猴B病毒抗体及B病毒相关抗体ELISA检测结果比较

采用以人单纯疱病毒为抗原的ＥＬＩＳＡ法在国内外测得相同猕猴血清样本中的Ｂ病毒相关抗体阳性率分别为６５％和７０％。相同标本在则昨Ｂ病毒抗体阳性率为８５％。结果表明以ＨＳＶ－１为抗原不能检出全部Ｂ病毒感染动物。     

猕猴B病毒相关抗体调查

以人疱疹病毒Ⅰ型为抗原,用酶免疫法(EIA)比较了在不同生活环境中,猕猴B病毒相关抗体阳性率的差异:野外捕获猴组的阳性率为65.5％;自繁雌雄分笼群养猴组阳性率为26.7％;野外捕获后单只笼养组阳性率为33.1％。野外捕获组与其它两组之间的B病毒相关抗体阳性率差异极显著(P<0.01)。在野外捕获组中,B病毒相关抗体阳性率与动物年龄的增长成正相关(r=0.951,P<0.05)。在同一组标本上,用EIA技术检查确定的B病毒相关抗体阳性猴,与用DIA试剂盒检查确定的B病毒抗体阳性猴一致,表明用EIA检查的结果,可反映B病毒在猴群中的流行情况。作者还就建立无B病毒感染繁殖群提出初步意见。     

两种方法检测猕猴B病毒抗体的初步探讨

【摘要】用BV DIAdot Kit和BV EIA抗原片对本中心100份经HSV-1抗原片检测为阳性,150份HSV1抗体阴性的食蟹猴血清进行B病毒抗体检测。结果发现,BV DiAdot Kit对150份阴性血清的阳性检测出率为8．7％,而B、EIA的阳性检测率为18．o％,二者的符合率90．7%。后者阳性检测率明显高于前者。用上述两种方法对100份HSV-1抗体阳性血清（ - )进行检测发现,BV DLAdotKit和BV EIA的阳性检出率均为100％。后者价格低廉且对HSV-1抗体阴性血清的阳性检出率较高,值得在国内猕猴生产和出口单位大力推广。     

B病毒抗原片在猕猴B病毒抗体检测中的应用

目的 建立8病毒玻片免疫酶法（BVEIA）。方法 与HSV－1玻片免疫酶法（HSV－1 EIA）及美国生产的B病毒DIA dot（BV DIA dot)试剂盒进行比较。结果 BV EIA法的阳性检出率比HSV－1 EIA法提高18．10％，比BV DIA dot法提高7．90％，达到国外同类产品的水平。结论 建议在临床上推广应用B病毒抗原片。     

实验猕猴B病毒抗体检测结果分析

目的 研究实验猕猴B病毒抗体阳性情况.方法 选取安徽省实验猕猴中心400只猕猴,各采集静脉血5 mL, 3000 r/min离心10 min后,抽取上层血清,采用酶联免疫吸附试验与免疫酶试验检测血清B病毒抗体,观察B病毒抗体阳性率.结果 400份有效样本中,B病毒抗体阳性率为36.50%;雌性猕猴B病毒抗体阳性率为36.74%,雄性为为36.22%,两者差异无统计学意义(χ2=0.012,P=0.913).幼年猕猴B病毒抗体阳性率为30.68%,青年猕猴B病毒抗体阳性率为32.34%,成年猕猴B病毒抗体阳性率为66.67%,差异有统计学意义(χ2=26.200,P=0.000).结论 实验猕猴B病毒抗体阳性率处于较高水平,雌性猕猴B病毒抗体阳性率高于雄性猕猴,成年猕猴B病毒抗体阳性率较高.因此,需加强实验猕猴的管理,以减少B病毒感染,生产出安全性更高的实验猕猴.     

猕猴SPF种群的建立及保持过程中B病毒抗体监测研究

目的 建立适合SPF猕猴种群建立与保持所需的B病毒抗体监测模式。方法 采用BV EIA及BVELISA等方法对本中心自繁自育仔猴从断奶开始进行BV感染情况跟踪。结果 从自繁自育猴中随机挑选218只断奶食蟹猴，92只断奶猕猴，经过近两年反复筛选得到25只SPF食蟹猴，9只SPF猕猴，此结果经美国BioReliatnce公司检测得到确认。结论 该模式能有效监测猕猴BV抗体变化，为本中心在国内建立猕猴SPF种群提供了有力的技术保障。     

猴B病毒相关抗体及B病毒抗体检测的比较研究

本文比较了用ＨＳＶ－１（ＩＥＡ）和Ｂ病毒（ＩＦＡ）的方法检查猴Ｂ病毒相关抗体和Ｂ病毒抗体的结果：ＩＥＡ检查出的Ｂ病毒相关抗体阴性猴，经ＩＦＡ检查，全部为Ｂ病毒抗体阴性。用ＩＦＡ检查了Ｂ病毒相关抗体阴性的恒河猴，在单笼隔离饲养六个月后，有９８．３％的动物Ｂ病毒相关抗体仍为阴性，表明ＩＲＡ的阴性结果有较好的一致性。本文讨论了建立无Ｂ病毒感染猴群的可行性。     

糖尿病患者血清中柯萨奇B组病毒抗体检测

Banatvala等[1 ] 研究表明 ,肠道病毒感染 ,特别是柯萨奇B组病毒 (CoxB)感染与 1型糖尿病 ( 1型DM)相关。CoxB隶属于小RNA病毒科 ,其感染引起人类心肌炎、无菌性脑膜炎等多种疾病[2 ] ,临床上主要靠检测特异性IgM抗体分析其可能病因。我们对 1 2 0例糖尿病 (DM)患者进行CoxB抗体检测 ,报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料　观察组 :2 0 0 1年 9月至 2 0 0 2年 1 0月在本院内科住院临床诊断为DM患者 ,于入院 1～ 2d内采集静脉血 (出院前再采集第 2份血 )共 1 2 0例 ( 2型DM 70例 ,其他类型DM 5 0例 )。其中男 5 4例 ,女 6 6例 ,…     

老年心脏病患者血清柯萨奇病毒B特异性抗体和核酸的检测

OBJECTIVE: To understand the status of coxsackievirus B (CVB) infection in senior subjects and explore the association of the infection with cardiovascular diseases. METHOD: By means of ELISA and RT-PCR, CVB IgG antibody and nucleic acid were detected in 172 patients with cardiopathy and 58 control subjects. RESULTS: The positivity rate of CVB IgG antibody was 43.61% (75/172) in the patient group and 15.52% (9/58) in the control group, showing obvious difference between the two groups. CVB RNA tests revealed a CVB RNA-positivity rate of 20.93% (36/172) in the former group and 3.45% (2/58) in the latter, with also a significant difference (P<0.01). CONCLUSION: CVB infection is prevalent in aged patients with heart disease, which should be given due attention to.     

三种登革热抗体检测方法的临床对比研究

目的 比较酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫斑点法（DIBA）和免疫层析法（ICT）检测登革热抗体的敏感性、特异性及其他优缺点。方法 用ELISA、DIBA和ICT同时检测登革热患者和流行性出血热、疟疾、乙脑、流感、钩体等其他发热患者的DV-IgM／Igg抗体,比较测试结果。结果 用ICT法（澳大利亚PANBIO Limited）检测登革热患者DV-IgM的阳性率为60．4％（32／53）,DV-IgG无1例阳性;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为14．7％（5／34）,DV-IgG无1例阳性。用ELISA法（德国GMBH）检测登革热患者DV-IgM的阳性率为66．0％（35／53）,DV-IgG的阳性率为70．2％（40／57）;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为35．3％（12／34）,DV-IgG的假阳性率为8．8％（3／34）。用ELISA法（澳大利亚PANBIO Limited）检测登革热患者DV-IgM的阳性率为75．5％（40／53）,DV-IgG的阳性率为49．1％（28／57）;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为11．8％（4／34）,DV-IgG无1例阳性。用DIBA法（新加坡Genelabs Diagnostics）检测登革热患者DV—IgM的阳性率为84．9％（45／53）,DV—IgG的阳性率为64．9％（37／57）;检测非登革感染发热患者DV-IgM的假阳性率为47．1％（16／34）,DV-IgG无1例阳性。结论 通过比较显示,ICT法检测DV-IgM抗体适合在登革热爆发流行期间用作疫区基层医疗单位的早期初筛试验;ELISA法检测DV-IgM／IgG抗体适合在普查及大批量标本检测时使用;DIBA法检测DV-IgM抗体不适合作为初筛试验;DIBA法检测DV-IgG抗体适合在登革热散发期间使用,可作为登革病毒感染的确证实验。     

猕猴B病毒gB蛋白特异性抗原表位的合成和表达

目的获得可以用于B病毒检测的gB蛋白特异性表位重组抗原。方法利用基因合成的方法,合成包含B病毒gB蛋白主要特性抗原表位的基因,通过定向克隆的方法,将该基因克隆到原核表达载体pET-22b中,构建了重组表达质粒。筛选出阳性重组质粒,转化到BL21感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达。结果成功的获得了B病毒gB蛋白的特异性抗原蛋白,该蛋白以可潜的形式表达。结论利用原核表达系统,可以产生B病毒gB蛋白特异性表位重组抗原,可以作为B病毒的检测抗原。     

脑研究用广西猕猴GMm-Ns新品系的培殖

本文报告广西猕猴新品种GMm-Ns的两个家系(?)代,(?)4只猕猴颅的测量数值;两个家系F_2代两只猴丘脑内侧背核(MD)立体定位数值。非本品种猴颅、脑测量数值作对照。结果表明实验组颅型的遗传性以及脑内结构立体定位数值十分稳定。G-O_p/APO-O_p能作为种培殖脑研究专用实验猕猴及其质量监测指标。     

猕猴B病毒gC蛋白特异性抗原表位的合成和表达

目的获得B病毒gC蛋白的特异性表位抗原。方法利用长片段基因合成的方法,合成B病毒C蛋白的特性抗原表位基因,将该基因连接到pMAL-5x载体,转化到BL21受体菌进行表达,并纯化表达产物。结果成功的获得了B病毒gC蛋白的特异性抗原蛋白,该蛋白以可溶的形式表达。结论利用原核表达系统,可以产生B病毒gC蛋白的可溶性抗原,可以作为B病毒的检测抗原。     

B病毒糖蛋白的原核表达及ELISA检测方法的建立

目的表达B病毒糖蛋白,筛选出具有较好检测敏感性和特异性的抗原或抗原组合,用以检测猴血清中的抗体。方法原核表达B病毒糖蛋白C,D和G,经纯化、复性后用蛋白印记验证其抗原性,建立ELISA法,对方法进行评价。结果3个表达抗原反应特异性较好;以BV-ELISA为标准,各抗原的检测敏感性分别是：BVgC-ELISA84.6％,BVgD-ELISA88.5％,BVgC＋gD-ELISA96.2％,检测特异性分别是：BVgC-ELISA93％,BVgD-ELISA85.7％,BVgC＋gD-ELISA64.3％。结论表达的3个BV重组抗原都具备作为替代抗原检测BV抗体的潜力。     

B病毒感染的预防和治疗方法

B病毒是一种P4级传染性病原，能引起人脑脊髓炎，其天然宿主为猕猴，B病毒侵染猕猴后无症状或症状轻微，但它却能致人死亡。人被B病毒感染途径主要包括被动物咬伤、抓伤或被B病毒污染过的材料感染，人被BV感染后，若及时采取预防和治疗措施能提高生存机率。本文综述BV预防和治疗方法。     

两种HBV-DNA荧光定量PCR检测比较

目的优化HBV—DNA特异性定量检测方法。方法采用荧光定量PCR检测法，用10份正常血清、10份HBV高滴度（10^6 IU／mL）血清和梯度稀释的HBV克隆质粒标准品，验证两种检测方法的重复性、特异性和灵敏度；并将结果进行配对检验。结果10份正常血清标本均无假阳性HBV—DNA检测结果，特异性极好；10份HBV高滴度血清中检出1份YMDD变异，灵敏度均可达到10^3 IU／mL，重复性和灵敏度两者之间无显著性差异（t=0．702，P〉0．05）。结论该方法特异性和灵敏度高，可用于HBV的临床检测和科学研究。     

两种HBV-DNA定量测定方法的比较

目的考察实时荧光PCR定量法(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒DNA的准确性。方法通过对 56份血清进行HBV—DNA检测,其中包括一个10倍倍比稀释系列6份、阴性血清12份和阳性血清38份。比较两种方法的准确性及临床标本符合情况。结果微板核酸杂交定量法和实时荧光定量法的线性回归系统分别为0．977 和0．999。实时荧光定量法所检测的不同含量的样本批内变异系数均低于微板核酸杂交定量法。结论实时荧光定量法具有较好的灵敏度、特异性、重复性和线性,与微板核酸杂交定量法有良好的相关性。     

2种制备抗新城鸡瘟病毒抗体方法的比较

采用首次免疫加完全佐剂和不加完全佐剂２种方法，分别制备兔抗新城鸡瘟病毒抗体。结果显示：首次免疫加入完全佐剂的免疫方法产生的血凝抑制抗体效价为１／６４０，显著低于不加完全佐剂（血凝抑制抗体效价为１／２５６０）的免疫方法。提示：在制备抗病毒抗体中，应该选用首次免疫不加入完全佐剂的免疫方法。     

猕猴B病毒囊膜蛋白gD基因真核细胞表达载体? 的构建及表达

目的 构建猕猴B病毒囊膜蛋白gD的真核表达载体, 并且检测其在293T细胞内的表达情况。 方法 首先通过基因合成手段获得含B病毒gD蛋白的基因片段, 在经由PstⅠ和NotⅠ双酶切后连接到pEGFP-N3载体, 随后将构建的pEGFP-N3-GD重组质粒转染到人胚胎肾上皮细胞系293T细胞。再用Western blot检测所提蛋白其在细胞内的表达情况, 并用激光共聚焦分析其在细胞内的表达定位情况。 结果 成功获得携带gD基因的阳性重组质粒pEGFP-N3-GD, 且pEGFP-N3-GD重组质粒能在293T细胞的表面正常表达。 结论 利用真核表达系统, 既能够在细胞表面产生B病毒gD蛋白的特异性重组抗原, 而且可用于B检测抗原的制备。