CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在不明原因复发性自然流产中的作用

 【目的】 检测不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血及蜕膜的CD4+ CD25high T细胞和FOXP3的表达,探讨CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在母胎免疫耐受中的作用&;#65377;【方法】 选择从2005年9月至2006年6月就诊的154例URSA患者根据就诊时的妊娠状态分成未孕组129例,早期流产组25例;正常早孕要求人工终止妊娠的妇女组50例及正常未孕女性组42例为对照组&;#65377;收集所有研究对象的外周血及由于计划外妊娠要求行人工流产者和已确认胚胎停育的URSA患者行清宫术后的新鲜蜕膜组织,采用流式细胞仪分析外周血及蜕膜组织CD4+ CD25+ 调节性T细胞及其亚群的比例及FOXP3表达&;#65377; 【结果】 ①外周血及蜕膜中CD4+ CD25high T细胞的比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞高于正常未孕妇女及URSA流产组, 差异有统计学意义(P < 0.01),URSA未孕患者外周血CD4+ CD25high T细胞也显著低于正常未孕女性及URSA流产患者(P < 0.01);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞低于正常早孕妇女蜕膜(0.62 ± 0.27 vs. 1.41 ± 0.31, P < 0.01)&;#65377;②外周血及蜕膜中FOXP3表达比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例为(95.6 ± 3.6),高于正常未孕妇(92.1 ± 3.4)及URSA流产患者,差异有统计学意义(P < 0.01;P < 0.05);URSA未孕组患者外周血中FOXP3的表达与正常未孕妇女及URSA流产组之间相比无统计学差异(P > 0.05);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例低于正常早孕妇女蜕膜,差异有统计学意义(94.3 ± 3.1 vs. 97.1 ± 2.2, P < 0.01)&;#65377;【结论】 CD4+CD25high T细胞在维持正常妊娠中发挥重要作用,URSA的发生与CD4+CD25high T细胞的减少有关,URSA患者CD4+ CD25high T细胞比例下降与FOXP3表达的降低有关&;#65377;     

福莫特罗对哮喘小鼠气道杯状细胞增生及 粘蛋白MUC5ac mRNA表达的影响

 【目的】 探讨长效β2受体激动剂福莫特罗对哮喘(支气管哮喘)小鼠气道杯状细胞增生及粘蛋白MUC5ac mRNA表达的影响&;#65377;【方法】 40只雌性SPF级BABL/c小鼠,随机分为4组,每组10只&;#65377;A组为生理盐水对照组;B组为卵蛋白(ovalbumin,OVA)哮喘组;C组为哮喘福莫特罗干预组;D组为哮喘地塞米松干预组&;#65377;在末次激发24 h后所有小鼠取左肺组织行过碘酸雪夫(PAS)染色,采用医学图像分析软件测定支气管上皮杯状细胞面积占上皮细胞总面积的百分比并计算杯状细胞数量&;#65377;取右肺组织行real-time qRT-PCR,检测粘蛋白MUC5ac mRNA的表达&;#65377;【结果】 B组小鼠支气管上皮杯状细胞的数量&;#65380;杯状细胞占上皮细胞总面积的百分比和MUC5ac mRNA水平显著高于A组[(163.63 ± 16.68)个vs (0.46 ± 0.16)个,(77.36 ± 5.05)% vs (0.03 ± 0.01)%,(10.31 ± 0.73) vs ( 1.00 ± 0.13),P均 < 0.05];C组小鼠支气管上皮杯状细胞的数量&;#65380;杯状细胞占上皮细胞总面积的百分比和MUC5ac mRNA水平均低于B组[(52.04 ± 4.60)个 vs (163.63 ± 16.68)个,(30.05 ± 3.72)% vs (77.36 ± 5.05)%,(1.64 ± 0.14) vs (10.31 ± 0.73),P均 < 0.05] ;D组小鼠支气管上皮杯状细胞的数量&;#65380;杯状细胞占上皮细胞总面积的百分比和MUC5ac mRNA水平均低于B组[(63.41 ± 6.39)个 vs (163.63 ± 16.68)个,(38.52 ± 3.83)% vs(77.36 ± 5.05)%,(1.72 ± 0.10) vs (10.31 ± 0.73),P均 < 0.05];C组和D组的杯状细胞数量&;#65380;面积百分比和MUC5ac mRNA水平间差异均无统计学意义[(52.04 ± 4.60)个 vs (63.41 ± 6.39)个,(30.05 ± 3.72)% vs (38.52 ± 3.83)%,(1.64 ± 0.14 ) vs (1.72 ± 0.10),P均 > 0.05]&;#65377;【结论】 长效β2受体激动剂福莫特罗可抑制哮喘小鼠气道杯状细胞增生及粘蛋白MUC5ac mRNA的表达&;#65377;     

中重度哮喘患儿白细胞介素-17与中性粒细胞炎症反应的关系

 【目的】 探讨白细胞介素-17(IL-17)在中重度儿童哮喘发病&#65380;气道中性粒细胞炎症反应中的作用&#65377;【方法】 中重度持续哮喘发作期儿童45例,其中中度持续组(20例)与重度持续组(25例);以健康儿童20例为对照组&#65377;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患儿外周血单个核细胞(PBMC)在CD3和CD28单克隆抗体刺激下分泌的IL-17水平,检测诱导痰中性粒细胞数量;对以上病例进行联合治疗3个月后随访,达到临床缓解的病例20例纳入哮喘缓解组,复查其IL-17水平&#65377;比较不同病情间IL-17的表达水平,了解IL-17与儿童哮喘临床病情&#65380;气道炎症反应的关系&#65377;【结果】 哮喘患儿PBMC表达IL-17水平显著高于正常对照组(2 685 ± 1 081) pg/mL,其中哮喘发作组 (5 355 ± 813) pg/mL显著高于哮喘缓解组(4 504 ± 687) pg/mL (P均 < 0.05);重度持续组患儿PBMC表达IL-17水平(5 830 ± 807) pg/mL显著高于中度持续组(4 962 ± 751) pg/mL (P < 0.05);急性发作期哮喘患儿IL-17水平(5 355 ± 813) pg/mL与诱导痰中性粒细胞比例(Xmin = 0, Xmax = 98.8, M = 44.73)%&#65380;血中性粒细胞比例(51.72 ± 13.43) %成正相关(r = 0.820&#65380;0.736, P < 0.001)&#65377;【结论】 中重度哮喘患儿外周血单个核细胞IL-17表达水平升高,并与哮喘临床病情&#65380;气道炎症反应密切相关&#65377;     

最低流量麻醉中七氟醚在两种挥发罐设定浓度下 的摄取规律及有效性观察

 【目的】 比较最低流量麻醉中七氟醚在体积百分数为8%与6%两种挥发罐设定浓度下的摄取规律及其临床实施的有效性&;#65377;【方法】 气管插管全身麻醉下行胃肠道手术的患者40名,ASAⅠ-Ⅱ级,年龄20 ~ 60岁,按七氟醚挥发罐开启浓度(Fd)随机分为两组:8%组(G1组)和6%组(G2组),每组20例&;#65377;经静脉诱导行气管插管接麻醉机后即将新鲜气流量调至0.5 L/min并维持在这一水平,按分组方法开启七氟醚挥发罐浓度至8%(G1组)或6%(G2组),维持呼气末CO2分压(EtCO2)于30 ~ 40 mmHg&;#65377;每隔两分钟记录一般生命体征&;#65380;七氟醚吸入浓度(Fi)&;#65380;肺泡浓度(Fa,以呼末浓度表示)&;#65380;最小肺泡浓度(MAC)值以及脑电双频指数(BIS),直至呼末七氟醚浓度达1.3 MAC (2.6%)&;#65377;【结果】 开启挥发罐10 min后G1组的Fi&;#65380;Fa值分别达(2.82 ± 0.21)%及(2.14 ± 0.20)%;G2组分别达(1.92 ± 0.17)%及(1.45 ± 0.18)%&;#65377;两组Fi/Fd&;#65380;Fa/Fd在2&;#65380;4 min时无差别;在6&;#65380;8&;#65380;10 min G1组高于G2组(P < 0.05);摄取期末G2组高于G1组(P < 0.05);G1组的Fa达1.3MAC的时间为(13.61 ± 2.12) min,G2组为(27.89 ± 7.62) min,差异有统计学意义(P < 0.001)&;#65377;【结论】 七氟醚用于最低流量麻醉时,8%的挥发罐设定浓度可使呼吸道浓度在(13.61 ± 2.12) min即达到1.3 MAC,且BIS值已达到临床麻醉所需深度,心血管稳定性好,适于临床推广;而6%的挥发罐设定浓度则需(27.89 ± 7.62) min才能达到1.3 MAC,未能理想达到临床应用的要求&;#65377;     

5 个新Y-STR基因座及其在广州地区汉族群体内的单倍型分布

 【目的】 从Y染色体DNA序列中筛选新的Y-STR基因座,调查其在汉族群体中的遗传多态性&;#65377; 【方法】 在人类Y染色体DNA序列中查找Y-STR基因座,确定它们在Y染色体上的定位并测序,与已报道的Y-STR基因座比较&;#65377;检测汉族(广州地区)无关男性群体中这些Y-STR基因座单体型&;#65377;【结果】 鉴别出5个Y-STR基因座(DYS709,DYS720,DYS721,DYS722和DYS723),其中3个STR基因座是新发现的,另2个基因座与在线报告的重叠&;#65377;所有5个STR基因座都是男性特有的&;#65377;它们的扩增产物长度介于185 bp ~ 278 bp&;#65377;在108例汉族无关男性个体中发现DYS709有6个,DYS720有11个,DYS721有4个,DYS722有6个,DYS723有6个等位基因&;#65377;在本组群体中发现95种单体型,其中84种只出现1次&;#65377;单体型多样性达0.997 2 ± 0.001 2&;#65377;【结论】 这组5个Y-STR基因座可望应用于汉族群体的有关研究中&;#65377;     

游离睾酮指数对诊断多囊卵巢综合征高雄激素 血症不孕患者的价值

 【目的】 探讨游离睾酮指数在诊断多囊卵巢综合征(PCOS) 高雄激素血症不孕患者的价值&;#65377;【方法】 对1113例不孕患者进行前瞻性研究,观察组(PCOS组) 533例;对照组(排卵正常的非PCOS不孕妇女) 580例&;#65377;其中观察组根据体质量指数(BMI)分肥胖PCOS组(109例)和非肥胖PCOS组(424例)&;#65377;检测基础生殖内分泌激素&;#65380;性激素结合球蛋白(SHBG)&;#65380;空腹血糖(FPG)&;#65380;空腹胰岛素(FINS),并计算游离睾酮指数(FAI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)&;#65377;比较各组各项指标的变化,探讨游离睾酮指数在诊断多囊卵巢综合征(PCOS) 高雄激素血症不孕患者的价值&;#65377;【结果】 PCOS组基础黄体生成素(LH)水平&;#65380;LH/卵泡刺激素(FSH)比值&;#65380;FAI&;#65380;FINS&;#65380;HOMA-IR均高于正常组,SHBG水平低于正常组(P < 0.05),差异有统计学意义&;#65377;两组的总睾酮水平差异无统计学意义&;#65377;通过Logistc回归分析提示HOMA-IR&;#65380;LH/FSH比值&;#65380;FAI&;#65380;基础LH均是PCOS危险因素&;#65377;其中LH/FSH比值以1.1为阈值&;#65380;FAI以3.08为阈值&;#65380;HOMA-IR以1.95为阈值,其ROC曲线下面积(AUC-ROC)分别为0.738&;#65380;0.792&;#65380;0.772&;#65377;在肥胖PCOS组,HOMA-IR对诊断PCOS灵敏度及阴性预测值最高(91.74%,83.63%),且与LH/FSH比值灵敏度及阴性预测值(52.29%,50.94%)差异有显著性,与FAI灵敏度及阴性预测值(88.07%,76.36%)差异无显著性;在非肥胖PCOS组中,LH/FSH比值灵敏度及特异度(69.10%,79.0%)最高,与HOMA-IR指数灵敏度及特异度(58.72%,68.60%)差异有统计学意义,与FAI差异无显著性&;#65377;【结论】 诊断高雄激素血症生化指标中首选FAI,因为其不仅反映游离睾酮水平还反映胰岛素抵抗水平,较单纯查总睾酮或游离睾酮优越,有临床应用价值&;#65377;     

非诺贝特改善伴高甘油三酯糖代谢异常患者急性 胰岛素分泌反应

 【目的】 观察微粒化非诺贝特对伴高甘油三酯(TG)糖代谢异常患者急性胰岛素分泌反应和胰岛素抵抗的改善作用&;#65377; 【方法】 53例入选者为按2:1随机分为非诺贝特组[36例,其中空腹血糖调节受损(IFG) 3例,糖耐量减低(IGT) 19例,IFG合并IGT 6例,2型糖尿病T2DM 8例]和对照组(17例,其中IFG 1例,IGT 9例,IFG合并IGT 4例,T2DM 3例),为期3月&;#65377;治疗前后测血糖&;#65380;血脂&;#65380;游离脂肪酸(FFA),行静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)&;#65377;计算IVGTT中急性胰岛素分泌反应(AIR)和胰岛素分泌峰值(CINS,MAX)与空腹胰岛素(FINS)比值&;#65380;差值(CINS,MAX / FINS&;#65380; ΔCINS)&;#65377;计算HOMA IR&;#65377; 【结果】 非诺贝特组治疗后血TG&;#65380;低密度脂蛋白胆固醇&;#65380;FFA明显下降,高密度脂蛋白胆固醇显著升高,腰围明显减小;对照组上述指标无改变&;#65377;非诺贝特组ΔCINS&;#65380; CINS,MAX / FINS 治疗后均增加(分别是808 ± 473 pmol/L比660 ± 472 pmol/L和中位数8.4比5.3,P < 0.000 1);AIR显著改善(5 585 ± 3 441 比4 444 ± 3 642 pmol&;#8226;L-1&;#8226;min-1,P < 0.000 1);FINS&;#65380;HOMA IR显著下降(108 ± 65 pmol/L比166 ± 115 pmol/L,P = 0.002;3.8 ± 2.3 比6.0 ± 4.2,P = 0.001)&;#65377;对照组3月后复查CINS,MAX / FINS&;#65380;ΔCINS&;#65380;AIR降低(4.6比7.0,P = 0.01;641 ± 286 pmol/L比720 ± 321 pmol/L,P = 0.039;4 313 ± 1 943 pmol&;#8226;L-1&;#8226;min-1比5 362 ± 2 861 pmol&;#8226;L-1&;#8226;min-1,P = 0.024),HOMA IR增加(7.8 ± 4.2比5.6 ± 3.2,P < 0.000 1)&;#65377;AIR改善与TG&;#65380;FFA下降显著相关(r = 0.41,0.36,P = 0.002, 0.014)&;#65377;【结论】 非诺贝特短期调脂治疗可显著改善糖代谢异常的高TG血症患者血脂谱,降低FFA水平,减小腰围,改善急性胰岛素分泌反应,减轻胰岛素抵抗;非诺贝特对胰岛素分泌功能的改善作用和减轻脂毒性相关&;#65377;     

间充质干细胞及其培养上清与融冻产物对脐血CD34+ 细胞扩增及分化的作用

 【目的】 探讨人骨髓间充质干细胞(MSC)及其培养上清&#65380;融冻产物对脐血CD34+ 细胞扩增及分化的作用&#65377;【方法】 分离纯化人骨髓MSC,收集纯化三代的MSC培养上清,采用反复冻融法获得MSC融冻产物,采用免疫磁珠分选系统纯化脐血CD34+ 细胞&#65377;实验分为4组,分别为含MSC滋养层组&#65380;MSC上清组&#65380;MSC融冻产物组及单纯造血生长因子(HGFs)对照组&#65377;流式细胞仪检测人脐血CD34+ 细胞在这四种培养体系中第6天和第12天有核细胞数及CD34+&#65380;CD34+CD38-&#65380;CD41+&#65380;CD19+&#65380;CD3+ 细胞含量&#65377; 【结果】 ①MSC滋养层组对脐血有核细胞和对脐血CD34+&#65380;CD34+ CD38- 的扩增能力最强,MSC培养上清组和MSC滋养层相比具有类似的作用,但其作用强度减弱(P < 0.05)&#65377;②MSC培养上清和MSC均具有抑制脐血CD34+ 细胞分化为CD3+ 和CD19+ 细胞的作用,差异无显著性(P > 0.05)&#65377;③MSC培养上清和MSC均具有促进脐血CD34+ 细胞向CD41+ 细胞分化的作用,MSC滋养层的作用强于MSC培养上清(P < 0.05)&#65377;④MSC融冻产物已完全丧失对脐血CD34+ 细胞扩增和分化作用,与单纯因子对照组相似(P > 0.05)&#65377;【结论】 MSC培养上清对脐血CD34+&#65380;CD34+ CD38- 细胞均具有扩增作用,而且可促进脐血CD34+ 细胞向CD41+ 细胞分化&#65377;     

改良新辅助放化疗加术中温热灌洗治疗低位直肠癌的临床应用

 【目的】 评估低位直肠癌手术前行改良新辅助放化疗+术中温热灌洗治疗的近期疗效及肿瘤的病理学改变,探索治疗低位直肠癌的新途径&;#65377;【方法】 45例低位直肠癌患者DukesB期(17)&;#65380;DukesC期(28)随机分为:A组15例行自行设计改良的新辅助治疗:术前放疗&;#65380;区域动脉介入微泵灌注化疗,按时辰多通道程控输液泵给药;B组15例,术前放疗+区域动脉介入一次性灌注化疗;C组15例诊断明确后手术;45例患者均行术中腹腔温热灌洗化疗&;#65377;【结果】 A&;#65380;B&;#65380;C组在术前降低肿瘤临床分期&;#65380;提高保肛率和复发率方面相比较有显著性差异(P < 0.05 ),A &;#65380;B&;#65380;C组肿瘤的病理改变相比较差异有统计学意义(P < 0.05 )&;#65377;【结论】 改良新辅助放化疗+术中腹腔温热灌洗化疗治疗低位直肠癌具有较好的临床疗效,能提高保肛率和生存率&;#65377;     

哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群和CD4+ T细胞亚群的变化情况

目的 小儿哮喘的发生发展受免疫系统的影响,本文探讨哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群的变化情况,探讨其临床意义。 方法 选择2013年1月-2015年12月哮喘患儿80例作为哮喘组,健康体检儿童80例作为对照组。测定外周血淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群含量。 结果 哮喘组CD3+、CD4+、CD19+、CD4+/CD8+[(62.13±11.24)%、(32.97±6.57)%、(24.35±11.21)%、(1.66±0.31)%]高于对照组[(71.16±12.64)%、(37.68±7.12)%、(13.87±8.46)%、(1.43±0.28)%,P<0.05],哮喘组CD8+[(19.87±4.21)%]低于对照组[(26.37±4.65)%。P<0.05]。哮喘组Th2、Th17、Treg、Th17/Treg[(4.42±2.14)%、(1.71±0.97)%、(7.65±1.35)%、(0.22±0.05)%]均高于对照组[(1.96±1.25)%、(0.89±0.42)%、(5.91±1.28)%、(0.15±0.03)%,P<0.05],哮喘组Th1/Th2[(1.31±1.32)]低于对照组[(2.70±1.47),P<0.05],2组Th1比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘组淋巴细胞[(36.57±13.24)%]低于对照组[(59.64±15.47)%,P<0.05],哮喘组单核细胞[(12.17±4.21)%]高于对照组[(3.68±1.74)%,P<0.05],2组白细胞和中性粒细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。淋巴细胞与Th1、Th2、Th17呈负相关(P<0.05),单核细胞与CD3+、CD4+、CD19+呈负相关(P<0.05),与CD8+呈正相关(P<0.05)。 结论 哮喘患儿存在淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群异常,外周血淋巴细胞亚群和CD4+T细胞亚群含量可用于哮喘患儿免疫功能判断。      

肿瘤细胞对CD4~+CD25~+Treg细胞数量和功能的影响

目的：探讨肿瘤细胞与免疫细胞相互作用对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响。方法：建立Lewis肺癌细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养体系。Lewis肺癌细胞与不同浓度小鼠脾淋巴细胞共培养,分为4组：实验组Ⅰ（5×105个Lewis肺癌细胞与1×106个淋巴细胞共培养）、对照组Ⅰ（1×106个淋巴细胞单独培养）、实验组Ⅱ（5×105个Lewis肺癌细胞
与2×106个淋巴细胞共培养）、对照组Ⅱ（2×106个淋巴细胞单独培养）;Lewis肺癌细胞与
淋巴细胞共培养不同时间,采用3个时间点：24、48和72 h;Lewis肺癌细胞培养上清与淋巴细
胞共培养,选择培养上清浓度为20%和50%。采用流式细胞术检测了Lewis肺癌细胞与脾淋巴
细胞共培养系统中CD4+CD25+Treg细胞数量变化,通过RT-PCR方法检测了共培养对Foxp
3 mRNA表达的影响。结果：与对照组比较,实验组Ⅰ 中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRN
A表达明显增强（P<0.05）,实验组Ⅱ中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达无明
显变化（P>0.05）;Lewis肺癌细胞与淋巴细胞培养24及48 h可见CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3
mRNA表达明显升高（P<0.05）,而72 h后变化不明显;20%和50% Lewis肺癌细胞培养上清
均可明显提高CD4+CD25+Treg数量及Foxp3 mRNA表达（P<0.05）。结论：肿瘤细胞及其培养
上清可诱导CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,由肿瘤细胞所引起的CD4+CD25+Treg细
胞产生及功能增强可能是肿瘤逃避免疫监视机制之一。     

丹参注射液对哮喘大鼠气道炎症及CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的 观察丹参注射液对支气管哮喘(哮喘)大鼠气道炎症和CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 Tr)的影响,探讨丹参注射液治疗哮喘的新机制.方法 30只Wistar大鼠随机分成正常对照组、哮喘组、丹参治疗组.计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,应用苏木精一伊红染色行肺组织病理学检查,流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4 CD25 Tr的比例.结果 丹参治疗组BALF细胞总数及淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞(Eos)百分率较哮喘组均明显减少(P<0.05,P<0.01),与正常对照组比较差异无显著性意义(均P>0.05).病理组织学显示:丹参治疗组较哮喘组肺组织炎性细胞浸润明显减少.哮喘组PBMCs中CD4 CD25 Tr的比例较正常对照组明显减少(P<0.05),丹参治疗组CD4 CD25 Tr的比例较哮喘组明显增加(P<0.05).结论 丹参注射液可减轻哮喘大鼠气道炎症反应,其机制可能与促进CD4 CD25 Tr的产生有关.     

宫颈疾病患者外周血CD4+CD25+C-D127-/low Treg细胞的检测及临床意义

目的 检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变患者外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达,分析其临床意义.方法 荧光抗体CD127-FITC、CD4-PECY5、CD25-PE标记T细胞,流式细胞术测定50例宫颈癌患者和49例宫颈上皮内瘤变患者中CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达.结果 与正常对照组[n=33,(8.07±2.18)％]比较,宫颈癌组[n=50,(11.15±1.97)％]、宫颈上皮内瘤变组[n=49,(10.61±2.62)％]CD4+CD25+CD127-low均显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=6.018,P＜0.001;t=4.943,P＜0.001);与宫颈上皮内瘤变Ⅰ级组[n=16,(8.96±0.65)％]比较,宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ级组[n=33,(11.54±2.72)％]显著升高,两者比较有差异统计学意义(t=4.114,P＜0.001);与宫颈癌Ⅰ期组[n=20,(10.34±1.79)％]比较,官颈癌Ⅱ期组[n=30,(11.68±1.97)％]显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=2.424,P＜0.05).结论 外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达升高可能在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变发病的发生、发展过程中起一定作用.     

Influence of Danshen Injection on airway inflammation and CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells of asthmatic rats

Objective： To investigate the influence of Danshen Injection on airway inflammation and CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells（CD4^＋CD25^＋ Tr） of asthmatic rats, and elucidate the possible mechanism of Danshen Injection in treatment of asthma. Methods： 30 Wister rats were randomly divided into control group, asthma group and Danshen Injection treated group. Bronchoalveolar lavage fluids （BALF） were collected, and cytology studies were conducted. Lung tissues were obtained and pathologic analyses were done with hematoxylin and eosin stain （HE）. Flow cytometry was used to detect the CD4^＋CD25^＋ Tr ratio in peripheral blood mononuclear cells （PBMCs）. Results： Total cell, the percentage of lymphocytes, neutrophils and eosinophils （Eos） in BALF of Danshen Injection-treated group were lower than that in asthma group （P〈0.05, P〈0.01）. Compared with asthma group, less infiltration of inflammatory cells in lung tissues was observed in Danshen Injection-treated group. CD4^＋CD25^＋ Tr of asthma group was lower than that of control and Danshen Injection treated group （P〈0.05）. Conclusion： Danshen Injection can suppress airway inflammation of asthmatic rats, probably by increasing the number of CD4^＋CD25^＋ Tr.     

哮喘儿童外周血单个核细胞Tim-3 mRNA的表达及其与CD4~+CD25~+调节性T细胞的关系

目的观察哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3 mRNA的表达及其与CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的关系,探讨Tim-3在哮喘发生发展中的作用。方法收集哮喘门诊或住院患儿73例,其中哮喘缓解期38例(缓解组),轻至中度急性发作期35例(发作组)。利用RT-PCR检测哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA的表达并做半定量分析,流式细胞术检测PBMC中的CD4+CD25+Treg的水平(CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞的百分比)。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)的水平,并分析Tim-3 mRNA与CD4+CD25+TregI、L-6水平的相关性。结果哮喘发作组PBMC中Tim-3 mRNA吸光度值为(0.86±0.17),与缓解组(0.39±0.11)和正常对照组(0.06±0.03)比较,差异具有统计学意义(均P<0.05),并且缓解组与正常对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05)。哮喘发作组外周血CD4+CD25+Treg百分率为(8.35±1.67)%,与缓解组[(10.21±2.04)%]和正常对照组[(12.43±2.58)%]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),并且缓解组与正常对照组比较差异亦具有统计学意义(P<0.05);哮喘发作组血浆中IL-6水平为(78.35±14.59)pg/mL,与缓解组[(36.48±9.18)pg/mL]和正常对照组[(10.24±3.57)pg/mL]比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),缓解组与正常对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。3组血浆中TGF-β水平没有明显差异;哮喘发作组和缓解组PBMC中Tim-3 mRNA的表达水平与CD4+CD25+Treg百分率均呈负相关(r=-0.81,-0.79,均P<0.05),与IL-6的水平呈正相关(r=0.87,0.83,均P<0.01)。结论哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA表达增高参与哮喘的发生与发展,其机制可能与升高血浆IL-6,抑制CD4+CD25+Treg的生成有关。     

AIDS患者胃黏膜CD4~+T淋巴细胞与HIV感染关系的初步分析

目的探讨AIDS患者胃黏膜CD4^＋T淋巴细胞的丢失、重建与HIV感染的关系。方法对35例AIDS患者胃黏膜组织冰冻切片和PBMC涂片采用核酸原位杂交方法及免疫组化双重染色,观察CD4^＋T淋巴细胞的HIV感染情况。结果①高效抗逆转录病毒治疗（HAART）治疗1～4年后,AIDS患者胃黏膜单个核细胞（MMC）中CD4^＋T细胞计数仍然低于对照组[（37.44±18.00]%vs（50.35±3.41）%]（P〈0.01）;但PBMC中CD4^＋T细胞计数与对照组无显著性差异[（42.70±10.66）%vs（51.00±6.60）%]（P〉0.05）。②未治疗组与治疗〈1年组胃黏膜MMC中CD4^＋T细胞HIV阳性率无显著性差异[（2.76±1.92）%vs（1.88±1.56）%]（P〉0.05）;治疗1～4年组则明显低于未治疗组[（0.54±0.49）%vs（2.76±1.92）%（P〈0.01）;三组AIDS患者PBMC中CD4^＋T细胞HIV感染率均具有显著性差异[（19.44±8.17）%vs（9.76±6.98）%vs（4.95±8.26）%]（P〈0.05）。结论相对于外周血,AIDS患者胃黏膜免疫重建可能是不完全的。AIDS患者胃黏膜CD4^＋T细胞HIV感染在胃黏膜CD4^＋T细胞的丢失与重建延迟过程中可能并非发挥主要的作用。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞凋亡及其相关信号蛋白表达的检测和临床意义

目的探讨CD4~＋T细胞凋亡在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）发病机制中的作用及其凋亡机制。方法应用流式细胞术分析类风湿关节炎患者及健康对照组外周血CD4~＋T细胞凋亡指标AnnexinV水平及凋亡相关信号蛋白Caspase-3,Caspase-8,促凋亡基因Fas和抑凋亡基因Bcl-2表达水平;同时对CD4~＋T细胞凋亡相关信号蛋白ESR、RF和DAS 28水平与临床活动相关指标进行相关性分析。结果与健康对照组相比,RA活动期患者CD4~＋T细胞数增加[（40.91±2.73）%vs（31.40±2.71）%,P〈0.05],CD4~＋T cell凋亡指标AnnexinV水平减少[（2.27±1.43）%vs（8.10±2.06）%,P〈0.05];RA患者外周血中CD4~＋T细胞促凋亡基因Fas表达较健康对照组降低差异无统计学意义[（63.12±4.61）%vs（84.13±1.72）%,P〈0.01],抑凋亡基因Bcl-2表达增加[（93.58±2.36）%vs（75.14±5.70）%,P〈0.05],Caspase-8减少[（18.54±15.23）%vs（3.02±1.39）%,P〈0.05],Caspase-3表达无差异无统计学意义[（2.17±1.19）%vs（2.53±1.46）%,P〉0.05];CD4~＋T细胞促凋亡基因Fas表达与DAS28评分呈负相关（r=-0.89,P=0.04,P〈0.05）,Bcl-2与DAS28评分呈正相关（r=-0.97,P=0.00,P〈0.01）。结论RA患者CD4~＋T细胞数量增多与其凋亡减少有关,这可能是导致该病自身免疫反应不能控制的重要原因之一。RA患者外周血CD4~＋T细胞凋亡减少与促凋亡基因Fas表达降低、凋亡相关蛋白Caspase-8表达下降及抑凋亡基因Bcl-2表达增高有关。Fas和Bcl-2的表达可作为评价临床活动性的敏感指标。     

哮喘患者外周血CD4~+和CD25~+调节性T细胞的变化及意义

目的探讨CD4+、CD25+调节性T细胞在哮喘发病机制中的作用,为哮喘的临床治疗提供新方法和新思路。方法分离哮喘患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞仪分析CD4+、CD25+调节性T细胞表型及其在外周血单个核细胞中的比例。结果哮喘组外周血CD4+、CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为(4.2±1.5)%,对照组(8.5±2.6)%,哮喘组明显低于对照组(P<0.05),两组CD4+、CD25+调节性T细胞表面表达的活化表型CTLA-4和CD69无显著性学差异(P>0.05)。结论CD04+和CD25+调节性T细胞参与了哮喘的发生。     

低剂量环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响

目的：研究低剂量环磷酰胺（CTX）单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4⁺CD25⁺Treg细胞功能的影响,探讨CD4⁺CD25⁺Treg 细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组：CTX组、肿瘤组、单纯对照组。采用CTX单次注射,观测各组肿瘤体积动态变化;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测各组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用LDH释放法检测脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)细胞的杀伤活性。结果：与未治疗肿瘤组相比,CTX治疗可延缓荷19 d Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长;CTX组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平明显低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞功能明显高于肿瘤组（P<0. 05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞杀伤活性比肿瘤组略高,但变化不显著（P>0.05）。结论：CTX单次注射可降低Lewis肺癌小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞的数量及Foxp3 mRNA表达,使T淋巴细胞增殖功能及脾细胞中CTLs杀伤功能增强。     

黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4IFN-γIL-10的影响

目的探讨黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4、IFN-γI、L-10的影响。方法将BALB/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组和黄芪组。以卵蛋白（OVA）致敏激发法制备小鼠哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ、IL-10及血清中IL-10的含量;流式细胞术（FCM）、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量及FoxP3 mRNA表达情况。结果哮喘组小鼠BALF中IL-4含量明显高于对照组（P〈0.01）而低于黄芪组（P〈0.01）。与对照组相比,哮喘组小鼠BALF中IFN-γI、L-10、血清中IL-10含量及脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量、FoxP3 mRNA表达水平明显降低（P〈0.01）;而黄芪组的上述改变较哮喘组显著增加（P〈0.05）。结论 CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与了支气管哮喘的发病过程,黄芪可通过上调CD4^＋CD25^＋调节性T细胞、FoxP3 mRNA的表达及增加IL-10含量减轻哮喘炎症。