人催乳素时间分辨荧光免疫分析检测试剂的研制

目的建立人血清催乳素的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法。方法采用双抗体夹心法建立人血清催乳素TRFIA检测试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果试剂盒的定量范围为16～11000mU/L,灵敏度为1.36mU/L,批内批间的精密度分别为2.6%～7.6%,5.7%～9.0%;与人胎盘泌乳素(hPL)、人生长激素(hGH)、人黄体生成素(hLH)和人促卵泡激素(hFSH)无交叉反应。30份异常血样用本试剂盒与进口的同类试剂盒同时检测,其相关系数为0.997。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。     

酶放大时间分辨荧光免疫分析酶底物试剂5-氟水杨酸磷酸酯的研制(简报)

酶放大时间分辨荧光免疫分析法（EATRFIA），是酶放大湖系元素发光法（EALL）在免疫分析中的应用，集中了生物素（BT）一链霉亲和素（SA）的高亲和力和放大作用，酶放大作用，湖系元素的激发光与发射光波长之间距离大，荧光寿命长等特有优点，集其时间分辨和波长分辨测量技术等于一体，是近年来发展起来的一种全新的超灵敏生物分析法。例如检测血清中促甲状腺激素灵敏度可达0·003mlU／L，其原理是抗原与包被单抗和生物素化单抗同时反应后，再与链霉亲和素（SA）一碱性磷酸酶（AP）复合物（SA－AP）反应，成为结合了AP的免疫反应…     

梅毒螺旋体抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂的研制

目的利用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)建立人血清中梅毒螺旋体(TP)抗体的检测试剂,适用于体检、TP感染及相关症状的临床检测。方法采用双抗原夹心法建立梅毒螺旋体抗体TRFIA检测试剂,对试剂的各项指标进行评价。结果本试剂国家参考品检测结果,阴性、阳性参考品符合率均为100.00%,最低检出限L1、L2检为阳性,L4检为阴性,精密性研究批内批间变异系数均符合试剂检定要求。本试剂与人类免疫缺陷病毒阳性、乙型肝炎病毒阳性、丙型肝炎病毒阳性、类风湿因子阳性、抗核抗体阳性等血样均无交叉反应。用本试剂与进口的酶免法试剂同时检测1 070份临床血样,结果显示对照试剂检出阳性标本484例,本试剂检出阳性标本486例,阳性符合率为99.59%,总符合率达99.43%。结论试剂各项指标均达到临床检测要求,试剂准确快速,安全可靠,具有较高的临床应用价值。     

人血红蛋白时间分辨荧光免疫分析试剂的研制及初步应用

目的建立人血红蛋白(Hb)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂,探讨在大便潜血(FOB)检测中的应用。方法采用固相双抗体夹心法建立检测Hb的TRFIA方法,并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果自制试剂盒的最低检测量为0.8ng/mL或32ng(Hb)/g(粪便),线性范围为0.8～1000ng/mL或32～40000ng(Hb)/g(粪便)。分析内和分析间变异系数分别为3.4%～8.9%和5.2%～13.4%。与羊、鸡、牛、猪、兔、狗Hb不发生交叉反应。90份临床确诊标本用本试剂盒和胶体金免疫层析(GICA)试剂同时测试,TRFIA法的敏感性和特异性均为100%,GICA法的灵敏度和特异性分别为95.6%、100%。结论Hb-TRFIA试剂盒各项指标均达到临床检测要求,适用于临床上大便潜血Hb的检测。     

CA125时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 研制CA125时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立CA125 TRFIA试剂盒。对试剂盒各项指标进行评价。结果 该试剂盒的工作范围为10～600U／ml,分析灵敏度为1．07U／ml，批内、批间的精密度分别为4．5％～8．1％，6．9％～11．5％。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年，37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0～37U／ml。123份血清标本用本试剂盒与国外其他方法的同类试剂盒同时检测，其相关系数为0．939。结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品试剂盒。     

人生长激素的时间分辨荧光免疫分析及其诊断试剂研制

 [目的]利用时间分辨荧光免疫分析（time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA）技术,建立人生长激素（human growth hormone,hGH）的快速检测方法并研制其诊断试剂.[方法]采用双抗体夹心法（一株抗GH的单抗用于包被微孔板,另一株抗GH的单抗用于Eu^3＋标记）建立hGH-TRFIA.[结果]hGH-TRFIA的线性测量范围为0.1×10^-3 100×10^-3U/L,灵敏度为0.036×10^-3U/L,批内和批间的变异系数分别为5.3%～8.6%和7.6%～12.8%.与促甲状腺激素（TSH）、卵泡生成素（FSH）、人胎盘催乳素（LH）和黄体生成素（HPL）均无交叉反应.将43份血清标本用本法与Wallac试剂盒同时检测相关系数（r）为0.957.[结论]hGH-TRFIA可作为一种具有灵敏度高、特异性强和测量范围宽的新方法,用于临床GH水平的测定.     

时间分辨荧光免疫分析技术研究

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoas-say,TRFIA)是一种全新的国际上公认的最有发展前途的非同位素免疫分析技术。镧系元素(Eu、Tb、Sm、Dy等)螯合物有突出的固有特点:激发最大波长到发射最大波长之间的Stokes位移很大,前者对后者无干扰。激发光谱段较宽,可增加激发能;发射光谱带窄,50%发射谱带宽度不足10nm,本底荧光很小;荧光衰变时间很长,有的达1ms。这样脉冲光激发后适当延迟一段时间,等短半衰期本底荧光完     

时间分辨荧光免疫分析技术研究

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoassay，TRFIA)是一种全新的国际上公认的最有发展前途的非同位素免疫分析技术。镧系元素(Eu、Tb、Sm、Dy等)螯合物有突出的固有特点：激发最大波长到发射最大波长之间的Stokes位移很大，前者对后者无干扰。激发光谱段较宽，可增加激发能；发射光谱带窄，50％发射谱带宽度不足     

CK-MB时间分辨荧光免疫分析的建立

目的: 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术,建立人血清CK-MB的快速定量检测方法. 方法: 采用双抗体夹心法(1株抗CK-MB的单抗用于包被微孔板,另1株抗CK-MB的单抗用于铕标记)建立CK-MB TRFIA. 结果: CK-MB TRFIA的线性测量范围为5～400 μg/L, 分析的灵敏度为0.24 μg/L,批内和批间的变异系数分别为4.9%～7.3%和8.4%～11.7%. 与CK-MM和CK-BB均无交叉反应. 将82份血清标本用本法与化学发光试剂盒同时检测,其相关系数为0.895. 结论: CK-MB TRFIA的各项指标均达到临床检测的要求,可用于临床血清CK-MB水平的测定.     

癌胚抗原时间分辨荧光免疫测定法

本文报告用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术定量检测癌胚抗原(CEA)方法。一、材料和方法: 1.E_u~(3+)标记抗体制备:方法同作者前文报告。 2.固相抗体制备:以聚苯乙烯微量滴定条为固相载体。取两株经纯化抗CEA McAb IgG C_6和C_7按3:7混合,用0.1ml/L PH9.6碳酸盐缓冲液配成25ug/ml。每孔加200ul,4℃包被24小时。 3.测定方法:固相抗体微量滴定条孔中加CEA标准或待测样品50ul/孔,补加50mmol/L PH     

乙肝病毒前S1抗原时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒前S1抗原的检测试剂盒。方法应用双抗体夹心法建立乙肝preS1抗原TRFIA检测试剂盒,对试剂盒的各项性能指标进行评估。结果对280份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果显示自制试剂盒的特异性更好;200份正常人血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×4.5。用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为3.4%～7.8%,6.9%～8.4%;检测HBsAg及HBeAg无交叉反应。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,TRFIA法精密度和特异性有较大提高,可替代酶免法试剂盒。     

乙型肝炎病毒核心抗体IgM 时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒抗HBc-IgM的检测试剂盒.方法 采用捕获法建立抗HBc IgM TRFIA检测试剂盒.对自制试剂盒的各项性能指标进行评估.结果用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为4.8～7.2%,7.5～8.6%;与抗-HBs,抗-HBc IgG和抗-HBe无交叉反应;对584份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果 显示自制试剂盒的灵敏度更高;300份健康者血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×3.5.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代酶免法试剂盒.     

时间分辨荧光免疫分析的研究进展及应用

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroinununoassay，TRFM)是一种新型的体外超微量分析技术。它具有高精度、自动化、大样本快速测定(1～2h就能出结果)等技术优点。其在灵敏度和准确性方面明显高于ELISA，特异性又明显高于聚合酶链反应(PCR)。因而，其应用已不再局限于临床诊断，已渗透入生物学研究的各个领域。本文就该技术的研究进展及应用做一简要综述。     

时间分辨荧光免疫分析技术及临床应用

标记免疫分析技术的出现使临床生化分析由常量分析向微量分析转变。20世纪80年代出现的时间分辨荧光免疫分析技术,以其独特的优势成为最有发展前途的非放射免疫标记技术。本文主要介绍时间分辨荧光免疫技术基本原理、基础试剂、基本技术以及近年来临床应用。     

北京举办时间分辨荧光免疫分析技术学习班

解放军总医院和 Pharmacia～LKB 公司联合举办第二期时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)技术学习班,于1989年10月16～21日在京进行。来自全国54名代表参加,请中外专家介绍这一八十年代又一新型非放射性免疫分析技术。它具有灵敏度高(10~(-17)mol),采用镧系元素 Eu~(3+)等作标记示踪物,稳定性好,无同位素污染,无衰变性,保存期长。专用自动测量仪操作方便。学习班上向学员提供 CFA、HCG、     

HBV-M时间分辨荧光免疫分析方法学评价

目的探讨TRFIA检测HBV-M方法的相关性、精密度、准确性和重复性。方法不同浓度的HBV-M标准血清及已知高浓度倍比稀释后的5项标志物混合血清标本用TRFIA法分别作定量检测。结果HBsAg、HBsAb、HBeAg3项测得的相对荧光强度与含量之间相关关系良好rHBsAg=0.9999,rHBsAb=0.9924,rHBeAg=0.9999,P<0.01,均有非常显著相关性;而HBeAb和HBcAb则相对较差,P>0.05;已知浓度5项标志物混合血清标本理论值和实测值的相关关系良好,r值均达到0.9980以上,P<0.01;结果准确度较好。结论HBV-MTRFIA精密度、重复性良好并具有较高的可靠性。     

时间分辨荧光免疫分析法定量测定乙肝两对半

目的：探讨时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）定量测定乙肝两对半的临床应用价值。方法：用TRFIA与ELISA对96例临床标本同时检测，并进行对比分析。结果：两种方法检测结果经配对卡方检验无显著性差异，P〉0．05。结论：TRFIA测定乙肝两对半具有灵敏、特异、定量、试剂稳定、无放射性污染等优点，具有良好的应用价值。