携带HIV-1包膜基因的重组病毒艾滋病疫苗的潜在负效应

由1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜糖蛋白(gp120/160)制备的多种候选艾滋病疫苗正在HIV阴性健康志愿者以及HIV感染者中进行临床试验(I和II期).这些疫苗大多使用携带HIV gP120/160基因的重组病毒载体。最近报告的HIV-1gP120和人类免疫球蛋白(Ig)可变区之间序列和基因的相似性,可能对这类疫苗的进一步开发和目前应用产生负效应.     

由HIV-1包膜疫苗诱导的对HIV-1gp120和HLA-Ⅰ类分子重链的交叉反应性应答

作者发现鼠单克隆抗体(McAb)M38能与Ⅰ型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)gp120和人白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子重链相结合,证明HIV-1与HLA之间具有分子相似性.本文研究了HIV包膜疫苗接种者能否产生抗gp120和HLAⅠ类交叉反应性抗体.研究对象为18～60岁健康志愿者,HIV-1血清学试验阴性,在6个月内未接受过血液制剂,细胞HIV培养阴性.志愿者分     

抗HIV-1 gp120单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备抗HIV-1 gp120单克隆抗体,鉴定其特性,为进一步研制HIV治疗性抗体提供贮备。方法将HIV-1 gp120基因片段连接到经酶切的原核表达载体PEGX-4T-2中,利用大肠杆菌XL1-blue表达GST-HIV蛋白。表达的蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆。重组免疫印迹分析(RIBA)和Western blot检测抗体特异性。结果构建的重组质粒的外源基因片段经测序与预期HIV-1 gp120抗原基因片段大小一致。纯化蛋白SDS-PAGE可见1条相对分子质量(Mr)32 000的表达蛋白条带。获得6株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其细胞培养上清效价为10-3,小鼠腹水效价为10-5,抗体亚型均为IgG1。RIBA结果显示6株单抗皆只与HIV-1 gp120抗原反应。Western blot结果显示在Mr32 000处可见1条单一目的条带。结论获得6株稳定分泌抗HIV-1 gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为进一步研制抗HIV治疗性抗体奠定了基础。     

HIV-1包膜蛋白gp41单克隆抗体研究进展

HIV-1 gp41在病毒侵入早期,发挥重要作用.针对gp41的单克隆抗体作为一种良好的工具广泛地应用于以gp41为靶点的抗HIV-1药物和疫苗研究工作中.       

HIV-1疫苗的人体试验

本文介绍了当前几种 1型人类免疫缺陷症病毒 ( HIV- 1)疫苗人体试验的主要进展。首先进行 期试验的疫苗是双价 B亚型 HIV- 1gp12 0亚单位疫苗 ;进入 期试验的是初免 -加强免疫法 ;进入 期试验的是两种 DNA疫苗。疫苗在未感染过 HIV- 1的志愿者中是安全、有效的     

HIV-1C疫苗研究进展

 对于HIV-1,抗逆转录病毒药物能显著改善HIV/AIDS病人的健康并延长其寿命.但高昂的费用和治疗条件令大多数HIV患者望而却步,尤其在感染水平高、公共资源极度匮乏的发展中国家.到2004年底,撒哈拉以南非洲地区有2540万HIV感染者,该地区迄今仍是HIV-1C感染最严重的地区.几种候选HIV-1C疫苗目前正在进行临床前和临床研究.这些候选疫苗的设计主要是来自HIV-1C的HIV-1调控蛋白和结构蛋白.本文重点介绍HIV-1C疫苗的研究进展.     

基于伤寒杆菌的HIV-1载体疫苗的构建和鉴定

由于Ⅰ型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)通过胃肠道外及性进行传播,因此,开发HIV疫苗的主要目标是构建作用于全身和粘膜免疫系统的免疫原。为此,作者构建了一种表达重组HIV-1gp120(rgp120)的伤寒杆菌减毒株。 作者将编码rgp120的基因表达盒整合进伤寒杆菌减毒株的aroC基因座,以构建一种疫苗株。作者首先构建了双启动子系统(P_(lpp)和P_(lacUV5)),通过定位诱变将P_(1pp)的-35和-10区靠近σ70启动子共有序列,以提高蛋白表达。其次,将lacO插入启动子使lacI能调控表达。最后,在P_(1ac UVS)后加人工终止密码子,使5′到P_(lpp)核糖体结合位点(RBS)一段序列成为框内RBS,这种框内RBS-终止-RBS     

HIV-1包膜糖蛋白gp120小分子抑制剂的研究进展

人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus-1, HIV-1)包膜糖蛋白gp120与CD4的结合是病毒侵入细胞的第一步,干扰此过程就能阻止病毒识别靶细胞而抑制其复制,因此HIV-1 gp120作为HIV-1生命周期中的重要靶标,针对该靶标的药物已成为当前抗艾滋病药物研发的热点。其中, gp120小分子抑制剂BMS-626529经前药策略修饰后得到的磷酸酯前药福替沙韦(fostesavir)已分别于2020年和2021年被美国和欧洲批准上市用于治疗具有多重耐药性HIV-1感染的成年患者。该篇综述从药物化学的角度重点描述了靶向gp120-CD4相互作用环节的各种结构类型小分子抑制剂的研究进展,以期为gp120抑制剂的研究提供启发。     

脊髓灰质炎病毒嵌合体诱生广泛反应性HIV-1中和抗体

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜蛋白(env)具有广泛的序列异质性和抗原变异性,也存在着抗原性保守位点.理想的疫苗应含有此保守位点,以便诱生能与许多病毒分离株起反应的抗体.作者选用HIV-1跨膜糖蛋白gp41(组特异性抗原决定簇),以Ⅰ型脊髓灰质炎病毒Sabin疫苗株为表达载体(pCASl),用DNA重组技术构建成脊髓灰质炎病毒/HIV-1抗原嵌合体Sl/env/3.     

合成的CD4肽可抑制HIV-1复制和合胞体形成

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)感染人的辅助性T淋巴细胞是由HIV-1包膜糖蛋白gp120与这些细胞上的CD4受体的特     

HIV-1融合抑制剂研究现状及发展趋势

HIV-1融合抑制剂是继逆转录酶和蛋白酶抑制剂后的新一类抗HIV感染药物, 通过阻断病毒与靶细胞膜的融合从而抑制病毒进入靶细胞, 在感染的初始环节切断HIV-1的传播, 其中多肽类融合抑制剂T-20已于2003年上市。HIV-1融合抑制剂以HIV-1跨膜糖蛋白gp41为作用靶标, 它们是一些天然或合成的多肽以及小分子化合物, 通过与gp41功能区结合从而抑制其促融合功能的发挥。近年来, 随着对膜融合过程分子机制以及gp41功能研究的不断深入, 新的以gp41不同功能区为靶点的融合抑制剂分子不断被发现, 成为倍受关注的研究热点之一。本文着重对近年来HIV-1融合抑制剂的研究现状及发展趋势进行综述。     

含HIV-1gp120基因抗原决定簇的重组脊髓灰质炎病毒的构建及鉴定

目的 构建含HIV-1gp120基因抗原决定簇的重组脊髓灰质炎病毒疫苗,并初步评价其免疫效果.方法 将HIV-1gp120基因抗原决定簇插入到脊髓灰质炎病毒表达载体PSVA14中,构建含HIV-1gp120基因抗原决定簇的重组脊髓灰质炎病毒,通过脂质体介导法将重组脊髓灰质炎病毒转染入Hela细胞,通过PCR,酶切鉴定等方法对重组脊髓灰质炎病毒载体进行了表达鉴定,并通过氯仿-PEG/NaCl-氯仿三步法纯化重组脊髓灰质炎病毒,利用免疫酶法,Western blot方法对重组脊髓灰质炎病毒作了初步的免疫效果的研究.结果 构建的重组脊髓灰质炎病毒在Hela细胞内可以正确的表达gp120基因,并能感染293细胞而不产生细胞病变,并能随293细胞的传代被复制克隆.结论 重组脊髓灰质炎病毒能正确的表达gp120基因,并能感染人正常细胞,初步证实了其生物安全性.     

用重组禽痘病毒表达HIV-1包膜基因

1型人免疫缺陷症病毒(HIV-1)env基因编码糖基化蛋白前体,其在细胞中被蛋白酶水解成精蛋白(gp)120及gp41.已在gp41氨基末端发现高度免疫显性表位,后者能使健康的血清阳性个体产生体液免疫,在体外能特异性地抑制淋巴细胞增生.此区与Ⅰ型和Ⅱ型人嗜T淋巴细胞病毒的gp21E跨膜蛋白和多种逆转录病毒的免疫抑制(IS)区具有同源序列.作者通过基因重组获得了表达HIV-1SF2株包膜基因的重组金丝雀痘(CP)病毒和禽痘(FP)病毒,并将它的表达情况在鸡胚成纤维细胞(CEF)、猴肾细胞(Vero)及     

完全糖基化的重组HIV-1gp160疫苗在感染危险性较低者中的安全性与免疫原性

本文作者应用完全糖基化的重组1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)(?)gp160疫苗免疫人体,对这种疫苗的安全性与免疫原性进行了评价.研究对象为60名18～60岁的健康志愿者,采用双盲法进行试验,受试者随机接受疫苗或安慰剂.疫苗系痘菌病毒表达系统在哺乳动物组织培养细胞中产生的重组HIV-1(?)gp160(rgp160-mam).两个免疫组分别于0、     

HIV-1gp120疫苗的无效性及可能的有害作用的分子基础

本文论述了准备在发展中国家进行Ⅲ期临床试验的以1型人类免疫缺陷症病毒(HIV1)包膜糖蛋白gp120/160为基础的候选艾滋病疫苗的可能的有害作用的分子基础。     

新生儿接种重组HIV-1 gp120疫苗后的特异性抗体应答

不少感染 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV-1 )的孕妇由于未得到药物治疗而使 1 0 %～1 3%的新生儿感染 ,在发展中国家母乳喂养导致婴儿在出生后两年内的 HIV感染率达到 1 6 % ,本研究旨在探索接种疫苗使婴儿获得保护的有效和可行的途径。　　作者以母亲感染 HIV的 52名初生婴儿为对象 ,建立原始免疫组 ,在出生时 ,第 4、第1 2和第 2 0周肌肉注射重组 HIV- 1 gp1 2 0疫苗 ,MF59为佐剂 ,按 5、1 5和 50 mg分为三个剂量组 ,每组 1 6～ 1 8人。以 MF59作对照。同时 ,建立加速免疫组 ,对母亲感染 HIV的 1 0名初生婴儿在出生时、第 2、第 8和…     

HIV-1 gp120真核表达载体的构建及表达

目的模拟HIV-1包膜糖蛋白天然构象,在真核细胞中高效表达三聚体包膜糖蛋白。方法本研究以原代HIV-1分离株06044包膜为研究对象,将不含信号肽序列的包膜gp120基因克隆至含有人类组织型纤溶酶原激活物（tPA）的信号肽序列的真核表达载体上,构建单体形式gp120蛋白表达载体;或将其克隆至含有tPA信号肽序列和蛋白质三聚化模序MTQ的真核细胞表达载体上,构建三聚体形式gp120蛋白表达载体。gp120重组表达载体体外瞬时转染293T细胞,westernblot检测表达情况。结果获得gp120蛋白单体和三聚体的真核细胞表达载体peT．06044gp120m／co和pcT-06044gp120T／co;重组质粒瞬时转染293T细胞后westernblot分析,在变性条件下,两组细胞培养上清均检测到单体形式gp120蛋白;非还原条件下,peT．06044gp120T／co转染组的细胞培养上清中检测到三聚体、二聚体和单体三种形式gp120蛋白,其百分比分别为76％、14％和10％。结论本研究成功构建了HIV-1原代06044株包膜gp120单体和三聚体表达载体,并在哺乳细胞中成功表达了gp120单体和三聚体蛋白。     

HIV-1耐药性的研究进展

<正>艾滋病是获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)的简称,是由人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)引起的慢性传染病。HIV为单链RNA病毒,属反转录病毒科(Retroviridae),慢病毒属(Lentivirus)中的人类慢病毒组[1]。根据HIV基因的差异,目前可将HIV分为HIV-1型和HIV-2型。HIV-2主要局限在西部非洲和西欧,北美也     

作用于HIV gp120的进入抑制剂研究进展

HIV-1病毒为包膜病毒,其感染靶细胞的第一步是由HIV包膜蛋白表面亚基gp120与靶细胞上的CD4分子和辅助受体（趋化因子受体CCR5或CXCR4等）结合,导致gp41的构型发生改变,启动病毒包膜与靶细胞膜的融合。与gp120相结合的一些抗体、蛋白、多糖、多肽和小分子化合物,都可能影响HIV-1病毒包膜和靶细胞膜融合的过程,从而起到抗HIV-1病毒的作用。该文对近年来以HIV gp120为靶点的HIV进入抑制剂的研究进展进行综述。     

疫苗诱导的抗天然及重组HIV-1包膜糖蛋白抗体

作者采用多中心、随机、双盲法,对以1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)LAV株gp160重组痘苗活病毒初免、再用杆状病毒表达的HIV-ILAV重组gp16O候选疫苗加强免疫所诱生的能识别感染细胞表面表达的天然外膜糖蛋白的抗体进行了测定.