香菇多糖与环磷酰胺联合治疗前列腺癌荷瘤小鼠的实验研究

目的 前列腺癌具有较高的死亡率,探求其有效治疗方式已成为学者的研究重点.本研究探讨香菇多糖联合环磷酰胺治疗前列腺癌荷瘤小鼠效果及联合治疗机制,为该联合治疗方案临床应用提供依据.方法 利用RM-1细胞建立前列腺癌皮下移植小鼠模型,将60只Balb/c荷瘤小鼠随机平分为4组,即对照组(Control组,生理盐水治疗)、LNT组(香菇多糖治疗)、CTX组(环磷酰胺治疗)和LNT+CTX组(香菇多糖和环磷酰胺治疗);观察治疗后荷瘤小鼠肿瘤体积比与平均存活时间,苏木精-伊红(HE)染色观察治疗后肿瘤组织病理学改变,检测荷瘤小鼠脾质量、脾指数和淋巴细胞水平确定荷瘤小鼠免疫功能情况.结果 联合治疗后LNT+CTX组荷瘤小鼠肿瘤体积比达到3.51±0.80,显著低于Control组(t=3.174)、LNT组(t=2.730)和CTX组(t=3.086),P<0.05;且治疗16 d后,LNT+CTX组肿瘤体积比出现下降趋势.HE染色结果进一步表明,LNT组、CTX组和LNT+CTX组肿瘤组织出现明显病理学改变,且LNT+CTX组病理学改变最明显.LNT+CTX组荷瘤小鼠平均存活时间达到60 d,显著长于Control组(χ2=7.747)、LNT组(χ2=3.653)和CTX组(χ2=2.784),差异有统计学意义,P<0.05.香菇多糖和环磷酰胺联合治疗后,LNT+CTX组荷瘤小鼠脾质量〔(0.28±0.08)g〕、脾指数〔(16.96±2.48)mg/g〕及淋巴细胞〔CD3+为40.67±3.13,CD4+为25.76±1.90,CD4+/CD8+为1.62±0.24〕显著低于LNT组,但高于CTX组和Control组,均P<0.05.治疗后各组荷瘤小鼠CD8+水平差异无统计学意义,P>0.05.结论 香菇多糖与环磷酰胺联合作用共同减缓了肿瘤生长,提高了荷瘤小鼠存活时间,其可能机制是香菇多糖提高了环磷酰胺治疗小鼠的免疫功能,促进了对肿瘤杀伤.     

β—胡萝卜素对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和自然杀伤细胞活性的影响

作者以正常的或荷瘤的(荷实体型ERLICH乳腺癌)ICR系小鼠的腹腔巨噬细胞(简称Mφ)和脾脏组织为材料,观察了β-胡萝卜素对小鼠Mφ功能和自然杀伤(NK)细胞活性的影响。结果表明:β-胡萝卜素(15mg/kg,po d_(1-15)),对正常小鼠Mφ功能和NK细胞活性影响不明显(P>0.05)。但给予β-胡萝卜素(15mg/kg po d_(1-22)),能提高荷瘤小鼠Mφ的吞噬功能(P<0.05)和NK细胞活性(P<0.01),并能对抗环磷酰胺的免疫抑制作用,与单用环磷酰胺的小鼠比较,有显著的差异(P<0.05)。     

酪丝亮肽对人肝癌BEL-7402细胞的抑制作用及对NK细胞杀伤活性的影响

[目的]研究三肽化合物酪丝亮肽(tyroserleutide,YSL)对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤的抑制作用及对自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性的影响。[方法]建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,观察YSL对肿瘤生长的抑制作用;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测YSL对正常小鼠及人肝癌BEL-7402荷瘤鼠的NK细胞杀伤活性的影响。[结果]YSL[160μg(/kg·d)]能抑制BEL-7402的生长,肿瘤抑制率为72.23%,且能增强BEL-7402荷瘤裸鼠及正常小鼠NK细胞杀伤活性,与生理盐水组相比均具有显著性差异(P<0.05)。[结论]YSL对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤有抑制作用,并具有增强正常及荷瘤小鼠NK细胞杀伤肿瘤细胞活性的作用。     

局部注射小鼠白细胞介素12逆转录病毒包装细胞对大鼠肝癌的治疗

目的:研究低剂量环磷酸胺(Cy)联合MHC Ⅰ类限制性肿瘤抗原多肽Mutl致敏、白细胞介素2(IL-2)基因修饰的树突状细胞(DCs)对转移性肺癌小鼠的治疗作用及其免疫学机理.方法:制备小鼠骨髓来源的DCs,用转移性Lewis肺癌特异性多肽Mutl预激经IL-2基因修饰的DCs联合低剂量Cy治疗转移性肺癌小鼠.通过FACS分析其脾细胞内T淋巴细胞比例的变化,~51Cr释放法检测CTL和NK细胞杀伤活性.结果:肿瘤抗原多肽致敏、IL-2基因修饰的DCs与小剂量Cy联合后,能比单用DCs更有效地治疗转移性肺癌,小鼠脾细胞中CD8~ T细胞和NK1.1~ 细胞明显比例升高,联合治疗组诱导出的CTL杀伤活性最高.结论:以肿瘤抗原多肽冲击致敏的IL-2基因修饰的DCs联合小剂量Cy能更有效地促进荷瘤宿主免疫应答,具有显著地体内抑制肺癌转移的效果.     

低剂量环磷酰胺增强MHCⅠ类限制性肿瘤抗原多肽冲击致敏的树突状细胞的抗肿瘤转移效果

目的:研究低剂量环磷酸胺(Cy)联合MHC Ⅰ类限制性肿瘤抗原多肽Mutl致敏、白细胞介素2(IL-2)基因修饰的树突状细胞(DCs)对转移性肺癌小鼠的治疗作用及其免疫学机理.方法:制备小鼠骨髓来源的DCs,用转移性Lewis肺癌特异性多肽Mutl预激经IL-2基因修饰的DCs联合低剂量Cy治疗转移性肺癌小鼠.通过FACS分析其脾细胞内T淋巴细胞比例的变化,~51Cr释放法检测CTL和NK细胞杀伤活性.结果:肿瘤抗原多肽致敏、IL-2基因修饰的DCs与小剂量Cy联合后,能比单用DCs更有效地治疗转移性肺癌,小鼠脾细胞中CD8~+T细胞和NK1.1~+细胞明显比例升高,联合治疗组诱导出的CTL杀伤活性最高.结论:以肿瘤抗原多肽冲击致敏的IL-2基因修饰的DCs联合小剂量Cy能更有效地促进荷瘤宿主免疫应答,具有显著地体内抑制肺癌转移的效果.     

自体肿瘤瘤苗对荷瘤鼠Th1、Th2型细胞因子及细胞毒作用的影响

目的研究经处理的H22肝癌细胞肿瘤瘤苗作为全细胞瘤苗对H22荷瘤小鼠体内Th1/Th2细胞比例和细胞因子的影响以及CTL的杀伤活性.方法用加重组白细胞介素2、重组粒细胞单核细胞集落刺激因子及福氏不完全佐剂制成疫苗,建立荷瘤小鼠模型,用51Cr释放法测定瘤苗免疫组、荷瘤组、正常组小鼠脾细胞对亲本H22肝癌细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测单个核细胞中的Th1和Th2细胞,并取血检测血清中IL-10、IFN-γ水平.结果效靶比为200:1时,免疫小鼠脾细胞体外杀伤亲本H22肝癌细胞的杀伤率为38.3%,显著高于荷瘤组的13.6%,正常组的7.5%,以及对S180细胞的9.1%(P均＜0.05).瘤苗免疫组Th1细胞及Th1/Th2细胞的比值显著升高(P＜0.01),血清IFN-γ较对照组明显升高(P＜0.01);血清IL-10较对照组明显降低(P＜0.01).结论肿瘤细胞加小剂量IL-2和GM-CSF及佐剂组成的肿瘤细胞瘤苗可激发特异性细胞介导的免疫反应,改善抗肿瘤免疫反应.     

全复配食用菌提取物对C26荷瘤小鼠的抑瘤作用和免疫功能影响

背景与目的:食用真菌在医疗保健领域的研究展现出强大的应用潜力.该课题探讨全复配食用菌提取物的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:小鼠随机编号分组,其中预防组预先给予全复配食用菌提取物灌胃2周,每天1次,之后各组均接种C26细胞建立荷瘤小鼠模型,接种后第2天给小鼠予以不同制剂灌胃(空白组灌0.9%氯化钠溶液,治疗组、预防阻灌复配食用菌提取物,CTX阳性组腹腔注射CTX)每天1次,观察记录小鼠一般状态,2周后处死小鼠无菌取脾脏、取瘤称重.MTT法检测小鼠脾淋巴细胞转化功能,乳酸脱氢酶(LDH)法检测NK细胞杀伤活性.结果:复配食用菌提取物预防组对小鼠C26肿瘤有30.4%的抑制率;小鼠脾淋巴细胞在ConA刺激下的增殖能力和NK细胞杀伤功能均显著高于空白组.结论:复配食用菌提取物预防性摄入对再接种C26小鼠有抑瘤和免疫增强作用.     

北豆根提取物PE2成分的体内抗肿瘤作用及其免疫学调节机制研究

背景与目的探讨中药北豆根提取物的体内抗肿瘤作用和免疫学调节作用机制。材料与方法采用水提取、醇提取及水回流等方法对北豆根进行成分分离。采用四甲基偶氮唑蓝[3-(4,5-dimethy-2-thiazoly)-2,5-diphenyl-2-tetrazoliumbromide,MTT]显色法分析北豆根提取物对肿瘤细胞和淋巴细胞增殖反应的作用。采用中性红法检测了北豆根提取物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响。采用皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型,采用北豆根提取物灌胃,观察北豆根提取物对小鼠的体内抗肿瘤作用和免疫调节作用。结果北豆根乙醇提取物(RME)比水提取物(RMW)具有更强的抑瘤活性,醇提取物中的PE2成分可能是北豆根的主要抗肿瘤活性部分。经北豆根提取物PE2灌胃后的荷瘤小鼠,与对照组荷瘤小鼠相比其胸腺指数、脾指数明显增加;腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞因子分泌功能增强;NK细胞活性增加;一般情况较对照组小鼠好;肿瘤生长缓慢而局限;生存期明显延长。结论PE2是北豆根抗肿瘤作用的主要有效部分,PE2体内也具有抗肿瘤作用,能通过增强荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬功能,增强NK细胞和小鼠脾细胞的活性,而发挥抗肿瘤作用。     

rIL-6抗癌机理初探(Ⅱ)-rIL-6对小鼠脾脏NK细胞和CTL细胞体内外调节效应

为了探讨rIL-6对NK和CTL细胞的调节效应．我们进行了rIL-6对小鼠脾脏NK细胞和CTL细胞功能影响的体内外实验研究，实验采用C57BL/6荷瘤或正常小鼠，给予rIL-6或生理盐水，连续10天，第15天取小鼠脾脏进行NK细胞或CTL细胞的活性测定。结果表明：(1)rIL-6在体外对NK细胞在小剂量时有促进作用，在大剂量时有抑制作用；对CTL细胞则表现出随IL-6剂量的增加，促进作用明显增强；(2)rIL-6对正常鼠体内NK细胞杀伤活性有促进怍用；(3)对荷瘤鼠体内NK细胞和CTL细胞杀伤活性均有明显的促进作用；(4)rIL-6对荷瘤所致NK功能下降具有预防作用。提示rIL-6对小鼠NK细胞和CTL细胞杀伤活性的促进效应可能是rIL-6发挥抗癌作用的一个途径。     

E838联合环磷酰胺抗白血病L1210细胞的作用

目的 观察E838及其与化疗药物环磷酰胺(CTX)联合应用对白血病L1210细胞荷瘤小鼠的肿瘤抑制及生命延长作用。方法 以L1210荷瘤IRM-2小鼠为模型,实验分对照组、CTX组、E838组、E838+CTX组,分别检测肿瘤抑制率、骨髓有核细胞数、胸腺与脾指数、生命延长率等指标,比较各组间的差别。结果 E838治疗组瘤重明显小于对照组,联合用药组对荷瘤小鼠白血病L1210有较强抑制作用。生命延长也有提高作用。结论 E838对白血病L1210有抑制作用,与化疗药物CTX合用时,能提高疗效及机体免疫功能。