湖南省肿瘤标志物项目(体液类)检测质量现状分析

[目的]通过对湖南省各级临床实验室肿瘤标志物(TM)项目(体液类)检测室间质量评价情况与室内质控的数据分析,评估全省实验室该项目分析性能,提高检测结果的准确性、可重复性和可比性,促进实验室质量改进.[方法]对2008年至2012年肿瘤标志物项目(体液类)检测的室间质量评价(EQA)回报数据和室内质控(IQC)回报的相关情况进行分析.[结果]TM项目EQA参评实验室合格率逐年上升;各项目检测试剂分组数据和方法学分组数据经无重复双因素方差分析,不同方法分组各项目统计结果合格率及变异系数(CV)值的组间差异有统计学意义(P＜0.05),不同试剂分组的CV值差异亦有统计学意义(P＜0.05).IQC图回报率均值12.75％,呈逐年上升趋势.[结论]本省TM EQA参评实验室过少,EQA样本的靶值代表性待提高;TM项目EQA的能力验证(proficiency testing,PT)得分和CV均值与实验室选择的检测系统有关;分组测定EQA结果以电化学发光组准确度最好,试剂分组以进口试剂EQA结果精密度较好.全省各实验室应加强室内质量控制工作.     

上海地区伊立替康药物代谢相关基因检测室间质量评价结果分析

目的以抽取自人全血的基因组DNA为质控样本,开展伊立替康代谢相关基因室间质量评价(EQA)计划,评估参评实验室检测能力,提高其检测质量。方法通过对人类基因组DNA的测序,获得包含多种尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1(UGT1A1)*6和UGT1A1*28不同基因型组合的样本,制备EQA质控样本盘。每个样本盘包含5支样本,要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测,并上传检测结果。汇总各实验室各样本的总体符合率,分析不同检测方法的符合率和检测错误类型。结果 2019年2次EQA中,满分的实验室分别占88.00%(22/25)和86.36%(19/22),样本检测的总符合率分别为96.33%(236/245)和96.74%(208/215);其中,荧光分子杂交法样本符合率均为100.00%,Sanger测序法样本符合率分别为91.82%(101/110)和93.00%(93/100)。结论参评实验室检测的总体准确率较高,但个别实验室检测能力仍有待提高,尤其是需加强实验室自建的Sanger测序法的全程质量控制。     

人乳头瘤病毒16和18型核酸检测用质控品制备及其应用

目的制备可模拟真实临床标本的HPV-16和HPV-18核酸检测用质控品,并用于上海地区临床实验室的室间质量评价。方法分别选择整合有HPV-16和HPV-18 L1基因的宫颈癌细胞系(Siha和Hela)进行培养,收集细胞后用HPV国际标准品定值并分装,对其均匀性和稳定性进行评价,然后将样本盘发送至参评实验室,对回报结果进行分析评价。结果均匀性评价结果显示质控品间均匀性良好,稳定性评价结果表明质控品检测结果随时间延长无明显趋势变化。参评实验室对高浓度样本的检测符合率较高,低浓度样本的检测符合率较低。对于不分型项目,26%参评实验室由于上报假阴性结果导致出错。对于分型项目,不同检测方法的结果间没有显著差异,样本检测出错主要是因为错检或漏检某一亚型所致。结论制备的核酸检测用质控品的均匀性和稳定性良好,可有效用于临床实验室室间质量评价。质评结果显示上海地区参评实验室HPV核酸检测质量整体较好,个别实验室检测能力尚需提高。     

上海地区表皮生长因子受体基因突变检测室间质量评价

目的分析上海地区临床实验室表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测项目室间质量评价(EQA)的总体情况,对存在问题进行分析,以确保检测质量。方法 2016年2次EQA样本盘各包含5份样本,要求各参评实验室在规定时间内将检测结果上传至上海市临床检验中心数据库。依据回报结果计算各实验室的EQA成绩和样本符合率,并汇总阳性样本和阴性样本的总体符合率。结果 2016年2次EQA分别收到25和30份有效回报结果,分别有20(80%)和26(87%)家实验室检测结果完全正确,分别有0(0%)和1(3%)家实验室EQA成绩80分;10份样本的符合率最高为100%,最低为88%;阳性样本和阴性样本的总体符合率分别为95.76%和97.27%;复合突变漏检是样本不符合的主要原因,达50%(5/10)。结论上海地区临床实验室EGFR基因突变检测总体符合率较高,但仍存在问题,复合突变漏检是主要原因;临床实验室应加强质量控制以保证检测结果的准确性。     

浙江省梅毒血清学检测室间质量评价调查

目的 了解浙江省县(区)级以上医疗卫生机构实验室梅毒血清学检测水平,从而促进检测质量持续改进. 方法 制备梅毒血清学质控品发放到各参评机构,要求进行梅毒特异性的试验定性检测和非特异性试验的定性、定量检测,将回报的检测结果进行统计分析. 结果 496家参评机构中优秀470家(94.76%),合格16家(3.22%),不合格10家(2.02%),其中特异性试验的符合率为99.31%,非特异性试验定性、定量检测符合率分别为97.94%和92.62%. 结论 各参评机构梅毒血清学检测整体质量较好,其中特异性试验质量要明显优于非特异性试验,但部分机构特别是妇幼机构的实验室检测能力还有待提高.     

上海地区遗传性耳聋基因检测室间质量评价

目的通过开展遗传性耳聋基因检测室间质量评价(EQA),评估上海地区临床实验室遗传性耳聋基因检测能力,以提高检测质量。方法 2017年EQA共涉及4个耳聋相关基因的9个突变位点,样本盘包含5个样本,样本类型为干血斑。要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测并上报检测结果。计算各实验室成绩、不同样本的总体符合率及不同检测方法的符合率,统计检测错误类型。结果共收到18份有效回报结果。77.78%的实验室回报结果完全正确,5.56%的实验室出现错误结果但总成绩合格,16.67%的实验室成绩不合格。阴性样本(野生型样本)的检测符合率为100%,阳性样本(突变型样本)的检测符合率为93.59%。共出现检测错误10个,错误类型集中表现为假阴性。结论上海地区临床实验室遗传性耳聋基因检测总体准确率较高,质量控制对于保证检测结果的准确性具有十分重要的作用。     

临床实验室室间质量评价不同计划的结果评价探讨与研究

在室间质量评价计划（能力验证）中,对各参评实验室回报结果的处理和评价是最为重要的环节之一,直接影响到室间质量评价计划的有效性,这也是室间质量评价组织者和参评单位最常出现争议的环节。室间质量评价计划（external quality assessment,EQA) 的结果和反馈报告应及时有效,应包括（但不限于）:定量、半定量和定性项目所有参评实验室结果的统计分析、总体和不同分组中离群值的判断与剔除、单样本和多样本以及单参数和多参数的结果和分布的评价、指定值的确定、标准差的确定、图形显示,以及在不同室间质量评价计划中多个样本和参数的整合信息等。室间质量评价计划结果的处理与评价方式一直在向着更加客观与合理的方向发展。     

上海地区[STBX]PIK3CA[STBZ]基因突变检测室间质量评价分析

摘要：目的：利用室间质量评价评估上海地区临床实验室[STBX]PIK3CA[STBZ]基因突变的检测能力。 方法：选用含有特定[STBX]PIK3CA[STBZ]突变型的福尔马林固定石蜡包埋细胞样本作为室间质评样本，对其均匀性和稳定性进行评价后，将5个样本随机编号后发送至参评实验室，要求实验室在规定时间内检测并回报结果，综合分析评价回报结果。 结果：均匀性和稳定性均符合中国合格评定国家认可委员会对能力验证样品的要求。2018年和2019年分别收到有效回报结果28份和19份，回报结果完全正确的实验室分别为78.6%（22/28）和89.5%（17/19），成绩不合格实验室分别为17.9%（5/28）和10.5%（2/19）。样本的整体符合率分别为86.4%（121/140）和93.7%（89/95），其中假阳性率为8.6%（12/140）和2.1%（2/95），假阴性率为8.3%（7/84）和5.3%（4/76）。 结论：上海地区临床实验室[STBX]PIK3CA[STBZ]基因突变检测质量整体较好，但部分实验室检测能力尚需提高。实验室通过参加室间质量评价可发现自身问题，持续改进并提高其检测质量。     

TORCH血清学检测室间质量评价分析

目的 对目前国内临床实验室TORCH血清学检测情况进行评价.方法 通过室间质量评价的方式:每年进行2次室间质评,每次发放5支质评样本;要求各临床实验室在规定时间内检测、回报检测结果、所用的检测方法、仪器和试剂;卫生部临床检验中心对各实验室的结果进行统计分析,将结果反馈给各实验室,同时对检测结果、试剂情况进行评价.结果 2007年单纯疱疹病毒(HSV)IgM、风疹病毒(Rubella virus)IgM和巨细胞病毒(CMV)lgM 3个项目临床实验室检测合格率均达到了80%以上,弓形虫(Toxo)IgM符合率较低,仅53.1%.试剂的使用评价分析显示,不同试剂各个项目的 阳性符合率均较低(均小于80%).相同的试剂在不同的实验室检测得到的样本吸光度(A)值与阳性结果判定值的比值(S/CO值)有很大差异.结论 TORCH血清学检测室间质量评价反映出多数实验室得到了满意的成绩(PT≥80),但阳性样本的检出率较低,除试剂的原因,也有实验室工作人员操作方面的原因.     

上海市及其他地区临床实验室B 族链球菌核酸检测室间质量评价分析

目的 通过开展B 族链球菌（group B Streptococcus,GBS）核酸检测室间质量评价计划（简称室间质评）,评价参评实验室检测能力,分析存在的问题,提高检测质量。方法 2021 年GBS 核酸检测室间质评计划为一年两次,每次质评计划样本盘包含4 支由灭活的GBS 培养液稀释而成的不同浓度阳性样本和1 支阴性样本。样本冷链寄送至各参评实验室,并要求其在规定时间内按要求检测并回报结果,依据回报结果计算各实验室成绩,汇总不同样本的总体符合率。结果 2021 年两次室间质评分别有33 家实验室报名参加,收到有效报告31 份和32 份。所有实验室室间质评成绩均合格,两次结果完全正确的实验室分别有87.10%（27/31）和96.88%（31/32）,样本的总体符合率为97.42%（151/155）和99.38%(159/160)。结果汇总中共出现检测错误5 例,错误类型集中表现为假阴性。结论 各参评实验室GBS 核酸检测能力总体较高,个别实验室检测能力尤其是弱阳性样本检测能力有待提高。通过参加室间质评计划能帮助实验室及时发现问题并持续改进以提高检测质量。     

上海地区苯丙酮尿症基因检测室间质量评价

目的通过开展苯丙酮尿症基因检测室间质量评价计划(简称室间质评),评估参评实验室检测能力,提高检测质量。方法2019年室间质评计划为1年2次,共包含苯丙氨酸羟化酶基因(phenylalanine hydroxylase,PAH)的4个致病变异位点,涉及错义变异和剪接变异2种类型。样本盘包含5支样本,类型为干血斑。要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测样本并网络上报检测结果。依据回报结果计算各实验室成绩,汇总不同样本的总体符合率,并分析致病变异位点检测及结果报告错误类型。结果2次室间质评分别收到3份和2份有效回报结果,成绩合格的实验室分别为1家和2家。2次室间质评中,样本检测结果的总体符合率分别为60%(9/15)和100%(10/10)。结果汇总中共出现检测错误6例,错误的类型集中表现为假阴性。剪接变异的检出符合率明显低于错义变异。结论临床实验室在苯丙酮尿症遗传基因致病变异检测及结果分析报告方面能力有待提高。通过参加室间质评计划能帮助实验室发现检测中存在的问题,提高检测质量。     

EB病毒核酸检测质控品制备及其应用

目的制备可模拟真实临床标本的EB病毒(EBV)核酸检测质控品用于上海地区临床实验室室间质评,以评估其EBV DNA的检测能力。方法选择整合有EBV基因组的淋巴细胞(NAMALWA)进行培养,收集细胞后观察细胞原液对国内常用商品化试剂盒的适用性,随后用EBV国际标准品对其定值,经血浆稀释制得含有阴、阳性共5份样本的样本盘,随机编码后发送至参加EBV DNA室间质评的临床实验室,并对回报结果进行分析。结果采用不同公司EBV PCR检测试剂盒检测NAMALWA细胞原液,结果全部阳性。EBV国际标准品对NAMALWA细胞原液定值浓度约为2.13×105IU/m L,部分参评实验室出现假阳性和假阴性问题,高浓度样本(105和104IU/ml)的符合率均为100%,低浓度样本(103和102IU/m L)的符合率分别为92%和40%,阴性样本的符合率为90%。重复样本实验室内检测结果的平均变异系数(CV)为4.1%(1.4%~11.3%),实验室间CV为6%;大多数实验室(75%)的检测结果与预期值呈良好的线性相关。结论成功制备可模拟临床标本的EBV PCR检测质控品,并证实其可有效用于临床实验室室间质评。质评结果显示上海地区参评实验室EBV DNA检测质量整体较好,但个别实验室检测能力尚需提高。     

全国HCV核酸定量检测室间质量评价

目的采用内含HCV RNA 5'非编码区的耐RNase病毒样颗粒作为质评血清阳性样本用于全国室间质量评价,评价临床实验室定量检测HCV RNA的能力,分析我国HCV RNA定量检测商品试剂盒存在的问题,以促进我国HCV RNA检测质量的提高.方法 2008年和2009年卫生部临床检验中心向全国开展HCV RNA检测的临床实验室每年寄发2次定值质评血清,每次包括5份样本,各实验室在规定时间内进行检测并回报结果.质评血清中的阳性样本为与WHO标准物质(NIBSC 96/798)比对定值的病毒样颗粒,实验室检测阳性样本的结果需在质评血清靶值对数值±0.5范围内.2008年2次质评血清涵盖了国内常见的HCV基因型,2009年2次质评血清为1b型病毒样颗粒系列稀释样本.对2009年第2次室问质评3种试剂(21001、21078和21097)阳性样本定量检测结果进行单因素方差分析,方差不齐则采用Dunnett'S T3和Tamhane'S,T2法进行统计.结果 回报定量检测结果的实验室2008年为390家,而2009年达到428和426家,不同基因型检测结果对数值均在靶值对数值±0.5范围内的实验室数有所差别,1b型样本为大于91.0%,2a型样本分别为93.7%和74.2%,6型样本分别为83.3%和80.3%,同一年检测结果含量低的样本CV高于含量高的样本CV,发生假阴性结果的样本均为低含量样本.2008年第1次、第2次及2009年第1次质评分别有5、1和10家实验室低于检测限样本出现了假阳性.2009年第2次室间质评3种试剂检测4种质评血清,检测结果比较差异均有统计学(F值分别为288.23、324.79、291.98和261.16,P均＜0.01).结论实验室检测低含量样本的能力有待提高,不同基因型检测中,2a和6型样本检测能力有待提高.     

广西地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症检测实验室室间质量评价分析

目的分析评价广西地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的实验室检测情况,以提高G6PD检测质量。方法 2015年3月和10月向广西地区197家开展G6PD检测的实验室发放两批冻干品和新鲜血质控品,分别用于定量与定性试剂检测。所有数据通过Clinet EQA网络回报,并按照规定格式上报定量结果,根据各实验室建立的参考范围上报定性结果及方法学、试剂、仪器等相关信息。按照试剂分组,采用Clinet EQA程序、Microsoft Excel 2007软件对各参评实验室检测结果进行统计分析。结果目前该地区G6PD定量试剂盒检测内容、检测单位及同种方法学的参考范围不一致。定量试剂检测G6PD缺乏质控品及正常质控品符合率均为100.0%,定性试剂检测缺乏质控品平均符合率为77.1%。各定量试剂组检测缺乏质控品变异系数(CV)较大,平均CV为17.06%,检测正常质控品CV较小,平均CV为10.10%。第2次室间质量评价各试剂组平均CV(10.81%)均低于第1次(14.89%)。结论通过参加广西地区G6PD室间质量评价计划,能帮助实验室减少误差、改进质量,更好地为G6PD缺乏症高发区的临床诊断服务。     

上海地区氯吡格雷药物代谢基因检测室间质量评价

目的通过开展氯吡格雷药物代谢基因——细胞色素P450 2C19(CYP2C19)*2、*3、*17位点检测室间质量评价(简称室间质评)项目,评估参评临床实验室的检测能力及存在的问题。方法 2015年2次室间质评样本盘均分为2组,每组各包含5支样本。要求参评实验室收到样本后在规定时间内检测样本并网上上报检测结果。依据回报结果计算各实验室成绩,汇总不同位点的总体符合率,并分析检测方法和试剂的符合率。结果 2015年2次室间质评分别收到16份和17份有效回报结果,成绩满分的实验室分别占93.75%和88.24%,CYP2C19*2、*3和*17检测总符合率分别为95.00%、95.00%、100.00%和98.82%、98.82%、95.00%。2次室间质评中,使用自配试剂进行检测的实验室分别占37.5%和35.3%,满分实验室占83.33%和83.33%。使用注册试剂检测实验室成绩为满分的分别占100%和90.91%。结论各实验室在CYP2C19基因各位点检测总体准确率很高,但个别实验室检测能力有待提高。临床实验室的质量控制对于保证检测结果准确性具有十分重要的作用。     

上海地区PIK3CA基因突变检测室间质量评价分析

目的利用室间质量评价评估上海地区临床实验室PIK3CA基因突变的检测能力。方法选用含有特定PIK3CA突变型的福尔马林固定石蜡包埋细胞样本作为室间质评样本,对其均匀性和稳定性进行评价后,将5个样本随机编号后发送至参评实验室,要求实验室在规定时间内检测并回报结果,综合分析评价回报结果。结果均匀性和稳定性均符合中国合格评定国家认可委员会对能力验证样品的要求。2018年和2019年分别收到有效回报结果28份和19份,回报结果完全正确的实验室分别为78.6%(22/28)和89.5%(17/19),成绩不合格实验室分别为17.9%(5/28)和10.5%(2/19)。样本的整体符合率分别为86.4%(121/140)和93.7%(89/95),其中假阳性率为8.6%(12/140)和2.1%(2/95),假阴性率为8.3%(7/84)和5.3%(4/76)。结论上海地区临床实验室PIK3CA基因突变检测质量整体较好,但部分实验室检测能力尚需提高。实验室通过参加室间质量评价可发现自身问题,持续改进并提高其检测质量。     

乙型肝炎病毒YMDD突变室间质量评价调查品制备及应用

目的制备乙型肝炎病毒(HBV)YMDD突变室间质量评价(EQA)调查品,评估上海地区临床实验室检测HBV YMDD突变的能力。方法筛选HBV DNA5×104 IU/ML的临床样本,经稀释制成含HBV YMDD不同突变类型的样本盘。采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)、高温连接酶反应(LDR)和测序法筛选EQA候选样本,并采用PCR评估样本均匀性和稳定性。2017年2次EQA各制备5份样本,要求参评实验室在规定时间内检测样本并上报检测结果。对回报结果进行分析。结果 2017年2次EQA分别收到12份和10份有效回报结果,66.67%的实验室检测结果完全正确。HBV YIDD、YVDD、YIDD+YVDD和YMDD不同突变样本的检测符合率分别为90.63%、86.36%、77.27%和88.24%。结论制备的调查品均匀、稳定,可用于EQA;部分临床实验室HBV YMDD突变检测能力尚需提高,应加强质量控制以保证检测结果的准确性。     

抗核抗体谱检测的室间质量评价

目的 评价全国临床实验室检测抗核抗体谱的能力。方法 每年进行2次室间质量评价，每次发放5支质评样本；要求各临床实验室在规定时间内检测，并回报检测结果、所用检测方法、仪器和试剂资料；卫生部临床检验中心对各实验室的结果进行统计分析，最后将结果反馈给各实验室。结果70％以上的实验室采用间接免疫荧光法测定抗核抗体谱，2003-2005年的阳性符合率分别为94．1％、93．0％和98．6％。对单一核型，包括均质型、颗粒型等检测结果符合率明显高于混合核型的检测。阳性样本，各实验室回报的滴度存在很大差异。可提取性核抗原抗体谱的检测方法主要有酶联免疫吸附法、间接免疫荧光法和免疫印迹法，采用免疫印迹法的实验室占90％以上，检测结果符合率存在明显差异。抗双链DNA（抗dsDNA）抗体检测整体成绩均接近或超过90％。结论 抗核抗体的检测还有待于标准化。通过抗核抗体谱临床检验实验室间质量评价，可及时发现参评实验室检测中存在的问题，促进实验室不断提高检测质量。     

1998年全国血站抗HCV测定室间质量评价

1998年全国血站抗HCV测定室间质量评价向每个参评实验室发样本4批共20份。回报结果经统计分析后表明,全国绝大部分(91．3％)血站实验室测定错误的样本在1份以下,所使用的测定方法基本为ELISA。大部分厂家的抗Hcv试剂测定的灵敏度、特异性和符合率在95％以上。     

百分制评分法在血站室间质评中的应用

血站采用的得分比值(SI)评分法,虽然能较好地反映参评实验室成绩在该次血站间质量评价(EQA)中的相对位置,但也只能反映参评实验室在当次质评中的相对水平,不能确切反映该室符合率和可信限.笔者提出一种血站EQA的新的评分法,即百分制评分法,现介绍如下.