灯盏花素通过调控LKB1/AMPK和Notch1/Jagged1通路改善高脂血症大鼠血脂水平及肝肾功能的作用机制研究＊

目的 基于LKB1/AMPK和Notch1/Jagged1通路探讨灯盏花素改善高脂血症大鼠血脂水平及肝肾功能的作用机制。方法 60只雄性SD大鼠随机为正常组、模型组、辛伐他汀组（20 mg·kg^-1）和灯盏花素低、中、高剂量组（6、12、24 mg·kg^-1），每组10只。采用先腹腔注射75%蛋黄乳液后饲喂高脂饲料的方式建立高脂血症模型，同时给药干预，1次/天，连续28d。采用ELISA法检测大鼠血清中T-CHO、TG、LDL-C、HDL-C、AST、ALT、Cr、BUN水平；测定大鼠肝脏、肾脏系数；采用HE染色法观察肝肾组织病理学变化；采用免疫组化法检测肝组织p-AMPK、LKB1、HMGCR水平及肾组织Notch1、Jagged1、Hes1水平；采用RT-PCR法检测肝组织p-AMPK、LKB1、HMGCR水平mRNA水平及肾组织Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠血清TG、T-CHO、LDL-C、ALT、AST、Cr、BUN水平明显升高（P<0.05），HDL-C水平明显降低（P<0.05）；肝脏、肾脏系数明显增加（P<0.05）且出现病理变化；肝组织中p-AMPK、LKB1水平明显降低（P<0.05），HMGCR水平明显升高（P<0.05）；肾组织Notch1、Jagged1、Hes1水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较，辛伐他汀组和灯盏花素低、中、高剂量组大鼠血清TG、T-CHO、LDL-C、ALT、AST、Cr、BUN水平明显降低（P<0.05），HDL-C水平明显升高（P<0.05）；肝脏、肾脏系数明显减小（P<0.05）且病变程度减轻；肝组织中p-AMPK、LKB1水平明显升高（P<0.05），HMGCR水平明显降低（P<0.05）；肾组织Notch1、Jagged1、Hes1水平明显降低（P<0.05）。结论 灯盏花素能够改善高脂血症大鼠血脂水平及肝肾功能，其机制与激活LKB1/AMPK通路及抑制Notch/Jagged1通路和HMGCR水平有关。     

化瘀祛痰方对脾虚型高脂血症大鼠肝脏SREBP-2信号通路的干预作用

目的探讨化瘀祛痰方对脾虚型高脂血症大鼠肝脏固醇反应元件结合蛋白-2（sterol regulatory element binding protein-2,SREBP-2）信号通路的干预作用。方法100只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、高脂血症组、高脂血症治疗组、脾虚型高脂血症组、脾虚型高脂血症治疗组,每组20只。空白对照组给予普通大鼠颗粒饲料喂养;高脂血症组和高脂血症治疗组给予高脂饲料;脾虚高脂血症和脾虚高脂血症治疗组采用劳倦过度和饮食不节进行造模,单日除饲喂高脂饲料外,予精炼猪油灌胃,每次3 mL,每日2次,双日喂食甘蓝不限量,造模时间30天。高脂血症治疗组和脾虚高脂血症治疗组灌胃化瘀祛痰方煎剂（20 mL/kg）,1 次/天,连续 30天。全自动生化分析仪检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、血清淀粉酶（AMY）水平,间苯三酚法测定D-木糖排泄率,HE染色观察肝脏形态变化,油红O染色观察肝脏脂质沉积,实时定量反转录-聚合酶链反应（Real time PCR）及Western blotting技术检测HMGCR、CYP7A1、LDL-R、SREBP-2 mRNA和蛋白表达。结果与空白对照组比较,高脂血症组及脾虚型高脂血症组血清TC（mmol/L,1.84±0.19,2.23±0.43）、LDL-C水平（mmol/L,0.99±0.24;1.13±0.56）显著升高（P<0.05）,HDL-C水平（mmol/L,0.41±0.66;0.41±0.11）及AMY活性（mmol/L,351±45;153±30）显著降低（P<0.05）,尿D-木糖排泄率（ng/mL,26.9±2.1;15.0±1.7）显著降低（P<0.05）,肝细胞形成脂质沉积,胞浆内多出现脂肪空泡,肝脏CYP7A1、HMGCR、LDL-R、SREBP-2 mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）。与高脂血症组比较,脾虚高脂血症大鼠血清TC、LDL-C水平显著升高（P<0.05）,AMY及尿D-木糖排泄率显著降低（P<0.01）,肝脏形成大量脂质沉积,肝细胞萎缩明显,肝脏CYP7A1、LDL-R、SREBP-2 mRNA及蛋白表达降低（P<0.01, P<0.05）;高脂血症治疗组TC、LDL-C含量降低（P<0.05）,HDL-C含量、AMY活性及D-木糖排泄率升高（P<0.05）,CYP7A1、LDL-R、SREBP-2 mRNA及蛋白表达升高（P<0.01）。与脾虚高脂血症组比较,脾虚高脂血症治疗组TC含量降低（P<0.05）,HDL-C含量、AMY活性及D-木糖排泄率升高（P<0.05）,CYP7A1、LDL-R、SREBP-2 mRNA及蛋白表达升高（P<0.01）。相应治疗组变化一致。结论脾虚加重血清TC水平异常及肝脏脂质沉积,可能与调控SREBP-2信号通路中LDL-R、HMGCR、CYP7A1基因表达有关,化瘀祛痰方可调控该通路,发挥干预TC代谢失常作用。     

中药水蛭对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏的影响北大核心CSCD

为了探究中药水蛭对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏功能的影响及其可能机制。实验通过生化分析仪检测大鼠实验前后血脂（TG,TC,HDL-C,LDL-C）的水平;ELISA检测实验末大鼠血清丙氨酸转移酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）的水平;Westernblot法检测大鼠肝脏组织中酰基辅酶A．-固醇酰基转移酶-2（ACAT-2）、脂肪酸合成酶（Fas）、羧甲戊二酸辅酶A还原酶（HMGCR）的表达水平;称量大鼠的体质量、肝脏质量并计算肝脏指数;油红0染色观察大鼠肝脏组织中脂质的沉积情况。结果显示,中药水蛭可以使高脂血症状态下大鼠的TC,LDL-C水平降低,HDL-C升高,ALT,AST水平明显下降,肝脏指数降低,肝脏组织中ACAT-2,Fas,HMGCR的表达水平下降,油红O染色显示中药水蛭干预组大鼠肝脏组织中的脂质沉积减少。以上研究结果表明,中药水蛭可能通过抑制肝脏组织中与脂肪酸、胆固醇合成及转化相关的酶ACAT-2,Fas,HMGCR表达水平及活性,减少胆固醇、脂肪酸的合成,从而调节脂质代谢以降低大鼠血脂水平,减轻肝脏组织中的脂质沉积及大鼠肝脏损伤,进而干预高脂血症大鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）的进程。     

山楂、决明子、泽泻提取物对高脂血症大鼠血脂水平、肝功能及HMGCR表达的影响

目的观察山楂、决明子、泽泻提取物对高脂血症大鼠血脂水平、肝功能及HMGCR表达的影响。方法 40只大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,山楂、决明子、泽泻提取物低剂量组(1 g/kg),山楂、决明子、泽泻提取物高剂量组(3 g/kg),阳性对照组(辛伐他汀,10 mg/kg),每组8只,正常对照组大鼠给予基础饲料,其他各组大鼠给予高脂饲料,自由采食饮水并灌胃给予相应药物,连续5周。于给药2、5周后各组大鼠眼眶取血,检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。末次给药采血后解剖大鼠取肝脏,HE染色观察肝组织病理形态学变化,免疫组化法检测肝组织HMGCR表达。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平升高(P0.01),HDL-C水平降低(P0.01),肝脏脂肪变性明显,HMGCR表达升高(P0.01);与模型对照组比较,山楂、决明子、泽泻提取物1、3 g/kg剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平降低(P0.05,P0.01),HDL-C水平升高(P0.01),肝组织病理变化均有所改善,HMGCR表达下降(P0.01),以3 g/kg剂量组作用更显著。结论山楂、决明子、泽泻提取物能降低高脂血症模型大鼠血脂水平,改善肝功能,减少肝脏脂肪变性,其作用机制可能与下调HMGCR表达有关。     

秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响

目的观察秦苓液对尿酸性肾病大鼠肾组织AMPK/iNOS信号途径的影响，探讨其对尿酸性肾病肾脏损伤的保护机制。方法采用腺嘌呤灌胃配合酵母饲料喂养的方法制备高尿酸肾病大鼠模型，将成模大鼠随机分为模型组，别嘌呤醇组［23.33 mg/（kg·d）］，秦苓液大、中、小剂量组［剂量分别为：36.4、18.2、9.1 g/（kg·d）］，每组12只，予对应药物干预。6周和8周时处死各组1/2大鼠，取肾脏组织。RT-PCR检测AMPKα1、iNOS mRNA表达水平，Western Blot检测AMPKα1、p-AMPKα1、iNOS蛋白表达水平。结果与正常组比较，6周及8周模型组AMPKα1 mRNA和蛋白表达、p-AMPKα1蛋白表达降低，iNOS mRNA及蛋白表达升高（P<0.01， P<0.05）。与模型组比较，6周时秦苓液各组AMPKα1 mRNA表达升高，p-AMPK蛋白表达升高，iNOS蛋白表达降低，秦苓液大、小剂量组AMPKα1 蛋白表达升高（P<0.01， P<0.05）；8周时秦苓液小剂量组AMPKα1 mRNA表达升高，中、小剂量组AMPKα1、p-AMPKα1蛋白表达升高，iNOS mRNA及蛋白表达降低（P<0.01， P<0.05）。结论秦苓液可能通过调节AMPK/iNOS信号途径改善代谢，抑制炎性损伤，减轻尿酸性肾病大鼠的肾脏损伤。     

地奥心血康联合辛伐他汀对动脉粥样硬化小鼠的影响及机制研究

目的 探讨地奥心血康 （以下简称心血康） 联合辛伐他汀对动脉粥样硬化 （AS） 小鼠的影响及机制。方法 将 8 只 C57BL/6J 小鼠作为对照组,将 32 只 ApoE-/- 小鼠随机分为模型组、心血康组 （160 mg·kg-1 ） 、辛伐他汀组 （1.3 mg·kg-1 ） 及联合治疗组 （心血康 160 mg·kg-1 +辛伐他汀 1.3 mg·kg-1 ） ,每组 8 只。对照组给予常规饲料喂养, 其余 4 组均给予高脂饲料喂养。同时,各给药组均按照上述剂量灌胃给药,灌胃体积为 10 mL·kg-1 ,每天 1 次, 持续 18 周。给药结束后,检测血清总胆固醇 （TC） 、甘油三酯 （TG） 、低密度脂蛋白胆固醇 （LDL-C） 、高密度脂 蛋白胆固醇 （HDL-C） 水平;采用油红 O 染色法观察小鼠主动脉斑块形成及肝脏脂质聚集情况;ELISA 法检测 血清前蛋白转化酶枯草溶菌素 9 （PCSK9） 水平;qRT-PCR 及 Western Blot 法检测肝脏组织 LDLR、HNF1α、 SREBP2 mRNA 及蛋白表达水平。结果 （1） 与对照组比较,模型组小鼠的血清 TC、TG、LDL-C 水平显著升 高 （P＜0.01） ,HDL-C 水平显著降低 （P＜0.01） ;主动脉根斑块面积百分比、主动脉全体斑块面积百分比、肝 脏脂滴面积百分比均显著升高 （P＜0.01） ;肝脏组织中 LDLR mRNA 及蛋白表达水平显著降低 （P＜0.01） ,血清 PCSK9 水平显著升高 （P＜0.01） ;肝脏组织中 HNF1α、SREBP2 mRNA 及蛋白表达水平均明显升高 （P＜0.05, P＜0.01） 。 （2） 与模型组比较,心血康组及联合治疗组小鼠的血清 TC、TG、LDL-C 水平明显降低 （P＜0.05, P＜0.01） ,HDL-C 水平明显升高 （P＜0.05） ;辛伐他汀组小鼠血清 LDL-C 水平显著降低 （P＜0.01） ;心血康组 及联合治疗组小鼠的主动脉根斑块面积百分比、主动脉全体斑块面积百分比明显降低 （P＜0.05,P＜0.01） ,各 给药组小鼠的肝脏脂滴面积百分比均显著降低 （P＜0.01） ;心血康组及联合治疗组小鼠肝脏组织中 LDLR 蛋白 表达水平明显升高 （P＜0.05） ,血清 PCSK9 水平明显降低 （P＜0.05,P＜0.01） ,肝脏组织中 HNF1α、SREBP2 mRNA 及蛋白表达水平均明显降低 （P＜0.05,P＜0.01） 。 （3） 与辛伐他汀组比较,联合治疗组小鼠血清 HDL-C 水平明显升高 （P＜0.05） ;主动脉根斑块面积百分比、肝脏脂滴面积百分比均明显降低 （P＜0.05,P＜0.01） ;肝脏组织中 LDLR 蛋白表达水平显著升高（P＜0.01）,血清 PCSK9 水平显著降低（P＜0.01）;肝脏组织中 HNF1α 蛋白及 SREBP2 mRNA 表达水平均明显降低 （P＜0.05,P＜0.01） 。结论 心血康可能通过抑制 SREBP2 及 HNF1α 表达,调节 PCSK9/LDLR 信号途径,从而发挥对辛伐他汀降脂及抗 AS 作用的协同增效作用。     

黄芪散对高脂血症大鼠AMPK/ACC/CPT1通路的影响

探讨黄芪散治疗饮食诱导的高脂血症大鼠的作用机制。将40只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,黄芪散低,高剂量组(1,2 g·kg-1),阳性立普妥组(2 mg·kg-1)。正常组饲以基础饲料,其他组饲以高脂饲料。造模8周后,灌胃相应药物13周,检测各组大鼠血清中空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝脏及骨骼肌病理变化;Real-time PCR和Western blot法检测肝脏和骨骼肌中AMPK信号通路相关分子(AMPK,ACC,CPT1A,SREBP2,HMGCR)的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,模型组大鼠FPG,TC,TG,LDL-C的含量最高,肝脏和骨骼肌病理损害最明显。黄芪散和立普妥给药后,血糖血脂显著下降,肝脏和骨骼肌的损伤有明显改善,除SREBF2和HMGCR的mRNA和蛋白表达降低,其他AMPK信号通路相关mRNA和蛋白表达量显著增加,且黄芪散作用效果优于立普妥。结果表明,黄芪散可能通过调控AMPK信号通路,增加脂肪酸氧化,抑制胆固醇合成来改善高脂血症。     

化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏自噬小体形成信号通路相关基因的影响

目的探讨化瘀祛痰方治疗高脂血症的可能作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为空白对照组、高脂血症组、化瘀祛痰组,每组10只。采用高脂饲料喂饲法制备高脂血症模型后,化瘀祛痰组予化瘀祛痰方煎剂10 ml/(kg·d),空白对照组、高脂血症组给予等体积的磷酸盐缓冲生理盐水灌胃。30天后检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)含量,HE及油红O染色观察肝脏形态变化及肝脏脂质沉积,PCR array筛选大鼠肝脏自噬小体形成信号通路的相关差异基因,Realtime PCR检测泛素样结合通路Atg12-Atg5通路和LC3-PE通路上的相关基因mRNA的表达水平。结果高脂血症组大鼠肝细胞脂质沉积,胞浆内见脂肪空泡;化瘀祛痰组大鼠肝脏脂滴减少。与空白对照组比较,高脂血症组血清TC、LDL-C水平显著升高、HDL-C水平显著降低(P0.01);与高脂血症组比较,化瘀祛痰组血清TC、LDL-C、HDL-C水平均显著改善(P0.05或P0.01)。PCR array结果显示,在参与自噬小体形成的基因中三组比较发生差异性改变的基因有10个。与空白对照组比较,高脂血症组Atg16l1、Atg3、Atg4c、Atg5基因mRNA表达水平均显著下降(P0.05或P0.01);与高脂血症组比较,化瘀祛痰组Atg16l1、Atg3、Atg4c基因mRNA表达水平均显著上升(P0.05)。结论化瘀祛痰方可能通过调节高脂血症大鼠肝脏自噬小体形成信号通路相关基因Atg16l1、Atg3、Atg4c、Atg5 mRNA的表达,从而改善高脂血症大鼠肝脏脂质损伤。     

基于AMPK/ACC信号通路探讨夏枯草提取物调节ZDF大鼠脂代谢的机制

目的:观察夏枯草提取物(Prunellae Spica extracts,PS)对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)模型大鼠肝腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乙酰辅酶A羧化酶(ACC)信号通路的影响以探讨其改善大鼠脂代谢的机制。方法:32只雄性ZDF(fa/fa)2型糖尿病模型大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(180 mg·kg~(-1)·d~(-1))和PS低、高剂量组(12.25,24.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只。8只Zuker Lean(ZL)大鼠设为正常组。于给药0,4,8周测体质量及空腹血糖。给药8周后,腹主动脉取血,离心抽取血清-20℃冻存,取肝组织-80℃冻存,及4%多聚甲醛固定,石蜡包埋。放射免疫法测血清甘油三酯(TG),胆固醇(CHO),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及游离脂肪酸(FFA)。油红O染色观察肝细胞脂滴含量。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏AMPKα_2及ACC mRNA表达。免疫组化法测肝细胞磷酸化(p)-AMPKα蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TG,CHO,LDL-C及FFA升高,肝细胞脂滴增加,肝AMPKα_2 mRNA表达减少而ACC1和ACC2 mRNA表达增加,p-AMPKα蛋白表达减少(P0.05,P0.01)。与模型组比较,PS低、高剂量组可明显降低ZDF大鼠血清TG,CHO,LDL-C及FFA,减少肝细胞脂滴,上调肝AMPKα_2 mRNA且下调ACC1和ACC2 mRNA表达,上调p-AMPKα蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:PS能有效改善2型糖尿病ZDF大鼠肝脏脂代谢紊乱,其机制可能与调节肝AMPK/ACC信号通路有关。     

潼白蒺藜药对调节高脂血症模型大鼠血脂作用及机制研究

目的：探究潼白蒺藜对高脂血症模型大鼠血脂水平的影响及机制,为药对协同降血脂的临床应用提供参考。方法：48只SPF级SD大鼠随机等分为正常对照组,高脂模型组,辛伐他汀组、潼白蒺藜药对组,并设白蒺藜组,潼蒺藜组对比。正常对照组采用基础饲料喂养,其余各组采用高脂饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,造模的同时预防性给药,用潼蒺藜水提物、白蒺藜水提物、潼白蒺藜药对水提物和阳性对照药辛伐他汀分别灌胃,6周后检测大鼠体重及各脏器指数、并检测血清总胆固醇（Total cholesterol,TC）、甘油三酯（Triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白（high density lipoproteincholesterol,LDL-C）的含量,RT-PCR及western blot检测各组肝脏组织三羟基三甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-Hydroxy- 3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase,HMGCR）、胆固醇7a 羟化酶（Cytochrome P450 7A1,CYP7A1）、低密度脂蛋白受体（Low-Density Lipoprotein Receptor,LDL-R）mRNA及蛋白表达。结果：三组中药组均不同程度降低高脂模型大鼠血液TC、TG、LDL-C含量,提高HDL-C含量,其中潼白蒺藜药对更加显著（P<0.01）;三组中药组均能提高脂模型大鼠肝脏HMGCR、CYP7A1、LDL-R基因及蛋白表达,潼白蒺藜药对组疗效更为显著。结论：潼白蒺藜药对能显著调节机体的血脂水平,有效预防高脂血症,发挥协同增效作用,且其机制可能与调节HMGCR、CYP7A1、LDL-R表达有关。     

纯康血脂胶囊对高脂血症大鼠肝脏Ldlr mRNA表达的影响

目的探讨纯康血脂胶囊对高脂血症大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(Ldlr)mRNA表达的影响。方法选用健康雄性SD大鼠40只随机分为4组,每组10只,即:正常对照组、模型组、纯康血脂胶囊组、辛伐他汀组。高脂饲料饲喂3周建立高脂血症动物模型,各组大鼠给予相应的药物灌胃9周,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定大鼠肝脏Ldlr mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C显著降低,肝脏Ldlr mRNA表达显著减弱;与模型组比较,辛伐他汀和纯康血脂胶囊组TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C显著升高,肝脏Ldlr mRNA表达显著增强。结论纯康血脂胶囊对实验性高脂血症大鼠有明显的降血脂效应,可增强高脂血症大鼠肝脏组织Ldlr mRNA表达。     

基于PCR array技术探讨化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢信号通路相关基因mRNA表达的影响

目的采用PCR array技术探讨化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢信号通路相关基因mRNA表达的影响,以初步揭示化瘀祛痰方对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢的干预作用。方法 24只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、高脂血症组、化瘀祛痰组。高脂血症组、化瘀祛痰组予高脂饲料喂饲30天后,化瘀祛痰组予化瘀祛痰中药汤剂灌胃,正常组、高脂血症组给予等体积的生理盐水灌胃。30天后,全自动生化分析仪检测各组大鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,HE染色观察肝脏形态变化,油红O染色观察肝脏脂质沉积,PCR array技术检测各组大鼠肝脏脂质代谢信号通路相关基因mRNA表达。结果与正常组相比,高脂血症组血清中TC、TG、LDL-C水平显著升高(P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.01),肝细胞形成大量脂质沉积,胞浆内多出现脂肪空泡;与高脂血症组相比,化瘀祛痰组血清中TC、TG、LDL-C水平显著降低(P0.01),HDL-C水平显著升高(P0.05),肝脏脂滴减少。PCR array显示:化瘀祛痰组发生差异改变的基因为Abca1、Apoe、cel、Cyp39a1、Cyp46a1、Cyp7a1、Hmgcr、Ldlr、snx17。结论化瘀祛痰方可能通过调控Abca1、Apoe、cel、Cyp39a1、Cyp46a1、Cyp7a1、Hmgcr、Ldlr、snx17基因,影响胆固醇代谢,发挥其对高脂血症大鼠肝脏脂质代谢的干预作用。     

丹蒌片对载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂及AMPK/SREBP通路的影响

目的:通过丹蒌片干预载脂蛋白E(APoE)基因敲除高脂血症小鼠,观察其对血脂水平的影响,探讨其可能的分子生物学机制。方法:48只APoE-/-小鼠随机分为空白对照组、模型组、瑞舒伐他汀钙片组[2 mg(kg·d)]、联合用药组[瑞舒伐他汀钙片2 mg/(kg·d)+丹蒌片1 g/(kg·d)]、丹蒌片低剂量组[1 g/(kg·d)]、丹蒌片高剂量组[4 g/(kg·d)]。空白对照组予以普通饲料,其余各组予以高脂饲料,造模6周后,予以相应药物灌胃7周。检测小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平; 分别用RTq-PCR、Western blot法检测肝脏组织AMPK信号通路相关分子(AMPK、SREBP-1、HMGCR)基因及蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST含量显著升高(P<0.001),HDL-C含量显著降低(P<0.001),肝脏组织中AMPK基因及蛋白水平表达量明显下降(P<0.05),SREBP-1、HMGCR基因及蛋白水平表达量显著升高(P<0.05); 与模型组相比,给药组血清中TG、TC、LDL-C、AST、ALT含量显著下降(P<0.05),HDL-C含量显著升高(P<0.05),肝脏组织中AMPK基因及蛋白水平表达量明显上升(P<0.05),SREBP-1、HMGCR基因以及蛋白含量显著降低(P<0.05); 各治疗组组间比较,TC降低、LDL-C的作用效果联合用药组>瑞舒伐他汀钙片组>丹蒌片高剂量组>丹蒌片低剂量组; 降低TG和升高HDL-C的效果各治疗组之间无统计学差异,降低ALT的效果联合用药组和丹蒌片高剂量组优于瑞舒伐他汀钙片组和丹蒌片低剂量组。结论:丹蒌片可以降低高脂血症小鼠的血脂水平,可能与激活AMPK信号通路,抑制脂质合成相关基因表达有关。     

黄连-吴茱萸组分配伍对高脂模型大鼠脂代谢相关基因的影响研究

目的:观察黄连-吴茱萸组分配伍(小檗碱、吴茱萸碱配伍)对高脂血症模型大鼠肝脏Ob-Rb、JAK2、STAT3 mRNA表达的影响。方法:给予高脂饲料喂养建立高脂血症大鼠模型,筛选造模成功大鼠随机分为空白组,模型组,辛伐他汀组,黄连吴茱萸组分配伍高、中剂量组,分别给予相应药物灌胃治疗,干预8周后,检测各组动物血清TC、TG、HDL-C及LDL-C含量;检测各组动物肝指数及肝脏TC、TG水平;RT-PCR法检测肝脏Ob-Rb、JAK2、STAT3 mRNA表达。结果:黄连吴茱萸组分配伍中、高剂量组能显著降低高脂模型大鼠血清TC,LDL-C含量(P0.05或P0.01)、改善高脂模型大鼠肝脏脂肪病变,以及降低肝脏TG水平(P0.05)。与模型组相比,黄连吴茱萸组分配伍中剂量组肝脏Ob-Rb,JAK2,STAT3 mRNA表达明显下降(P0.05)。结论:黄连-吴茱萸组分配伍可能通过下调高脂模型大鼠肝脏Ob-Rb,JAK2和STAT3 mRNA的表达参与血脂调控。     

复方丹参片通过调控TGF-β1/Smad 通路及基质金属蛋白酶水平对肾纤维化大鼠的作用机制研究

目的基于TGF-β1/Smad 通路和基质金属蛋白酶水平探讨复方丹参片对肾纤维化大鼠的保护作用及相 关机制。方法采用灌胃腺嘌呤（250 mg·kg-1）的方式制备肾纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型 组、氯沙坦组（0.09 g·kg-1）及复方丹参低（0.3 g·kg-1）、高（0.6 g·kg-1）剂量组。各组大鼠给予相应剂量灌胃给 药,每日1 次,连续干预4 周。检测大鼠血清Cr、BUN 水平;采用HE 及Masson 染色法观察肾脏组织病理形 态及纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 蛋白表达水平;采用 Western Blot 法检测肾脏组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大 鼠血清Cr、BUN 水平明显升高（P＜0.05）;肾脏出现明显纤维化病变;肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、 TIMP-1 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模 型组比较,低、高剂量复方丹参片均能明显降低大鼠血清Cr、BUN 水平（P＜0.05）;明显改善肾脏纤维化病 变;降低肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,升高Smad7、MMP-2、 MMP-9 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论复方丹参片可能通过抑制TGF-β1/Smad 通路及提高基质金属蛋白酶 水平来实现对肾纤维化大鼠的保护作用。     

中药水蛭对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏的影响

为了探究中药水蛭对高脂血症大鼠脂质代谢及肝脏功能的影响及其可能机制。实验通过生化分析仪检测大鼠实验前后血脂(TG,TC,HDL-C,LDL-C)的水平;ELISA检测实验末大鼠血清丙氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)的水平;Western blot法检测大鼠肝脏组织中酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶-2(ACAT-2)、脂肪酸合成酶(Fas)、羧甲戊二酸辅酶A还原酶(HMGCR)的表达水平;称量大鼠的体质量、肝脏质量并计算肝脏指数;油红O染色观察大鼠肝脏组织中脂质的沉积情况。结果显示,中药水蛭可以使高脂血症状态下大鼠的TC,LDL-C水平降低,HDL-C升高,ALT,AST水平明显下降,肝脏指数降低,肝脏组织中ACAT-2,Fas,HMGCR的表达水平下降,油红O染色显示中药水蛭干预组大鼠肝脏组织中的脂质沉积减少。以上研究结果表明,中药水蛭可能通过抑制肝脏组织中与脂肪酸、胆固醇合成及转化相关的酶ACAT-2,Fas,HMGCR表达水平及活性,减少胆固醇、脂肪酸的合成,从而调节脂质代谢以降低大鼠血脂水平,减轻肝脏组织中的脂质沉积及大鼠肝脏损伤,进而干预高脂血症大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)的进程。     

活血通脉方对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化和心肌细胞能量代谢的影响研究

目的：探讨活血通脉方对慢性心力衰竭 （CHF） 大鼠心肌纤维化 （MF） 和心肌细胞能量代谢的影响。方法：将60 只 SD 大鼠随机选择 10 只作为假手术组,其余大鼠用腹主动脉缩窄法建立 CHF 模型。模型制备成功的 50 只大鼠随机分为模型组、阳性对照组及活血通脉方高、中、低剂量组（高、中、低剂量组）,每组 10 只。阳性对照组按 1.5 mg/kg 的剂量灌胃赖诺普利;高、中、低剂量组按 16.0、8.0、4.0 g/kg 的剂量灌胃活血通脉方;假手术组与模型组大鼠灌胃等容积的生理盐水。每天1 次,持续 4 周。计算各组大鼠心质量指数,检测左室射血分数（LVEF）、左心室短轴收缩率（LVFS）及心肌组织转化生长因子-β1 （TGF-β1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平、5''-单磷酸腺苷（AMP）依赖的蛋白激酶（AMPK）、过氧化物酶体增殖剂激活受体 γ （PPARγ）、辅助激活因子-1α （PGC-1α） 蛋白及 mRNA 表达水平。结果：与假手术组比较,模型组 LVEF、LVFS、AMPK、PGC-1α 蛋白及 mRNA 相对表达下降 （P＜0.05）,心质量指数及 TGF-β1、MMP-9 水平升高 （P＜0.05）。与模型组比较,活血通脉方高、中、低剂量组和阳性对照组 LVEF、LVFS 及 AMPK、PGC-1α 蛋白与 mRNA 相对表达升高（P＜0.05）,心质 量指数及 TGF-β1、MMP-9 水平降低（P＜0.05）。与阳性对照组比较,活血通脉方中、低剂量组LVEF、LVFS、AMPK、PGC-1α蛋白及 mRNA 相对表达较低 （P＜0.05）,心质量指数及 TGF-β1、MMP-9 水平较高 （P＜0.05）。结论：活血通脉方能显著提高CHF 大鼠心功能,改善大鼠心肌纤维化,提高心肌细胞能量代谢,其机制可能与上调 AMPK、PGC-1α 表达,下调 TGF-β1、MMP-9 水平有关。     

虎杖提取物血脂调节作用及其机制研究

目的:研究虎杖苷的血脂调节作用,并探讨其可能机制。方法:SD大鼠建立高脂血症模型,灌胃给予虎杖苷100 mg/kg,1次/d,连续给药4周。测定大鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C、ox-LDL、NO、MDA浓度及CAT、SOD活性,测定CPT-I、CPTII、ACC和FAS水平;观察肝脏组织学形态变化。结果:与空白对照组相比,模型对照组TC、TG、LDL-C、ox-LDL、MDA、CPI-I、CPI-II、FAS和ACC水平显著升高(P0.05),HDL-C、NO、HMGR水平显著降低(P0.05),CAT、SDO活性显著降低(P0.05),肝脏脂质堆积明显。虎杖苷组TC、TG、LDL-C、ox-LDL、HDL-C水平较模型对照组显著改善(P0.05),与阳性对照组无显著性差异(P0.05);虎杖苷组CAT、SOD活性显著升高(P0.05),MDA活性显著降低(P0.05),NO、HMGR水平显著升高(P0.05),CPI-I、CPI-II、FAS和ACC表达均显著降低(P0.05);虎杖苷组adipo R2和PPARαmRNA表达水平提高(P0.05);虎杖苷组大鼠肝脏脂肪变性程度病变最轻。结论:虎杖苷可以有效降低高脂血症大鼠的血脂水平,改善肝脏脂肪病变,其机制可能与减少脂肪酸和胆固醇合成,纠正高脂血症大鼠氧化应激状态,从而减少脂质过氧化,防止脂肪堆积。     

复方白术提取物对高脂血症大鼠脂质代谢、血液流变学和微循环的影响

目的观察复方白术提取物(CBE,白术精提取物、红曲提取物)对高脂血症模型大鼠脂质代谢、血液流变学和微循环的影响。方法采用高糖高脂饲料递增酒饮建立SD大鼠高脂血症模型,造模4周后分别灌胃给予高、中、低剂量(36、24、16 mg/kg)复方白术提取物,依折麦布作为阳性药。每2周测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉粥样硬化指数(AI)水平;给药7周后测定大鼠尾部微循环血流量;给药10周后,测定大鼠血液流变学指标及血清卵磷脂胆固醇酯酰基转移酶(LCAT)水平,以及肝脏中TC、TG水平和羟甲戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、脂肪酸合成酶(FAS)、酯酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)水平。结果复方白术提取物3组大鼠的血清TC、LDL-C、AI及肝脏TG、HMGCR、ACAT水平降低,血清LCAT水平及尾部微循环血流量升高,血液流变学指标明显改善;复方白术提取物高剂量组血清HDL-C水平升高及肝脏TC、FAS水平降低;中剂量组血清HDL-C水平升高;低剂量组肝脏FAS水平降低。结论复方白术提取物通过抑制胆固醇、脂肪酸合成和促进胆固醇转化来调节脂质代谢,从而改善血液的流变性和微循环。     

脾虚痰浊证巴马小型猪心肌组织LKB1/MPK信号通路的变化

目的:探讨脾虚痰浊证巴马小型猪心肌物质代谢相关通路LKB1/AMPK的变化。方法:普通级雄性巴马小型猪10只随机分为正常组、脾虚痰浊组,每组5头。采用疲劳过度联合高脂单笼饲养建立小型猪脾虚痰浊证模型。采用实时荧光定量PCR法检测心肌组织腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶(p AMPK)、肝脏激酶B1(LKB1)mRNA表达,应用Western blotting法检测心肌组织AMPK、p AMPK、LKB1蛋白表达水平。结果:与正常组小型猪相比,脾虚痰浊组小型猪心肌组织AMPK、p AMPK mRNA表达水平显著下降(P<0.05),AMPK、p AMPK蛋白表达水平亦明显下降(P<0.01);与正常组小型猪相比,脾虚痰浊组小型猪心肌组织LKB1mRNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。结论:心肌组织LKB1/AMPK信号通路相关分子表达下调可能为脾虚痰浊证的分子生物学基础。