证实了I-B4与初级传入的小神经元结合的特异性，并表明I-B4结合位点是鉴别脊髓后角内P物质阳性轴突终末的初级传入来源的重要标志。