河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究

摘要：目的：研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。 方法：用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。 结果：HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5; 2a 0.946 9,2b 0.053 1; 3a 0.590 6,3b 0.409 4; 4a 0.996 9,4b 0.003 1; 5a 0.990 6,5b 0.009 4; 6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。 HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ²检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。 结论:河南汉族人HPA-15 和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。     

HPA和HLA已知型的血小板供者库建立及应用

目的 开展血小板同型或配合性输注是预防和治疗免疫性血小板输注无效(PTR)的良策.为此建立一定规模的HPA和HLA已知型血小板资料库,为临床提供匹配的单采血小板,是血小板输注安全有效的保障.方法 对所有供者库单采血小板进行ABO、HLA-A、B及HPA1-6,15基因分型.根据ABO、HPA同型和HLA同型或HLA交叉反应组相同(CREG)配型策略,编制数据库软件,建立上海市单采血小板供者资料库.结果 上海市血小板供者库至今已接受80人/次患者查询,共有78名患者找到合适的供者.HPA和HLA的CREG相同配合率为97.5％.其中50名患者接受了单采血小板的同型(或配合型)输注,47名输注有效(24 h血小板回收率＞20％).其中更有15名患者同型输注疗效明显,24 h回收率＞80％.结论 建立血小板供者HPA和HLA Ⅰ类抗原基因分型资料库,为患者提供HLA和HPA、ABO匹配的单采血小板,可以降低PTR的发生率,是解决免疫性PTR的根本手段.     

新疆汉族人群血小板抗原1—5、15系统基因多态性分析

目的调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)1—5及15系统基因在新疆汉族人群中的遗传多态性。方法采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法对101例无血缘关系的新疆汉族血样进行HPA基因分型。结果新疆汉族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0.9851、0.9208、0.5446、1、0.9505、0.4653,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0.0149、0.0792、0.4554、0、0.0495、0.5347,新疆汉族HPA基因频率与维吾尔族人群相比,HPA-1a、1b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,HPA-3、15系统具有高度多态性。     

南昌地区机采血小板捐献人群中人类血小板抗原基因多态性初步分析

人类血小板抗原(HPA)在临床与输血实践中具有非常重要的意义.HPA不合可致同种免疫反应,导致输血后紫癜、血小板输注无效、新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜等[1].我们应用序列特异性引物聚合酶链式反应(PCRSSP)技术,对本中心机采捐献血小板者的血小板抗原(HPA)基因多态性进行了初步分析,现报告如下.     

长沙地区汉族人血小板抗原（HPA1-17）基因多态性调查

目的研究长沙地区汉族人群人类血小板特异性抗原HPA1-17基因多态性。方法采用PCR-SSP方法对长沙市血液中心618名汉族无偿献血者进行HPA1-17系统基因分型。结果长沙地区618名汉族无偿献血者HPA1a基因频率为99.3%,HPA2a基因频率为96.8%,HPA3a基因频率为58.7%,HPA4a基因频率为99.4%,HPA5a基因频率为98.9%,HPA6a基因频率为98.9%,HPA15a基因频率为53.6%。结论长沙地区汉族人群HPA1-17的基因检测填补了地方空白,为建立血小板库奠定了基础,也为临床提供同型血小板输注提供可能。     

长沙地区血小板供者基因数据库理论建模分析*

摘要:目的分析长 沙地区血小板供者基因数据库建设情况,评估为临床提供HLA/HPA匹配的单采血小板的可能性。方法分析长沙地区血小板供者基因数据库1 029例无亲缘关系单采血小板供者HPA、HLA-A/B等位基因及抗原分布情况，评估长沙地区血小板供者基因数据库建设规模。结果在不考虑ABO血型的情况下,当库容为207人时,约有95%的患者能在该库中找到至少1名HPA基因型全匹配的供者;当库容为2127人时,约有95%的患者能在该库中找到至少1名HLA-A/-B表型匹配的供者;当库容为1 029人时,约有79.25%的患者能在该库中找到至少1名HLA-AB表型匹配的供者。单采血小板捐献者A.B抗原CREG表位不配合的概率最高分别为1C-2C和7C-5C, Broad CREG不配合概率最高的为4C-6C。结论长沙地区已建立已知HLA/HPA基因型的血小板供者基因数据库库容1029人，在扩大有效库容的同时将进一步验证理论建模的适用性和匹配概率的符合性。     

潍坊地区汉族献血者血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性研究

目的研究汉族人群血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性区域分布特点,建立HPA基因型资料库。方法采用PCR-SSP技术对102名潍坊地区汉族无血缘关系的志愿捐献血小板者作HPA-1-16系统基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果从HPA-1、5、6系统分别检出1例a/b基因型,HPA-4系统检出2例a/b基因型,检出HPA-2a/2b 11例(基因频率占0.1078);HPA-3、15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.3039、0.5392、0.1569,15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.3529、0.4608、0.1863;HPA- 7-14、16系统只检出a基因,呈单特异性。结论潍坊地区汉族人HPA-2、3、15系统具有多态性,是HPA配合性输注关注重点。在随机输血中供受者HPA-2系统不配合的机会为9.68%、HPA-3系统不配合的机会为36.95%、HPA-15系统不配合的机会为36.8%。     

陕西地区血小板供者基因数据库拓展性应用的研究

目的 通过分析本地区无偿献血与造血干细胞捐献群体之间的共性和特性,挖掘包括血小板基因供者库在内的无偿献血者与造血干细胞捐献者资料库间的融合潜力,提高招募成功率和已知结果库存率。方法 应用数据库建模和比对方法对本市近10年无偿献血者与中华骨髓库陕西分库造血干细胞捐献者之间的匹配度和融合度进行筛选分层,采用Arlequin 3.5.2.2软件计算HLA、HPA基因频率及单体型频率,并根据表型频率计算不同血小板供者后备库中找到HLA、HPA全匹配供者概率。结果 在本地区已入库造血干细胞志愿捐献者中,依据其献血行为挖掘出的活跃献血者分别划分为血小板供者库后备一、二、三、四梯队,分别为696名、2 752名、9 092名和12 028名捐献者。第一梯队具有10～50次血小板捐献经历和10～20次全血捐献经历的占比最高,分别为13.65%和26.01%;第二梯队具有10～20次全血捐献经历和10～50次血小板捐献经历者占比分别为15.04%和1.38%,与其他梯队献血特征有差异(P<0.05)。在现有血小板库+一二梯队的核心库容中(n=4 955),患者找到至少1名HLA-A,B表型相同的供...     

南京地区汉族人群中人类血小板抗原基因多态性及分析

人类血小板抗原(Ｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｎｔｉｇｅｎ,ＨＰＡ)分型对临床上一些因血小板同种免疫反应导致的同种免疫性疾病,如新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(ＮＡＩＴＰ),输血后紫癜(ＰＴＰ)及血小板输注无效(ＰＴＲ)等的诊断和治疗有重要意义[13]。长时期来,人们一直沿用传统的血清学方法进行ＨＰＡ分型,但由于难以获得高质量、特异性抗血清等多种因素的制约,ＨＰＡ分型工作始终无法深入下去。随着对ＨＰＡ基因研究的深入,近年来国外陆续报道将基因检测技术用于血小板分型研究中。本文应用聚合酶链序列特异性引物(ＰＣＲＳＳＰ)…     

中国汉族人群HPA分型单采血小板供者库的建立模式与库容

本研究探讨建立中国汉族人群HPA分型单采血小板供者库的模式和合适的库容水平。研究方法为合并分析公开发表的中国16个省份的汉族血小板献血者人群人类血小板抗原（human platelet antigen,HPA）分布多态性群体调查数据。对HPA多态性群体调查数据进行Hardy—Weinberg平衡检验。结果表明,HPA．1、-4、石、-10未检出bb纯合子,HPA-7-9,11-14、-16未检出b基因。HPA1-16系统相互独立存在于血小板表面。中国汉族人群中发现了648种HPA组合,其中42种频率高于0．001的组合的累积频率达0．9763,频率最高（0．2012）的组合为：HPA-（7-8-9-11-12-13-14—16）aa-（1-4-5-6-10）aa-2aa-3ab-15ab。HPA对偶抗原不配合概率高于0．1的系统有HPA．15、-3和-2,对偶抗原不配合概率介于0．01—0．1的系统有HPA-1、-5和-6。中国汉族人群供受者间随机输血HPA1—16系统对偶抗原全匹配概率为0．3195。根据库容（N）随频率（F）变化的曲线,推导得到在P=95％时的回归方程LogN=-0．4394x Ln（F）＋0．4324。使用该公式椎测综合频率（HPA和AB0的频率乘积）为0．005的库容至少需要为576．07人。结论：中国汉族人群HPA分型单采血小板供者库应采用单库容600名供者的区域多中心联合建库模式,它既能解决当地主要的HPA—15、3和2系统不配合造成的血小板输注无效（platelet transfusion refractoriness,PTR）,还可以在遗传背景相近的区域有效地扩大建库规模以解决HPA低频抗原的不配合问题。在评估HpA分型血小板供者库容时不仅要考虑HPA的频率还同时要考虑ABO血型分布频率对库容的影响。     

中国南京地区汉族人群血小板HPA-1-18遗传多态性研究

本研究旨在调查南京地区无关健康人群人类血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因频率,为输血患者寻找相容性血小板提供可靠依据。使用PCR-SSP方法对300例南京地区非血缘健康志愿者血液样品进行人血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因分型。结果表明,南京地区300例非血缘人群HPA等位基因频率分别为:HPA-2a 0.9183和-2b 0.0817;HPA-3a 0.6100和-3b 0.3900;HPA-5a 0.9733和-5b 0.0267;HPA-6a 0.9883和-6b 0.0117;HPA-15a 0.5250和-15b 0.4750。HPA-1a,-4a,-7a-14a和HPA-16a-18a均是纯合子。结论:HPA抗原等位基因频率存在种族和地域差异。南京地区HPA抗原等位基因频率显示具有自身特点。HPA-3和HPA-15是最常见的杂合子,因此必须关注HPA在血小板临床输血中的作用。     

Establishment of an HPA-1- to -16-typed platelet donor registry in China

In order to determine gene frequencies of human platelet antigen (HPA) and establish a panel of accredited HPA-1a, -2a, -4a, -5a and -6a-negative donors as well as an HPA-typed platelet donor registry, a total of 1000 Chinese donors of Han nationality (500 from north China and 500 from south China) were typed for HPA-1 through -16 using a DNA-based polymerase chain reaction with sequence-specific primers genotyping method. The gene frequencies of HPA-1b, -2b, -3b, -4b, -5b, -6bw, -10bw and -15b were 0.0060, 0.0485, 0.4055, 0.0045, 0.0140, 0.0135, 0.0005 and 0.4680, respectively. The HPA-7bw, -8bw, -9bw, -11bw, -12bw, -13bw, -14bw and -16bw alleles were not found. The HPA-2b and -5b homozygous donors were detected at low frequencies. The HPA mismatch probabilities potentially leading to alloimmunization in random platelet transfusion vary with a region from 0.1% to 37% depending on the distribution patterns of common and less common alleles in each system. This study provides a useful HPA-typed plateletpheresis donor registry in China and could improve platelet antibody detection and HPA-matched platelet transfusion in alloimmune thrombocytopenic patients.     

深圳地区汉族人类血小板抗原1-6系统基因多态性分析

目的 研究人类血小板抗原基因多态性,为人类学研究及临床输血实践提供依据。方法 采用PCR-SSP方法对深圳地区222名汉族随机献血者HPA1-6系统进行基因分型研究,对其基因及基因型频率进行统计,并与HPA在不同人群中的分布进行对比分析。结果 在6个HPA系统中,HPA-3基因型的杂合程度最高,HPA-3a/3a、HPA-3a/3b、HPA-3b/3b的频率分别为0.265 8,0.518 0,0.216 2;其余5个HPA系统均以a/a纯合子为主,a基因的频率范围为0.997 7～0.955 0,且均未发现b/b纯合子。1b、4b的基因频率很低,分别为0.009 O和0.002 3。结论 深圳汉族人群HPA1-6系统的基因频率与中国台湾人及中国香港人均很相似(P>0.05)。HPA-1、HPA-5与美国黑人、白人及荷兰人差异显著(P<0.05);HPA-2、HPA-3与日本人、韩国人、美国黑人、白人差异显著(P<0.05);HPA-4与日本人差异显著(P<0.05)。在未来的临床实践中要警惕HPA-2,3,5,6系统同种抗体导致的同种免疫血小板减少综合征的可能。     

血小板特异性抗原基因与职业性慢性苯中毒的相关性分析

目的探讨血小板特异性抗原HPA-1-6,15基因多态性与职业性慢性苯中毒的相关性。方法采用FLOW-SSO法和PCR-SSP法对32名职业性慢性苯中毒患者(病例组)做HPA-1-6,15基因分型,并将之与中国汉族人群(对照组,n=245 8)的数据比较。结果 HPA-3b等位基因频率、HPA-3基因型分布,病例组与对照组分别为0.593 7 vs 0.441 4(P0.05)及0.750 0 vs 0.506 9(P0.01);HPA-3b等位基因相关ab/bb基因型,实验组与对照组分别为96.88%(31/32)vs 69.49%(1 708/2 458)(P0.01)。HPA-1,2,4,5,6,15等位基因频率和基因型分布,2组比较均无明显差异(P0.05)。结论职业性慢性苯中毒可能与HPA-3基因多态性有关。     

盐城地区汉族人血小板抗原HPA-1～17，Caba基因多态性分析

目的：研究盐城地区汉族人群血小板特异性抗原人类血小板同种抗原1～17（HPA1～17）,Caba的基因分布,建立本地区固定机采血小板供者 HPA数据库。方法应用序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR‐SSP）技术,对盐城市中心血站200名汉族固定血小板献血者的血液进行HPA1～17,Caba基因分型。用χ2检验统计分析各 HPA血型系统基因分布的期望值与观察值,验证其是否符合 Hardy‐Weinberg平衡定律,并与国内外人群相比较。结果盐城地区200名汉族血小板献血者的HPA‐1a、2a、3a、4a、5a、6a、15a的基因频率分别为0．9950、0．9375、0．5725、0．9925、0．9850、0．9875、0．5425,呈多态性分布,HPA7～14、16～17及Caba呈单线性分布;不配合率大于10％的HPA系统有HPA‐2～3、15。结论本研究已确认盐城地区200名固定血小板供者 HPA基因分布特征,与国内其他地区、其他国家相比有本地区人群特点;在此基础上建立本地区已知 H PA基因型固定机采血小板供者数据库,为临床血小板HPA血型配合性输注提供可能。     

HPA-1a抗体SPR技术定量检测方法的建立

目的:建立针对人类血小板抗原(HPA)-1a抗体的表面等离子体共振(SPR)技术定量检测方法.方法:以氨基偶联法在芯片表面偶联重组蛋白,采用SPR方法检测不同浓度的标准抗血浆样本,优化实验条件,在检测范围内绘制标准曲线,并分析其敏感性、特异性、准确性和精密度.结果:利用SPR技术建立针对HPA-1a抗体的定量检测方法,...     

The allele frequencies of HPA 1‐16 determined by PCR‐SSP in Chinese Cantonese donors

Background: Typing of human platelet antigens (HPA) has proven to be useful in some clinical situations related to platelet alloimmunization. Objective: The objective of this study was to investigate HPA 1–16 and to determine genotype and allele frequencies by polymerase chain reaction‐sequence specific primer (PCR‐SSP) in apheresis platelet donors in Guangzhou Blood Center. Methods: A total of 200 random samples from donors were involved in the study. Genotype and allele frequencies of HPA 1 to 16 were detected by PCR‐SSP method. Results: The frequencies obtained from these donors were 99·50 and 0·50% for HPA‐1a and ‐1b; 96·25 and 3·75% for HPA‐2a and ‐2b; 54·25 and 45·75% for HPA‐3a and ‐3b; 99·50 and 0·50% for HPA‐4a and ‐4b; 99·00 and 1·00% for HPA‐5a and ‐5b; 97·00 and 3·00% for HPA‐6a and ‐6b and 42·25 and 57·75% for HPA‐15a and ‐15b. There is only a/a homozygosis detected in HPA‐7, ‐8, ‐9, ‐10, ‐11, ‐12, ‐13, ‐14 and ‐16. In this study, none of HPA‐1b/ 1b, ‐2b/2b, ‐5b/5b homozygosis were detected which were found in other racial groups. One homozygosis of HPA‐6b/6b in 200 individuals was detected which was not found in a study involving 1000 Chinese ( Feng et al., 2006 ). Conclusion: The HPA‐3 and ‐15 appear to the highest priority and HPA‐2, ‐6, ‐5 ‐1 and ‐4 to be the second priority in Chinese Cantonese when it comes to the diagnosis of neonatal alloimmune thrombocytopenia and to provide the HPA‐matched platelet for patients with platelet transfusion refractoriness. The PCR‐SSP method makes it possible to detect genotype of HPA‐1 to ‐16 in less than 4 h and to establish a donor database for HPA genotype in a blood bank.