NF-κB与糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病最普遍的并发症,其通常导致终末期肾衰和很高的死亡率.核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是包含二聚体转录因子的家族其能调控包括炎症和细胞增殖在内的许多基因的表达.NF-KB可能通过高糖、高脂,肾素血管紧张素醛固酮系统、肾脏血流动力学和遗传等多种途径参与糖尿病肾损伤的发生发展.靶向于NF-κB介导的肾脏损伤的治疗被认为是干预糖尿病肾病的有效手段.     

糖尿病与核转录因子NF-κB

核转录因子-κB(NF-κB)作为一种转录调节因子在体内各组织细胞中广泛存在，调控多种细胞因子和炎性介质的基因表达，调节免疫反应，与多种疾病的发生发展密切相关。了解其生物学特点，与肾脏病的关系。特别是近年来在糖尿病及糖尿病肾病发病中的作用，有助于该病的防治。     

糖尿病与核转录因子NF-κB

核转录因子 κB (NF κB)作为一种转录调节因子在体内各组织细胞中广泛存在 ,调控多种细胞因子和炎性介质的基因表达 ,调节免疫反应 ,与多种疾病的发生发展密切相关。了解其生物学特点 ,与肾脏病的关系 ,特别是近年来在糖尿病及糖尿病肾病发病中的作用 ,有助于该病的防治。     

核因子NF-κB在糖尿病大鼠肾组织中表达及洛丁新对NF-κB的影响

目的：了解糖尿病鼠肾组织NF—κB的表达和肾功能损害的关系，并观察洛丁新对NF—κB的影响。方法：采用微波免疫组化染色法检测各组肾组织NF—κB表达水平，并分析其与尿蛋白及肾功能的关系。结果：糖尿痛鼠肾组织NF—κB表达较正常肾组织明显增高，与尿蛋白及血肌酐增高呈正相关关系。用洛丁新治疗后，肾组织NF—κB出表达明显下降，并改善肾功能。结论：NF—κB可能在糖尿痛肾病发生中有重要作用。肾组织中NF—κB的表达可作为反应进行性肾损害的指标。     

甲状旁腺激素通过NF-κB诱导人近曲小管上皮细胞结缔组织生长因子表达

目的 观察甲状旁腺激素（PTH）对人肾小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子（CTGF）的影响,并探讨其信号传导通路及NF-κB在此过程中的作用。 方法 应用荧光实时定量PCR、Western印迹技术,观察PTH诱导人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞CTGF mRNA和蛋白合成情况;从转录水平探讨PTH对CTGF基因启动子活性的调控作用。采用凝胶迁移实验（EMSA）技术检测PTH刺激HK-2细胞后NF-κB的DNA结合能力;NF-κB抑制剂PDTC阻断信号通路以明确PTH发挥作用的信号途径。 结果 HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA表达和蛋白合成,PTH刺激后其表达及合成量显著增加。PTH最佳刺激浓度是10－10 mol/L,最佳刺激时间是72 h。10－10 mol/L PTH作用HK-2细胞12 h后,荧光素酶活性显著高于未刺激组（1.8884±0.0780比0.9891±0.0300,P ＜ 0.01）。正常情况下,胞核内NF-κB处于无活性状态,PTH刺激HK-2细胞后,NF-κB的DNA结合能力明显增强,10－10 mol/L PTH作用30 min时NF-κB活性达到高峰;而后随PTH浓度和作用时间增加,NF-κB活性有所下降。PDTC预处理HK-2细胞后,PTH诱导细胞CTGF mRNA表达显著低于PTH组（0.33±0.05比3.84±0.68,P ＜ 0.05）,CTGF蛋白表达亦显著低于PTH组（0.56±0.23比3.76±0.54,P ＜ 0.01）;PDTC亦显著抑制CTGF基因启动子活性,其萤火虫荧光素酶相对活性显著低于PTH组（1.1942±0.0107比1.8884±0.0780,P ＜ 0.01）。 结论 PTH可诱导HK-2细胞高表达CTGF,且在一定范围内呈时间、剂量依赖,其作用可能是通过NF-κB信号通路来实现的。     

核因子-κB及炎性介质与急性胰腺炎

核因子 κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ ｋａｐｐａＢ ,ＮＦ κＢ)是一类能与多种基因的启动子或增强子κＢ位点发生特异性结合并启动基因转录的蛋白质。现已发现与炎症和免疫反应有关的许多炎性介质基因上含κＢ位点 ,ＮＦ κＢ在调控这些基因表达方面起重要作用〔1〕。目前急性胰腺炎 (ａｃｕｔｅｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ ,ＡＰ)的治疗仍无突破性进展 ,导致治疗失败的主要原因是对其发病机制认识不清 ,缺乏针对性强的治疗措施 ,重症ＡＰ(ＳＡＰ)仍有较高的病死率 ,急性呼吸窘迫综合征及多器官功能不全综合征是ＡＰ早期主要的死亡原因…     

NF-κB与骨髓瘤肾病

NF-κB是一类普遍存在的转录因子,在细胞增殖、生长分化、细胞周期以及凋亡中发挥着重要的调节作用,在淋巴系恶性肿瘤的发病中也起一定作用。本文就NF-κB在骨髓瘤肾病(myeloma nephrop-athy)中的作用机制以及抗NF-κB治疗的新进展作一综述。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾间质Wnt与NF-κB影响的研究

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾间质Wnt4、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(PGSK-3β)及核因子-κB(NF-κB)表达水平的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠32只,体重(200±20g),随机选取8只作为正常组,其余予腹腔注射链脲佐菌素,制备糖尿病肾病动物模型,造模成功后随机分成4组:模型组(n=8),益肾胶囊组(n=8)和氯沙坦组(n=8)。连续给药12周。12周末,检测各组大鼠24h尿蛋白定量,血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),取肾组织行HE染色、免疫组化。光镜下观察肾间质病理变化情况,用免疫组化法检测Wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平,行实时荧光定量(FQ-PCR)法测定肾组织中Wnt4、NF-κBmRNA的表达。结果:12周末,与正常组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN明显增加,肾间质Wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平明显升高,肾组织Wnt4、NF-κBmRNA表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,益肾胶囊治疗组大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN明显减少,肾间质Wnt4、PGSK-3β与NF-κB表达水平明显降低,肾组织Wnt4、NF-κBmRNA表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。氯沙坦治疗组与益肾胶囊治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾胶囊可能通过调节DN肾间质Wnt4、PGSK-3β、NF-κB的表达,影响了NF-κB和Wnt通道的信号转导,延缓了DN的进展。     

NF-κB在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨NF-κB基因在肝细胞癌组织中的表达及生物学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western-blot免疫组织化学技术检测32例肝癌组织及癌旁肝组织中的NF-κB基因的mRNA和蛋白表达水平及蛋白定位。结果：NF-κB基因在肝癌组织中的表达较癌旁肝组织显著性增高(P<0.05)。免疫组化结果显示，NF-κB蛋白在肝癌细胞胞浆和胞核中均有表达，而在癌旁肝细胞中仅在胞浆中有表达。结论：NF-κB基因在肝癌组织中呈显著高表达，提示其可能参与了肝癌的发生发展。NF-κB表达定位在癌细胞和癌旁肝细胞中的差异，提示NF-κB活化后，进入胞核，通过调节下游基因的转录，促进肝癌的发生。     

NF-κB通路在单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的 观察单核细胞（U937细胞）对人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）转分化的影响及其分子机制。 方法 将HK-2细胞与人单核细胞系U937细胞共培养;倒置相差显微镜观察HK-2细胞形态;Western印迹、实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）、E钙黏蛋白（E-cadherin）和胞间黏附分子1（ICAM-1）表达;BCECF-AM荧光染色法测定单核细胞黏附;流式细胞仪法检测HK-2细胞表面分子ICAM-1表达;基因芯片筛选HK-2细胞基因变化;利用信号阻断剂阻断基因芯片筛选出的信号通路,进一步验证单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化的分子机制。 结果 单核细胞可直接诱导HK-2细胞发生形态变化,减少HK-2细胞E-cadherin表达（均P < 0.05）,并上调α-SMA、FN表达（均P < 0.05）。应用CD18抗体阻断CD18-ICAM-1可抑制单核细胞黏附及其诱导的HK-2细胞形态变化。基因芯片结果显示,NF-κB信号通路分子CC亚族趋化因子配体20（CCL20）、白细胞介素（IL）2、IL-8、脂磷壁酸（LTA）及血小板内皮细胞黏附分子1（PECAM1）表达明显增加（均P < 0.05）。NF-κB信号阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）能显著抑制HK-2细胞形态变化及表面ICAM-1表达,抑制单核细胞诱导的肾小管上皮细胞转分化。 结论 单核细胞通过CD18分子与HK-2细胞表面ICAM-1结合,从而启动NF-κB信号通路介导的特定基因转录,最终导致肾小管上皮细胞发生转分化。     

法舒地尔对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 观察法舒地尔对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响并探讨其机制。 方法 将实验性Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、法舒地尔治疗组。3个月后处死动物,PAS染色法观察肾小球病理变化,Masson染色法观察肾间质病理变化;免疫组化观察肾脏皮质ROCKⅠ、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E钙黏蛋白（E-cadherin）的变化和β连环蛋白（β-catenin)的细胞定位改变;Western印迹法观察肾脏皮质p-MYPT1、α-SMA、E-cadherin、胞膜β-catenin蛋白的变化;实时定量PCR法观察ROCKⅠ、E-cadherin和总β-catenin的mRNA变化。 结果 法舒地尔治疗可改善肾间质纤维化状况。与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾皮质内p-MYPT1、α-SMA蛋白表达增强（均P < 0.01）;E-cadherin、胞膜β-catenin的蛋白表达减弱（均P < 0.01）;ROCK1、总β-catenin mRNA表达增强（均P < 0.01）;E-cadherin mRNA表达减弱（P < 0.01）。与糖尿病组相比,治疗组p-MYPT1、α-SMA蛋白表达减弱 （均P < 0.01）;E-cadherin、胞膜β-catenin的蛋白表达增强（均P < 0.05）;ROCK1、β-catenin mRNA表达减弱（均P < 0.01）;E-cadherin mRNA表达增强（P < 0.01）。 结论 法舒地尔可能通过抑制Rho激酶活性减轻糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化和肾间质纤维化,该作用可能与法舒地尔恢复肾小管上皮细胞的黏附特性与紧密连接复合体有关。     

miR-210 agonist alleviates renal inflammatory response and fibrosis in diabetic kidney disease rats

Objective To investigate the protective effect and mechanism of microRNA-210 agonist (agomiR-210) on kidney in diabetic kidney disease (DKD) rats. Methods Thirty-six 5-week-old male SD rats were divided into normal control (NC) group, agomiR-NC control group, agomiR-210 control group, DKD model group, DKD+agomiR-NC group and DKD+agomiR-210 group, with 6 rats in each group. Diabetic rats were established by a high-fat diet combined with intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ), then were fed for 12 consecutive weeks to construct DKD model rats. During 2nd-4th week of continuous feeding, the rats in DKD+agomiR-210 group were injected with 20 nmol/kg agomiR-210 via tail vein twice a week. Blood glucose levels, 24 h urine albumin (Alb) and 24 h urine microalbumin (MAU) contents were measured regularly. At the end of the 12th week, the rats were sacrificed, and renal tissues were collected. The renal histopathological changes were assessed by HE, PAS and Masson staining methods. The mRNA and protein expression levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin (IL)-1β and IL-6 in renal tissues were detected by RT-qPCR and Western blot. The distributions and expressions of α-smooth muscle actin (α-SMA), typeⅠ collagen (Col-Ⅰ), type Ⅳ collagen (Col-Ⅳ) and fibronectin (FN) in renal tissues were detected by immunohistochemical method. The protein expression levels of phospho(p)-Smad3 and p-NF-κB p65 in renal tissues were detected by Western blot and immunohistochemical methods. Results Compared with DKD model group, the renal pathological damages in DKD+agomiR-210 group were improved, the blood glucose level, glycogen deposition and collagen accumulation were significantly decreased (all P＜0.05), the urinary excretions of Alb and MAU were significantly reduced (all P＜0.01), and the expressions of TNF-α, IL-1β, IL-6, α-SMA, Col-Ⅰ, Col-Ⅳ, FN, p-Smad3 and p-NF-κB p65 in renal tissues were significantly decreased (all P＜0.01). Conclusion AgomiR-210 can alleviate renal pathological changes and urinary Alb and MAU excretion in rats with DKD, which may be related to its inhibition of Smad3 and NF-κB activity.     

微小RNA在糖尿病肾病患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨糖尿病肾病发生、进展过程中血清微小RNA (microRNA,miRNA)表达谱及其临床意义.方法 应用miRNA基因芯片检测10例糖尿病肾病患者、10例糖尿病尿蛋白正常患者及10例健康对照者血清miRNA表达谱.实时荧光定量PCR法对66例糖尿病肾病(微量蛋白尿者36例,大量蛋白尿者30例)、40例糖尿病尿蛋白正常者及40例健康对照者进行血清miRNA表达谱验证,分析血清差异表达的miRNA与糖尿病肾病临床参数的关系.结果 实时荧光定量PCR法验证得到miR-150-5p、miR-155-5p、miR-30e-5p及miR-3196在糖尿病微量蛋白尿患者组(n=36)、糖尿病尿蛋白正常者组(n=40)及健康对照组(n=40)血清样本中表达差异有统计学意义(P＜0.05).miR-150-5p (P=0.005)和miR-155-5p (P=0.006)在糖尿病微量蛋白尿组(n=36)及糖尿病大量蛋白尿组(n=30)血清中表达差异有统计学意义.大量蛋白尿组血清miR-150-5p和miR-155-5p表达水平分别是微量蛋白尿组的2.3倍、1.5倍.同时发现,miR-150-5p和miR-155-5p与糖尿病肾病患者的估算肾小球滤过率和尿蛋白排泄率具有明显相关性.结论 miR-150-5p和miR-155-5p可能参与糖尿病肾病发生及发展的病理过程;血清miR-150-5p和miR-155-5p有望成为DN早期诊断及判断预后的潜在分子标志物.     

抗氧化治疗对糖尿病肾脏病患者肾功能的保护作用

目的探讨维生素E联合维生素C抗氧化治疗对2型糖尿病肾脏病患者肾功能的保护作用。方法选择我院2型糖尿病肾脏病患者80例,随机分为2组,对照组（A组）接受常规治疗;抗氧化治疗组（B组）除常规治疗外,口服维生素E（0．1g／次,每日1次）、维生素C（0．2g／次,每日3次）。每3个月随访1次,观察记录患者的肾功能,以血肌酐（SCr）升高1倍为随访终点,SCr升高1倍所经历的时间为肾功能生存时间,最长随访时间为2年。结果A组肾功能平均生存时间为（14．78±0．64）个月;B组平均生存时间为（18．16±0．68）个月,2组比较有统计学差异（P〈0．05）。结论维生素E联合维生素c抗氧化治疗对糖尿病肾脏病患者肾功能具有保护作用。     

血红蛋白与IgA肾病患者肾小管萎缩/间质纤维化的关系

目的探讨IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者血红蛋白(Hb)水平与肾脏病理牛津分级中肾小管萎缩/间质纤维化(T)的关系。方法回顾性分析2010年1月1日至2015年12月31日在深圳市第二人民医院肾活检确诊为IgAN、同时有完整实验室及影像学资料的患者。将所有患者分为贫血组与非贫血组。采用Logistic回归分析确定Hb与肾小管萎缩/间质纤维化的关系;采用平滑曲线拟合分析Hb与肾小管萎缩/间质纤维化可能的曲线关系;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析Hb对肾小管萎缩/间质纤维化的诊断价值。结果本研究共纳入IgAN患者630例,贫血组130例(20.63%),非贫血组500例(79.37%);两组间年龄差异无统计学意义,而性别差异有统计学意义(男性35.38%比53.80%,χ2=10.740,P<0.001)。与非贫血组相比,贫血组的患者肾小管萎缩/间质纤维化的比例和24 h尿蛋白量较高(χ2=62.586,P<0.001;Z=-6.082,P<0.001),估算的肾小球滤过率(eGFR)较低(t=7.126,P<0.001)。Logistic回归分析显示,高Hb水平为肾小管萎缩/间质纤维化发生风险减少的独立保护因素(OR=0.973,95%CI 0.958~0.987,P<0.001)。平滑曲线拟合分析显示Hb与肾小管萎缩/间质纤维化呈线性负相关。ROC曲线提示Hb诊断肾小管萎缩/间质纤维化的最佳临界值为120.5 g/L,即提示Hb>120.5 g/L时,肾小管萎缩/间质纤维化的程度可能降低。结论IgAN合并贫血的患者其肾小管萎缩/间质纤维化发生率较高。Hb>120.5 g/L可能减少肾小管萎缩/间质纤维化发生的风险。     

红细胞生成素对高糖诱导下肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 探讨红细胞生成素（EPO）对高糖诱导下的肾小管上皮细胞转分化的影响。 方法 体外培养人肾小管上皮细胞株（HK-2细胞）,分为正常对照组、渗透浓度对照组、高糖组、高糖＋EPO（5 U/ml）组和高糖＋EPO（10 U/ml）组。RT-PCR法检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smads信号蛋白2（Smad2）及整合素连接激酶（ILK）的mRNA表达。细胞免疫荧光法检测细胞TGF-β1及α-SMA的蛋白表达。 结果 RT-PCR结果显示,相对于对照组,高糖组细胞α-SMA、TGF-β1、Smad2、ILK的mRNA表达均显著上调（P ＜ 0.01）。细胞免疫化学也显示,高糖组TGF-β1和α-SMA的蛋白表达较对照组显著上调（P ＜ 0.01）,而高糖＋EPO（5 U/ml）组和高糖＋EPO（10 U/ml）组上述指标的表达均显著低于高糖组（均P ＜ 0.01）。 结论 EPO能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化,可能与其抑制TGF-β1、Smad2及ILK表达有关。     

糖尿病大鼠肾实质小动脉内膜/中膜厚度比与炎性因子的关系

目的 通过观察糖尿病大鼠肾小动脉内膜/中膜厚度比变化,初步探讨其与炎性因子的相关关系及对糖尿病肾病（DN）血管病变的影响。 方法 70只健康大鼠被随机分为DN组（n=40）和正常对照组（N,n=30）。DN大鼠模型采用链脲菌素（STZ）腹腔注射诱导,成功35只,N组予同等剂量柠檬酸缓冲液。分别于4、12、24周处死动物,取大鼠股静脉血查生化指标。用免疫荧光方法检测肾小动脉内膜/中膜厚度比。用免疫组化及原位杂交方法检测各时间点肾小动脉中单核细胞趋化因子1（MCP-1）的蛋白和mRNA表达变化。 结果 生化结果显示DN组各时间点血糖及尿蛋白量（24 h）均显著高于N组（P < 0.05）,自第12周开始,DN组血肌酐、BUN、血磷显著高于N组（P < 0.05）。免疫组化及原位杂交显示DN组肾小动脉4周时已有MCP-1蛋白及mRNA表达,随时间延长表达逐渐增强,24周表达最强,各时间点均显著高于N组（均P < 0.05）。免疫荧光结果显示,第4周时DN组内膜/中膜厚度比与N组差异无统计学意义,12周时高于N组（P > 0.05）,24周时显著高于N组（P < 0.05）。DN组小动脉内膜/中膜厚度比与MCP-1表达、胆固醇、三酰甘油、血磷水平均呈正相关（r = 0.742, P < 0.01;r = 0.740,P < 0.01;r = 0.829,P < 0.01;r = 0.580,P < 0.01）。 结论 DN早期小动脉内膜/中膜厚度比与MCP-1呈正相关。MCP-1可能参与了DN血管病变。     

高糖与切应力对肾小管上皮细胞megalin及cubilin表达的影响及其意义

目的 观察高糖与切应力对肾小管上皮细胞白蛋白受体megalin、cubilin表达的影响并探讨其意义。 方法 链尿菌素（STZ）腹腔注射SD雄性大鼠制作糖尿病肾病（DN）模型，以健康SD雄性大鼠为对照。于第2、4、6周分别检测尿白蛋白量（24 h）；免疫组化法检测各组肾脏megalin、cubilin蛋白的表达。将体外培养的肾近端小管上皮细胞(NRK-52E)分为空白对照组、甘露醇组、高糖组，并以平行板流室系统提供0.5、1.0 Pa的切应力处理各组NRK-52E细胞, 分别作用1、3、6 h。以RT-PCR法检测各组细胞megalin、cubilin mRNA表达。 结果 对照组肾脏megalin、cubilin蛋白表达水平高于相应时间点DN组(P < 0.05)。肾脏megalin、cubilin表达水平与尿白蛋白量（24 h）呈负相关(r =－0.832及－0.815，均P < 0.05)。高糖抑制NRK-52E细胞megalin、cubilin mRNA的表达(P < 0.05)。切应力加载抑制细胞megalin、cubilin mRNA的表达,其抑制作用比单纯高糖更明显，且与切应力大小及作用时间有关(P < 0.05)。 结论 DN早期高滤过导致滤出液对肾近端小管上皮细胞的切应力增加，其与高糖协同作用可下调细胞megalin、cubilin mRNA的表达，减少肾小管对白蛋白的重吸收,是DN早期微量白蛋白尿发生的机制之一。     

Smad锚着蛋白在糖尿病肾病肾小管上皮细胞转分化中的作用及机制研究

目的 研究Smad锚着蛋白(SARA)在高葡萄糖诱导的HK-2细胞转分化中的作用及相关机制.方法 用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,分别采用细胞免疫荧光、Western印迹及实时定量PCR等方法检测HK-2细胞波形蛋白(vimentin)、紧密连接蛋白(ZO-1)、SARA、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2及Smad3的表达.分别转染全长SARA质粒[SARA (WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSBD)],检测转染后高糖诱导的HK-2细胞Vimentin、ZO-1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3表达的变化.结果 高糖刺激时,HK-2细胞出现转分化 ;ZO-1蛋白和mRNA表达呈时间依赖性下调 ;vimentin蛋白和mRNA表达呈时间依赖性上调,而SARA蛋白和mRNA表达呈时间依赖性下调 ;TGF-β1、Smad3蛋白和mRNA表达呈时间依赖性上调 ;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调 ;Smad2和Smad3磷酸化,Smad3活化时间更长.与高糖刺激组相比,转染全长SARA质粒[SARA (WT)]过表达SARA使HK-2细胞ZO-1表达上调(P＜0.05) ;vimentin表达下调(P＜0.05) ;Smad2蛋白表达上调,但mRNA表达无明显变化 ;Smad2活化时间延长.转染SARA(dSBD)质粒对高糖诱导的HK-2细胞ZO-1、vimentin、Smad2的表达无影响,对Smad2和Smad3的磷酸化亦无明显影响.结论 高糖诱导的HK-2细胞转分化过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下调.过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,延长Smad2活化时间,从而抑制TGF-β1信号传导,进而抑制高糖诱导的HK-2细胞转分化进程.     

祖细胞样肾小管细胞在急性肾小管坏死修复中的作用

目的 观察大鼠缺血性急性肾小管坏死（ATN）后肾脏内溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）及Pax2阳性细胞的动态变化,探讨祖细胞样肾小管细胞在ATN修复过程中的作用。 方法 钳夹SD大鼠左侧肾动脉60 min后再开放血流,建立缺血性ATN模型。给予细胞分裂增殖标记物BrdU负荷,分别于术后第1、3、5、7、14、21、28天收获肾脏标本,进行BrdU和肾源性标记物Pax2免疫组织化学染色,以及BrdU和Pax2、间充质细胞标记物波形蛋白（vimentin）、细胞凋亡标记物活化caspase-3的双重染色,观察BrdU阳性细胞的数量和分布变化。 结果 ATN组术后左肾出现明显的近端肾小管上皮细胞广泛性坏死,BrdU阳性细胞明显增加,第3天达到高峰,显著高于假手术对照组和右肾（P < 0.01）。而右肾BrdU阳性细胞亦显著高于假手术对照组（P < 0.01）。双重染色显示BrdU阳性细胞同时表达Pax2和波形蛋白,但未见同时表达活化的caspase-3。 结论 大鼠在经历缺血性ATN后,肾脏内祖细胞样小管细胞被动员。其修复可能是通过逆分化、增殖和再分化过程来完成的。而细胞因子可能在这过程中起着调控作用。