芳香烃受体在女性生殖中的作用

芳香烃受体(AhR)是一种配体激活的转录因子,通过与其配体结合,启动下游靶基因转录,发挥相应的生物学效应。AhR可调控雌(女)性哺乳动物卵泡的生长、卵巢激素的合成、分泌及排卵;AhR信号通路与月经周期亦相关,可能通过调控雌激素信号系统改变子宫内膜的增殖和分泌。AhR在胎盘的表达水平最高,且主要分布于胎盘滋养层细胞和胎盘血管内皮细胞,其可能通过影响葡萄糖的转运和代谢系统影响胎盘功能。AhR基因敲除小鼠不能正常维持胚胎的植入和胎仔的发育,另外,即使胚胎着床后也不能维持正常妊娠和哺乳,且同胎出生仔数减少、出生后2周幼仔存活率低、断奶后死亡率高。     

血管生长因子受体3(VEGFR3)在胎盘的细胞定位及其在ART安全性研究中的意义

目的:探讨血管生长因子受体3(vascular endothelial growth factor 3,VEGFR3)在ART妊娠胎盘组织中的差异表达及其安全性研究中的意义。方法:收集11例自然妊娠(对照组)和10例ART妊娠(ART组)的单胎足月妊娠选择性剖宫产分娩的胎盘组织,分析比较组间的临床资料;并应用免疫组织化学技术和实时荧光定量PCR技术,观察VEGFR3在胎盘组织的细胞定位,比较VEGFR3在ART和对照组胎盘组织中的差异表达。结果:VEGFR3在胎盘组织中定位于胎盘绒毛合体滋养层细胞胞质。与对照组相比,VEGFR3细胞定位一致,ART妊娠的胎盘组织中VEGFR3 mRNA表达水平有上升趋势,但无统计学差异(P>0.05)。结论:ART妊娠的胎盘组织中VEGFR3细胞定位和表达水平未见明显变化。     

表皮生长因子及其受体在胎盘发育中的作用

研究表明 ,表皮生长因子及其受体在胎儿、胎盘的生长发育中有一定作用 ,胎儿生长与胎盘的发育直接相关。表皮生长因子受体在胎盘中有很强的表达 ,主要位于合胞体滋养层微绒毛胞质膜顶端 ,微绒毛与母血直接接触 ,是支持母胎之间物质与信息交换 ,并能分泌多种物质的组织。现就表皮生长因子及其受体在胎儿、胎盘发育过程中的作用作一综述。     

尼古丁通过抑制可溶性血管内皮生长因子受体1促进胎盘生长因子分泌并提高人滋养细胞侵袭行为的分子机制

目的:探讨尼古丁对人滋养细胞侵袭行为调控的分子机制。方法:以低剂量尼古丁处理人绒毛膜癌细胞株JEG-3,以实时定量RT-PCR及ELISA方法分析可溶性血管内皮生长因子受体1(soluble fms-like tyrosine kinase 1,s Flt1)及胎盘生长因子(placental growth factor,PLGF)在m RNA及蛋白质水平的表达。以PLGF阻断性抗体及尼古丁共同处理人滋养细胞,Transwell细胞侵袭实验分析滋养细胞的侵袭能力。结果:低剂量的尼古丁通过抑制s Flt1表达促进PLGF分泌并改善滋养细胞的侵袭能力。结论:尼古丁可能通过调控滋养细胞PLGF分泌改善滋养细胞的侵袭行为,对妊娠高血压综合征(PIH)发挥保护作用。     

血管内皮生长因子受体2在子(癎)前期患者胎盘中的表达及其意义

目的 探讨子痢前期患者胎盘中血管内皮生长因子受体2(KDR)的表达与胎盘血管病变的关系,研究子(癎)前期的发病机制.方法 对中国医科大学附属第二医院2004年1至11月间收治的重度子(癎)前期患者22例、轻度子(癎)前期患者20例和同期正常妊娠妇女20例,采用免疫组化SP法检测其胎盘中KDR的表达情况,记数胎盘间质的平均微血管密度(MVD)值.结果 子(癎)前期重度患者胎盘中KDR的表达显著低于轻度患者和正常孕妇(P＜0.01),子(癎)前期轻度组较正常对照组KDR表达明显降低(P＜0.05).子(癎)前期重度组患者胎盘中MVD值明显低于轻度组和正常对照组(P＜0.01),子(癎)前期轻度组较正常对照组MVD值降低(P＜0.05).子(癎)前期患者和正常孕妇胎盘中KDR表达与MVD值的变化呈显著正相关(r=0.855,P＜0.01).结论 KDR表达水平降低可能参与引起胎盘血管发育不良.从而导致子(癎)前期的发生和发展.     

胎盘生长因子及Flt-1受体在子癎前期/妊娠期高血压发病中的作用

妊娠期高血压疾病（hypertensive disease complicating pregnancy,HDCP）的病因与发病机理至今还不十分清楚,近年来的研究发现,其发生可能与胎盘“浅着床”有关.胎盘生长因子（placenta growth factor,PLGF）丰富表达于胎盘,主要合成部位是合体滋养细胞,其特异性结合的受体为酪氨酸酶受体（fms-like tyrosine kinase,Flt-1）,该受体位于血管内皮细胞和滋养细胞,使PLGF成为一个对滋养细胞有自分泌作用和对血管生长有旁分泌作用的蛋白分子,因而引起人们的注意.PLGF及其受体的表达异常可能在子癎前期的发生发展中起重要作用.本研究通过检测不同程度HDCP孕妇PLGF蛋白、Flt-1受体蛋白及二者的mRNA在胎盘中的表达情况,以探讨PLGF及其特异性受体Flt-1与HDCP的关系.     

胎盘印迹基因在子痫前期发病中的作用研究进展

<正>子痫前期（preeclampsia,PE）是妊娠期特有并发症,是导致孕产妇和围产儿死亡的主要原因之一,其发病机制至今仍未阐明。目前的研究主要集中于滋养细胞功能异常、氧化应激、血管内皮细胞损伤、免疫学因素和遗传因素等方面。随着表观遗传学的研究进展,发现胎盘印迹基因的异常表达可导致滋养细胞功能异常、促进氧化应激损伤和血管内皮细胞损伤,参与子痫前期的发生。本文就胎盘印迹基因与子痫前期发生的可能机制综述如下。     

激活素A对早孕胎盘细胞滋养细胞凋亡的作用

激活素A是转换生长因子13家族中的一员。研究表明，激活素A在细胞增殖、凋亡以及癌变过程中都有重要的调节作用；其中激活素A对具有增殖功能的细胞可诱导其发生凋亡。人的细胞滋养细胞是具有增殖能力的正常细胞，细胞膜上有激活素A受体表达，在妊娠期与激活素A结合，继而影响细胞滋养细胞增殖与凋亡。本研究旨在探讨激活素A对细胞滋养细胞凋亡的调节作用，报道如下。     

II型核受体PPARγ和金属蛋白酶MMP-2、MMP-9在早孕胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨II型核受体的过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)、金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9与细胞滋养细胞浸润的关系。方法:采用免疫组织化学、实时RT-PCR和免疫印迹技术检测早孕早期(孕6-8周,A组)和早孕晚期(孕11-12周,B组)绒毛组织中PPARγ、MMP-2和MMP-9mRNA及蛋白的表达。结果:PPARγ蛋白主要定位在早孕绒毛细胞滋养细胞核及绒毛外滋养细胞柱和细胞岛的细胞滋养细胞核内,MMP-2和MMP-9蛋白阳性颗粒主要存在于绒毛细胞滋养细胞和合体细胞滋养细胞胞浆内,绒毛间质细胞内亦有阳性染色,且A组绒毛PPARγ表达量高于B组(P<0.05),而MMP-2和MMP-9表达量在B组高于A组(P<0.05),与PPARγ呈负相关(r=-0.74,-0.68,P<0.01);且在A组MMP-2表达量多于MMP-9,而B组则MMP-9多于MMP-2,但无显著性差异。结论:PPARγ在调节滋养细胞浸润过程中起重要作用,而且其作用可能是通过调节MMP-2和MMP-9的表达实现的,为深入探讨PPARγ及其配体在滋养细胞浸润机制中的作用提供实验基础。     

子(癎)前期患者胎盘组织中Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义

目的研究子痫前期（PE）患者胎盘组织中Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达及其与胎盘中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）表达的关系,探讨PE胎盘中Toll样受体变化的意义。方法2005年1月至2006年12月在哈尔滨医科大学第一临床医学院采用免疫组化和RT-PCR法检测PE患者和正常晚期妊娠妇女胎盘组织中TLR2和TLR4的定位及表达,同时用脂多糖（LPS）体外刺激胎盘组织中的TLR4,检测其上清液中TNF-α、IL-6的变化。其中PE患者44例（PE组）,同期正常晚期妊娠妇女22例（对照组）。结果PE组和对照组胎盘组织中均有TLR2和TLR4的表达,其中PE组TLR4表达明显比对照组增强,组间差异有显著性意义（P〈0.05）;LPS体外刺激PE组胎盘组织,导致TNF-α、IL-6分泌量增加,刺激后2hPE组TNF-α、IL-6分泌量与对照组比较差异无显著意义（P〉0.05）,刺激后6hPE组TNF-α、IL-6的分泌量升高明显,与对照组比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论PE患者胎盘中TLR4表达增加与TNF-α、IL-6改变密切相关,是造成局部细胞因子微环境异常的主要因素,其增加可能是PE发病机制中的关键环节之一。     

子痫前期患者胎盘组织中降钙素受体刺激肽-3(CRSP-3)的表达及意义

目的:研究子痫前期患者胎盘组织中降钙素受体刺激肽-3(CRSP-3)的表达与正常妊娠者之间的差异及其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测住院分娩的50例子痫前期患者(子痫前期组:轻度子痫前期25例,重度子痫前期25例)和30例正常晚期妊娠孕妇(对照组)胎盘组织中CRSP-3的表达定位,Real-time PCR及Western blotting方法检测胎盘组织中CRSP-3mRNA和蛋白的表达。结果:子痫前期和正常妊娠者胎盘组织细胞滋养细胞和合体滋养细胞中均表达CRSP-3。子痫前期患者胎盘组织中CRSP-3mRNA及其蛋白表达水平均高于正常妊娠组(P均0.05)。其中重度子痫前期患者胎盘组织中CRSP-3mRNA和蛋白表达水平显著高于正常对照组(P均0.01),虽重度子痫前期胎盘组织中CRSP-3表达略高于轻度子痫前期,但组间无统计学差异(P均0.05)。结论:CRSP-3上调可能参与子痫前期的发病,但是与疾病的进展及严重程度无关。     

先兆子痫患者母胎界面上细胞凋亡的研究

目的:研究先兆子痫患者母胎界面上细胞凋亡水平及凋亡相关分子的表达变化。方法:分别收集妊娠25、27、29、30和31周及足月分娩的正常妊娠者和先兆子痫患者的胎盘组织,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP刻痕末端标记法(TUNEL)检测母胎界面上细胞凋亡情况, 并行凋亡细胞定位;RT-PCR检测正常妊娠和先兆子痫胎盘组织中P53,Bcl-2和Bax的mRNA表达水平的差异。结果:正常妊娠和先兆子痫患者胎盘中发生凋亡的细胞数目都随孕周延长而逐渐增高,但先兆子痫的胎盘中细胞凋亡率明显高于正常妊娠者;正常妊娠胎盘中凋亡细胞主要为合体滋养层细胞,足月胎盘绒毛内血管内皮细胞亦有少量细胞凋亡,而先兆子痫胎盘中细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞和绒毛内血管内皮细胞均发生明显的凋亡;RT-PCR显示先兆子痫胎盘组织中P53和Bax的mRNA水平明显高于同期妊娠的正常胎盘,而Bcl-2水平显著降低。结论:正常妊娠过程中胎盘组织中只在有限部位出现少量细胞凋亡,而先兆子痫胎盘组织中细胞过度凋亡, 且凋亡细胞分布广泛,并伴有凋亡相关分子的表达上调。表明先兆子痫的发生与胎盘组织中滋养层细胞大量凋亡密切相关。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对体外人滋养层细胞孕酮分泌的影响

目的:探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对人早孕绒毛滋养层细胞孕酮(P)的合成和调节 作用。方法:将胰蛋白酶和胶原酶联合消化人早孕绒毛滋养组织,Percoll密度梯度分离纯化后得 到的人早孕胎盘滋养层细胞进行原代培养。以终浓度为0.1μg/L、1μg/L、10μg/L、100μg/L　IGF-I分 别对其作用12h,以及100μg/L浓度IGF-I作用12h、24h、48h、72h时,放免法检测滋养细胞 分泌P 的含量,RT-PCR法检测低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA的表达。结果:滋养层细胞P 的 分泌量随着IGF-I的浓度升高而增加;同时100μg/L浓度的IGF-I作用于滋养层细胞12h 后,P 分泌开始增加,48h达到高峰,以后逐渐下降。半定量RT-PCR均显示LDLRmRNA阳性条带,且表 达规律与P一致。结论:滋养层细胞P的分泌具有对IGF-I的时间和浓度依赖性,并且IGF-I能 上调LDLRmRNA的表达,对促进滋养细胞P分泌的调节起重要作用。     

TNFα、IL-4及IL-10在妊高征孕妇胎盘中的表达

目的:研究肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-4及IL-10在妊高征(PIH)孕妇胎盘中的表达规律,探讨它们与妊高征发病的关系。方法:用原位杂交法对TNFαmRNA、IL-4mRNA及 IL-10mRNA在54例 PIH孕妇和32例正常血压的晚期妊娠(NLP)孕妇胎盘的表达进行检测。结果:TNFαmRNA、IL-4mRNA及IL-10mRNA在两组均主要表达于胎盘的合体滋养细胞浆,经图像分析处理:①TNFαmRNA在PIH及NLP组的平均光密度分别为0.1947±0.0303及0.1681±0.028　8(P　<0.001)。②　PIH组的IL-4mRNA、IL-10mRNA平均光密度分别为0.1478 ±0.0468、0.1585±0.0402,均低于NLP组(0.2081±0.0280、0.2019±0.0289),P　<0.001。结论:孕妇母-胎界面的TNFαmRNA表达升高、IL-4mRNA及IL-10mRNA表达降低导致的免疫失衡可能是PIH的病因之一。     

正常妊娠滋养层组织中Lin28B表达变化的研究

目的:探讨Lin28B在正常妊娠不同阶段滋养层细胞中的表达变化及其临床意义。方法:收集40例正常早期妊娠者(孕早期组),包括20例妊娠5~7+6周(孕早A组)和20例妊娠8~12+2周(孕早B组),15例孕17~27周(孕中期组),以及20例孕37~41周(孕晚期组),共75例正常孕妇的绒毛和胎盘组织。采用RT-q PCR、Western blotting和免疫组织化学方法检测胎盘组织Lin28B基因和蛋白的表达差异及细胞定位。结果:1在正常妊娠不同时期的滋养层组织中细胞滋养细胞和合体滋养细胞中均可检测到Lin28B蛋白的表达。2 Lin28B m RNA表达量各组间有统计学差异(P0.05),早孕A组最高,随着孕周进展逐渐下降,至孕晚期达最低水平。3正常妊娠不同时期的滋养层组织中Lin28B蛋白表达呈现为随着孕周的增加而逐渐下降趋势。结论:Lin28B在正常妊娠进展过程中表达下调,提示其可能参与了滋养细胞的增殖和浸润及胎盘的发育。     

经子宫后路子宫切除术在凶险性前置胎盘伴胎盘植入中的临床应用

目的:探讨经子宫后路子宫切除术在凶险性前置胎盘伴胎盘植入中的临床应用价值。方法:对经临床或病理诊断凶险性前置胎盘伴胎盘植入患者90例分为经子宫后路子宫切除术组(观察组)23例和传统子宫切除术组(对照组)67例,对比两组平均手术时间、术中出血量、术后24小时出血量、术后住院天数、严重并发症。结果:观察组无孕产妇死亡,对照组1例孕产妇死亡。观察组未发生膀胱损伤,1例(4.34%)输尿管损伤、1例(4.34%)肠管损伤;对照组5例(7.46%)膀胱损伤,7例(10.4%)输尿管损伤、7例(10.4%)肠管损伤;两组各并发症比较差异均有统计学意义(P0.05)。观察组与对照组比较,手术平均时间(143.7±40.5分钟vs 180.8±37.2分钟)、术中出血量及术后24小时出血量(2243.6±1010.7 ml vs 2866.5±985.9 ml,2468.5±120.7 ml vs 3084.1±110.5 ml)、输注红细胞量(12.3±5.6 U vs 17.1±6.7 U)、术后住院天数(7.8±3.2天vs 10.7±2.9天)差异有统计学意义(P0.05)。结论:经子宫后路子宫切除术治疗凶险性前置胎盘伴胎盘植入,能有效控制产后出血量,减少手术并发症,可能是更好的手术选择。     

IGF-I对卵泡内膜细胞增殖及其LH受体表达的影响

目的 :通过研究胰岛素样生长因子 (IGF- I)对猪卵巢卵泡内膜细胞增殖及促黄体生成素受体(LH受体 )表达的影响 ,提出 IGF- I可能在卵泡发育中的作用。方法 :采用细胞免疫组化、Westernblot及 MTT法进行研究。结果 :1 .细胞免疫组化结果显示 LH+IGF- I组及 IGF- I组与 LH组相比 ,LH受体表达明显增强 ,有统计学差异 ,分别为 P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 ;而 LH+IGF- I组与 IGF- I组相比无统计学差异。Western blot结果发现 LH、IGF- I及 LH+IGF- I三组之间 LH受体蛋白强度的比较与细胞免疫组化结果相一致 ,此外还发现 LH受体蛋白为三个不同分子量的蛋白 ,它们分别为 6 0 k Da,5 0 k Da,3 5 k Da。 2 .IGF- I使卵泡内膜细胞增殖 ,LH的促增殖作用不明显 ,IGF- I及LH+IGF- I组与 LH组相比差异显著 ,P<0 .0 1 ;LH+IGF- I组与 IGF- I组相比无统计学差异。结论 :本实验发现 IGF- I及它与 LH协同作用 ,可以增强卵泡内膜细胞 LH受体的表达 ,同时又可以促进卵泡内膜细胞增殖 ,为进一步阐明多囊卵巢综合征 (PCOS)的卵泡发育停滞机制奠定了一定的实验基础