造血干细胞移植的护理

<正>造血干细胞移植治疗某些恶性和非恶性血,可以达到临床痊愈,是现代医学发展的重要里。造血干细胞移植可分为骨髓移植(BMT)、外干细胞移植(PBSCT)和脐血干细胞移植,按照干细胞来自患者自身与否又可分为自体移植、因移植和异基因移植,而造血干细胞移植的成取决于人类白细胞抗原(HLA)的配型。由于     

总有核细胞和CD34＋细胞数对脐血移植效果的分析

目的探讨总有核细胞和CD34’细胞数量在脐血移植中选择合适脐血的预示作用。方法分析不同总有核细胞数（TNc）和CD34＋细胞数输入量、供受者人类白细胞抗原（HLA）不相合数间脐血移植效果的差异,评价TNC和CD34＋细胞数的作用。结果89例白血病患者植入75例。植入率为84．3％。中性粒细胞（ANC）≥0．5x10’几、血小板≥20x106／L、血小板≥50x109／L的时间分别为17d、34d和46d。TNC输入量与移植植入率呈正相关,与生存率无关。CD34＋细胞输入量与移植植入率和生存率有正相关性。供受者HLA配型不相合位点数差异对移植后的植入率和生存率无影响。结论脐血是一种替代骨髓造血干细胞应用于白血病患者移植的较好来源。TNC和CD34＋细胞数输入量对移植效果存在正性影响作用,是脐血移植中选择合适脐血的重要参考指标。     

非血缘造血干细胞移植的临床研究

目的探讨非血缘性(无关供者)异基因造血干细胞移植治疗白血病。方法HLA配型不相合非血缘脐血移植治疗儿童白血病3例(ALL,CR2),无关供者异基因外周血造血干细胞移植治疗成人白血病1例(M6,NR),输入的脐血有核细胞(4.98～6.68)×107.kg-1,CD34+(2.24～4.93)×105.kg-1。输入的外周血的单个核细胞7.04×108.kg-1,CD34+1.08×106.kg-l。预处理主要为:阿糖胞苷,马利兰,环磷酰胺,甲基环已亚硝脲,抗胸腺细胞球蛋白。结果4例患者完全植入,+15～+25天白细胞(WBC)>1.0×109L-1,+35天～+51天血小板(PLT)>20×109L-1。例1移植后+12及+51天出现可疑为急性GVHDI度,例4于+16天出现肝静脉闭塞综合征(轻型)(VOD),+17天出现急性消化道GVHDI度,+30天出现出血性膀胱炎(HC),例2于移植后六个月复发,放弃治疗而死亡。余3例正常生活或工作。结论无关供者或对于HLA不相合的异基因造血干细胞移植是治疗白血病的有效方法,且可以是安全、可行的。     

脐血造血干细胞移植的相关免疫分析

脐血造血干细胞移植融化疗与免疫治疗于一体,作为血液恶性疾病的治疗手段已获公认,其重要原因就是脐血造血干细胞移植比其他造血干细胞移植具有诸多优点:来源丰富、取材简单;对供、受者HLA相符的要求相对较低;不易受病毒及残留肿瘤细胞的污染;CD3、CD4相对不成熟,GVHD发生率低;NK细胞、LAK细胞较多,GVL发生率低;增殖、自我增殖能力强;骨髓基质细胞多,给造血干细胞提供生长的微环境等.     

脐血造血干细胞体外扩增及临床应用研究进展

脐血作为一种新的造血干细胞 (haematopoieticstemcell,HSC)移植的供源 ,具有造血干 祖细胞含量高、来源丰富、易于采集、对供体无危害、致命性移植物抗宿主病 (graft versus hostdisease,GVHD)发生率低、移植时对HLA位点不合耐受性高、比较纯净如CMV感染率低、无肿瘤细胞污染及从配型到获得供源时间短等优点 ,近年来备受关注 ,越来越多地应用于临床治疗血液系统恶性肿瘤、实体瘤、骨髓衰竭性疾病及一些先天性疾病等。但是 ,由于单份脐血所含的有核细胞 (nucleatedcells,NC)及造血干 祖细胞的绝对含量有限 ,Regidor等[1 ] 报道单份…     

HLA抗原与造血干细胞移植进展及骨髓库建立意义初探

白血病俗称“血癌”，是一种恶性程度极高的血液病。死亡率高。造血干细胞移植(PBSCT)是目前治疗白血病及其他许多恶性血液病的重要方法，是治疗多种骨髓衰竭或恶性疾患的有效措施。造血干细胞移植面临最大的问题是HLA的配型问题。现将HLA抗原与造血干细胞移植及骨髓库建立意义阐述如下。     

混合脐血干细胞移植的研究进展

自198 8年Gluckman等[1 ] 用脐血代替骨髓对1例小儿Fanconi贫血患者进行抑制并重建其造血功能以来,脐带血移植(umbilicalcordbloodtransplant,UCBT)已应用于数十种疾病的治疗[2 - 4] 。UCBT的成功率取决于输入脐血单个核细胞(MNC)的数量,对于人组织相容性白细胞抗原(HLA)相匹配的供者脐血MNC至少需2×10 7 kg以上,低于这一剂量,植入率降低,不足1×10 7 kg则难以植入[5,6 ] 。脐血移植后造血重建较骨髓移植慢,这亦与脐血所含CD+34 细胞数量少有关[4 ,5] 。单份脐血造血干细胞数少,在体外对脐血造血干细胞扩增后,只有造血祖细胞和成…     

人脐血干细胞对裸小鼠移植的实验研究

目的　探讨脐血干细胞移植到小鼠体内的增殖、分化以及维持情况。方法　将人脐血单个核细胞注入经致死量照射后的免疫缺陷小鼠— BAL B/C nu 小鼠。观察小鼠的生存、造血重建和植入指标情况。结果　移植组小鼠生存、造血重建及植入指标表达明显优于对照组 (P<0 .0 5 ) ,人脐血中的 CD34 细胞可植入且定居于小鼠骨髓中 ,并可在其中增殖、分化。结论　人脐血干细胞移植入裸鼠显示脐血的造血干 /祖细胞在体内具有长期重建造血的能力     

1个位点不相合的非血缘关系外周血造血干细胞移植治疗慢性粒细胞性白血病

目的 观察1个位点不合的非血缘关系外周血造血干细胞移植 (URD-PBSCT) 治疗慢性粒细胞性白血病的疗效及其并发症的防治.方法 采用HLA配型1个位点不相合的非血缘关系外周血造血干细胞移植治疗慢性粒细胞性白血病 1 例.预处理方案为氟达拉滨 白舒菲 抗胸腺细胞球蛋白 (A TG);输入非血缘关系供体单个核细胞数 (MNCs)为5.60×108/kg,CD34 细胞为4.8×lO6/kg;采用霉酚酸酯(MMF)联合环孢素A(CsA)和甲氨蝶呤(MTX)方案,预防急性移植物抗宿主病(aGVHD).结果 患者 25 d造血重建,无aGVHD.结论 MM F联合CsA和短程MTX可用于预防无关供体移植aGVHD预防的发生.     

脐血造血干细胞移植治疗小儿慢性粒细胞白血病

目的 :研究脐血造血干细胞移植治疗小儿慢性粒细胞白血病的疗效及特点。方法 :给一例 12岁男性慢性粒细胞白血病慢性期的患儿移植HLA配型基本相合的同胞脐血。预处理选用BU CY方案 (马利兰 4mg·kg- 1 × 4d ,环磷酰胺 6 0mg·kg- 1 × 2d)。预防移植物抗宿主病 (GVHD)采用环孢霉素A(CsA)。移植有核细胞数为 2 0× 10 7·kg- 1 。结果 :移植后 2 2d(+2 2d)微卫星位点分析显示移植物植入成功 ,+2 5d骨髓显示造血开始重建 ,+42d中性粒细胞 >0 .5× 10 9·L- 1 ,+91dBCR ABL融合基因表达转阴 ,且受者血型由O型转为供者血型B型。随访 15 0d ,未发生急、慢性GVHD。结论 :脐血造血干细胞移植对小儿慢性粒细胞白血病有根治性治疗作用 ,它具有GVHD发生率低、程度较轻、重建造血慢等特点。     

同胞间脐血移植成功治疗儿童难治性急性髓系白血病

目的 报道同胞间脐血移植(UCBT)成功治疗1例儿童难治性急性髓系白血病的疗效及治疗体会.方法 急性髓系白血病M5a型8岁男性患儿1例,采用改良的白消安/环磷酰胺(BU/CY)方案预处理.回输人类白细胞抗原(HLA)配型完全相合胞妹的脐血干细胞,脐血有核细胞(NC)数:5.17×107/kg,其中集落形成细胞(CFC)数为10.33×104/kg,CD34 细胞数为1.25×105/kg.移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用单用环胞素A(CsA)的方案.结果 移植后 14d患者WBC>1.0×109/L,中性粒细胞绝对值(ANC)>0.5×109/L; 23d PLT>20×109/L, 35d性染色体检测显示为完全供者的染色体.移植后 85d未发生GVHD及其他并发症.结论 UCBT是儿童高危白血病有效的治疗手段,而同胞间脐血移植则更为安全可靠.     

脐血造血干/祖细胞集落体外生物特性的研究

目的探讨脐血造血干/祖细胞CD34+含量、集落生长及产率等生物特性并与骨髓进行相关比较。方法选择脐血标本25份,正常骨髓标本18份,健康成人标本20份,对脐血体积测量和有核细胞计数,用流式细胞仪对脐血、骨髓、外周血中CD34+细胞含量进行检测;采用体外细胞培养法测定脐血和骨髓的粒单系祖细胞集落(CFU-GM)和粒-巨噬细胞与红系细胞混合集落(CFU-GEM)的产率、生长、构成,并进行了相关比较。结果①脐血量平均为96.73 mL(64~150 mL)含有核细胞数为7.84×108[(4.94~11.3)×108];②脐血中CD34+细胞含量0.85%虽低于骨髓的1.68%,但明显高于外周血的0.15%,P均<0.05,差异有显著性;③CFU-GM的产率脐血为(92.9±12.2)/2×105高于骨髓的(73.4±14.1)/2×105,脐血CFU-GEM的产率(11.64±1.86)/2×105高于骨髓的(8.63±1.17)/2×105,差异均有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论①脐血中含有丰富的造血干/祖细胞,是造血干细胞移植的较好的来源。②脐血的造血干/祖细胞对外源性集落刺激因子反应较骨髓更敏感,更易在外源条件下增殖分化,体外扩增获得大量脐血造血干/祖细胞以达到移植阈值是完全可行的。     

人脐带间充质干细胞对脐血CD34~+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响

目的 探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34~+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响.方法 将3.5×10~5个脐血CD34~+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经~(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠体内,观察移植后6周内小鼠外周血象的变化情况.于移植后第6周处死小鼠,采用流式细胞术检测小鼠骨髓、脾脏及外周血人源细胞(hCD45~+)含量,并分别检测小鼠骨髓中人源淋巴系(CD3/CD19)、粒系(CD33)、单核系(CD14)、血小板(CD61)、红系(CD235a)等各系血细胞比例,比较间充质干细胞共移植对CD34~+细胞植入率的影响.结果 移植后3周,两组小鼠外周血象开始有不同程度恢复;移植后6周,共移植组外周血白细胞和血小板计数均已达高峰,明显高于单移植组(P<0.05),两组小鼠的红细胞计数差异无统计学意义(P>0.05).移植后6周,共移植组骨髓及外周血中人源细胞hCD45~+CD34~+比例分别为(42.66±2.57)%和(4.74±1.02)%,明显高于单移植组的(25.27±1.67)%和(1.19±0.54)%(P=0.006).移植后6周,共移植组小鼠骨髓内的CD19~+、CD33~+、CD14~+、CD61~+和CD235a~+细胞比例均明显高于单移植组(P<0.05),CD3~+T淋巴细胞比例明显低于单移植组(P=0.003);CD19~+B淋巴细胞得到优势扩增,明显高于其他各系血细胞比例(P<0.05).结论 脐带间充质干细胞与脐血CD34~+细胞共移植可促进造血干细胞的植入,缩短CD34~+细胞移植后造血恢复时间.     

外周造血干细胞移植的进展

造血干细胞移植在器官移植中难度最大 ,这是由于细胞移植过程中同时植入了淋巴细胞 ,可导致严重的移植物抗宿主病 (ＧＶＨＤ)。造血干细胞移植的工作艰难 ,现将一些新的进展介绍如下。1　脐血移植近 10年来脐血移植有了很大的发展 ,除了对脐血生物学特征进行研究和脐血库大量建立以外 ,为克服单份脐血干细胞数量较少的限制 ,有学者经临床研究提出了部分脐血体外扩增和两个有相同人类白血胞抗原 (ＨＬＡ)配型的脐血同时移植给一个体重较大的患者等方案。2　非清髓的异体造血干细胞移植非清髓的异体造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ｈｅｍａｐｏｉｅ…     

不同类型干细胞移植治疗缺血性脑卒中的研究现状

干细胞具有自我复制和多向分化的潜能,可分化为神经元或其支持结构,为其移植治疗脑卒中提供了广阔的前景.目前,用于治疗脑卒中的成体干细胞主要包括骨髓间充质干细胞(BMSCs)、脐血间充质干细胞(UCBM SCs)、造血干细胞(HSCs)、神经干细胞(NSCs)及人畸胎瘤衍生的细胞(NT2细胞).     

造血干细胞移植的研究进展

造血干细胞移植是近30年来血液病治疗的一个重要进展。干细胞移植包括骨髓移植、外周血干细胞移值、脐血移植、胚胎肝移植和CD_(34)~+细胞分选纯化移植等。当前,造血干细胞移植在治疗恶性血液病及部分恶性肿瘤方面进展很快,其疗效明显优于化疗,提高了白血病及其它恶性肿瘤的长期生存率和治愈率,亦为基因治疗创造了条件,是目前国内外研究的重点。一、骨髓移植(BMT) 包括异基因(allo-)BMT及自体BMT(ABMT)。     

脐血造血干细胞冻存和纯化的研究

为观察脐血造血干细胞—80℃保存以及脐血CD34~ 细胞的纯化效果,采用-80℃深低温冰箱冻存脐血干细胞,结果表明保存1个月脐血单个核细胞(MNC)数量、锥虫蓝拒染率、粒一单祖细胞集落(CFU—GM)数回收率分别为85.17％±5.38％、91.67％±3.22％、60.50％±4.42％。保存1、3、6个月动态观察3项指标除锥虫蓝拒染率1个月与6个月外均无显著性差异{均P>0.05)。用Isolex50免疫磁珠分离系统,可从脐血中获得高纯度CD34~ 细胞。上述研究为脐血造血干细胞移植的临床应用提供了实验依据。     

人脐血CD34~+细胞在NOD/SCID小鼠上有效重建造血系统

目的探讨人脐血CD34+造血干细胞在非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(no obese diabetic/severecombined Immunodeficiency,NOD/SCID)小鼠模型上造血重建的作用。方法利用密度梯度离心法,从新鲜脐血中分离出单个核细胞,利用免疫磁珠分选法筛选CD34+造血干细胞,经尾静脉输注入经亚致死剂量照射后的NOD/SCID小鼠体内,移植后3、7、10、14 d分别用断尾法取小鼠外周血,血常规计数外周血动态变化情况;移植后4、6、8、10周,取其外周血,运用PCR法检测外周血中人特异性Alu基因的表达情况。结果免疫磁珠分选得到的CD34+细胞浓度达91.2%,照射后小鼠骨髓腔内有核细胞和巨细胞数量明显减少或消失,达到清髓目的。移植后第3天移植组小鼠外周血各系细胞均明显低于正常组(P<0.01),移植后第7天,移植组小鼠外周血象开始恢复,明显高于阴性对照组[白细胞:(3.90±0.53)×109/L vs(1.30±0.18)×109/L,血红蛋:(139.8±5.0)g/L vs(79.8±11.0)g/L,白血小板:(253.0±17.5)×109/L vs(52.0±6.9)×109/L,(P<0.01)],移植后第10天,移植组小鼠外周血象恢复到辐照前水平,与正常组无差别。移植4周后,PCR方法在小鼠外周血中可检测到人特异Alu基因序列,未移植组小鼠照射后2周内全部死亡。结论经照射后的NOD/SCID小鼠通过人脐血CD34+细胞植入可建立起人鼠嵌合模型。NOD/SCID小鼠经照射后,不破坏骨髓造血微环境及造血基质,可用于异基因细胞移植模型。人脐血CD34+细胞移植入NOD/SCID小鼠,其造血系统能有效重建。     

脐血CD34+细胞高效分选技术的建立及应用

CD34+细胞包括造血干细胞和早期的祖细胞,在造血干细胞移植、体外扩增培养及基因治疗等方面都有广泛的应用,但其仅占正常成人外周血的0.05%～0.2%、骨髓的0.5%～3%和脐血的0.1%～0.5%,因此CD34+细胞分选技术越来越重要.通过长时期的摸索,本实验室建立了一套高效的脐血CD34+细胞分选富集技术,并成功地分选了180份脐血样本.     

外周血干细胞的单采与实验分析

研究外周血干细胞的采集及其安全性,分析终产品纯度及CD34 细胞绝对数计数.通过G-CSF动员后进行外周血造血干细胞的采集,不仅得到高数量的用于细胞免疫治疗的单个核细胞,也获得用于造血干细胞移植的高纯度、高剂量的CD34 细胞.