正常核型急性髓系白血病NPM1基因突变的临床分析

目的：分析具有正常核型的急性髓系白血病（CN-AML）患者 NPM1基因突变情况及其临床意义。方法回顾性分析2008年1月至2015年6月年同济医院血液内科收治的190例初发 CN-AML患者的临床资料。对比研究 NPM1突变型与野生型 CN-AML 患者之间临床特征和治疗效果的差异。结果190例 CN-AML 患者中44例（23.16%）出现 NPM1基因突变。与野生组比较,突变组患者外周血白细胞计数高（60.0×109／L 比75.7×109／L,P＜0.05）,骨髓中原始细胞比例高（63.87%比75.82%,P＜0.05）,初次化疗缓解（完全缓解+部分缓解）率高[56.91%（45／79）比70.09%（22／31）,P＜0.05]。结论NPM1基因突变与 CN-AML 高肿瘤负荷以及高诱导化疗缓解率具有相关性。     

急性髓系白血病患者骨髓涂片FMS样酪氨酸激酶3、NPM1和c-kit基因检测及临床研究

目的：探讨提取贮存骨髓涂片DNA的方法,通过对急性髓系白血病（AML）患者FMS样酪氨酸激酶3（FLT3）、NPM1及c-kit基因突变进行检测,分析三种基因突变与AML临床特征之间的关系。方法收集55例AML患者骨髓涂片,采用聚合酶链反应（PCR）、DNA测序和分子克隆方法对FLT3-内部串联重复（ITD）、NPM1和c-kit基因突变进行检测及分析,记录患者疾病缓解、进展及生存时间。结果实验证实对于低温冻存、未经瑞特染色、未用化学方法固定的骨髓涂片标本及室温贮存、经瑞特染色脱色后的标本均能用苯酚∶氯仿∶异戊醇法成功提取DNA。从骨髓涂片中提取的DNA可用于PCR、直接测序和分子克隆测序分析。在55例AML患者中,FLT3-ITD阳性10例（18.2%）,其中9例为杂合型突变,1例为纯合型突变。FLT3-ITD阳性组较阴性组完全缓解（CR）率低,无事件生存（EFS）和总生存（OS）时间短（P＜0.05）。NPM1基因杂合型突变9例（16.4%）,全部为A型突变。10个月以内NPM1突变组患者EFS率比野生组高（P＜0.05）,19个月以内NPM1突变组OS率比野生组高（P＜0.05）。9例NPM1突变患者中FLT3-ITD阳性3例,CR率由高到低依次为NPM1+ FLT3-ITD-、NPM1- FLT3-ITD-、NPM1- FLT3-ITD+、NPM1+ FLT3-ITD+（P＜0.05）,且NPM1- FLT3-ITD+是影响OS的危险因素（RR＝1.250,P＝0.005）。55例患者中,c-kit基因突变2例（3.6%）,分别为D816H突变型和D816V突变型;c-kit基因突变患者与FLT3-ITD阳性及NPM1突变患者无重叠。结论 FLT3-ITD突变为AML患者预后不良的分子标志,NPM1基因突变可能提示预后较好,NPM1- FLT3-ITD+是影响OS的危险因素。AML中c-kit基因突变率低,未见其与FLT3、NPM1基因突变重叠。     

WT1基因在急性髓系白血病预后判断中的研究进展

急性髓系白血病（AML）是骨髓恶性克隆性疾病。该病在临床表现及分子学病因上存在异质性,预后分层是AML治疗中最热门也是最棘手的问题之一。近年来对AML预后判断的研究取得了显著进展,其中WT1基因是研究热点。文章从WT1基因mRNA表达量改变、基因突变及单核苷酸多态性三个方面综述其在AML预后判断中的研究进展。     

成年人正常核型急性髓系白血病基因突变检测研究进展

 【摘要】　急性髓系白血病（AML）是一种对于治疗反应和预期生存高度异质性的疾病。一些不能由传统细胞遗传学方法检测出来的基因突变已经被发现,包括FMS样酪氨酸激酶3（FLT3）基因,核磷蛋白1基因（NPM1）和CCAAT增强结合蛋白α基因（CEBPA）。而且,近年来不断有新的突变基因如异柠檬酸脱氢酶基因1／2（IDH1／2）和肾母细胞瘤基因1（WT1）逐渐为人所知。现探讨这些突变基因的结构、特点以及对于成年人正常核型AML预后的影响。     

DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变正常核型急性髓系白血病患者的临床特征及预后分析

目的 分析DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常核型急性髓系白血病(AML)患者的临床特征,探讨该类患者的预后.方法 回顾性分析2005年12月至2014年6月就诊的109例正常核型AML患者的临床特征及预后.其中DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+AML患者共25例,单独FLT3-ITD+ AML患者共32例,单独NPM1+AML患者24例,单独DNMT3A+ AML患者28例.结果 25例DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+ AML患者平均年龄46岁,伴有高白细胞(81.7×109/L)及较高的骨髓原始细胞(66.3％).其中,17例选择大剂量化疗,8例行异基因造血干细胞移植,与DNMT3A+、FLT3-ITD+、NPM1+AML组比较,差异均无统计学意义.25例DNMT3A/FLT3-ITD/NPM1+患者的3年总生存率为17.65％,3年无病生存率为13.88％,与DNMT3A+、FLT3-ITD+、NPM1+AML组差异均有统计学意义(P值分别为0.049 9、0.036 1、0.013 4),3年无病生存率差异无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 DNMT3A、FLT3-ITD合并NPM1基因突变的正常AML患者往往合并高的外周血白细胞及骨髓原始细胞,预后较差.     

免疫细胞在急性髓系白血病骨髓微环境中的浸润模式及其预后价值

目的:探究免疫细胞在急性髓系白血病骨髓微环境中的浸润模式,以及分析其与临床特征和预后间的关系.方法:从GEO数据库中下载422例急性髓系白血病患者的基因表达谱数据和相关临床数据,采用CIBERSORT算法计算急性髓系白血病患者骨髓微环境中22种免疫细胞的构成比例,然后分别分析浸润性免疫细胞与年龄、FAB分型等临床特征间...     

伴NPM1基因突变的成年人急性髓系白血病临床研究

 目的　探讨我国成年伴NPM1基因突变的急性髓系白血病患者（NPMc+AML）的临床特点,初步探讨定期定性检测该突变在早期判断AML复发中的意义。方法　采用聚合酶链反应（PCR）-毛细管电泳法对95例成年初治AML患者检测NPMl突变情况,并选取其中5例完全缓解患者定期检测该突变。结果　95例成年AML患者NPM1突变发生率为29.5 %（28／95）; ≥40岁患者突变发生率[40.0 %（22／55）]明显高于＜40岁患者[15.0 %（6／40）]（χ2＝6.963,P＝0.012）;正常核型AML患者突变发生率[51.1 %（24／47）]明显高于异常核型患者[8.3 %（4／48）]（χ2＝20.860,P＝0.000）。AML患者发生NPM1突变以M5[72.7 %（16／22）]、M2[36.3 %（8／22）]常见,在具有重现性染色体异常的AML中,未发现该突变。NPMc+AML患者白细胞、血小板计数及乳酸脱氢酶水平均明显高于NPMc-AML组（t值分别为4.132、4.603、4.069,均P＜0.05）。NPMc+AML患者完全缓解率、无复发生存率及总生存率均明显高于NPMc-AML患者（χ2值分别为10.448、4.146、4.384,均P＜0.05）。定期检测的患者血液学复发前1.5～2.0个月重新出现NPM1基因突变。结论　NPM1基因突变在成年AML患者中,尤其是正常核型AML患者中有较高的发生率,临床表现为患者年龄偏大,白细胞计数、血小板计数、乳酸脱氢酶均较高,NPM1基因突变是成年AML患者预后良好的指标。定期定性监测该突变可早期判断AML复发。     

FLT3、NPM1、DNMT3A及IDH基因突变对非M3型急性髓系白血病预后影响的研究进展

非M3型急性髓系白血病(AML)是一组异质性恶性血液系统疾病,无论在形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学及临床特点上都存在很大差异.细胞遗传学检测结果已经成为AML精确诊断、治疗选择和预后判断的主要依据之一,但由于在分子水平上存在高度的异质性,常规细胞遗传学技术检出率不高.有40%~50%的AML患者在初诊时用标准的染色体显带分析方法检测不到克隆性染色体畸变,被称为正常核型AML.非M3型AML较常见的分子遗传学改变为FLT3、NPM1、DNMT3A、IDH基因突变.文章主要就四种基因的特点、发病机制及对非M3型AML的预后影响作一综述.     

老年正常核型急性髓系白血病患者临床特征及预后分析

目的 探讨老年正常核型急性髓系白血病(CN-AML)患者的临床特征及其预后相关因素.方法 回顾性分析104例初治老年CN-AML(M3除外)患者的临床资料.用χ2检验分析完全缓解(CR)的影响因素.用Kaplan-Meier法进行生存分析,并采用Log-rank检验对预后相关影响因素进行单因素分析,采用Cox回归模型进行多因素分析.结果 104例患者中首次化疗后可评价疗效者72例,CR率为38.9%(28/72),总有效率为55.6%(40/72).白细胞计数(WBC)<100×109/L、NPM1突变阳性患者的CR率较高[59.4%(38/64)比12.5%(1/8),83.3%(10/12)比36.4%(8/22),均P<0.05].104例患者中位总生存(OS)时间为6.9个月.单因素分析显示年龄≥70岁、继发AML、高WBC(≥100×109/L)、FLT3-内部串联重复(ITD)突变阳性、CD7阳性、达CR诱导疗程数>2个以及Charlson合并疾病指数(CCI)评分≥2分的患者OS时间较短(均P<0.05).多因素分析显示FLT3-ITD突变阳性(HR=7.61,95%CI 1.80~32.11,P=0.006)及达CR诱导疗程数>2个(HR=10.11,95%CI 2.38~43.03,P=0.002)是患者OS的独立不良影响因素.结论 老年CN-AML患者的预后是多种因素综合作用的结果,FLT3-ITD突变阳性、 达CR诱导疗程数>2个是老年CN-AML患者不良OS的独立影响因素.     

急性髓细胞白血病NPM1和FLT3-ITD突变检测临床意义分析

目的:研究核仁磷酸蛋白1(NPM1)FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变在急性髓细胞白血病(AML)中发生的情况,并了解其临床特征及预后意义.方法:分别应用高分辨熔解曲线(HRM)和变性高效液相色谱技术(DHPLC)检测103例初诊AML患者NPM1和FLT3-ITD突变情况,并结合临床资料进行分析.结果:103例初诊AML患者中,31例发现NPM1基因突变,20例发现FLT3-ITD突变,阳性率分别为30.1％和19.4％,而在核型正常组中所占的比例分别为47.6％(20/42)和26.2％(11/42).FLT3-ITD突变型外周血白细胞计数高,t=2.21,P=0.037;骨髓原始细胞比例高,t=2.44,P=0.023;NPM1突变型亦表现为高外周血白细胞计数,t=2.24,P=0.034.在非M3患者中,NPM1突变型的CR与野生型差异无统计学意义,但第1次化疗的CR(76.9％)明显高于野生型患者(35.0％),x2=12.78,P=0.000 35;FLT3-ITD突变型患者的CR为58.8％,野生型患者为82.6％,两者比较,x2=4.48,P=0.034;FLT3-ITD突变型患者第1次化疗的CR为17.6％,而野生型患者为55.1％,两者比较,x2=6.23,P=0.012.31例NPM1基因突变中有6例合并FLT3-ITD突变,NPM1+/FLT3-ITD-组的CR最高(85.0％),1年内RR率最低(17.6％);NPM1-/FLT3-ITD+组的CR最低(54.5％),1年内RR率最高(50.0％).结论:NPM1和FLT3-ITD突变是AML患者常见的分子遗传学异常,与预后密切相关,可成为目前细胞遗传学预后分组的重要补充,对于指导AML患者的个体化治疗具有重要的临床价值.     

骨髓活检在判断急性白血病髓象缓解及预后中的价值

目的 探讨一种简便易行的检测急性白血病残留病变的方法。方法 对２７例急性白血病化疗后骨髓涂片首次完全缓解（ＣＲ）时的骨髓切片进行同步观察,计数单位面积内原始细胞族及原始细胞总数。原始细胞簇≥３／ｍｍ＾２定为切片未完全缓解。结果 ２７例中１３例未达切片ＣＲ,占４８％,切片中原始细胞总数与簇数呈显著正相关,ｒ值０．９１８,切片缓解组完全缓解期明显长于未缓解组。对骨髓切片未ＣＲ者继续行诱导化疗至原始细胞     

伴NPM1基因突变的成年人急性髓系白血病临床研究

Objective To evaluate the clinical feature of adult acute myeloid leukemia with nucleophosmin (NPM1) cytoplastic positive (NPMc+AML), and to investigate the significance of the NPM1 gene mutations regularly in detecting the early relapse. Methods The NPM1 gene mutations was screened by the PCR-capillary electrophoresis in 95 newly diagnosed adult AML patients. 5 complete remission AML patients were selected to detecte the NPM1 gene mutations regularly. Results In 95 cases of adult AML patients, the incidence of the NPM1 mutations was 9.5 % (28/95). The incidence of the NPM1 mutations in patients (≥40-year-old) was higher clearly than it' s in pazients (40-year-old) (λ 2= 6.963, P = 0.012). That in the AML patients with normal karyotype (51.1%) was higher than that in the patients with abnormal karyotype (8.3 %) (λ2= 20.860, P= 0.0000). NPM1 mutations occured with a considerate percentage in AML patients with M5/M2 subtype. In AML with recurrent genetic abnormalities the NPM1 mutations wasn' t found.The white blood cell count, platelet count, lactate dehydrogenase in the NPMc+AML patients were clearly higher than that in the NPMc-AML patients (t were individually 4.132, 4.603, 4.069, P ＜0.05). The rate of complete remission, relapse-free survival and overall survival in the NPMc+AML patients were also higher than that in the N PMc-AML patients (λ 2 were individually 10.448, 4.146, 4.384, P ＜0.05). In cases detected regularly NPM1 mutations preceded the hematological relapse about 1.5-2 months. Conclusion NPM1 gene mutations has a higher incidence in adult AML, particularly in normal karyotype AML. The clinical manifestations are older, and higher in white blood cell count, platelet count, and lactate dehydrogenase. The NPM1 mutations in adult AML is a good factor for prognosis. The regular detection of NPM1 mutation could find relapse early.     

伴NPM1基因突变的成年人急性髓系白血病临床研究

Objective To evaluate the clinical feature of adult acute myeloid leukemia with nucleophosmin (NPM1) cytoplastic positive (NPMc+AML), and to investigate the significance of the NPM1 gene mutations regularly in detecting the early relapse. Methods The NPM1 gene mutations was screened by the PCR-capillary electrophoresis in 95 newly diagnosed adult AML patients. 5 complete remission AML patients were selected to detecte the NPM1 gene mutations regularly. Results In 95 cases of adult AML patients, the incidence of the NPM1 mutations was 9.5 % (28/95). The incidence of the NPM1 mutations in patients (≥40-year-old) was higher clearly than it' s in pazients (40-year-old) (λ 2= 6.963, P = 0.012). That in the AML patients with normal karyotype (51.1%) was higher than that in the patients with abnormal karyotype (8.3 %) (λ2= 20.860, P= 0.0000). NPM1 mutations occured with a considerate percentage in AML patients with M5/M2 subtype. In AML with recurrent genetic abnormalities the NPM1 mutations wasn' t found.The white blood cell count, platelet count, lactate dehydrogenase in the NPMc+AML patients were clearly higher than that in the NPMc-AML patients (t were individually 4.132, 4.603, 4.069, P ＜0.05). The rate of complete remission, relapse-free survival and overall survival in the NPMc+AML patients were also higher than that in the N PMc-AML patients (λ 2 were individually 10.448, 4.146, 4.384, P ＜0.05). In cases detected regularly NPM1 mutations preceded the hematological relapse about 1.5-2 months. Conclusion NPM1 gene mutations has a higher incidence in adult AML, particularly in normal karyotype AML. The clinical manifestations are older, and higher in white blood cell count, platelet count, and lactate dehydrogenase. The NPM1 mutations in adult AML is a good factor for prognosis. The regular detection of NPM1 mutation could find relapse early.     

伴Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复的急性髓系白血病临床特点及预后分析

目的 探讨Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)的急性髓系白血病(AML)患者的临床特点及预后.方法 回顾性分析2011年6月至2014年3月收治的39例FLT3-ITD的AML患者临床资料.结果 FLT3-ITD突变的发生率为11.6％(39/337),39例FLT3-ITD AML患者中,M5所占比例最高(43.6％,17/39),其次为M2(28.2％,11/39);外周血白细胞计数平均为88.63×109/L,其中12例(30.8％)大于100×109/L;骨髓原始细胞比例平均为82.53％,其中33例(84.6％)大于50.00％.13例发生髓外浸润;17例核型正常,9例核型异常,3例未见核分裂象;13例患者伴随NPM1突变,2例伴有KIT突变,3例伴有DNMT3突变.37例接受治疗的患者中,第1个疗程获完全缓解(CR)16例(43.2％),第2个疗程获CR 4例(10.8％),2个疗程累积CR率为54.0％,诱导治疗相关病死率为21.6％ (8/37),死亡原因主要为感染及出血.中位随访时间12个月,20例CR患者的复发率为50.0％(10/20),无复发生存(RFS)率为45.0％(9/20);移植组17例患者的总生存及RFS均优于单纯化疗组的20例患者(P=0.004、0.020).结论 FLT3-ITD AML具有初发时外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例高、与M5亚型高度伴随的临床特点,异基因造血干细胞移植能明显提高患者总生存期及无复发生存期.     

骨髓活检在判断急性白血病髓象缓解及预后中的价值

目的　探讨一种简便易行的检测急性白血病残留病变的方法。方法　对 2 7例急性白血病化疗后骨髓涂片首次完全缓解 (CR)时的骨髓切片进行同步观察 ,计数单位面积内原始细胞簇及原始细胞总数。原始细胞簇≥ 3 / mm2定为切片未完全缓解。结果　 2 7例中 13例未达切片 CR,占 4 8%。切片中原始细胞总数与簇数呈显著正相关 ,r值 0 .918。切片缓解组完全缓解期明显长于未缓解组。对骨髓切片未 CR者继续行诱导化疗至原始细胞簇 <3 / mm2 ,再行巩固治疗及强化治疗 ,可明显延长 CR期。结论　骨髓切片内原始细胞簇计数检测急性白血病残留病变简便可靠 ,可真实反映诱导化疗后的骨髓缓解状况 ,弥补涂片结果之不足。     

WT1基因水平监测对造血干细胞移植后正常核型急性髓系白血病患者预后的意义

目的探讨WT1基因水平监测对造血干细胞移植(HSCT)后正常核型急性髓系白血病(AML)患者预后的意义。方法回顾性分析2009年7月至2017年3月于苏州大学附属第一医院接受HSCT的115例正常核型AML患者临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)动态检测骨髓WT1基因表达水平。根据患者移植前WT1基因相对表达水平中位数,将115例患者分为两组(<中位数组和≥中位数组)进行生存分析。结果115例患者男性52例,女性63例,年龄(39±10)岁。初诊时中位白细胞计数20.45×10^9/L[(0.5~355.9)×10^9/L],骨髓中原幼细胞比例为0.60±0.28,WT1基因中位相对表达水平为87×10^4。中位随访时间24个月(3~79个月)。115例患者中19例患者复发,对缓解组(96例)及复发组分别进行随访,在移植后1、3、6、12个月进行骨髓穿刺监测WT1基因水平,发现复发组的WT1基因相对表达水平高于缓解组,其中移植后6个月[缓解组(187±50)×10^4,复发组(871±211)×10^4,t=2.519,P=0.014]、12个月[缓解组(51±9)×10^4,复发组(1 797±312)×10^4,t=4.000,P<0.05]的WT1基因相对表达水平差异有统计学意义。WT1基因相对表达水平<87×10^4组2年总生存(OS)率、无进展生存(PFS)率均高于WT1相对表达水平≥87×10^4组,复发率低于WT1相对表达水平≥87×10^4组,两组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析显示,患者移植后12个月的WT1基因水平是影响OS(HR=4.12,P=0.046)及PFS(HR=5.95,P=0.001)的独立因素。19例复发患者中位复发时间11个月(1~60个月)。复发患者在WT1基因相对表达水平明显增高时均首先减停免疫抑制剂,其中6例患者对干预无效,余13例患者中仅5例对干预有效。结论正常核型AML患者移植前的WT1基因表达水平与预后呈负相关。移植后12个月的WT1基因表达水平是影响患者生存的独立因素。复发患者的WT1基因表达水平较高,可对复发患者进行临床干预,较为有效。     

急性髓系白血病预后相关因素分析

目的 探讨成年急性髓系白血病(AML)患者的预后影响因素.方法 回顾性分析182例初治AML患者临床资料,探讨患者性别、年龄(以60岁为界)、初治白细胞计数(≥30× 109/L)、骨髓细胞学免疫表型、细胞遗传学、异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)和治疗1个疗程获得完全缓解(CR)等因素与总生存(OS)及无事件生存(EFS)的关系.结果 182例AML患者的中位年龄49岁(14～ 80岁),中位随访时间9.7个月(0.5～75.5个月),首次化疗达CR 107例,总有效率为65.9％(120/182),年龄≥60岁、CD64阴性、染色体高危组及首次诱导未达CR患者的总CR率低于无上述因素者.单因素生存分析提示年龄≥60岁、细胞遗传学高危组、CD19阴性、CD11b阳性、CD64阴性、未行allo-HSCT、首次诱导未达到CR的患者OS及EFS较短(P＜0.05),多因素分析显示年龄、细胞遗传学表达、CD11b、CD64、是否行allo-HSCT、首次诱导能否达CR是患者OS的独立预后因素,细胞遗传学表达、CD64表达、是否行allo-HSCT及首次诱导能否达CR是患者EFS的独立预后因素.结论 根据AML相关因素进行预后分析判断,有利于临床医生早期制订个体化治疗方案,对于延长患者生存期有重要意义.     

骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病细胞遗传学特征研究

 【摘要】　目的　分析骨髓增生异常综合征（MDS）和急性粒-单核细胞白血病[急性髓系白血病（AML）-M4]、急性单核细胞白血病（AML-M5）患者的细胞遗传学特征。方法　采用骨髓细胞短期培养法,结合R显带技术对100例AML-M4、46例AML-M5与115例MDS患者进行细胞遗传学特征分析。结果　有26 %（26／100）AML-M4患者发生了克隆性细胞遗传学异常,常见的异常为+8、t（8;21）、-7;有26 %（12／46）AML-M5患者发生了克隆性细胞遗传学异常,常见的异常为+11;39 %（45／115）MDS患者发生了细胞遗传学异常,常见的异常为+8、亚二倍体、-7。结论　对MDS和AML患者进行细胞遗传学特征的分析对于其诊断具有重要的价值。     

新型酪氨酸激酶抑制剂AC220治疗急性髓系白血病的研究进展

急性髓系白血病(AML)是一种高度异质性疾病,多个信号通路异常可导致其发病.AML的主要发病因素之一是FLT3基因突变,其主要形式是内部串联重复(ITD),与AML患者的不良预后密切相关.鉴于FLT3-ITD突变阳性在AML患者预后作用中的重要性,认识FLT3的通路以及开发针对FLT3突变的靶向药物显得十分关键.虽然FLT3抑制剂表现出一定程度的抗白血病活性,但单药使用的临床疗效仍有一定局限性.AC220(quizartinib)是强效的二代选择性FLT3抑制剂,以AML患者对FLT3抑制剂的耐药机制为基础,越来越多的学者开始研究AC220单药以及联合细胞毒性化疗药物、蛋白激酶抑制剂对FLT3-ITD细胞株及原始白血病细胞的抑制作用,但各组合方案的临床疗效还有待深入研究.