干细胞移植在眼科的应用前景

干细胞具有自我更新、高度增殖及多向分化潜能的优点,主要分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞移植在眼科的应用尚处于实验研究阶段,其在视网膜变性疾病及视神经病变治疗中的应用潜能渐成为研究的热点。越来越多的动物实验表明成体干细胞具有横向分化潜能,其自身的应用优势为难治性眼科疾病的治疗提供了新的途径。本文就干细胞移植在眼科应用的前景作一综述。     

家兔自体虹膜色素上皮移植细胞制备的研究

目的探讨自体虹膜色素上皮（iris pigment epithelium，IPE ）细胞移植时虹膜取材的较佳方法。方法在20只黑兔眼上按人眼周边虹膜切除术的步骤，分别在左眼（ A法，在12点处切取底边为4～5 mm的三角形虹膜组织1块）、右眼（B法，在11点和1点 两处切取底边为2～2.5 mm的三角形虹膜组织块2块）取材，采用酶显微解剖酶分离法对IPE 细胞进行精细的分离和培养，并用光学显微镜、电子显微镜和免疫组织化学等方法对培养的细胞进行观察和鉴定。结果A法取材的IPE细胞培养成功率为65%，B法取材的成功率为95%，经 3～4代的传代即达到移植所需的细胞数。显微镜及免疫组织化学方法观察结果显示，培养的IPE细胞基本保持了原代细胞的特性，细胞活力为85%～93%。结论B法取材的 IPE细胞培养成功率高于A法，培养的IPE细胞在传代到第3代时即可进行移植。（中华眼底病杂志，2003，19：201-268）     

兔眼虹膜和视网膜色素上皮细胞移植的形态学观察

目的 比较有色兔虹膜色素上皮及视网膜色素上皮细胞在白兔视网膜下腔的生长状况。 方法 分离培养有色兔的IPE及RPE细胞。采用内路法在8只白兔16眼中进行了IPE和RPE细胞悬液的移植,其中左眼移植IPE细胞,右眼移植来自同一供体兔的RPE细胞。8只兔分别在2周(n=3)、4周(n=3)和6周(n=2)时处死。对眼球壁做光镜和电镜检查。 结果 IPE和RPE细胞在异体视网膜下腔存活,绝大多数贴附在Bruch’s膜上,并具有极性,细胞基底部有大量的皱褶,细胞顶部有一些微绒毛。6周时未见移植细胞周围有炎性细胞浸润。 结论 移植的IPE和RPE细胞可以在视网膜下腔存活,它们的形态均和原先RPE细胞类似。IPE细胞有望替代RPE细胞用于移植。     

结膜下角膜缘干细胞移植

角膜缘干细胞概念的提出及近年对其深入研究使角膜疾病的治疗有了飞跃提高。目前已应用于临床的角膜缘干细胞移植术对于眼表疾病的治疗开拓了新的前景。本文采用自体结膜下角膜缘干细胞移植术治疗翼状胬肉取得良好效果。患有活动性翼状胬肉患者 3人 4眼 ,复发性翼状胬肉患者5人 5眼。年龄为 32～ 6 3岁 ,其中男 5人 ,女 3人。手术方法——球结膜浸润麻醉 ,剥离角膜表面结膜化的纤维血管化上皮至巩膜 ,切除病变组织。于正上方距角膜缘 5 mm处平行角膜缘剪开球结膜 (长 10 mm) ,将结膜瓣折向角膜的止端 ,取结膜瓣下角膜缘干细胞所在上皮组织 3…     

视网膜色素上色细胞移植的研究

视网膜色素上皮细胞是位于视网膜感光器细胞和脉络膜之间的一层单层细胞。本文介绍了ＲＰＥ细胞的分离，培养和内，外路两种不同的手术方法。从手术活体和组织学检查表明，视多膜下腔是一免疫赦免区域，通过对首次异体移植培养的胎儿ＲＰＥ细胞病例的随访显示，所移植的ＲＰＥ细胞在黄斑区均能存活，并且具有注视功能，术后囊样黄斑水肿是最主要的并发症，是宿主免疫排斥反应的结果，因此预防和处理移植物的免疫排斥，是手术成功的关     

眼科细胞培养的特殊技术

目前已建立了完整的人类眼部组织细胞分离培养技术,生长良好的有视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)、虹膜色素上皮细胞、睫状体色素上皮细胞、葡萄膜黑紊细胞、各部位成纤维细胞(巩膜、眼球筋膜及角膜)、血管内皮细胞、小粱细胞和部分肌细胞等。已能培养、但生长不够满意的有角膜上皮细胞及内皮细胞、晶状体     

视网膜感光细胞移植的研究

视网膜移植是视觉恢复研究中的重大课题之一，包括视网膜色素上皮移植和视网膜感光细胞移植，因感光细胞在视觉形成中具有更重要的作用，感光细胞移植成为近年来的研究热点并取得了初步结果，本文就目前视网膜感光细胞移植研究的进展进行综述。     

自体角膜缘干细胞球结膜移植治疗翼状胬肉

目的 探讨自体角膜缘干细胞球结膜移植治疗翼状胬肉的疗效以及显微手术技术的有关要点。方法 应用自体角膜缘干细胞球结膜移植治疗翼状胬肉38例52祗眼,其中静止期翼状胬肉13例22祗眼。活动期25例30祗眼,包括复发性胬肉3例4祗眼,隋访期最长18个月。最短6个月。结果 经过平均11.80个月观察,祗有1眼胬肉术后复发（占52祗眼的1.92%),其余病例无复发,角膜上皮稳定,泪膜正常,供区角膜创面正常愈合,结论 本术式是目前治疗翼状胬肉最为安全有效的方法。     

组织工程口腔粘膜构建及眼表移植的研究进展

组织工程口腔粘膜是应用细胞生物学和工程学原理，将获得的少量口腔粘膜上皮细胞，在体外培养、扩增后，接种到天然或合成的支架材料上生长繁殖，而得到的口腔粘膜细胞一支架复合物。将此复合物植入体内，种植的细胞继续增殖，形成新的口腔粘膜组织，可达到重建或修复缺失的功能。近年来，随着组织工程技术的兴起和发展，应用组织工程口腔粘膜进行眼表重建逐步展现出其广阔的前景，具有如下优势：①仅需取少量自体组织，可摆脱免疫排斥的干扰；②相对于角膜缘干细胞来源丰富且取材容易；③尤其当双侧角膜缘干细胞完全丧失，自体角膜干细胞移植无法进行时，利用组织工程口腔粘膜进行眼表移植意义重大。本文将对组织工程口腔粘膜的构建及其眼表移植研究进展作一简要综述。     

羊膜移植联合角膜缘干细胞移植治疗严重眼烧伤

目的观察羊膜移植联合上下角膜缘干细胞移植治疗严重眼烧伤的效果。方法采用新鲜羊膜移植联合上下角膜缘干细胞移植治疗严重眼烧伤患者15例（17眼）。术后随访平均2月，观察其效果。结果视力大于0．05者12眼占70．59％，10眼角膜无明显新生血管，2眼角膜中央留有薄翳，12眼角膜稍有浑浊。17眼全部瘢痕愈合，眼表稳定。结论烧伤早期行羊膜移植联合上下角膜缘干细胞移植可明显减少睑球粘连并可使早期眼表稳定。     

胚胎干细胞体外培养及在眼科的研究进展

胚胎干细胞（ESC）具有体外无限增生和自我更新并能够分化为体内各种细胞的潜能。ESC独特的生物学特性被广泛应用于生物和医学研究领域,因此,成功地培养ESCs对于更深入地探讨ESCs的作用机制是非常有帮助的。目前,培养和分化的ESCs已用于一些眼科疾病的治疗,如视网膜变性性疾病和严重的角膜疾病等。ESC在动物和人的胚胎发育、致畸实验、组织工程和移植治疗等研究领域具有重要的科学意义和巨大的应用前景。对胚胎干细胞的发展、体外培养体系及在眼科研究进展进行综述。     

深低温保存的异体角膜缘干细胞的角膜移植术

目的 :探讨深低温保存的异体角膜缘干细胞在临床应用中的疗效。方法 :取每只新鲜尸眼长度 12 0°、宽度分跨角膜缘球结膜 2mm、角膜 1mm的角膜缘干细胞各 3片 ,简化二步法处理后备用。 8例 (8眼 )患者接受异体角膜缘干细胞移植 ,术后使用常规消炎眼药水同时点地塞米松和环胞霉素A。随访观察角膜上皮修复程度、新生血管退化程度并做印迹细胞学检查。结果 :全部病例随访 3个月以上 ,最长的为 12个月 ,8例角膜上皮修复完整、Fl(- )、透明度好转、新生血管得到控制 ,印迹细胞学检查未见杯状细胞。结论 :深低温保存的异体角膜缘干细胞具有一定的临床应用前景 ,是一项可以在一定范围内推广的技术。     

角膜缘上皮移植治疗化学伤和热烧伤后的眼球表面疾患

本文采用自体或异体角膜缘上皮移植治疗８例（８眼）化学伤和热烧伤后角膜表面缺损及血管翳性混浊。结果：８例中，上皮稳定愈合７例，角膜透明６例（其中包括１例行Ⅱ期穿透性角膜移植术），视力均有明显提高。结论：采用自体或异体角膜缘上皮移植替换严重受损的角膜缘组织，通过供体干细胞的增殖、分化能有效地修复和稳定受损的角膜表面，是治疗单侧或双侧眼球表面疾患的合理治疗方法     

自体角膜缘部上皮移植治疗翼状胬肉

采用自体角膜缘部上皮移植治疗原发性胬肉５５眼，复发性胬肉６眼，经３－６个月随访，原发性胬肉全部治愈无复发，复发性胬肉有一例复发。研究表明本手术法与结膜移植法相比有复发率低、眼部不充血、角膜上皮恢复时间短、角膜无新生血管等优点，并对自体角膜缘部上皮移植治疗翼状胬肉的机理进行了探讨。     

兔虹膜和视网膜色素上皮细胞的体外培养比较

目的 观察比较有色素兔虹膜色素上皮(IPE)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的体外生长状况。方法 采用酶消化法及酶辅助机械分离法分别分离IPE和RPE细胞。观察培养的两种细胞的生长状况，并对其进行免疫组化鉴定。结果 原代IPE及RPE细胞大多呈圆形或六边形，细胞内充满了黑色素颗粒。随着传代的增加，呈梭形或纤维细胞样生长的细胞增多，细胞中的色素颗粒也逐渐减少。细胞角蛋白免疫组化染色显示IPE及RPE细胞绝大多数呈棕黄色阳性反应。Desmin兔疫组化染色显示IPE细胞中阳性细胞约占5％。结论 分离培养的IPE和RPE细胞纯度很高。IPE细胞中绝大多数为后层IPE细胞。IPE和RPE细胞的形态及体外生长特点类似。     

自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症

目的　探讨自体角膜缘干细胞移植在角膜缘功能衰竭症治疗中的作用。方法　将 83例 90眼初发性翼状胬肉、外伤性角膜缘板层缺损及角膜缘碱烧伤患者随机分为A、B组。A组为自体角膜缘干细胞移植组 (干细胞治疗组 ) 4 2例 4 5眼 ,其中 30眼翼状胬肉行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术 ,外伤性角膜板层损伤 10眼、角膜缘碱烧伤 5眼行自体角膜缘干细胞移植术 ;B组为传统单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层损伤、碱烧伤行结膜瓣移植术 (对照组 ) ,4 1例 4 5眼 ,其中翼状胬肉 30眼行单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层缺损 11眼、碱烧伤 4眼行结膜瓣移植术 ,术后观察角膜上皮修复时间、角膜缘新生血管、角膜透明度、泪膜破裂恢复时间以及胬肉复发率 ,术后随诊 6～ 2 4月。结果　A组术后角膜上皮修复时间 2～ 4d、BUT(6 .7± 0 .8)d ,无角膜缘新生血管生长 ,术后翼状胬肉复发率为 0 ,角膜透明 ;B组术后角膜上皮修复时间 5～ 7d ,BUT(7.9± 0 .5 )d ,角膜缘有 3～ 8支新血管生长 ,角膜有不同程度的云翳 ,翼状胬肉复发率 13.33% ,A、B 2组各项指标比较有统计学差异。结论　自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症是一种简单、安全、有效的手术方法。     

兔眼虹膜色素上皮细胞自体视网膜下移植的研究

目的探讨兔眼虹膜色素上皮(IPE)细胞的自体移植技术并进行术后移植区的细胞形态学观察。方法通过虹膜全切法获取10只新西兰白兔的虹膜,采用酶-机械分离-酶消化的方法分离IPE细胞,用5溴脱氧尿嘧啶(5-Brdu)标记原代或一代的细胞。将标记过的IPE细胞悬液通过内路法分别植入对侧眼的视网膜下腔。术后2、4、6周摘除眼球对移植区进行光镜、电镜检查。结果经免疫学鉴定纯化培养了兔眼IPE细胞。术后光镜显示移植的IPE细胞成单层贴附在原始的视网膜色素上皮(RPE)细胞上。电镜结果证实移植的IPE细胞尖端微绒毛与光感受器外节连接,邻近的光感受器细胞显示正常结构。结论采用内路法可成功地将细胞悬液植入家兔视网膜下腔。6周内移植的自体IPE细胞在视网膜下腔存活,与原先的RPE细胞生长状态类似,邻近的光感受器细胞无形态改变。     

早期衰老大鼠视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体超微结构的变化

目的：观察早期衰老大鼠视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体超微结构的变化。

方法：取3月龄及12月龄大鼠视网膜,制成半薄切片,透射电镜下观察视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体超微结构的变化。

结果：12月龄大鼠视网膜中出现视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium, RPE)凋亡和RPE-光感受器细胞复合体的退行性改变。

结论：视网膜色素上皮-光感受器细胞复合体的退行性改变是视网膜衰老的早期表现。     

虹膜色素上皮移植

自体虹膜色素上皮容易获得，能够吞噬光感受器外节盘膜，使得用它替代视网膜色素上皮细胞移植到视网膜下腔以治疗视网膜色素上皮变性疾病成为可能。对IPE和视网膜色素上皮(RPE)细胞的功能进行了比较，并对IPE细胞的培养方法，用IPE细胞移植治疗老年性黄斑变性和视网膜色素变性等技术进行了综述。