氧自由基在高氧所致离体血管内皮细胞损伤中的作用

本实验研究了离体兔主动脉血管内皮细胞在常压高氧(100%O_2)条件下(0～72h)细胞形态、三磷酸腺苷(ATP)、黄嘌呤氧化酶(XO)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性的改变。我们的实验发现内皮细胞形态改变(细胞肿胀、畸形、脱落)呈时间依赖性;ATP含量经短暂的升高后(24h)持续降低(48～72h);高氧作用24～48h内皮细胞XO活性、MDA含量持续升高,72h XO活性、MDA含量开始降低,但仍高于对照组;GSH-px活性在48h内无明显改变,72h其活性升高。上述结果表明高氧确能引起内皮细胞损伤,氧自由基在其损伤过程中有重要作用。     

力竭游泳后大鼠大脑微循环超微结构与自由基代谢动态变化的同步研究

观察力竭游泳后即刻、24h和48h大鼠大脑微循环超微结构的动态变化，并测定大鼠大脑组织MDA含量、SOD和GSH—px的活性。实验结果表明，力竭游泳后即刻大鼠大脑微循环结构发生明显的变化，24h后较力竭游泳后即刻有所好转，48h后大鼠大脑微循环形态结构恢复接近正常。力竭游泳后观察各时段MDA含量无显著性改变，而SOD的活性在力竭游泳后即刻显著升高，24h后显著下降，48h后又显著上升；GSH—px活性动态变化呈下降趋势，且24h下降具统计学意义，特别是在24h与SOD同步明显下降，表明此时SOD和GSH—px消耗量最大，以及时清除自由基，减轻自由基对脑组织造成的损伤，有利于大脑微循环形态结构的修复。     

黄芪注射液对内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的探讨黄芪注射液对内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其机制.方法人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,传至3代后,分为三组:对照组常规培养;缺氧复氧组先缺氧处理1 h,再复氧1 k药物干预组在培养液中加入不同浓度的黄芪注射液,12 h后进行缺氧复氧处理.各组均测定细胞上清液超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)含量.结果①缺氧复氧组与对照组比较,细胞上清液中SOD活性降低(P<0.01)、MDA含量升高(P<0.01),NO含量降低(P<0.01)、ET含量升高(P<0.01).②黄芪注射液组与缺氧复氧组比较,细胞上清液中SOD活性升高(P<0.05或P<0.01)、MDA含量降低(P<0.05或P＜0.01),在浓度5～40tg/ml范围内该效应与黄芪注射液星剂量依赖效应,但当浓度大于40μg/ml时,该效应无明显改变(P>0.05);NO含量升高(P<0.01)、ET含量降低(P<0.05或P<0.01),直线相关分析显示:随着黄芪注射液预处理浓度增加,培养液中NO的生成量升高(r1=0.93,P<0.05),ET含量降低(r2=-0.97,P<0.05).结论缺氧复氧过程造成内皮细胞脂质过氧化损伤,引起内皮功能紊乱.黄芪注射液可能通过抗脂质过氧化,加强对氧自由基的清除,对缺氧复氧内皮细胞产生保护作用.     

金属硫蛋白在新生鼠肠损伤中的作用

目的建立新生鼠肠损伤模型,探讨金属硫蛋白(M etalloth ione in,MT)在其发生发展中的作用。方法新生鼠随机分为对照组8只,实验组每一时间点各8只。实验组腹腔内注射E coli 055∶B5脂多糖5mg/kg,分别于注射后1h、3h、6h、12h、24h处死动物,分离肠道;对照组注射生理盐水。常规HE染色,光镜下行损伤评分,化学法检测回肠组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量,RT-PCR法检测回肠组织MT1,MT2 mRNA表达,并分别与组织损伤评分进行相关性分析。结果实验组1h、3h、6h、12h、24h损伤评分均高于对照组,差异显著(P<0.05);实验组MDA含量均高于对照组,(P<0.01);实验组3h、6h、12h、24h GSH含量均高于对照组,差异显著(P<0.05);回肠组织MT1、MT2mRNA表达在1h、3h、6h明显增强,12h骤降,低于对照组,差异显著(P<0.01),24h有所回升。实验组24h内MDA含量与平均损伤程度呈显著正相关(P<0.01),GSH含量与平均损伤程度呈显著负相关(P<0.01),MT1、MT2 mRNA表达与损伤程度无相关性。结论LPS致新生鼠肠损伤时,氧化应激增加,启动MT抗氧化机制,以清除自由基。提示临床治疗新生儿NEC时,可适当应用MT制剂。     

高氧致早产鼠BALF及肺组织中MDA、SOD的变化

目的观察丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)在高氧致(CLD)早产鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中的变化.方法用高浓度氧致早产鼠CLD为研究对象,应用生化方法同步检测肺组织和BALF中MDA含量及SOD的活性.结果实验组肺组织中SOD的活性呈升高趋势,但与对照组比较,肺组织和BALF中SOD的活性均无差异(P>0.05、P>0.05),实验组肺组织和BALF中MDA的水平呈同相变化,自吸入高氧的第3d开始升高,(P<0.05),7d达高峰并持续至14d(P<0.01),21d时虽有下降,但仍高于对照组(P<0.05).结论 SOD、MDA的动态变化,可间接反应肺部疾病的变化,对慢性肺疾病的诊断、鉴别诊断、活动性判断及预后均有一定的价值.同时也证实机体的氧化与抗氧化失衡是高氧所致早产儿慢性肺疾病的发病原因之一.     

慢性肺疾病早产鼠BALF及肺组织中脂质过氧化的同步研究

目的为探讨高氧致早产儿慢性肺疾病(CLD)发生中支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中脂质过氧化的变化规律及相互间关系.方法采用高浓度氧致早产鼠CLD模型为研究对象,应用分光光度计比色法同步测定BALF和肺组织超氧化物岐化酶(SOD)活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量.结果两组的BALF及肺组织中SOD活性均无差异(P>0.05);而实验组,BALF及肺组织中MDA的水平呈同相变化,即吸高氧3d明显升高(P<0.05),7d达高峰(P<0.01),持续1w后逐渐下降,21d仍高于正常水平(P<0.05).结论肺组织的氧自由基损伤贯穿高氧致CLD发生、发展全过程中;BALF中MDA水平可间接反应肺组织的氧自由基损伤程度.     

肠缺血再灌注时肠粘膜抗氧化系统及肝、肾功能改变的实验研究

目的：研究肠缺血再灌注损伤时肠粘膜抗氧化系统的改变及对肝、肾功能的影响。 方法： 复制大鼠肠缺血再灌注模型，采用分光光度计生化测定方法检测肠粘膜的还原型谷胱甘肽GSH、谷胱甘肽-S-转移酶GST、过氧化氢酶CAT、丙二醛MDA、超氧化物岐化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px及血清谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST、尿素氮BUN、肌酐Cr的改变。 结果： 肠粘膜MDA含量于再灌注2 h显著高于假手术组(P<0.05)，再灌注4 h较假手术组高116%(P<0.05)，24 h较前有所降低但仍高于假手术组(P<0.05)；GSH含量于再灌注2 h显著低于假手术组(P<0.05)，再灌注4 h低至假手术组的40%（P<0.01），12 h恢复；肠粘膜CAT、SOD和GSH-Px活性未见明显改变；GST活性于再灌注2 h较假手术组低39%，再灌注4 h达最低，较假手术组低43%(P<0.05)，12 h恢复至假手术组水平；血清ALT、AST、 BUN及Cr于再灌注2 h显著高于假手术组(P<0.05)，再灌注4 h分别较假手术组高208%、100%、103%、41%（P<0.01），24 h基本恢复。 结论： 肠缺血45 min再灌注使肠粘膜GSH含量和GST活性降低，MDA含量增加，并造成肝肾功能的可逆性损伤。     

山姜素对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制北大核心CSCD

目的:探讨山姜素对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制。方法:H/R诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,不同浓度山姜素处理H9C2细胞,pcDNA、pcDNA-circPRKCI转染H9C2细胞24 h后再进行H/R处理;si-NC、si-circPRKCI分别转染H9C2细胞24 h后置于山姜素培养液中继续培养24 h,再进行H/R处理;试剂盒检测LDH、MDA、SOD水平;ELISA检测MPO、IL-1β、TNF-α水平;MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡率;化学发光法检测ATP含量;qRTPCR检测circPRKCI、miR-29b-3p表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPRKCI与miR-29b-3p的靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:山姜素可降低H/R诱导的H9C2细胞LDH、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平、凋亡率和Bax蛋白水平(P<0.05),而增强SOD活性和提高细胞存活率、ATP含量及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),提高circPRKCI表达(P<0.05),降低miR-29b-3p表达(P<0.05),且呈剂量依赖性。H/R诱导的H9C2细胞转染pcDNA-circPRKCI后,LDH、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平、凋亡率和Bax蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性、Bcl-2蛋白水平、细胞存活率和ATP含量升高(P<0.05);circPRKCI可靶向调控miR-29b-3p表达;干扰circPRKCI表达部分逆转山姜素对H/R诱导的H9C2细胞氧化应激、炎症反应、增殖、凋亡及ATP含量的作用。结论:山姜素可通过调控circPRKCI/miR-29b-3p轴抑制细胞氧化应激、炎症反应、凋亡及促进细胞增殖进而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。     

金属硫蛋白在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用

目的:探讨金属硫蛋白(MT)在培养乳鼠心肌细胞缺氧预处理中的作用机制。方法:建立培养的乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,检测心肌细胞预缺氧24 h后MT及丙二醛(MDA)含量,Na⁺-K⁺ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺ATP酶活性的变化以及用MT抗体阻断后的相应变化。结果:缺氧预处理组MT含量及Na⁺-K⁺ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺ATP酶活性显著高于对照组及缺氧/复氧组(P＜0.05),MDA含量显著低于缺氧/复氧组(P＜0.01);使用MT抗体后,酶活性则显著降低,而MDA含量显著高于未加抗体和对照组(P＜0.01)。结论:缺氧预处理产生大量MT,后者可能通过减少MDA及促进Na⁺-K⁺ATP酶、Ca²⁺-Mg²⁺ATP酶的活性升高起到保护心肌的作用。     

Nrf2减轻小鼠非酒精性脂肪性肝炎

目的研究Nrf2对小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及其可能机制。方法通过蛋氨酸-胆碱缺乏饲料(MCD)饲喂小鼠获得NASH模型;随机分为对照组、模型组以及Nrf2组,Nrf2组灌胃姜黄素0.9 mL/d,对照组和模型组给予相应体积的0.9%氯化钠注射液灌胃。4周后检测肝组织中Nrf2含量,肝指数,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶水平(AST)、葡萄糖(GLU)、三酰甘油(TG)和胆固醇(Chol)含量;对肝脏进行油红O染色;检测肝组织中TG、Chol、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;并检测细胞色素C和ATP含量。结果与模型组小鼠相比,Nrf2组小鼠的血清中ALT,AST和GLU含量下降(P<0.05),肝组织中TG、Chol和MDA含量下降(P<0.05),GSH水平、SOD活性升高(P<0.05);同时细胞色素C漏出降低,ATP含量上升(P<0.05)。结论 Nrf2对由蛋氨酸-胆碱缺乏所引起的NASH具有一定的保护作用,其机制可能是通过减少氧化应激,提高线粒体活性实现的。     

金属硫蛋白对缺血/再灌注未成熟心肌细胞功能的影响

目的探讨诱导金属硫蛋白(MT)在未成熟心肌中的表达对缺血/再灌注未成熟心肌细胞功能的影响.方法采用Langendorff离体灌注模型,大白兔分为4组:对照组(C,n=9),腹腔注射蒸馏水0.3ml,按注射后时间12、24、和48 h取离体心脏,灌注KH液15 min转为工作心15 min,全心停灌45min,恢复灌注15 min改为工作心30 min;E12h组(n=6)、E24h组(n=6)、E48h组(n=6)各组分别按腹腔注射3.6%ZnSO4(1.5 ml/kg)后12、24和48 h取离体心脏,常规建立Langendorff灌注模型.方法同C组.以心肌细胞中MT含量、CK和LDH漏出率、ATP含量、心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 -ATPase活性及其Ca2 含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m作为观察指标.结果腹腔注射ZnSO4后12 h MT开始表达,24h达高峰,48 h仍在高表达水平.MT含量在E24h、E48h组与C、E12h组比较明显增高;E24h、E485h组ATP含量优于C组和E12h组(P＜0.05),CK、LDH漏出率均低于C组和E12h组(P＜0.05),心肌线粒体Ca2 -ATPase活性、[ATP]m均优于C组和E12h组(P＜0.01),心肌细胞内Ca2 含量、心肌线粒体Ca2 含量低于C组和E12h组(P＜0.01).结论腹腔注射ZnSO4可诱导心肌MT长时间表达,MT可减轻未成熟心肌细胞缺血/再灌注损伤.     

TNF-α含量的改变与肾小管细胞缺氧-复氧性损伤关系的研究

目的:探讨TNF-α含量的改变与肾小管上皮细胞株(HK-2)缺氧-复氧性损伤的关系。方法:以HK-2细胞株作为研究材料,采用液体石蜡覆盖法建立缺氧损伤模型,分别在缺氧4、12、24h和复氧4、12、24h,采用放射免疫分析法(RIA)、生化法和台盼蓝拒染法,检测培养液中TNF-α的含量、乳酸脱氢酶(LDH)的活性、细胞计数及活细胞率的改变。结果:缺氧后4h,TNF-α的含量、LDH的活性开始升高,细胞总数及活细胞计数开始下降,并于缺氧后24h达高峰。TNF-α含量的改变与LDH活性的升高呈显著的正相关(r=0.89,P<0.05),与活细胞计数的下降呈显著的负相关(r=-0.91,P<0.05)。结论:肾小管缺氧-复氧后,TNF-α的产生增多,并参与了肾小管细胞损伤的过程。     

2型糖尿病微血管病变患者血浆对氧磷酯酶-1活性与氧化应激的关系

目的探讨2型糖尿病微血管病变(DMPA)患者血浆对氧磷酯酶-1(PON-1)活性与氧化应激的关系。方法168例2型糖尿病根据微血管并发症情况分为无微血管并发症(NDC)组、糖尿病视网膜病变(DR)组和糖尿病肾病(DN)组,分别检测各组患者血浆PON-1、超氧化物歧化酶(SOD)和循环谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性、丙二醛(MDA)含量,分析PON-1活性与SOD、MDA、GSHPx之间的关系。结果糖尿病各组患者血浆PON-1、SOD、GSHPx活性均明显低于对照组(P<0.01),DMPA组又低于NDC组(P<0.05),而血浆MDA含量与对照组比较显著升高(P<0.01),DMPA组又高于NDC组(P<0.05)。相关分析表明,糖尿病患者血浆PON-1活性与GSHPx、SOD呈正相关(r=0.774,P<0.01;r=0.801,P<0.01),与MDA呈负相关(r=-0.833,P<0.01)。结论在2型糖尿病DMPA中氧化应激增强及血浆PON-1活性显著降低,PON-1与氧化应激及其相互作用参与了2型糖尿病DM-PA的发生和发展。     

猪急性心肌梗死再灌注后氧化应激损伤及通心络的保护作用

目的:评价猪急性心肌梗死(AMI)再灌注后氧化应激损伤在心肌无再流中的作用以及中药通心络的保护作用和机制。方法:中华小型猪30只,随机分成假手术组、模型组、小剂量(0.05g·kg-1.d-1)、中剂量(0.2g·kg-1.d-1)和大剂量(0.5g·kg-1.d-1)通心络治疗组,每组6只。冠状动脉阻断3h,再灌注1h建立AMI再灌注模型。测定并对比AMI前、后3h和再灌注后1h血清及再灌注后正常、再灌注和无再流区心肌组织中氧化应激指标总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的变化。结果:(1)与假手术组相比,模型组冠脉结扎3h,血T-AOC、T-SOD和GSH含量均显著降低(均P0.01),而MDA含量显著增加(P0.01),再灌注后,上述指标降低和升高更显著(均P0.01)。(2)与假手术组和正常区心肌组织相比,模型组再灌注区心肌T-AOC、T-SOD和GSH含量均显著降低(均P0.01),MDA含量则显著升高(P0.01),而无再流区上述指标降低和升高比再灌注区更显著(均P0.01)。(3)与模型组相比,中剂量通心络能显著提高AMI3h血T-AOC、T-SOD含量,降低MDA含量(均P0.05),并显著提高再灌注1h血T-SOD含量(P0.05);大剂量通心络能显著提高AMI3h和再灌注1h血T-AOC、T-SOD含量,抑制MDA生成(均P0.05)。(4)中剂量通心络仅能显著提高再灌注区T-AOC含量(P0.05),降低MDA含量(P0.05);而大剂量则显著增加再灌注区T-AOC、T-SOD和GSH含量(均P0.05),抑制MDA的合成(P0.01),并显著增加无再流区T-AOC和T-SOD含量(均P0.05),降低MDA的含量(P0.01)。结论:机体抗氧化防御功能降低和心肌局部氧化还原稳态失衡,可能是AMI再灌注后无再流发生的重要机制。中药通心络可能通过提高机体抗氧化防御能力,抑制心肌局部的氧化损伤,起到了减少无再流的作用。     

低氧导致培养心肌细胞Na+通道基因SCN5A mRNA表达改变

目的研究低氧培养大鼠心肌细胞Na 通道基因SCN5A mRNA表达的变化,并探讨其与丙二醛(M alond ialhyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide d ismutase,SOD)活性的关系。方法培养大鼠心肌细胞,检测各组培养液氧分压。用RT-PCR检测SCN5A mRNA表达,检测培养液MDA含量和细胞SOD活性。结果与对照组相比:SCN5A mRNA相对表达量低氧1 h和6 h组显著增高(P<0.001)、低氧12 h和24 h组显著降低(P<0.001);MDA含量显著增高而SOD活性显著降低。结论心肌细胞Na 通道基因SCN5A在低氧1 h和6 h mRNA表达上调,而在低氧12 h和24 h mRNA表达下调,且与脂质过氧化和SOD相关。     

内源性碱性成纤维细胞生长因子是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子

目的:观察内、外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠心脏缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用.方法:在大鼠离体心脏I/R模型上分别给以bFGF和bFGF抗血清,以生理多导仪测定心率、±LV dp/dtmax及左心室终末舒张压(LVEDP)变化,并测定冠脉流量、冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、乳酸盐脱氢酶(LDH)活性以及心肌组织钙、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量和蛋白激酶(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性.结果:I/R组心功能显著低于对照组,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量、LDH活性及心肌MDA、钙含量显著升高,ATP含量显著降低(均P＜0.01).bFGF组±LV dp/dtmax较I/R组分别高42.8%和25.6%,LVEDP低40.0%,再灌末心率/预灌末心率(HRr/HRi)及冠脉流量的(B/A)分别高42.3%和20.3%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白含量及LDH活性分别少28.8%、30.2%(均P＜0.01)和32.3%(P＜0.05),心肌MDA和钙含量分别少44.4%和35.6%,ATP含量高33.8%.心肌PKC、MAPK活性分别高41.3%和10.1%(均P＜0.01);bFGF抗血清组±LV dp/dtmax较I/R组分别低35.1%和38.1%,LVEDP高92.5%,HRr/HRi及冠脉流量的B/A分别少36.0%和45.4%,冠脉流出液中蛋白、肌红蛋白和LDH漏出分别多54.3%、96.2%和34.4%,心肌MDA和钙含量分别高23.6%和49.7%,ATP含量低27.8%,心肌PKC及MAPK活性分别低20.9%和7.7%(均P<0.01).结论:内源性bFGF是大鼠对抗心脏缺血/再灌注损伤的保护因子.     

ARDS时氧自由基与血粘度变化

观察ARDS患者氧自由基和血粘度变化 ,并探讨两者间的关系。方法用NXE -4锥板式粘度计检测高切变率(200S -1)、中切变率(20S -1)和低切变率(4S -1)下全血表观粘度 ;测定SOD蛋白含量、活性和MDA含量。结果ARDS组高、中、低切变率下全血表观粘度明显增高(P<0.05和P<0.01) ;MnSOD活性明显降低(P<0.05) ,MDA含量明显增高(P<0.01) ;MDA含量与高、中、低各切变率下全血表观粘度均显著相关。结论ARDS时全血粘度增高 ,其可能与氧自由基增加有关     

二氧化硫对大鼠缺血再灌注心脏的损伤作用

目的观察二氧化硫(SO2)在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法大鼠心脏分为:I/R组,SO2组及天冬氨酸异羟肟酸(HDX)组。采用Langendorff离体心脏灌注模型。MacLab数据采集系统监测离体心脏功能。结果SO2组心功能恢复率明显低于I/R组(P<0.05,P<0.01);HDX组显著高于I/R组(P<0.05,P<0.01)。SO2组冠脉流液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷氨酸-草酰乙酸转移酶(GOT)活性、肌红蛋白(Mb)含量及心肌丙二醛(MDA)、共轭双烯键(CD)含量及GOT活性显著高于I/R组(P<0.05,P<0.01);HDX组冠脉流液中上述指标明显低于I/R组(P<0.05,P<0.01)。SO2组心肌还原型谷胱甘肽(GSH)含量明显低于I/R组(P<0.05);HDX组心肌GSH含量显著高于I/R组(P<0.01)。结论SO2参与了大鼠心肌缺血再灌注损伤。增加心肌脂质过氧化及降低心肌还原型谷胱甘肽含量可能与SO2心肌损伤有关。     

母体肢体缺血预处理对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元线粒体结构和功能的影响

目的:探索母体肢体缺血预处理(LIP)对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元线粒体结构和功能的影响。方法:将孕20 d的40只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、LIP对照组、胎鼠宫内窘迫组(FD组)和LIP+FD组。通过实验设计建立胎鼠宫内窘迫模型,观察各组胎鼠海马CA1区线粒体超微结构的变化;检测海马线粒体跨膜电位变化;测定海马组织活性氧簇(ROS)、三磷酸腺苷(ATP)、丙二醛(MDA)含量及锰-超氧化物歧化酶(MnSOD)活性变化。结果:(1)与S组比较,FD组和LIP+FD组电镜下观察胎鼠海马CA1区线粒体呈不同程度破坏,线粒体膜电位下降,ATP含量和Mn-SOD活性降低,ROS和MDA含量增加(P0.05)。(2)与FD组比较,LIP+FD组胎鼠海马CA1区线粒体的超微结构保持较好的完整性,线粒体膜电位明显提高,海马ATP含量和Mn-SOD活性显著增高,ROS和MDA含量减少(P0.05)。结论:母体肢体缺血预处理对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元线粒体功能具有保护作用。     

铁过载损伤小鼠睾丸支持细胞

目的探讨铁过载对体外原代培养的小鼠睾丸支持细胞(SC)的影响。方法取原代分离培养小鼠睾丸SC纯化并鉴定,加入不同浓度(50、100、200μmol/L)右旋糖酐铁注射液,培养至24、48和72 h后收集细胞,光学显微镜与流式细胞术鉴定铁过载,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,Western blot与免疫细胞化学检测闭锁蛋白(occludin)、雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(TRF)、抑制素(INH)和波形蛋白(VIM)的表达。结果与对照组相比,铁过载组细胞内ROS、MDA、NO与NOS的含量显著增高(P0.01),GSH含量、SOD和GSH-Px的活性显著降低(P0.01),occludin、ABP、TRF、INH和VIM蛋白的表达明显降低(P0.05)。结论铁过载可导致体外培养的睾丸支持细胞氧化性损伤并降低其功能。