人参皂甙Rg3对大肠癌淋巴结微转移的影响

消化道肿瘤是我国最常见的恶性肿瘤之一，肿瘤的转移与预后密切相关。微转移的存在提示肿瘤已不再局限于原发灶，有发展为远处转移的可能。及时发现微转移不仅对胃肠道肿瘤的复发和预后的判断有重要意义，而且对消化道肿瘤的分期和指导临床治疗亦有重要价值 。我们观察了参一胶囊（人参皂甙Rg3）对淋巴结微转移阳性的胃肠道肿瘤患者长期生存的影响。     

人参皂甙Rg3诱导乳腺癌细胞系 MCF-7凋亡的实验研究

背景与目的:人参皂甙Rg3[20(R)-GinsenosideRg3]是从红参中提取的微量中药单体。近年研究表明人参皂甙Rg3尚具有抑制肿瘤细胞的增殖、抗肿瘤细胞浸润和转移等作用。肿瘤的发生和发展是一个极其复杂的过程,有多种转移相关的蛋白因子参与,并涉及多种转移途径和分子机制。人参皂甙Rg3抗肿瘤机制的研究为目前中药抗肿瘤研究热点之一。本研究的目的在于探讨Rg3抑制乳腺癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。材料与方法:四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法检测人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖活力;荧光染色观察凋亡细胞的形态学变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡;琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状带。结果:Rg3与MCF-7细胞生长抑制率之间有浓度依赖关系,相关系数(r)=0.953,Rg3处理细胞48h的IC50为71.91μg/ml;荧光显微镜下观察到经Rg3作用后,MCF-7细胞出现染色质凝集、核片段化、凋亡小体等凋亡形态学特征;流式细胞术检测表明Rg3能诱导细胞凋亡及调节细胞周期,用150μg/ml的Rg3处理细胞48h后,S期和G2-M期的细胞比率增加,G0-G1的细胞比率下降。细胞凋亡率从对照组的(0.45±0.25)%上升到(34.86±4.65)%。DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,服150μg/ml的Rg3处理细胞24h和48h后,能够使细胞产生明显的梯形电泳图谱(DNAladder)。结论:Rg3可通过诱导MCF-7细胞凋亡而发挥其抑制细胞增殖的作用。     

人参皂甙Rg3对小鼠肝癌H22腹水瘤的治疗研究

目的：研究人参皂甙Rg3治疗小鼠恶性腹腔积液的疗效。方法：100只雌、雄各半昆明种小鼠随机分为5组：Ⅰ组生理盐水组（0．9％NS）;Ⅱ组顺铂组（DDP0．5mg／kg）;Ⅲ组低剂量人参皂甙Rg3组（LPD0．3mg／kg）;Ⅳ组中剂量人参皂甙Rg3组（MPD1．0mg／kg）;Ⅴ组高剂量人参皂甙Rg3组（HPD3．0mg／kg）。所有小鼠肝癌H22腹水瘤模型建立后24小时开始分别腹腔注射0．2ml／只治疗,每日1次,共14天,同时观察小鼠的生活状态和体重。治疗结束后24小时,处死各组半数小鼠测各项指标,剩余小鼠停止治疗并观察生存时间。结果：各用药组较生理盐水组在腹水量（P〈0．05）、腹水中瘤细胞数和瘤细胞存活率方面都下降（P〈0．05）;随着人参皂甙Rg3给药浓度的增加,腹水中瘤细胞数及瘤细胞存活率下降（P〈0．05）;人参皂甙Rg3高剂量组腹水中瘤细胞数及瘤细胞存活率低于DDP组（P〈0．05）。各实验用药组较生理盐水组小鼠寿命延长,其中中剂量人参皂甙Rg3组延长最明显（P〈0．05）。结论：人参皂甙Rg3对小鼠恶性腹腔积液的形成具有抑制作用,这为临床应用提供了实验依据。     

人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用

目的:探讨人参皂苷Rg3对人宫颈癌Hela细胞的诱导凋亡作用。方法:培养人宫颈癌Hela细胞,不同浓度Rg3处理,HE染色观察细胞形态学改变,CCK-8、流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果:Rg3作用后Hela细胞出现了典型的凋亡形态学变化,包括细胞皱缩、细胞核内染色体浓缩。10、20、40、80μg/ml人参皂苷Rg3处理48小时后Hela细胞的平均生存率为76.3%、57.1%、50.0%、29.8%;流式细胞术(FCM)显示肿瘤细胞凋亡率为16.4%、37.0%、50.0%、69.8%,表明肿瘤细胞在人参皂苷Rg3诱导下发生凋亡。结论:Rg3能抑制Hela细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡作用呈剂量依赖性。     

人参皂甙Rg3抑制小鼠肝癌淋巴道转移作用及其对免疫功能的影响

目的：观察人参皂甙Rg3抑制小鼠肿瘤生长及抗淋巴结转移的作用及对免疫功能的影响。方法：以Hca-F25//6A3-F（F）接种于615近交系小鼠，建立肝癌淋巴道转移动物模型，分为5组：Rg3预防组（接种肿瘤前给Rg3）、Rg3治疗组（Rg3）、阳性对照组（PDD）、联合治疗组（Rg3＋PDD）和阴性对照组（生理盐水），比较各组的原发瘤抑制率和转移淋巴结抑瘤率，并通过流式细胞仪方法分析各组免疫指标CD4／CD8的变化。结果：联合治疗组原发瘤的抑瘤率明显提高，与阴性对照组相比具有统计学上明显差异（P〈0．05）；淋巴结转移抑制率含Rg3组均较阴性对照组高；Rg3预防组和Rg3治疗组CD4／CD8比值与阴性对照组相比升高，具有统计学上明显差异（P〈0．05）。结论：人参皂甙Rg3具有明显的抗肿瘤作用，可以增强化疗药物PDD的抗癌作用，及抑制淋巴道转移作用，并提高荷瘤小鼠免疫功能。     

人参皂甙Rg3诱导细胞凋亡作用的研究

目的观察人参皂甙Rg3对小鼠肝癌淋巴结转移模型中肿瘤细胞凋亡的诱导作用，探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤淋巴结转移的机制。方法建立小鼠肝癌淋巴结转移模型；利用免疫组化方法观察原发瘤及转移瘤各组（Rg3预防组，Rg3治疗组，Rg3与顺铂联合治疗组，顺铂治疗组及对照组）中肿瘤细胞的凋亡。结果在原发和转移瘤中，对照组Bcl-2高表达，Bax低表达，Bcl-2在人参皂甙Rg3预防组、Rg3治疗组、Rg3与顺铂联合治疗组，顺铂治疗组中是低表达，明显低于对照组（P〈0．05），Bax明显高于对照组（P〈0．05）。结论人参皂甙Rg3抗肿瘤细胞淋巴结转移的作用与诱导细胞凋亡有关。     

PCNA、P16、MMP9在人参皂甙Rg3抗肝癌淋巴道转移中的表达及意义

目的 :通过检测PCNA、P16及MMP 9在人参皂甙Rg3抗荷瘤小鼠淋巴道转移中的表达 ,探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤作用的机制。方法 :建立小鼠肝癌淋巴道转移模型 ,应用免疫组织化学方法检测PCNA、P16及MMP 9在各实验组 (Rg3预防组、Rg3治疗组、Rg3+DDP合用组、DDP阳性对照组和生理盐水阴性对照组 )的原发瘤及相应转移瘤 (淋巴结 )中的表达水平。结果 :应用人参皂甙Rg3组较未用药组 ,PCNA及MMP 9在原发瘤的表达减少 ,P16的表达增加 ,差异显著 (P <0 0 0 1) ;而在转移瘤中的变化不明显。结论 :人参皂甙Rg3抗淋巴道转移作用的机制与上调P16表达及下调PCNA和MMP9表达有关。     

人参皂甙Rg3和核糖核酸酶抑制因子转基因对小鼠黑色素瘤的抑制作用研究

目的观察人参皂甙Rg3和核糖核酸酶抑制因子(RI)转基因对小鼠B16黑色素瘤肺转移的抑制作用和影响,探讨人参皂甙Rg3和RI抗肿瘤生长和转移作用的分子机制。方法制备转RI基因的B16黑色素瘤肺转移小鼠模型,对野生型对照组(W组)、空质粒转染组(B组)和RI转基因组(RI组)以及给予Rg3的野生型对照组(Rg3/W组)、空质粒转染组(Rg3/B组)和RI转基因组(Rg3/RI组)中,荷瘤小鼠肺重量、肿瘤转移灶数目、生存期和肿瘤组织微血管密度进行检测和分析。结果Rg3和RI转基因使荷瘤小鼠肺重量降低,肿瘤转移灶数目减少,其肺重量降低和肿瘤转移灶数目减少的程度以Rg3/RI组最明显,Rg3/B组、Rg3/W组和RI组次之,与W组和B组差异有显著性(P<0.01),Rg3和RI有一定的协同性。Rg3和RI可延长荷瘤小鼠的生存期,Rg3/RI组小鼠在观察期(1.5个月)内均存活,W组和B组小鼠全部死亡(至26d),且出现死亡的时间较早。经HE染色和第Ⅷ因子相关抗原的免疫组化分析显示,Rg3和RI使肺内瘤组织的微血管密度降低,降低的程度为Rg3/RI组>Rg3/B组>Rg3/W组>RI组>B组>W组。结论人参皂甙Rg3可增强RI转基因对小鼠黑色素瘤肺转移的抑制作用,人参皂甙Rg3和RI基因在抗肿瘤生长、转移及血管生成方面有协同作用。     

人参皂甙-Rh2诱导人肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用

目的 研究人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)诱导肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用。方法 应用流式细胞术检测GS-Rh2对肝癌Bel-7404细胞凋亡的诱导作用以及对细胞周期的影响。结果 流式细胞术证实GS-Rh2具有诱导凋亡作用。细胞凋亡（AR）随GS-Rh2浓度增高和作用时间延长而升高，当GS-Rh2浓度由12.5μg/ml增至50.0μg/ml时，AR由16.2%升高至27.5%，但GS-Rh2浓度由50.0μg/ml进一步增至100.0μg/ml后，AR未见相应升高；GS-Rh2可将细胞周期阻滞于G1期。结论 GS-Rh2能诱导体外培养的Bel-7404细胞凋亡；GS-Rh2诱导Bel-7404细胞凋亡可能与细胞周期阻滞有关。     

人参皂甙Rg1协同诱生LAK细胞的抗瘤活性

淋巴因子激活性杀伤细胞(LAK细胞)过继输入疗法已经被证明是一种有效的抗肿瘤免疫治疗措施,但此疗法的临床应用却受到LSK细胞抗瘤活性尚低问题的困扰.我们曾经证明人参总皂甙能够增强LAK细胞杀伤新鲜急性白血病细胞的活性,本文进一步检测了人参总皂甙的单体之一人参皂甙Rg_1(Ginsenoside Rg_1)对LAK细胞抗瘤活性的影响,报告如下.     

人参皂甙Rg3 抑制肿瘤新生血管形成机制研究

 目的　人参皂甙 Rg3抑制肿瘤新生血管的机制。方法　采用鸡胚 CAM和小鼠 Lewis肺癌模型及免疫组化方法探讨 Rg3抑制新生血管形成的机制。结果　Rg3浓度为 0 .1 m M、0 .5 m M时 ,抑制鸡胚 CAM的血管指数 (BI)分别达到 6 2 .4%、45 .6 %。而给予小鼠 Rg3灌胃剂量分别为 5、1 0、2 0 mg/kg/隔日 ,连续 2 0天后 ,观察到 3组的抑瘤率分别为 2 3.0 4%、31 .30 %、47.1 0 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。免疫组化证实 Rg3可明显抑制肿瘤组织内 b FGF的表达。结论　Rg3可明显抑制 Lewis肺癌的生长并抑制了肿瘤新生血管形成。     

Apoptosis Induced by Ginsenoside Rg3 in a Human Bladder Carcinoma Cell Line

OBJECTIVE This study was conducted to explore the effect of Rg3 on inhibition of proliferation and induction of apoptosis in bladder cancer cells. METHODS The EJ bladder cancer cell line was treated with Rg3 at various concentrations. Cell proliferation was measured by the MTT assay. Morphological changes in the cells were observed by fluorescent staining using Hoechst 33258. The cell cycle and apoptotic rate were analyzed by flow cytometry (FCM) and the expression of caspase-3 in cells was detected by immunocytochemistry. DMA ladder analysis was conducted by agarose gel electrophoresis. RESULTS Rg3 inhibited proliferation of EJ cells in a concentration-dependent manner, resulting in an IC50 for Rg3 at 48 h of 125.5μg/ml. When treated with 150μg/ml of Rg3 for 24 h and 48 h, the cells showed apoptotic morphological characteristics including condensed chromatin, nuclear fragmentation, apoptotic bodies and bright fluorescent granules as well as a higher caspase-3 expression. The FCM assay indicated that Rg3 altered the cell cycle and induced apoptosis of the EJ cells, when treated for 24 h and 48 h with 75μg/ml of Rg3 as well as for 48 h with 150μg/ml. The percentages of cells in the S phase and the G2/M transition were increased, whereas the percentages of cells in the G0-G1 transition were decreased. The apoptotic rates were increased from (1.05±0.17)% in the control group cells to (8.41±0.98)%,(18.57±2.20)% and (33.98±1.64)% respectively. Significant changes in the DNA ladders, showed that the effects of Rg3 were displayed in a dose and time dependent manner. CONCLUSION The results suggest that Ginsenoside Rg3 exerts an inhibitory effect on proliferation of EJ cells by inducing apoptosis.     

人参皂苷Rg3对鼻咽癌肿瘤干细胞放疗增敏的作用研究

目的探讨人参皂苷Rg3对体外培养鼻咽癌肿瘤干细胞放疗敏感性的影响。方法采常规无血清悬浮培养法从鼻咽癌低分化细胞株CNE-2中筛选出鼻咽癌肿瘤干细胞样细胞亚群CNE-2S;采随机分组法将细胞分为人参皂苷Rg3组(15μg/m L)、放疗组和人参皂苷Rg3(15μg/m L)联合放疗组;人参皂苷Rg3干预4 h后,将三组细胞16 Gy放射线照射30 min,然后在培养箱内继续孵育1 d、2 d和3 d,再进行相关测定。MTT法检测各组CNE-2S细胞增殖抑制率;DAPI染色法检测各组CNE-2S细胞凋亡情况,并分析细胞的光密度和面密度变化;Elisa法检测各组CNE-2S细胞SOD水平。结果 1 d、2 d和3 d,人参皂苷Rg3联合放疗组的细胞增殖抑制率以及细胞SOD水平均明显高于人参皂苷Rg3组和放疗组,而细胞光密度、面密度明显于人参皂苷Rg3和放疗组,比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论人参皂苷Rg3可显著提高CNE-2S细胞的放疗敏感性,其促进细胞SOD表达可能是其作用机制之一。     

顺铂联合人参皂甙Rg3对荷宫颈癌鼠血管生成的抑制作用

目的探讨人参皂甙Rg3(简称Rg3)与顺铂联合应用对人宫颈癌动物模型中肿瘤的生长及其对肿瘤血管生成的影响。方法采用人宫颈癌HeLa细胞株接种于28只雌性裸鼠,随机均分成4组：即（1）生理盐水对照组;（2）顺铂（DDP）组;（3）人参皂甙Rg3组;（4）人参皂甙Rg3与顺铂联合组。各组用药时间均为5周,35天后脱颈处死。分别检测肿瘤的重量,并计数肿瘤内微血管密度(MVD)。结果Rg3组、DDP组及联合组对原位种植肿瘤的生长有明显的抑制作用,联合治疗组抑制肿瘤生长的作用明显优于单纯组;且Rg3及联合治疗组MVD也明显低于DDP组及对照组。结论Rg3与DDP联合应用能抑制人移植性宫颈癌的生长,降低肿瘤内的MVD,抑制宫颈癌肿瘤血管生成。     

参一胶囊联合NP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的:观察参一胶囊(人参皂甙Rg3)联合去甲长春花碱与顺铂方案(NP方案)化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效、毒副反应及细胞免疫功能变化。方法:观察组35例患者给予参一胶囊20mg每日2次口服,自化疗前3天开始用药至化疗停药后7天止,共39天。对照组35例给予NP方案化疗。均化疗2周期后评价疗效。应用流式细胞仪检测细胞免疫指标。结果:观察组有效率37.1%(13/35),对照组有效率31.4%(11/35),两组疗效未见差异(P>0.05);观察组白细胞减少发生率低于对照组(P<0.05);观察组卡氏评分较对照组改善明显(P<0.05);观察组CD4/CD8比值及NK阳性细胞百分率治疗后提高,差异有显著性(P<0.05)。结论:参一胶囊联合NP方案治疗晚期非小细胞肺癌白细胞减少发生率低,并可改善行为状况,提高患者细胞免疫功能。     

参一胶囊联合卡培他滨治疗晚期乳腺癌临床观察

目的评价参一胶囊联合卡培他滨治疗晚期乳腺癌的疗效、机制及对化疗不良反应和生活质量的影响。方法采用前瞻性随机对照研究,把56 例晚期乳腺癌患者分为治疗组与对照组。治疗组28例,给予参一胶囊联合卡培他滨治疗;对照组28例单纯给予卡培他滨治疗。结果治疗组和对照组有效率分别为35.7%、25%。1年生存率分别为68%、50%,差异均无统计学意义。治疗组白细胞减少率和疲劳发生率分别为17.9%、7.1%,对照组分别为42.9%、32.1%,两组白细胞减少率、疲劳发生率比较差异均有统计学意义。治疗组与对照组相比能显著降低VEGF的值,提高了生活质量。结论参一胶囊联合卡培他滨治疗晚期乳腺癌有提高患者生存期的趋势,并可以减少化疗引起的疲劳、白细胞降低等不良反应,提高患者的生活质量等,其机制可能与参一胶囊有抗血管生成作用等有关。     

人参皂苷Rg3对食管癌细胞放射增敏作用的初步研究

目的 探讨人参皂苷Rg3（简称Rg3）对食管癌EC109细胞的放射增敏作用。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法观察不同浓度的Rg3（10、20、50、100、200、400、600mmol/L）作用EC109细胞24、48及72h的细胞存活率,克隆形成实验及单击多靶模型计算10mmol/L Rg3预处理24h经0、1、3、6和9Gy X射线照射后的辐射增敏比（SER）。根据实验设计分为对照组、单纯照射组及Rg3+照射组,流式细胞仪及Foci焦点形成实验分别检测3组经8Gy X射线照射48h的细胞凋亡率和DNA分子损伤情况。结果在10～600mmol/L范围内,Rg3可降低EC109细胞的存活率,呈剂量和时间依赖性;10mmol/L Rg3处理EC109细胞的SER为1.28。Rg3+照射组的凋亡率为（62.33±4.60）%,高于对照组的（6.46±1.23）%和单纯照射组的（30.68±3.55）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;Rg3+照射组的Foci焦点细胞数为（64±12）个,亦高于对照组的（6±3）个和单纯照射组的（32±6）个,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论Rg3对食管癌EC109细胞有放射增敏作用,能够抑制细胞活性并诱导细胞凋亡与DNA分子损伤。