应用间接ELISA方法检测兔轮状病毒抗体的初步研究

目的 建立间接ELISA方法对兔轮状病毒抗体进行检测。方法 确定抗原和阴、阳性参考血清的最佳工作浓度；进行特异性、敏感性以及中间试验。结果 抗原的最佳工作浓度为1：12000倍；参考血清的最佳工作浓度为1：200倍；本次实验建立的ELISA方法具有很好的敏感性和特异性；中间实验表明，LaRV在兔群中具有很高的感染率。结论 本次试验成功地建立了用于兔轮状病毒抗体检测的ELISA方法。     

酶联免疫吸附试验检测人血清弓形体IgG、IgM抗体的研究

对ELISA检测人血清弓形体IgG、IgM抗体进行了研究。450份孕妇血清中,ELISA阳性率显著高于IHA;抗体滴度分析,ELISA一般高于IHA2～10倍。25份ELISA IgG抗体阳性血清,TFA检出19份;3份IgM抗体阳性和2份IgG、IgM抗体均阳性血清,IFA分别检出2份。2份阴性和4份含不同抗体滴度的阳性血清于第一次测定后,第7天和第21天测定的阴、阳性结果一致,OD值变异系数为2.43～16.52%。39份阳性血清抗体滴度与OD值呈直线比例关系(r=0.991,p<0.0005)。结果表明,ELISA用于弓形体感染的血清学诊断具有较好的实用性。     

ELISA捕捉法与间接夹心法检测肾综合征出血热患者血清IgM抗体的比较

作者用ELISA捕捉法和间接夹心法平行检测106份第7病日内的肾综合征出血热患者血清IgM抗体,其阳性检出率分别为92.5％和87.7％,其中40份第4病日内的血清阳性率分别为90.0％和85.5％,差异均无显著性意义,但前法检出的抗体滴度(平均1:102 400)明显高于后者(1:3200)     

应用SPA的ELISA检测血清胰岛素抗体

应用SPA代替抗人IgG第二抗体的ELISA测定血清胰岛素抗体(IA)。经正交试验分析,受检血清稀释度是影响IA测定的主要因素。选用胰岛素包被浓度为10μg/ml,受检血清1:2.5稀释时,IA测定可获较满意的结果。竞争性结合抑制试验表明IA测定具有特异性。血清稀释试验提示OD值大小反映了IA滴度高低。28例正常人血清IA测定结果OD正常值范围(X±2SD)为0.05～0.25。使用胰岛素的DM病例均为阳性,而未使用胰岛素病例未发现IA阳性。本文认为应用该法测定IA是一种稳定、特异、简便的方法。     

血清幽门螺旋菌抗体定量ELISA检测的实验研究

幽门螺旋菌(Hp)的检测目前主要采用培养法、组织切片染色法、快速尿素酶试验法等.本文建立酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测Hp抗体,以Hp抗体滴度来反映血清Hp抗体水平,该方法敏感性93.9%、特异性100%,可为临床诊断Hp感染、判断Hp感染严重程度以及指导临床抗Hp治疗提供实验依据.该方法也可用于Hp感染的流行病学调查.     

用微量ELISA法检测水痘—带状疱疹病毒IgG抗体

用微量ELISA法检测807例份不同年龄、性别的健康人血清中水痘－带状疱疹病毒疱疹病毒IgG抗体，0－1岁年龄组最低，为48．15％，25－35岁年龄达到高峰，以后逐渐下.降无性别差异。随机取95份血清与CF进行比较，两法的总符合率为90．53％，阳性符合率为94．20％，rs^1=0.7760,P<0.001,ELISA法的GMT是CF法的64倍。     

快速ELISA法检测单克隆抗体

本文采用HRP-SPA快速ELISA法检测筛选葡萄球菌A蛋白单克隆抗体,使整个检测流程由常规法的5～6小时以上缩短为1小时。常规法与快速法OD值比较,用配对t检验结果:1O~(-1)组t=1.625 P>0.10;10~(-2)组t=1.345 P>0.20,均无显著性差异。证明快速法可替代常规法,具有快速、简便、特异、敏感等特点,是检测单克隆抗体较好的方法。     

用日本血吸虫成虫抗原ELISA检测血吸虫病抗体的现场应用

用日本血吸虫成虫抗原(AAg)和虫卵抗原(EAg)ELISA检测血吸虫病疫区粪检阳性病人134例,其阳性率分别为99.25％和98.51％。134例中45例儿童和89例成人用AAg检测,其阳性率分别为100％和98.88％,而用EAg检测的阳性率分别为97.78％和98.88％。AAg和EAg检测26例正常人均为阴性。结果表明:AAg与EAg的检出率以及儿童与成人的检出率均相似。     

用微量ELISA法检测水痘—带状疱疹病毒IgG抗体

用微量ELISA法检测807份不同年龄、性别的健康人血清中水痘-海洋污染海洋污染海洋污染带状疤疹病毒IgG抗体,0～1岁年龄组最低,为48.15%,25～35岁年龄组达到高峰,以后逐渐下降。无性别差异。随机取95份血清与CF进行比较,两法的总符合率为90.53%,阳性符合率为94.20%,r_s~1=0.7760,P(?)0.001,ELISA法的GMT是CF法的64倍。     

酶联免疫吸附法检测幽门螺旋菌抗体IgG的研究及其临床意义

本文以幽门螺旋菌(HP)反复冻融后的可溶性成分作包被抗原,用酶联免疫吸附试验(ELISA)对经胃镜检查的76例慢性胃炎患者、62例1～7岁体检儿童、41例18～25岁正常成人进行了血清HP IgG的测定.结果显示,患者组抗体检出率为75.0%、与HP培养法相比,符合率为88.16%,诊断敏感性为91.38%、特异性为77.78%、阳性预测值为92.98%、阴性预测值为73.68%.若以1～7岁儿童作为未感染HP者,则本法诊断特异性为80.61%.不同人群抗体阳性率以患者组最高、正常成人组次之、儿童组最低,各组间的抗体水平有显著性差异.研究表明,本法可用于临床HP感染的初筛检查及正常人群的流行病学调查.     

ELISA检测血清戊型肝炎病毒IgM型抗体

用ＥＬＩＳＡ检测血清抗ＨＥＶ－ＩｇＭ。３０份抗ＨＥＶ－ＩｇＧ阳性急性肝炎患者血清中，抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性１３份，阳性率４３．３％。抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性结果可被加入的ＤＴＴ所阻断，但不受ＨＡＡｇ，ＨＢｃＡｓ或ＨＢｅＡｇ的影响。因此抗ＨＥＶ－ＩｇＭ的特异性较高，对戊型病毒性肝炎的诊断有一定价值。     

抗人TPO单克隆抗体的制备

目的：制备抗人血小板生成素（hTPO）单克隆抗体，用于建立ELISA方法和检测TPO的表达。方法：用基因重组的hTPO免疫Balb／c小鼠，常规法做细胞融合，用ELISA法筛选出阳性杂交瘤细胞株。结果：获得一杂交瘤细胞株（46-6），其免疫球蛋白亚类为IgG1经ELISA和免疫印迹技术证明，此单抗能特异识别TPO。结论：46－6单克隆抗体（McAb）特异性强。用其建立的夹心ELISA检测TPO的方法线性好，灵敏度可达50ng／L。     

三种轮状病毒ELISA试剂的比较研究

作者用自制轮状病毒单克隆抗体ＥＬＩＳＡ试剂检测细胞培养和８８份粪样中轮状病毒，与丹麦Ｄａｋｏ公司和上海市卫生防疫站制备的轮状病毒ＥＬＩＳＡ试剂进行了比较。结果自制试剂的细胞培养中轮状病毒最低抗原检出量是０．０３ＴＣＩＤ５０；对低轮状病毒核酸含量粪样的阳性检出率为９５．７％，均高于另二种试剂；检测８８份粪样中轮状病毒，自制试剂的灵敏度、特异度及Ｙｏｕｄｅｎ指数分别为９８．３％、９０％及０．８８，与另二种试剂无显著性差别（Ｐ＞０．０５）。此外，自制试剂的阳性标本与阴性标本ＯＤ值均数之比约为另二种试剂的２．２倍。实验结果提示，本研究自制轮状病毒ＥＬＩＳＡ试剂检测轮状病毒的敏感性和特异性较高，可以替代同类轮状病毒多克隆抗体ＥＬＩＳＡ试剂，且易于目测判断结果，适于基层临床使用。     

免疫荧光技术检测肺吸虫病抗体的初步研究

<正> 间接荧光抗体方法(Indirect fluorescent antibody test,IFA)是组织化学结合免疫学应用显微示踪的一种新技术。目前国内外已广泛用于微生物学和免疫学的诊断和研究并已取得显著的成就。在寄生虫学领域里,国外应用也很广泛,许多人体寄生虫病如血吸虫病、丝虫病和弓浆虫病等均已用荧光抗体方法进行诊断。国内已成功地用于疟疾和丝虫病的流行病学调查和诊断。Cho KM等报告用卫氏并殖吸虫的碎片固定于玻片上作为抗原。用荧光抗体方法     

间接法ELISA检测流行性出血热抗体

用间接法ELISA检测流行性出血热IgG抗体。54份EHF病人血清全部阳性,32份正常人、19份发热病人和18份误诊为EHF病人的血清全部阴性,与IFA检测结果相同。检测EHF病人系列血清,发病3d就可检出抗EHF IgG,抗体滴度随病程升高,表明间接法ELISA可用于EHF临床诊断。将间接法ELISA与IFA、RPHI和HI平行检测30份EHF病人血清,抗体几何平均滴度(GMT)分别为1:43 211、1:413、1:253和1:143,有高度相关性,且ELISA比RPHI和HI更能检测出早期抗体。检测疫区人群血清4134份,间接法ELISA检出490份阳性,而IFA仅检出470份。结果表明间接法ELISA有较好的敏感度和特异度,尤其适用于血清流行病学研究。     

间接ELISA检测HIV－1／－2抗体

报告了一种检测人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和Ⅱ型（ＨＩＶ－１／－２）抗体的间接酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法。通过检测４ｌ份ＨＩＶ抗体参比血清（其中１３份为ＨＩＶ抗体阳性，２８份为ＨＩＶ抗体阴性），未见假阴性结果（０／１３）。在２８份阴性参比血清中，有２份呈假阳性。变异系数（ＣＶ）小于１５％。该结果符合参比血清说明书规定的标准。     

ELISA法检测结核性脑膜炎脑脊液中抗-BCG或抗-PPD水平

本研究用酶联免疫吸附试验(ELISA)对结核性、病毒性、隐球菌性脑膜炎及对照组脑脊液中牛型卡介苗结核杆菌(BCG)及PPD的IgG抗体进行了测定。结果显示抗-BCG与抗PPD水平呈正相关。研究发现,抗-BCG和抗-PPD水平在结核性脑膜炎组、非结核性脑膜炎组及对照组之间差异显著。如果以OD值0.16作为诊断结核性脑膜炎的标准,灵敏度达83.6%,特异性达97.6%,阳性预告值93.7%。所以本法对结核性脑膜炎早期诊断较为有用。     

浙江省不同地区人轮状病毒基因组的研究

本文以聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对1986年浙江省不同地理位置流行的轮状病毒基因组进行比较.结果显示,除缙云县外其余地区均以L型为主,且不同地区的L型无明显差异,表明本省流行的轮状病毒基因型相对稳定.实验还发现2份混合感染标本有可能存在基因重组.