高效液相色谱法测定SHR尿液中犬尿喹啉酸含量的变化

目的建立高效液相色谱荧光法测定尿液中犬尿喹啉酸(KYNA)含量的方法,观察不同周龄自发性高血压大鼠(SHR)及其正常对照大鼠(WKY)的尿KYNA含量变化。方法高效液相色谱荧光法采用的色谱柱为ODS色谱柱,流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液(pH4.5)和乙腈(体积95∶5),激发波344 nm,发射波398 nm。选择4周龄WKY大鼠和SHR各4只、16周龄WKY大鼠和SHR各6只检测24 h尿液中的KYNA含量,并进行统计学分析。结果KYNA浓度检测的线性范围0.220-33.000nmol/mL(R2=0.999 1),回收率为(90.37±8.47)%,日内差异为4.70%~9.40%,日间差异为5.20%~7.50%。4周龄WKY组24 h尿KYNA含量为(41.251±22.663)μg/24 h尿,SHR组为(35.387±10.814)μg/24 h尿,两组间无统计学差异(P<0.05);16周龄SHR尿KYNA含量为(39.511±15.985)μg/24 h尿,较WKY组(90.690±42.189)μg/24 h尿明显降低(P<0.05)。结论高效液相色谱荧光方法具有灵敏、稳定、特异性高等特点,可用于临床检测尿KYNA。成年SHR尿KYNA含量较WKY大鼠减少,提示可能与高血压的发生发展有关。     

精神分裂症患者血清犬尿喹啉酸和犬尿喹啉酸与色氨酸比值变化的临床意义

目的 初步探讨血清犬尿喹啉酸(KYNA)含量及犬尿喹啉酸/色氨酸(TRP) 比值(KA/T)在精神分裂症患者抗精神药物治疗中的意义.方法 测定并比较了健康对照组、初始发病未用药SCH患者(SCH I组)、坚持用药SCH患者(SCH II组)血清KYNA、TRP含量及KA/T值.结果 与健康对照组血清KYNA (23.30±8.31)μmol/L、TRP(47.59±10.43)μmol/L比较,SCH I组患者血清KYNA(29.47±12.01)μmol/L和TRP(54.50±9.56)μmol/L含量均升高; SCH II组血清KYNA含量及KA/T比值下降.结论 抗精神药物治疗可能使血清KYNA含量和KA/T比值降低.     

精神分裂症患者血清犬尿氨酸和犬尿喹啉酸水平及临床意义

目的 研究精神分裂症(SZ)患者血清犬尿氨酸(KYN)和犬尿喹啉酸(KYNA)的浓度变化以及不同临床分型患者之间二者浓度的差异性.方法 采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测SZ患者和正常对照人群以及不同临床分型患者血清KYN和KYNA含量并计算KYN/KYNA比值.结果 SZ患者血清KYN水平[(2.148±0.605)μmol/L]与正常对照组[(2.108±0.592)μmol/L]比较差异无显著性意义( t =0.675,P >0.05),血清KYNA水平[(24.231±6.831)nmol/L]低于正常对照组[(29.420±7.595)nmol/L]( t =1.657,P <0.05), KYN/KYNA比值(111.496±23.797)高于正常对照组(80.330±17.639)( t =1.654,P <0.05).偏执型SZ患者血清KYN含量低于青春型,血清KYNA含量高于单纯型和青春型;青春型KYN/KYNA比值高于偏执型和未分型,均差异有显著性( P <0.05).结论 SZ患者血清KYNA水平和KYN/KYNA比值可为SZ的临床诊断和治疗提供实验室依据.     

帕金森病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义

目的 研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清犬尿氨酸(kynurenine,KYN)、犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)和色氨酸(trptophane,TRP)浓度及代谢改变,探讨其临床意义.方法 采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测16例首发PD患者、36例美多巴(Madopar)治疗PD患者、20例正常对照人群血清KYN、KYNA和TRP的浓度,比较血清KYN、KYNA、TRP以及KYNA/KYN和KYN/TRP比值的差异性.结果 美多巴治疗PD患者血清KYNA水平和KYNA/KYN比值较首发PD患者和正常对照人群显著升高(P<0.01);首发PD患者及美多巴治疗PD患者血清中TRP水平较正常对照人群显著升高(P<0.01).结论 采用HPLC-FLD检测PD患者血清中的KYN、KYNA及TRP的含量,可为帕金森病的临床诊断和药物治疗提供部分实验室依据.     

帕金森氏病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义

目的 研究帕金森氏病 (Parkinson’s disease, PD) 患者血清犬尿氨酸（kynurenine, KYN）、犬尿喹啉酸（kynurenic acid, KYNA）和色氨酸 (trptophane, TRP) 浓度及代谢改变，探讨其临床意义。 方法 采用高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）检测16例首发PD患者、36例美多巴（Madopar）治疗PD患者、20例正常对照人群血清KYN、KYNA和TRP的浓度，比较血清KYN、KYNA、TRP以及KYNA/KYN和KYN/TRP比值的差异性。结果美多巴治疗PD患者血清KYNA水平和KYNA/KYN比值较首发PD患者和正常对照人群显著升高（分别P＜0.01）；首发PD患者及美多巴治疗PD患者血清中TRP水平较正常对照人群显著升高（分别P＜0.01）。结论 采用高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）检测PD患者血清中的KYN、KYNA及TRP的含量简便、快速、灵敏、特异，可为帕金森氏病的临床诊断和药物治疗提供部分实验室依据。     

高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量。方法 将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12)。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C₁₈(250×4.6 mm,5 μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15∶85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20 ℃。结果 大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+378730,R²=0.9984和y=7810.5x-16635,R²=0.9967;最低检测浓度为5 μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50~2000.00 μg/ml,低浓度线性范围为6.25~100.00 μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%~10.8%和3.8%~9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35±254.52)μg/ml比(51.56±36.34)μg/ml,(687.35±234.53)μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24 h尿草酸含量:(11.23±4.12)mg比(0.87±0.45)mg,(9.89±3.55)mg比(0.77±0.65)mg;P均＜0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义(P均＞0.05)。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。     

高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量。方法将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12)。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C18(250×4.6 mm,5μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15∶85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20℃。结果大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+378730,R2=0.9984和y=7810.5x-16635,R2=0.9967;最低检测浓度为5μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50~2000.00μg/ml,低浓度线性范围为6.25~100.00μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%~10.8%和3.8%~9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35±254.52)μg/ml比(51.56±36.34)μg/ml,(687.35±234.53)μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24 h尿草酸含量:(11.23±4.12)mg比(0.87±0.45)mg,(9.89±3.55)mg比(0.77±0.65)mg;P均<0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定尿液香草扁桃酸的含量

香草扁桃酸 (３ -甲氧 -４ -羟 -苦杏仁酸 ,ＶＭＡ)是儿茶酚胺的代谢产物。测定尿中ＶＭＡ水平 ,临床上主要用于诊断和鉴别诊断嗜铬细胞瘤及神经母细胞瘤 ［１ ,２］。传统的测定尿中ＶＭＡ方法所受干扰因素多、准确度低。国内外相继报道用高效液相色谱电化学检测和紫外检测联合进行［２ ,３］。由于电化学检测器价格昂贵 ,普及率低 ,而紫外光检测器一般高效液相色谱仪都配备。笔者参考了国内外已有文献 ,建立了一种仅用高效液相色谱紫外光检测器进行检测ＶＭＡ的方法。１．仪器与试剂３３２型高效液相色谱仪(包括１１０Ｂ双泵、２１０Ａ进…     

犬尿喹啉酸与阿尔茨海默病的研究进展

以阿尔茨海默病(AD)为主的认知障碍疾病给公共和医疗系统带来了沉重的负担,在AD中可观察到犬尿氨酸途径的紊乱。其中代谢物犬尿喹啉酸(KYNA)一般被认为是神经保护性物质,KYNA的水平在AD患者的外周和中枢会随着AD病情的发展而发生变化。KYNA可能是认知损害的一种标志物,其水平的升高可能是一种代偿性的保护机制,也可能是对认知功能的损害,目前对其功能尚无定论,在认知功能疾病中是一个研究热点,文章就KYNA在AD中的作用进行综述。     

高效液相色谱法测定广东引种苏合香中桂皮酸的含量

用高效液相色谱法测定了广东引种苏合香中桂皮酸的含量。结果表明，广东引种苏合香中游离桂皮酸含量为8．05％，总桂皮酸含量为35．85％，符合药典规定的桂皮酸含量要求。     

高效液相色谱法同时测定人尿中假尿核苷和肌酐

采用反相高效液相色谱同时测定人尿中假尿核苷(ψ)和肌酐(Cr)。尿样经过滤、稀释后可直接进样,具有简便、快速和准确的特点。并探讨了ψ/Cr 值与肺癌的相关性.利用本法测定了69例正常成人,平均值为23.1±4.4μmol/mmol,22例肺部感染患者为26.2±4.2μmol/mmol,43例肺癌患者为32.8±7.9μmol/mmol。肺癌患者比肺部感染者及正常者有显著增高(P<0.001),同时讨论了ψ/Cr 值作为一种新的肺肿瘤标志物的临床意义。     

高效液相色谱测定尿中香草扁桃酸含量

目的 :建立测定尿中的香草扁桃酸 (VMA)含量的高效液相色谱法。方法 :以Nova PakC18柱为分析柱 ,流速是 0 9ml·min-1,流动相为 40mmol·L-1NaH2 PO4 液 (内含Na2 EDTA和辛基磺酸钠各为 5 0mg·L-1,pH3.0 ) ,采用电化学检测器和利用内标法测定了 30例正常人 2 4h尿中的VMA含量。结果 :当VMA浓度为 5～ 2 0 0 μmol·L-1时呈良好的线性关系。VMA的平均回收率为 99 1% ,平均批内变异系数为 5 8% ,平均批间变异系数为 7 7% ,最低检出量是 5 3 2μg。标本量为 10 0 μl时的最低检出浓度为 0 2 8μmol·L-1;正常人 2 4h尿中VMA含量为 (18 13± 6 17) μmol。结论 :该方法能准确测定尿中VMA含量 ,适合临床常规应用。     

HPLC法测定饮料食品中的邻苯二甲酸酯类含量

目的 建立高效液相色谱法测定饮料食品中邻苯二甲酸酯类含量的方法.方法 利用Cleanert DEHP-SPE萃取柱富集和净化样品,以乙腈/水为流动相,采用梯度洗脱,二极管阵列检测器外标法定量.结果 该方法10种邻苯二甲酸酯类回收率范围为70.9％～125.7％,相对标准偏差为1.47％～4.41％.结论 HPLC法精密度和灵敏度较高,操作简便.     

高效液相色谱测定尿中香草扁桃酸含量

OBJECTIVE: To develop a high performance liquid chromatography(HPLC) for determining vanillylmandelic acid(VMA) in urine. METHODS: The analytical column was packed with Nova-Pak C18. Flow rate was 0.9 ml.min-1. The mobile phase was 40 mmol.L-1 NaH2PO4 buffer. The VMA of 30 healthy people in 24 hour urine were tested by the internal standard method and with electrochemical detector. RESULT: The linear range was from 5 mumol.L-1 to 200 mumol.L-1. The mean analytical recovery rate was 99.1%. The mean within-day coefficient of variation(CV) was 5.8%, and the mean day-to-day CV was 7.7%. The detection limit was 0.28 mumol.L-1. The VMA of 24 hour urine was 18.13 +/- 6.17 mumol in healthy people. CONCLUSIONS: The method is suitable for routine determination of VMA in urine.     

Determination of gouty arthritis' biomarkers in human urine using reversed-phase high-performance liquid chromatography

Creatinine, uric acid, hypoxanthine and xanthine are important diagnostic biomarkers in human urine for gouty arthritis or renal disease diacrisis. A simple method for simultaneous determination of these biomarkers in urine based on reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) with ultraviolet (UV) detector was proposed. After pretreatment by dilution, centrifugation and filtration, the biomarkers in urine samples were separated by ODS-BP column by elution with methanol/50 mM NaH₂PO₄ buffer solution at pH 5.26 (5:95). Good linearity between peak areas and concentrations of standards was obtained for the biomarkers with correlation coefficients in the range of 0.9957–0.9993. The proposed analytical method has satisfactory repeatability (the recovery of data in a range of creatinine, uric acid, hypoxanthine and xanthine was 93.49–97.90%, 95.38–96.45%, 112.46–115.78% and 90.82–97.13% with standard deviation of <5%, respectively) and the limits of detection (LODs, S/N≥3) for creatinine, uric acid, hypoxanthine, and xanthine were 0.010, 0.025, 0.050 and 0.025 mg/L, respectively. The established method was proved to be simple, accurate, sensitive and reliable for the quantitation of gouty arthritis' biomarkers in human urine samples. The ratio of creatinine to uric acid was found to be a possible factor for assessment of gouty arthritis.     

高效液相色谱法测定复方苯甲酸凝胶中苯甲酸和水杨酸的含量

目的:研制复方苯甲酸凝胶,建立高效液相色谱(HPLC)测定制剂中苯甲酸和水杨酸含量的方法。方法:以卡波姆-940为基质,用常规方法制备。以Ultrasphere-ODS柱(5μm,4.6mm×250mm)为固定相;以甲醇-水(40:60v/v)为流动相;检测波长227nm。结果:制剂稳定性好,平均回收率分别为苯甲酸100.31%,相对标准偏差(RSD)1.10%;水杨酸99.75%,RSD1.53%。苯甲酸和水杨酸的线性范围分别为:16～75mg·L-(1r=0.9992),7.5～40mg·L-1(r=0.9990)。结论:本制剂工艺简单、质量稳定,含量测定方法准确、快捷、适用。     

三七药材指纹图谱的研究

目的研究三七药材指纹图谱。方法采用反相高效液相方法(HPLC):C18(250.0mm×4.0mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长203nm。结果建立了三七药材的HPLC指纹图谱。结论该方法简单,重现性好,具可操作性,能用于三七药材的鉴别与评价。     

正常人血和尿中麦芽糖的廓清

目的建立麦芽糖分析方法,研究正常志愿者输入不同浓度麦芽糖溶液的廓清变化。方法用高效液相色谱仪分析血浆和尿样中的麦芽糖;12名男性健康志愿者,分别接受以0.2、0.3、0.5g.kg-1.h-1的给药速率静脉滴注麦芽糖注射液4h,在滴注前和滴注后不同时间点采集血样、不同时间段收集尿液测定麦芽糖和葡萄糖。结果血样分析麦芽糖的准确性和回收率的变异系数(RSD)分别在3.68%～4.58%和0.44%～4.83%之间;尿样分析准确性和回收率的RSD分别在2.91%～7.62%和0.95%～8.27%之间。健康志愿者以0.2、0.3、0.5g.kg-1.h-1的给药速率静脉滴注麦芽糖注射液4h后,血中麦芽糖的浓度随给药剂量的增加而成比例增加,具有良好的剂量依赖性(r>0.99)。3个高、中、低不同浓度的麦芽糖在输入12h后血中麦芽糖的浓度均回到起始点,麦芽糖在血中消除较快。在输入麦芽糖后2h,尿中麦芽糖和葡萄糖排出增加,2～4h达高峰,6h后减少,24h完全回到零点。结论在0.2～0.5g.kg-1.h-1的给药速率下,输注麦芽糖基本不会导致体内血糖浓度的明显升高,在上述浓度下具有很好的廓清能力。建议除需要立即补充大量能量时,可考虑采用较快的输注速率,常规补充能量时宜采用不超过0.3g.kg-1.h-1的输注速率。     

高效液相色谱法测定马齿苋提取物中α-亚麻酸和亚油酸的含量

目的：运用高效液相色谱法分析测定马齿苋提取物中α-亚麻酸和亚油酸的含量,为马齿苋提取物的质量控制提供一种简单快捷的方法。方法：根据以下色谱条件进行分析。色谱柱：Shi m-pack CLC-ODS色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;保护柱：DIKMA EasyGuard C18（10mm×4.6mm）;流动相：甲醇-乙腈-0.5%磷酸水溶液（602218）;柱温：26℃;检测波长：210nm;流速：1.1ml/min;进样量：25μl。结果：α-亚麻酸的回归方程为A=2.9158×107C＋12250.9,r=0.9999,线性范围为0.0162-0.1944mg/ml,平均加样回收率为100.5%。亚油酸回归方程为A=1.3664×107C-9759.39,r=0.9999,线性范围为0.0169-0.2030mg/ml,平均加样回收率为100.8%。结论：高效液相色谱法简单、准确、快速,可作为马齿苋提取物中α-亚麻酸和亚油酸的定量分析方法。