CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中的表达

目的探讨胃癌组织中CDK4和cyclin D1蛋白的表达及意义。方法收集胃癌石蜡标本40例,运用免疫组化法检测CDK4和cyclin D1蛋白的表达情况,分析其与胃癌的组织学类型、TNM分期和淋巴结转移的关系。结果40例胃癌标本中CDK4和cyclin D1蛋白表达的阳性率分别为65%和55%。CDK4与cyclin D1的表达呈正相关（P〈0.05）。CDK4和cyclin D1蛋白的表达与胃癌的病理类型、TNM分期和淋巴结转移均无显著相关性（P〉0.05）。结论CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中有较高的表达阳性率,两者具有协同作用,提示可能与胃癌的发生有密切关系。     

CDK4和Geminin在胶质瘤中的表达及其与预后的关系

目的：探讨细胞周期依赖性激酶4（cyclin-dependent kinase 4,CDK4）和Geminin在胶质瘤中的表达及其临床病理意义。方法：采用免疫组织化学方法,检测70例胶质瘤中CDK4和Geminin的表达,分析CDK4和Geminin的表达和其相关性,以及二者与胶质瘤临床病理因素及生存时间的关系。 结果：CDK4、Geminin在胶质瘤中的总阳性率分别为70.0%（49/70）、75.7%（53/70）;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中CDK4阳性率分别为52.8%（19/36）、84.6%（22/26）、100.0%（8/8）,Geminin阳性率分别为58.3%（21/36）、92.3%（24/26）、100.0%（8/8）,CDK4和Geminin在不同级别胶质瘤中的表达有显著差异（P＜0.05）。且二者表达呈正相关;CDK4、Geminin阳性表达与肿瘤大小及细胞核分裂像多少有关（P＜0.05）,与患者年龄、性别以及肿瘤组织有无坏死无关（P＞0.05）;Kaplan-Meier单因素统计分析结果显示 CDK4、Geminin阳性表达组的患者术后生存时间明显短于CDK4、Geminin阴性表达组（P＜0.001）。结论：CDK4和Geminin表达与胶质瘤的分级、预后有关,联合检测CDK4和Geminin有助于判断胶质瘤恶性程度及评估预后。     

Cyclin D1在胃癌中的表达

目的：探讨CyclinD1蛋白表达与胃癌发生发展及其与组织类型的关系。方法：有用S－P免疫组化技术，检测胃癌组织中CyclinD1蛋白的表达。结果：在63例胃癌标本中有20例CyclinD1阳性表达，阳性率为31．75％。50岁以下年龄组胃部CyclinD1阳性表达明显高于50岁以上年龄组（P＜0．05）。CyclinD1在胃癌不同组织类型中的表达无显著性差异（P＞0．05）。在癌周和萎缩性类，非典型增生的胃粘膜也可见CyclinD1阳性表达。结论：CyclinD1蛋白过度表达与胃癌发生发展有关，与胃癌的组织类型没有明显关系。     

Bmi-1、cyclin D1、p16在胃癌中的表达及意义

目的 探讨细胞周期调控因子Bmi-1、cyclin D1、p16在胃癌中的表达及临床意义.方法 应用免疫组化S-P法检测15例正常胃黏膜组织、35例不典型增生和60例胃癌组织中Bmi-1、cyclin D1、p16的表达.结果 胃癌组织中Bmi-1和cyclin D1的表达显著高于在正常胃黏膜组织和不典型增生中的表达(P<0.01),p16的表达显著低于在正常胃黏膜组织和不典型增生中的表达(P<0.01).Bmi-1的表达与胃癌瘤体大小、肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期密切相关(P<0.05);cyclin D1的表达与瘤体大小、肿瘤分化、临床分期密切相关(P<0.05);p16的表达与瘤体大小、淋巴结转移密切相关(P<0.05).Bmi-1与cyclin D1在胃癌组织中的表达呈正相关(P<0.05),Bmi-1与p16的表达呈负相关(P<0.05),cyclin D1与p16的表达也呈负相关(P<0.05).结论 Bmi-1、cyclin D1、p16与胃癌的发生、发展有关,它们可能是通过bmi-1-p16-cyclinD1通路来相互影响相互作用,从而影响胃癌的发生发展.     

卵巢上皮性肿瘤中cyclin D1和Ki-67蛋白检测及其临床意义

目的 探讨卵巢上皮性肿瘤中cyclin D1和Ki-67蛋白表达及其临床意义。方法 运用免疫组化方法,检测cyclin D1和Ki-67蛋白在30例卵巢腺癌、20例卵巢交界性肿瘤和80例卵巢癌中的表达情况,结合肿瘤的临床资料,分析其临床意义。结果 cyclin D1蛋白在卵巢良性腺瘤、交界性肿瘤和卵巢中的阳性表达率分别为3％、25％、26％。Ki-67蛋白在交界性卵巢肿瘤的过度表达率为15％,在卵巢癌中为39％,而且与肿瘤Silverberg氏分级有显著的相关性（P〈0.05）,其中47％的G2／G3级的卵巢癌出现Ki-67蛋白过度表达,其过表达率明高于G1级的肿瘤（17％）。结论 cyclin D1和Ki-67蛋白可以作为临床判断卵巢上皮性肿瘤良恶性有参考价值的分子标记;卵巢癌中Ki-67蛋白过度表达可成为评估肿瘤细胞恶性程度的指标之一。     

cyclin D1蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨cyclin D1蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测20例正常子宫内膜、38例不典型增生子宫内膜及126例子宫内膜癌组织中cyclin D1蛋白的表达,分析其与子宫内膜癌临床病理因素的关系及对生存率的影响。结果 cyclin D1蛋白表达阳性率及表达强度在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜及子宫内膜癌中呈明显上升趋势,三者之间cyclin D1蛋白表达存在统计学差异(P<0.001)。cyclin D1蛋白表达阳性率及表达强度在Ⅲ～Ⅳ期病例明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P=0.006);cyclin D1蛋白在组织学分级G1、G2、G3中的表达逐渐增加(P=0.010);淋巴结转移阳性者明显高于阴性者(P=0.008);Ⅱ型子宫内膜癌明显高于Ⅰ型(P=0.020)。cyclin D1蛋白表达与肌层浸润程度、腹腔液细胞学及患者年龄均无统计学相关(P>0.05)。cyclin D1蛋白阳性组患者的总体生存率明显低于阴性组患者(P=0.017)。结论 cyclin D1蛋白的过表达参与了子宫内膜癌的发生发展,提示其可作为有效的预后因子。     

p27kip1在胃癌中的表达和意义

目的 探讨p27kip1（细胞周期素依赖性激酶抑制因子）在胃癌中表达及其与胃癌临床病理学特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测p27kip1在60例胃癌组织原发灶和淋巴结转移灶中的表达。结果 p27kip1在胃癌的阳性表达率为43．33％（26／60）,阳性细胞定位于细胞浆,在高分化及Ⅰ,Ⅱ期胃癌高表达（P＜0．05）,且与淋巴结转移密切相关（P＜0．01）。结论 p27kip1表达与胃癌组织分化程度、淋巴结转换呈负相关;p27kip1表达对估计胃癌预后有一定意义。     

Hedgehog通路中PTCH1蛋白在人胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Hedgehog通路中PTCH1蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌发生的关系。方法应用免疫组化法检测PTCH1蛋白在40例胃癌及癌旁组织中的表达情况以及分布规律,分析PTCH1蛋白的表达与胃癌的临床生物学特征的关系。结果 PTCH1蛋白在胃癌组织中的表达比癌旁组织低（50.0%vs87.5%）,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。PTCH1蛋白表达与胃癌肿瘤大小和转移无相关性,与肿瘤分化程度有关,低分化癌组织中PTCH1蛋白表达率明显低于中高分化癌组织中表达率（41.4%vs72.7%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 PTCH1蛋白在胃癌组织中的低表达与胃癌的发生、发展密切相关,提示PTCH1蛋白检测有可能成为临床新的胃癌的早期诊断标志物并可预测患者的预后及转归。     

BAG-1、CDK4蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的：探讨BAG-1、CDK4蛋白在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法：应用免疫组化SP法对80例结直肠癌组织、40例结直肠腺瘤组织及25例癌旁正常结直肠组织中的BAG-1、CDK4进行检测。结果：BAG-1、CDK4在结直肠癌中过度表达,阳性率分别为80．0％（64／80）和65．0％（52／80）,并且BAG-1、CDK4与肿瘤的分化程度成反比。有淋巴结转移的结直肠癌BAG-1、CDK4的阳性率分别为96．7％（29／30）和83．3％（25／30）．无淋巴结转移的结直肠癌阳性率分别为70．0％（35／50）和54．0％（27／50）,两者比较,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。侵及浆膜层者CDK4蛋白表达阳性率明显高于未侵及浆膜层者,阳性率分别为71．4％（40／56）和35-3％（12／34）,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论：BAG—1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;CDK4的过度表达还与浸润深度密切相关;结直肠癌的发生机制涉及BAG-1、CDK4调节环路中多个基因的异常。     

胃癌组织中CyclinD1与P27蛋白表达及其意义

目的 探讨细胞周期蛋白(CyclinD1)、细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白(P27)在胃癌组织表达及其意义.方法 应用组织微阵列技术结合免疫组织化学方法(PV-9000法)检测CyclinD1、P27在正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的表达.结果 正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中CyclinD1的表达率分别为17.6%、32.7%、65.5%,P27的表达率分别为61.9%、23.9%、13.3%,三组间CyclinD1、P27的表达率比较差异有显著性(H=54.35、46.92,P＜0.01).CyclinD1、P27在肿瘤中的表达呈负相关(r=-0.209,P＜0.05).CyclinD1过表达和P27表达下降与胃癌浸润程度和淋巴结转移有关(X2=4.86～9.04,P＜0.05).结论 CyclinD1过表达和P27表达下降在胃癌的发展过程中起重要作用,对早期预测癌细胞的转移潜能、判断胃癌预后有重要的临床意义.     

胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达及其意义

目的研究胃黏膜癌变过程中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1及CDK4的表达及其意义.方法采用免疫组化方法对50例胃癌,18例癌旁肠化生,7例癌旁轻中度不典型增生及9例重度不典型增生组织中细胞周期调控基因Rb、Cyclin D1 及CDK4的表达情况进行检测和比较.结果 Rb基因的过度表达在不典型增生及胃癌中检测到,在胃癌组织中的表达强度明显大于重度不典型增生病变(P<0.05),Cyclin D1 及CDK4的表达仅发现在胃癌组织中,胃癌组织中Cyclin D1表达阳性的13例病例中有5例同时表达Rb,2例同时表达CDK4;Rb阳性的17例胃癌组织中有3例同时表达CDK4.结论 Rb,cyclin D1和CDK4的过度表达可能参与胃癌的发生,Rb的过度表达出现在胃黏膜癌变过程的较早期阶段,Cyclin D1和CDK4的过度表达属于胃癌变过程中的较晚期的基因事件.     

P16INK4A、CDK4和cyclin D1在子宫平滑肌肿瘤中的表达

目的：探讨P16^INK4A、CDK4和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）在子宫平滑肌肿瘤中的表达及意义。方法：应用免疫组化SP法及原位杂交法检测P16^INK4A、CDK4和cyclin D1蛋白和P16^INK4A mRNA在21例子宫平滑肌肉瘤（leiomyosarcoma,LMS）、34例子宫平滑肌瘤（leiomyoma,LMA）和22例正常子宫平滑肌组织中的表达情况。结果：P16^INK4A、CDK4和cyclin D1蛋白在LMS、LMA和正常平滑肌组织中的阳性率分别为62%、90%、57%;15%、26%、53%;10%、10%、0%。P16INK4A、CDK4在LMS和LMA间的表达差异均有统计学意义（P〈0.05）;cyclin D1蛋白在LMS和LMA中的表达率均明显高于正常平滑肌组织,而在LMS和LMA间表达率差异无显著性。原位杂交结果与免疫组化结果基本一致。结论：P16^INK4A、CDK4在肉瘤发生过程中具有重要作用;cyclinD1过表达是常见的分子水平改变,且可能出现较早;检测P16^INK4A、CDK4蛋白有助于鉴别子宫平滑肌肉瘤和平滑肌瘤。     

p53和cyclin D1蛋白在甲状腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨p53和cyclin D1蛋白在甲状腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法用免疫组化方法对68例甲状腺癌、46例甲状腺腺瘤和瘤旁甲状腺组织进行p53和cyclin D1的检测。结果 p53和cyclin D1在甲状腺癌组织中的阳性表达率为58.82%和63.23%,均高于其在甲状腺腺瘤和甲状腺腺瘤旁甲状腺组织中的阳性率,差异均有显著性（P〈0.01）。不同病理类型甲状腺癌组织中,p53和cyclin D1在乳头状癌中的阳性率分别为37.83%和40.54%,低于其在滤泡癌,髓样癌和未分化癌组织中的阳性率,差异均有统计学意义（P〈0.05）。p53和cyclin D1在甲状腺癌的阳性表达呈正相关（r=7.78,P〈0.05）。结论 p53和cyclin D1在甲状腺癌组织中的表达与癌细胞分化及恶性程度似有一定的关系。     

T24细胞系中CyclinD1、CDK4、p16和PCNA的表达状态及其意义

目的研究人膀胱移行细胞癌(TCC)T24细胞系中Cyclin D1、CDK4、p16和PCNA的表达及其意义.方法用免疫组化方法检测T24细胞系在细胞周期各时期Cyclin D1、CDK4、p16和PCNA的表达.结果在G1、S和G2-M期,Cyclin D1阳性细胞数分别为28.4%、46.8%和64.7%CDK4阳性细胞数分别为41.2%、53.7%和63.7%;PCNA阳性细胞数分别为41.3%、59.9%和71.1%.在G1、S、G2-M期间均有显著性差异(P＜0.01).各期细胞中均未检出p16阳性细胞.结论(1)在正常(非肿)细胞中CyclinD1和CDK4的表达主要在G1期,然而,在T24细胞系中的表达在S期继续增高并在G2-M期达高峰,在肿瘤细胞中Cyclin D1和CDKM4这种异常的表达形式和p16蛋白缺失可能导致细胞周期进程的正常调控机制丧失.(2)PCNA的表达状态可作为判断膀胱TCC组织病理分级和恶性程度的一个重要参考指标.     

P16和Cyclin D1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义

目的　探讨P16和cyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的异常表达及与生物学行为的关系。方法　应用免疫组化S -P法检测 5 8例皮肤鳞状细胞癌中 p16和cyclinD1的表达水平。结果　 5 8例皮肤鳞状细胞癌中 p16和cyclinD的阳性表达率分别为 6 9%和 5 3.4 %。结论　p16和cyclinD1的异常表达在皮肤鳞状细胞癌的发生发展中起重要作用 ,可作为判断恶性程度 ,评估预后的指标。     

Cyclin D1在喉癌和下咽癌中的表达及临床意义

目的探讨喉和下咽鳞状细胞癌中Cyclin D1的表达与临床和病理特征的关系.方法应用免疫组化Envision二步法检测喉癌和下咽癌60例中Cyclin D1的表达情况,并将其表达与喉癌和下咽癌的患者性别、临床分类、临床分期、病理分化程度、颈淋巴结转移情况及预后做统计学分析.结果 Cyclin D1在喉癌和下咽癌中表达率增加,其表达与喉癌和下咽癌的病理分化程度、颈淋巴结转移及预后相关,但与患者性别、肿瘤原发部位、临床分期无相关性.结论 Cyclin D1异常表达在喉癌和下咽癌的发生发展中发挥了重要作用,可作为判断喉癌和下咽癌恶性程度、颈淋巴结转移和预后的一个生物学指标.     

涎腺腺样囊性癌组织中细胞周期相关蛋白cyclin D1与Ki-67的表达

目的:探讨涎腺腺样囊性癌组织中cyclin D1、Ki-67的表达及其与涎腺腺样囊性癌的发生发展及临床生物学行为特点的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测41例涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)、15例涎腺混合瘤(pleomorphic adeno-ma,PA)及12例正常涎腺组织(normal salivary gland,NSG)中cyclin D1、Ki-67蛋白的阳性表达率和标记指数(labeling index,LI)。结果:三组中的cyclin D1阳性表达率分别为0%、53.3%、68.3%,PA组与NSG组、SACC组与NSG组组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);三组的cyclin D1 LI分别为2.35、16.57、44.63,三组总体及组间比较均有统计学意义(P<0.05);Ki-67在NSG组、PA组、SACC组的阳性表达率分别为0.0%、0.0%和58.5%,SACC组与NSG组、SACC组与PA组组间差异有统计学意义(P<0.05)。三组的Ki-67 LI分别为0.00、3.44、20.22,在三组总体及组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);腺-管型和实性型SACC中Ki-67的阳性表达率分别为46.7%、90.9%,Ki-67 LI分别为4.64、51.85,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);cyclin D1与Ki-67在SACC中的表达存在正相关关系(rs=0.703,P<0.05)。结论:cyclin D1的高表达促进了细胞的异常增殖,在SACC的发生发展中发挥作用,检测Ki-67表达水平可用以辅助诊断腺样囊性癌的分型。     

人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定

【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。