黄体生成素受体基因的激活突变与青春期发育关系的研究进展

黄体生成素受体 (L HR)基因突变会影响人类尤其是男性的性发育。本文从黄体生成素受体基因的定位、激活突变的类型、对两性性发育的影响以及可能的致病机制等方面对国外 L HR基因激活突变的分子遗传学研究进展进行综述     

黄体生成素受体rs61996318基因多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究

目的探讨黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因rs61996318多态性与PCOS的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism PCR-RFLP)方法对北京大学第三医院及北京妇产医院生殖中心门诊患者进行LHR基因rs61996318多态性进行检测,并通过基因测序证实。结果 RFLP检测未发现rs61996318位点突变。通过基因测序证实无突变。结论 LHCGR的SNP位点rs61996318是中国人稳定的多态位点,与PCOS的发病无关。     

缝隙连接蛋白43和黄体生成素受体在小鼠卵巢中的表达

目的 观察小鼠卵泡发育过程中缝隙连接蛋白43（Cx43）和黄体生成素受体（LHR）在小鼠卵巢中的表达以及黄体生成素(LH)对卵巢Cx43表达的影响,为这两种分子与卵泡发育的关系提供实验依据。 方法 选择出生后1d、4d、7d、2周、3周、4周、6周、8周龄雌性C57小鼠共8组,每组10只,取卵巢。HE染色观察卵巢形态、卵泡发育并测量颗粒细胞体积分数。免疫组织化学和Western blotting观察卵巢组织中Cx43及LHR的表达,Western blotting检测不同浓度黄体生成素（LH）孵育后对卵巢Cx43表达的影响。 结果 HE染色显示,出生1d小鼠卵巢中见原始卵泡,出生7d卵巢内出现初级卵泡,2周时出现窦前卵泡和少量窦卵泡,3周、4周时,出现较多大的窦卵泡,6～8周时出现黄体。卵泡颗粒细胞体积分数在2周后的卵巢中明显增加。Cx43表达在各阶段卵泡的颗粒细胞胞膜上,LHR表达在卵泡膜细胞、颗粒细胞及卵母细胞胞质中。Cx43和LHR出生后2周卵巢中的表达开始明显增加,并随卵泡发育表达逐渐增强,在3周、4周、6周和8周维持相对较高水平。LH体外干预可增加卵巢组织Cx43的表达。 结论 Cx43和LHR在卵泡发育中发挥重要作用,LH可能通过LHR促进卵巢卵泡颗粒细胞Cx43的表达。     

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体的影响

目的:探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体(LHR)的影响.方法:复制运动疲劳动物模型,测定睾酮水平,采用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学法检测各组睾丸组织LHR的表达变化.结果:LHR免疫组化阳性颗粒主要表达于间质细胞以及精母细胞胞膜和胞质,何首乌饮预防组和何首乌饮治疗组阳性信号较强,模型组最弱.LHR蛋白和mRNA表达变化为:何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组明显高于对照组和何首乌饮组,模型组明显低于对照组.结论:何首乌饮可以提高大鼠睾丸组织LHR的表达.     

黄体生成素β Gly102Ser基因多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究

目的探讨黄体生成素β(Luteinizing hormoneβ-subunit,LHβ)Gly102Ser及黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因多态性与PCOS的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测LHβGly102Ser多态性,分析LHβ基因多态性与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的相关性。结果 PCOS组中LHβGly102Ser基因有14例突变型,占3.3%。对照组中3例突变,占1.1%;PCOS组LHβGly102Ser基因突变率显著高于对照组(P=0.006);LHβGly102Ser基因突变型的血清基础LH水平低于对照组(P0.05),但突变组有降低趋势;PCOS组内血清LH2mmol/L的患者,LHβ基因Gly102Ser发生突变的比例显著增加(P=0.003)。结论 PCOS人群中存在LHGly102Ser基因多态性,此多态性与PCOS有明显的相关性。LHβGly102Ser基因多态性可能是PCOS发病的危险因素之一。     

黄体生成素及其受体在大鼠肝脏的定位

目的观察黄体生成素(LH)及其受体(LHR)在大鼠肝脏的定位分布,为研究LH是否参与肝代谢功能的调节提供形态学依据。方法应用免疫荧光组织化学双标染色技术,在激光共聚焦扫描显微镜下观察染色结果。结果大鼠肝细胞既呈LH阳性又有LHR阳性,LH和LHR免疫反应阳性物质均分布在大鼠肝细胞的细胞质,细胞核为阴性。不同部位的肝细胞LH及其受体免疫反应强度存在差别。结论 LH及其受体存在于大鼠肝脏细胞,可能对肝脏的功能起调节作用。     

定量测定尿促性腺激素判断女童性发育程度的临床研究

目的 探究定量检测女童尿促性腺激素进而诊断性发育程度的临床意义,便于女童性发育异常筛查的简便法.方法 选取2015年12月-2020年12月于大足区人民医院就诊的368例女童进行分析,全部女童均有乳房发育表征,都经过了血清卵泡生成素、GnRH激发试验、血清促黄体生成素检查,也同期完成了尿促黄体生成素、尿卵泡生成素检查....     

大鼠颌下腺黄体生成素及其受体的定位、核心片段的克隆及序列分析

目的 探讨大鼠颌下腺组织中是否表达黄体生成素(LH)及其受体(LHR),为进一步研究LH对颌下腺的功能调节提供理论依据.方法 采用免疫组织化学SABC和原位杂交方法进行定位研究;应用RT-PCR方法克隆获得LH及LHR基因的cDNA核心序列,并进行序列分析.结果 大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞呈LH和LHR免疫反应阳性.阳性物质分布于胞浆,胞核呈阴性反应.上述细胞同样含有LH和LHR mRNA杂交信号,信号物质亦分布于胞浆内,胞核呈阴性反应.从大鼠颌下腺组织中扩增的LH及LHR基因的特异性条带经序列分析发现,扩增产物的LH基因序列与文献报道的大鼠腺垂体的完全一致;扩增产物的LHR基因序列与大鼠睾丸组织的完全一致.结论 大鼠颌下腺浆液性腺泡上皮细胞既能产生LH,又能表达LHR,提示LH对颌下腺浆液性腺泡上皮细胞的作用可能是通过自分泌或旁分泌来实现的.     

家族性男性性早熟一家系LHCGR基因突变分析

目的 报告1例家族性男性性早熟(familial male-limited precocious puberty,FMPP)患儿的临床特点,并对其黄体生成素受体基因(LHCGR)进行突变分析.方法 收集1例3.1岁FMPP患儿的临床资料,包括性征检查、促性腺激素释放激素兴奋试验、血清睾酮检测及骨龄检查等.对患儿及其父母外周血白细胞LHCGR基因的11个外显子进行PCR扩增和DNA直接测序.结果 患儿为男性,身高116.8cm(+5.1s),外阴发育2期,双侧睾丸8 mL,阴茎8.5 cm×2.5 cm,睾酮2310 ng/L,骨龄9岁,垂体兴奋试验显示黄体生成素峰值2.66 IU/L,卵泡刺激素峰值1.03 IU/L,符合外周性性早熟的临床表现.PCR扩增片段直接测序显示患儿LHCGR基因第n外显子1703C>T突变,导致568位氨基酸由丙氨酸替换为缬氨酸.用芳香化酶抑制剂半年后,患儿的骨龄得到控制.患儿父亲检测到相同的基因突变位点,但未出现青春发育异常.结论 FMPP是外周性性早熟的罕见病因.本病例有典型的临床表现,检测发现其LHCGR基因杂合突变c.1703C>T(Ala568Val),为国内首次发现.父子具有相同突变基因但表型不同,提示FMPP具有不一致的表现度.     

围着床期小鼠卵巢黄体生成素受体和血管内皮生长因子表达的免疫组织化学研究

目的 探讨黄体生成素受体(LHR)和血管内皮生长因子(VEGF)在围着床期小鼠卵巢中的生物学作用. 方法 应用免疫组织化学SABC法和图像分析,检测LHR与VEGF在昆明小鼠( n =28)动情期、孕1d、孕4d和孕6d卵巢中的分布状况和变化规律. 结果 LHR与VEGF免疫阳性细胞具有相似的分布和变化规律.在动情期,较大的卵泡周围的基质细胞呈强阳性着色,与其他组相比,差异显著( P <0.05).随着妊娠的继续,颗粒黄体细胞的着色逐渐增强,在孕6d时表达最强.在动情期和孕1d,部分血管内皮和血细胞分别呈VEGF和LHR强阳性着色.从孕1d开始,卵泡膜细胞呈LHR阳性着色. 结论 LHR和VEGF的表达与围着床期小鼠卵巢中卵泡的发育、排卵和黄体形成过程密切相关.     

卵泡发育及辅助生殖促排卵中促黄体生成素的作用研究

目的 研究卵泡发育及辅助生殖促排卵中促黄体生成素的作用。方法 回顾分析2016年5月~2017年5月在我院进行促排卵的94例不孕症患者,随机分为对照组和观察组,每组47例。对照组采用重组人卵泡刺激素,观察组在对照组基础上采用促黄体生成素,对比两组患者血清指标及卵泡发育情况。结果 观察组患者血清黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;观察组患者获卵数、成熟卵子数、优质胚胎数明显高于对照组,观察组妊娠率、种植率明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 卵泡发育及辅助生殖促排卵中,促黄体生成素可有效促进卵泡的发育,提高临床妊娠率,值得推广应用。     

促性腺激素释放激素信号转导研究进展

促性腺激素释放激素(gonadotropinreleasinghormone,GnRH)与垂体前叶细胞膜上特异的G蛋白偶联受体(Gproteincoupledreceptor,GPCR)结合,激活胞内一系列信号分子,最终使特定的基因表达,合成并分泌黄体生成素和卵泡刺激素。此外,GnRH脉冲频率的变化可影响胞内信号通路组件和下游基因反应的模式。促性腺激素基因自身结构的差异及各自启动子结构的不同,可部分解释GnRH受体下游基因反应的频率敏感性。     

被动吸烟下调大鼠卵泡刺激素、黄体生成素、促性腺激素释放激素及其受体的表达

目的 研究被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构、激素受体及血清中激素的影响. 方法 Wistar大鼠32只,分为实验组和对照组(各16只).实验组大鼠吸烟3个月,对照组不予吸烟,3个月后处死大鼠.光镜及电镜下观察各组大鼠卵巢结构的改变,免疫组织化学染色检测激素受体的改变,酶联免疫吸附试验检测血清中激素的改变情况. 结果 实验组大鼠卵巢髓质血管收缩、减少,间质疏松.卵巢颗粒细胞内线粒体水样变、空泡样变,线粒体嵴断裂、模糊;粗面内质网脱颗粒样变.血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)水平比对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05).实验组大鼠卵巢组织中卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)的表达显著低于对照组(P＜0.01,P＜0.05). 结论 被动吸烟可使大鼠血清中FSH、LH及GnRH水平明显降低,大鼠卵巢中FSHR及LHR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的结构及功能,引起生殖内分泌失调.     

黄体生成素及其受体在大鼠胰腺的免疫荧光定位

目的观察黄体生成素(LH)及其受体(LHR)在SD大鼠胰腺的定位分布,以了解LH对胰腺的功能意义。方法选取SD大鼠12只,雌雄不拘,经腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后,用4%多聚甲醛灌流固定2h,取出胰腺组织置于300g/L蔗糖液中,用于双标记免疫荧光定位研究,在激光共聚焦扫描显微镜下观察。结果胰腺部分外分泌腺细胞质、导管上皮细胞及部分胰岛细胞质LH反应阳性,小血管内皮细胞质呈LH弱阳性。部分胰岛细胞质呈LHR反应阳性,一些外分泌腺上皮细胞质呈LHR反应弱阳性,部分胰岛细胞及胰腺外分泌细胞质呈LH和LHR双阳性反应。结论LH可能通过旁分泌或自分泌的途径对胰腺的功能起调节作用。     

小鼠发育期卵巢成纤维细胞生长因子10的表达

目的 研究小鼠卵巢发育期成纤维细胞生长因子10(FGF10)的表达. 方法 分离孕E14.5、E16.5、E18.5、生后第1天和3周龄小鼠卵巢,每组实验动物6只,应用免疫组织化学技术研究FGF10蛋白在卵巢中的表达;3周龄小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)48h后,再注射人绒毛膜促性腺激素(hCG),hCG注射后3h提取总mRNA,应用RT-PCR技术研究卵巢中FGF10、黄体生成素受体(LHR)、成纤维细胞生长因子7(FGF7)和成纤维细胞生长因子受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)基因的表达变化. 结果 FGF10蛋白表达于卵母细胞,并且FGF10在生后第1天小鼠的卵母细胞上表达最强;两种促性腺激素处理后,FGF10 mRNA 与对照组相比表达下降,LHR mRNA表达升高,FGF7和FGFR2Ⅲb mRNA表达不变. 结论 FGF10蛋白特异表达于小鼠卵母细胞膜,促性腺激素影响卵巢FGF10 mRNA的表达,推测FGF10可能参与调控小鼠卵母细胞的生长和卵泡发育.     

FGFR3在骨骼发育和疾病中作用的研究进展

FGFR3是成纤维细胞生长因子受体（Fibroblast growth factor receptors ,FGFRs）家族成员之一,在骨骼发育中起重要作用。FGFR3的激活突变引起一系列骨骼发育缺陷性疾病,如软骨发育不全（achondroplasia,ACH）、季肋发育不全（hypochondroplasia,HCH）和致死性骨发育不全（thanatophoric dysplasia,TD）。目前研究认为,FGFR3在骨骼发育中抑制软骨形成的作用是明确的,但其对骨形成的作用尚不明确,需要进一步研究。     

影响卵泡发育的因素及相关信号传导

卵泡的发育与闭锁除了受到垂体分泌的卵泡刺激素（FSH）和促黄体生成素（LH）的内分泌调节外，卵巢内局部因子对卵泡生长的影响尤为重要。     

罕见46, XX性发育睾丸疾病合并前列腺生殖细胞肿瘤病例的遗传学及病理学特征分析

目的分析一例46, XX性发育睾丸疾病合并前列腺生殖细胞肿瘤患者的临床特点、遗传学和病理学特征并探讨其致病原因。方法对患者进行临床特征分析及病理学检查, 用染色体核型分析及荧光原位杂交技术分析其遗传学特征。结果患者身高偏矮、双侧睾丸小、乳房轻度增大, 血清甲胎蛋白浓度显著升高, 卵泡刺激素、促黄体生成素、泌乳素升高, 睾酮水平偏低。染色体核型为46, XX, 荧光原位杂交提示一条X染色体短臂末端上存在SRY基因。病理学诊断为前列腺原发性生殖细胞肿瘤, 主要为卵黄囊瘤。结论确诊一例46, XX性发育睾丸疾病合并原发前列腺生殖细胞肿瘤病例, 丰富了该疾病的基因和表型谱, 并为该病治疗提供一些思路。     

视黄酸受体与T淋巴细胞发育

视黄酸(retinoic acid)受体属于核受体超家族，通过与其配体结合调节靶基因转录，从而发挥各种生物学效应。视黄酸受体的表达分布具有时间与空间的特异性，不同的视黄酸受体亚型的表达在T淋巴细胞发育过程中起不同作用。视黄酸受体可通过对T淋巴细胞增殖、分化和凋亡的影响而调节T淋巴细胞发育。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠睾酮水平、LHR和StAR mRNA表达的影响

目的： 探讨银杏叶提取物(EGB)在2型糖尿病大鼠睾酮合成中的作用及其对黄体生成素受体(LHR)、类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)基因表达的影响。方法: 雄性SD大鼠30只，随机均分成3组：正常对照组、2型糖尿病组、EGB 治疗组。后2组给以高脂饮食加小剂量(30 mg/kg)链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型，EGB治疗组予EGB50mg·kg^-1·d^-1灌胃12周，正常对照组及2型糖尿病组灌服等容积生理盐水。测定各组大鼠血葡萄糖、血胰岛素、血LDL-c含量；称各组大鼠睾丸重量，并用光镜和透射电镜观察大鼠睾丸组织的形态学改变； ELISA法检测血清黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平；RT－PCR检测睾丸组织中LHR、StAR mRNA表达水平。结果: 与正常组相比，糖尿病组大鼠血清T、LH含量及睾丸组织的StAR mRNA含量明显降低，血糖、血胰岛素、LDL-c及LHR mRNA含量显著升高，睾丸重量明显减轻；光镜下主要表现为睾丸曲细精管内生精细胞数量减少及生精阻滞，透射电镜下主要见到间质细胞(Leydig cell)及支持细胞内线粒体、内质网等细胞器空泡样变及扩张。EGB治疗组睾丸组织病理改变较轻，血清T 、LH含量及睾丸组织StAR mRNA含量明显高于糖尿病组，血糖、血胰岛素、LDL-c及睾丸组织LHR mRNA含量低于糖尿病组。结论: EGB可提高2型糖尿病大鼠T的合成，其机制可能与改善糖脂代谢紊乱，调节LHR、StAR mRNA表达有关。