黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响

目的 研究黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对相关蛋白表达的影响.方法 采用体外细胞培养方法,应用MTT法检测黄芩苷诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡作用;通过免疫细胞化学(S-P法)检测凋亡相关基因bcl-2、bax、P53蛋白表达的改变.结果 MTT结果表明,黄芩苷在体外对人肝癌HepG-2细胞有明显的诱导细胞凋亡作用,且这种抑制作用呈现浓度和时间依赖性.免疫细胞化学(S-P法)检测凋亡相关基因Bcl-2、P53蛋白表达明显减少、Bax表达明显增加;Bcl-2/Bax比例明显降低.结论 黄芩苷对人肝癌HepG-2细胞具有较强的诱导凋亡的作用,其作用机制可能与下调P53基因表达和降低Bcl-2/Bax比例有关.     

莪术油对小鼠原位移植HepA肝癌细胞影响的研究

目的:研究莪术油对HepA肝癌细胞的抑制作用及其对细胞周期相关因子的影响。方法:复制30只小鼠HepA移植性肝癌模型,随机分为莪术油组、5-FU组和生理盐水组,每组10只;并用免疫组化方法检测各组间细胞周期相关因子p16和p21蛋白的表达情况,比较各实验组的变化,评估莪术油抑制肝癌细胞生长的分子机制。结果:莪术油治疗组小鼠皮下肿瘤重量小于生理盐水组,p16和p21蛋白的表达高于生理盐水组(P<0.01),与5-FU组相比较无显著性差异(P>0.05)。结论:莪术油对小鼠肝癌细胞具有明显抑制作用,其机制可能是莪术油上调p16和p21蛋白的表达,影响细胞周期的发生而起到抗癌疗效。     

松针油诱导肝癌HepG2细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的:研究松针油对人肝癌HepG2细胞的作用.方法:水蒸气蒸馏法提取松针油,GC-MS分析其成分,不同浓度松针油处理HepG2细胞后,用MTT法测定HepG2细胞的生长抑制率.HE染色及电镜下观察细胞凋亡形态的改变.流式细胞仪技术检测细胞凋亡率;流式细胞仪检查bcl-2基因表达水平;TRAP法测定端粒酶活性的变化.结果:MTT法证明松针油可显著抑制HepG2细胞生长,抑制率与药物浓度正相关,呈现明显的量-效和时-效关系.流式细胞仪可以检测到细胞凋亡,0.125～8 mg/L的松针油能引起HepG2细胞凋亡,且呈时间依赖性及剂量依赖性.电镜下可观察到核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征.松针油在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调和bcl-2表达水平下降.结论:松针油诱导肝癌HepG2细胞凋亡,并抑制端粒酶活性,bcl-2参与了松针油诱导的肝癌HepG2细胞凋亡过程中端粒酶活性的调控.     

华蟾素对肿瘤细胞周期及bcl-2蛋白表达的影响

目的　探讨华蟾素诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法　采用流式细胞及免疫组化的方法 ,研究华蟾素诱导肿瘤细胞凋亡与细胞周期阻断和抗凋亡基因bcl- 2表达之间的关系。结果　华蟾素能将肿瘤细胞阻断在S期 ,并能抑制bcl- 2基因的表达。结论　华蟾素诱导肿瘤细胞凋亡 ,与其能阻断细胞周期、抑制bcl- 2基因表达有关     

莪术油联合干扰素对小鼠宫颈癌端粒酶活性和细胞凋亡的影响

目的探讨莪术油、莪术油联合α-2b干扰素抑制宫颈癌细胞的分子机制及其协同作用。方法通过莪术油、莪术油联合干扰素作用小鼠宫颈癌细胞,并设立阴、阳性对照组,比较各组间端粒酶活性和细胞凋亡率有无差异。结果莪术油可明显抑制宫颈癌细胞的端粒酶活性和诱导肿瘤细胞凋亡,并有一定的剂量依赖性;莪术油联合α-2b干扰素比单独莪术油效果好,统计学显示差异有显著性。结论抑制肿瘤的端粒酶活性和诱导肿瘤细胞发生凋亡可能是莪术油抗鼠宫颈癌的重要分子机制;α-2b干扰素与莪术油联合使用对抑制宫颈癌细胞增殖有协同效应。     

外燥对小鼠气管细胞凋亡与bcl-2基因及bax基因表达的影响

目的观察外燥对小鼠气管细胞凋亡与bc l-2基因及bax基因表达的影响。方法30只昆明种小鼠随机分为常温常湿组(A组),温燥组(B组),凉燥组(C组),每组10只。经处理后第14天用免疫组化法检测各组气管细胞凋亡率(%)、bc l-2、bax阳性指数(PI,%)、bc l-2/bax累积阳性指数(AI,%)与bc l-2:bax蛋白表达比值。结果3组小鼠气管细胞凋亡率均≤0.3%;B组与C组bc l-2 PI与AI均低于A组(P<0.01),B组、C组气管细胞bc l-2:bax蛋白比值中bax增加。结论外燥致气管细胞bc l-2表达降低、bc l-2:bax蛋白比值改变,bc l-2、bax阳性细胞以气道炎性病灶或纤毛缺损处多见,提示与外燥分子致病机制有关。     

苦参碱对NCI-N87胃癌细胞增殖凋亡及bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨不同浓度苦参碱对体外培养的人胃癌细胞NCI-N87的增殖、凋亡及bcl-2蛋白表达的影响。方法:NCI-N87细胞经不同浓度苦参碱处理后,采用CCK-8法检测药物对肿瘤细胞的抑制作用,显微镜观察细胞形态学改变;应用流式细胞仪分析苦参碱对细胞凋亡和bcl-2蛋白的影响。结果:苦参碱浓度>3mg/mL,细胞毒作用较大;浓度在0.5～2.0mg/mL时,对肿瘤细胞的生长有抑制作用,且呈时间剂量依赖性;浓度在0.1mg/mL,对肿瘤细胞生长几乎无抑制作用。流式细胞仪分析结果显示,细胞凋亡百分率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而增加,而bcl-2蛋白则随之下降。结论:苦参碱对人胃癌细胞NCI-N87增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡,下调bcl-2蛋白水平。     

PhaseoloidesideE诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

目的:以人肝癌HepG2细胞为研究对象,探讨phaseoloideside E(PE)的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法,检测不同浓度的PE处理48 h后对HepG2细胞的细胞毒性效应;应用光学显微镜、荧光显微镜观察PE处理下的细胞形态学变化;用DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测凋亡,并用免疫印迹法检测PE对凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2表达水平的影响。结果:PE对HepG2细胞的生长有明显的细胞毒性效应;直接形态显微观察及Hoechst 33258荧光染色皆可见典型的凋亡细胞形态学特征;琼脂糖凝胶电泳结果显示给药组出现明显的DNA梯状凋亡带,而对照组没有出现梯状条带;免疫印迹结果显示PE可以增加Bax表达并减少Bcl-2表达。结论:PE能够诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,并提示PE诱导的Bax,Bcl-2蛋白的表达水平变化可能与它的凋亡诱导效应紧密相关。     

白藜芦醇对人卵巢癌细胞株A2780凋亡及bcl-2及Bax蛋白表达的影响

目的：研究白藜芦醇对卵巢癌细胞株A2780的凋亡诱导作用,并探讨其对凋亡相关基因Bax和bcl-2表达的影响。方法：50、100及200μmol／LRES分别作用12～72h后,末端TdT酶标记技术检测细胞凋亡：免疫组化法检测凋亡控制蛋白的表达。结果：RES能明显诱导卵巢癌细胞A2780凋亡。且呈时间与剂量依赖性;随着RES浓度的增加,Bax基因的表达增加而bcl-2的表达减少。结论：可诱导卵巢癌细胞A2780发生凋亡,bcl-2蛋白的减少与bax蛋白表达增多可能是RES诱导卵巢癌细胞A2780凋亡的机制之一。     

莪术油对小鼠肝癌细胞抑制作用的分子机理

目的 :研究莪术油抑制小鼠HepA肝癌细胞的分子机制。方法 :建立小鼠HepA肝癌模型 ,进行莪术油抑癌试验 ,并用免疫组化法检测细胞增殖核抗原 (PCNA)、细胞周期素D1(cyclinD1)的表达 ,探讨莪术油抑制小鼠肝癌的分子机理。结果 :莪术油治疗组的瘤重、PCNA标记指数、cyclinD1标记指数均低于生理盐水组 (P <0 .0 1)。结论 :莪术油可能是通过下调cyclinD1的表达 ,抑制PCNA的阳性表达率 ,进而抑制肿瘤的生长。     

苦参碱对肺腺癌细胞凋亡及bcl-2、bax表达的影响

目的探讨中药提取物苦参碱对人肺腺癌细胞系SPC-A-1的凋亡诱导作用及其发生的机制。方法用不同浓度的苦参碱对体外培养的SPC-A-1细胞进行干预。分别采用MTT、免疫细胞化学染色、流式细胞仪检测的方法,观察其对SPC-A-1细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用;并对凋亡相关bcl-2与bax蛋白表达的变化进行定性检测。结果经不同浓度的苦参碱处理后的SPC-A-1细胞,其生长受到明显的抑制,细胞凋亡指数随药物浓度增加而明显增加;实验组bax表达明显高于对照组。结论一定浓度的苦参碱能抑制SPC-A-1细胞的增殖,促进其凋亡;其机制可能与调控bcl-2、bax表达有关。     

儿黄散对宫颈上皮内瘤变小鼠宫颈组织PCNA、EGFR和bcl-2表达的影响

目的:探讨儿黄散逆转宫颈上皮内瘤变、阻断宫颈浸润癌发生途径的作用机制。方法:利用二甲基苯蒽(DMBA)诱发小鼠宫颈上皮内瘤变动物模型,局部给药5月,免疫组织化学法检测造模小鼠宫颈组织增殖细胞核抗原(PCNA)、表皮生长因子受体(EGFR)和细胞凋亡抑制基因bcl-2的表达。结果:中药治疗组小鼠宫颈组织PC-NA、EGFR和bcl-2阳性表达数量减少,程度减轻,与模型组相比有统计学意义。结论:儿黄散通过对PCNA、EGFR和bcl-2的调控,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,使宫颈癌前病变细胞向良性转化,从而阻断宫颈浸润癌的发生。     

原花青素对β-淀粉样肽25-35诱导PC12细胞par-4和bcl-2基因表达的影响

目的探讨原花青素(PC)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA的表达,Westernblotting检测PC12细胞Par-4和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量(5、10、20、30mg/L)PC预处理PC12细胞1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高PC12细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的PC12细胞核固缩、凝聚和碎裂,降低par-4基因mRNA表达及蛋白表达,增加bcl-2基因mRNA表达及蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因par-4和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

赤芍总苷对荷瘤鼠细胞因子分泌的调节及对bcl-2、p16表达的影响

[目的]通过观察赤芍总苷(TGC)对荷瘤小鼠免疫功能的调节及对肿瘤细胞凋亡的调控,研究TGC抗肿瘤的作用机制.[方法]采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平;用免疫组化SABC法检测瘤荷小鼠瘤组织bcl-2和p16的表达.[结果]TGC提高瘤荷小鼠外周血IL-2的分泌,TGC组与荷瘤对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);与荷瘤对照组比较,TGC组IL-10分泌显著低于荷瘤对照组(P＜0.01),TGC降低IL-10分泌水平;TGC组与荷瘤对照组比较,bcl-2蛋白阳性细胞数表达均低于荷瘤对照组(P＜0.05),下调bel-2的表达水平,上调p16蛋白表达水平(P＜0.01).[结论]TGC通过调节荷瘤机体异常的免疫状态及诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

银杏叶提取物预处理对大鼠脑梗死后皮质Bax、Bcl-2表达的影响

目的 观察银杏叶提取物(GBE)预处理对大鼠脑梗死后皮质Bax、Bcl-2表达的影响.方法 大鼠随机分为假手术组,模型组以及GBE预处理组,线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞模型.假手术组以及模型组手术前30min腹腔注射生理盐水0.4ml,GBE预处理组腹腔注射舒血宁35mg/kg.造模24h后取大脑皮质,TTC染色测定梗死体积,免疫荧光化学法测定Bax、Bcl-2的表达.结果 TTC染色测得的梗死体积百分比在GBE预处理组为(25.87±1.56)%,免疫荧光化学法测得Bax蛋白表达阳性细胞数为(13.79±1.95)个/视野,Bcl-2表达阳性细胞数为(52.68±4.35)个/视野,各指标与模型组差异显著.结论 GBE可有效减轻梗死体积,调节Bax/Bcl-2的表达可能是其发挥作用的机制之一.     

瑞香狼毒诱导HL-60细胞凋亡和调节SGC-7901细胞bcl-2蛋白表达

目的：探索瑞香狼素（SC）抗肿瘤机制。方法：以HL－60和SGC－7901为靶细胞,用MTT比色法测定细胞增殖抑制,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学改变,DNA电泳和流式细胞仪检测DNA断裂,免疫组化检测bcl-2蛋白表达。结果：含SC药物血清处理细胞48h后,HL－60细胞增殖呈剂量依赖性抑制,并表现出典型的凋亡细胞形态学改变及DNA断裂;即染色体聚集,核固缩,断裂及阶梯状DNA电泳条带,G1期前细胞从11．7％增到57．4％;而SGC－7901细胞bcl-2蛋白表达率从78．3％下降到32．9％。结论：SC可诱导肿瘤细胞凋亡,降低bcl-2蛋白表达。     

针刺对多发梗塞性痴呆模型大鼠海马bcl-2及bax的影响

目的:观察针刺对多发梗塞性痴呆模型大鼠海马bcl-2和bax mRNA及蛋白表达的影响。方法:通过向颈内动脉注入自体血栓的方法建立大鼠MID模型。将大鼠随机分为模型组、针刺组、非穴组和假手术组;针刺组取人中、内关、风池穴,非穴组取双侧肋下两固定非穴点,每日针刺1次;模型组与假手术组进行与针刺组和非穴组相同时间、相同程度的捉抓。连续针刺2 w后断头处死大鼠,取左侧大脑。原位杂交和免疫组化法观察海马bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达。结果:模型组bcl-2和bax mRNA和蛋白的表达均增加;针刺后,bcl-2 mRNA和蛋白的表达进一步增加,bax mRNA和蛋白的表达减少。结论:针刺可促进MID模型大鼠海马bcl-2的表达,抑制bax的表达,从而保护脑组织,且这种作用具有穴位特异性。     

央芪汤对胃癌细胞凋亡影响的实验研究

目的观察央芪汤对胃癌细胞凋亡的影响。方法培养人胃癌细胞SGC-7901细胞株,用MTT法评价央芪汤对胃癌细胞增殖的抑制作用,确定央芪汤对胃癌细胞的IC50值,采用流式细胞术检测央芪汤对胃癌细胞凋亡的诱导作用,免疫细胞化学法检测胃癌细胞中bcl-2及caspase-3蛋白的表达情况。结果央芪汤可以显著促进胃癌细胞SGC-7901的凋亡(P0.01),明显增加胃癌细胞SGC-7901凋亡蛋白caspase-3的表达(P0.01),并可明显抑制抗凋亡蛋白bcl-2的表达(P0.01)。结论央芪汤可以通过促进胃癌细胞的凋亡,达到抗肿瘤的目的。     

中药何首乌饮对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2,bax表达的影响

目的通过测定不同剂量的中药何首乌饮含药血清作用后的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达及caspase-3活性,探讨何首乌饮对卵巢自身功能的影响。方法制备排卵前卵巢模型,收集颗粒细胞分别与雌性SD幼鼠空白血清及含不同剂量何首乌饮的药物血清在体外共同培养,Western blotting检测GC内凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达情况;分光光度法检测颗粒细胞内caspase-3活性。结果何首乌饮含药血清可上调颗粒细胞bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,中、高剂量组何首乌饮含药血清与对照组比较,可明显上调bcl-2蛋白表达(P均<0.01),中、高剂量组何首乌饮含药血清与对照组比较,明显下调bax蛋白表达(P均<0.01)。何首乌饮含药血清可下调颗粒细胞caspase-3活性,中、高剂量何首乌饮含药血清组与对照组比较有显著性差异(P均<0.01)。结论何首乌饮增加GC内凋亡抑制蛋白bcl-2表达及减少凋亡促进蛋白bax表达的作用,可能是其抑制GC凋亡,防止卵泡闭锁的作用途径之一;同时何首乌饮可能是在凋亡的较早阶段,通过阻断caspase-3的级联裂解即可开始起效,而发挥凋亡抑制作用。